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恶性疟原虫FCC1/HN株CSP抗原细胞免疫应答IL-2和IFN-γ的体外诱生分析 被引量:1
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作者 方政 刘彦文 +3 位作者 黄为群 季莘 史玉坤 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期32-34,共3页
本实验利用恶性疟原虫FCC1/HN株CSP抗原基因在真核细胞(HeLa)中高效表达,将纯化的表达蛋白作为候选疫苗免疫小鼠,并通过体外诱生检测小鼠脾细胞白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)水平。结果显示经疫苗免疫后的BALB/C小鼠脾细... 本实验利用恶性疟原虫FCC1/HN株CSP抗原基因在真核细胞(HeLa)中高效表达,将纯化的表达蛋白作为候选疫苗免疫小鼠,并通过体外诱生检测小鼠脾细胞白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)水平。结果显示经疫苗免疫后的BALB/C小鼠脾细胞体外经特异性刺激后产生的IL-2和IFN-γ水平有显著提高。与我们前期研究结果比较,表明对该疫苗特异性的IL-2、IFN-γ的产生与淋巴细胞增殖以及NK细胞活性增高有明显的相关性;该疫苗对T细胞有一定的刺激能力,可诱导小鼠产生较强的细胞免疫反应。 展开更多
关键词 恶性疟原子 环子孢子抗原 IL-2 IFN-Γ
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恶性疟原虫子孢子CS抗原融合基因的克隆
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作者 李杰之 马清钧 +2 位作者 曹诚 石成华 张京生 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第4期429-433,共5页
利用381-A型DNA合成仪,参照恶性疟原虫子孢子CS抗原决定簇相应氨基酸的核苷酸序列,设计了CS-Ⅰ和CS-Ⅱ两个片段。以噬菌体M13mp18质粒作为载体,将两片段进行磷酸化、退火、连接和克隆,经过原位杂交,序列分析,获得了(NANP)_(10)重复串联... 利用381-A型DNA合成仪,参照恶性疟原虫子孢子CS抗原决定簇相应氨基酸的核苷酸序列,设计了CS-Ⅰ和CS-Ⅱ两个片段。以噬菌体M13mp18质粒作为载体,将两片段进行磷酸化、退火、连接和克隆,经过原位杂交,序列分析,获得了(NANP)_(10)重复串联基因的重组质粒M13mp18-CS。再以酶切,从重组质粒中回收(NANP)_(10)次的片段,将其片段基因与CT-B基因融合,最后将融合基因CT-B-CS插入载体PMC055中,成功地得到含有(NANP)_(10)与CT-B基因融合的重组质粒pMC055-CS。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 子孢子 抗原 生物工程
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恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达产物免疫鼠体内抗原定位研究
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作者 方政 刘彦文 +2 位作者 鄂群 史玉坤 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期40-42,F002,共4页
目的 用恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达产物免疫小鼠 ,观察其在宿主体内各组织的抗原分布情况。方法 提取目的基因PfCSP在HeLa细胞中的表达产物 ,免疫注射BALB/c小鼠。取免疫后 4周及 7周小鼠心脏、肝脏、脑、脾及肌肉 ,通过免疫酶... 目的 用恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达产物免疫小鼠 ,观察其在宿主体内各组织的抗原分布情况。方法 提取目的基因PfCSP在HeLa细胞中的表达产物 ,免疫注射BALB/c小鼠。取免疫后 4周及 7周小鼠心脏、肝脏、脑、脾及肌肉 ,通过免疫酶组织化学法及间接免疫荧光法检测组织内的抗原。结果 免疫 7周后的BALB/c小鼠肝脏组织枯否氏细胞内及肝细胞膜上可见棕黄色特异性抗原 -抗体反应 ,而免疫鼠心、脑、肌肉未出现明显的阳性反应。结论 恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达蛋白能被肝实质细胞特异性识别 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 环子孢子蛋白 csP基因 基因表达产物 抗原定位
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恶性疟原虫子孢子CS抗原融合基因的表达及其生物活性
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作者 李杰之 马清钧 +2 位作者 曹诚 于秀琴 石成华 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第1期14-18,共5页
采用遗传工程技术获得了含有恶性疟原虫子孢子CS抗原融合基因的重组质粒pMC055-CS的工程菌株,能高效分泌CS抗原的融合蛋白至胞外,可达25mg/L.具有霍乱毒素B亚单位(CT-B)和子孢子CS的抗原性.将纯化的融合蛋白免疫C57纯系小鼠,... 采用遗传工程技术获得了含有恶性疟原虫子孢子CS抗原融合基因的重组质粒pMC055-CS的工程菌株,能高效分泌CS抗原的融合蛋白至胞外,可达25mg/L.具有霍乱毒素B亚单位(CT-B)和子孢子CS的抗原性.将纯化的融合蛋白免疫C57纯系小鼠,免疫后抗CT-B抗体滴度可达1:3200~6400,抗CS抗体滴度可达1:320~640.免疫小鼠采用约氏疟子孢子腹腔攻击,保护率达34~45%. 展开更多
关键词 恶性疟原虫 子孢子 cs抗原 基因融合 生物活性
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无细胞百日咳疫苗生产用菌株CS的5种保护性抗原基因序列分析 被引量:1
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作者 王雅英 王丽婵 +1 位作者 徐颖华 张庶民 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期259-262,共4页
目的对我国无细胞百日咳疫苗生产用菌株CS的5种保护性抗原的基因序列进行分析。方法分别用PCR扩增CS菌株的PT、FHA、PRN、FIM2和FIM3基因,克隆至pGEM-TEasy vector中,进行序列测定及分析,并确定其基因型。结果获得了CS菌株PT、FHA、PRN... 目的对我国无细胞百日咳疫苗生产用菌株CS的5种保护性抗原的基因序列进行分析。方法分别用PCR扩增CS菌株的PT、FHA、PRN、FIM2和FIM3基因,克隆至pGEM-TEasy vector中,进行序列测定及分析,并确定其基因型。结果获得了CS菌株PT、FHA、PRN、FIM2和FIM35段基因克隆,其核苷酸和氨基酸序列与GenBank中收录的相应百日咳杆菌的同源性均在90%以上,种系进化树分析结果与鲍特菌属进化结果一致。CS的基因型为:PTS1属于ptxS1B型,PTS3属于ptxS3A型,FHA属于FHA1型,PRN属于PRN1型,FIM2属于FIM2-1型,FIM3属于FIM3A型。结论本研究为更好地对我国无细胞百日咳疫苗进行质量控制和百日咳杆菌的基因漂移研究奠定了基础。 展开更多
关键词 无细胞百日咳疫苗 cs菌株 保护性抗原 基因序列
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Evaluating seroprevalence to circumsporozoite protein to estimate exposure to three species of Plasmodium in the Brazilian Amazon
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作者 Virginia Araujo Pereira Juan Camilo Sanchez-Arcila +9 位作者 Mariana Pinheiro Alves Vasconcelos Amanda Ribeiro Ferreira Lorene de Souza Videira Antonio Teva Daiana Perce-da-Silva Maria Teresa Queiroz Marques Luzia Helena de Carvalho Dalma Maria Banic Luiz Cristovao Sobrino Porto Joseli Oliveira-Ferreira 《Infectious Diseases of Poverty》 SCIE 2018年第1期448-459,共12页
Background:Brazil has seen a great decline in malaria and the country is moving towards elimination.However,for eventual elimination,the control program needs efficient tools in order to monitor malaria exposure and t... Background:Brazil has seen a great decline in malaria and the country is moving towards elimination.However,for eventual elimination,the control program needs efficient tools in order to monitor malaria exposure and transmission.In this study,we aimed to evaluate whether seroprevalence to the circumsporozoite protein(CSP)is a good tool for monitoring the exposure to and/or evaluating the burden and distribution of Plasmodium species in the Brazilian Amazon.Methods:Cross-sectional surveys were conducted in a rural area of Porto Velho,Rondônia state.Parasite infection was detected by microscopy and polymerase chain reaction.Antibodies to the sporozoite CSP repeats of Plasmodium vivax,P.falciparum,and P.malariae(PvCS,PfCS,and PmCS)were detected using the enzyme-linked immunosorbent assay technique.Human leukocyte antigen(HLA)-DRB1 and DQB1 genes were typed using Luminex®xMAP®technology.Results:The prevalence of immunoglobulin G against P.vivax CSP peptide(62%)was higher than P.falciparum(49%)and P.malariae(46%)CSP peptide.Most of the studied individuals had antibodies to at least one of the three peptides(72%),34%had antibodies to all three peptides and 28%were non-responders.Although the majority of the population was not infected at the time of the survey,74.3%of parasite-negative individuals had antibodies to at least one of the CSPs.Importantly,among individuals carrying the haplotypes DRB1*04~DQB1*03,there was a significantly higher frequency of PfCS responders,and DRB1*16~DQB1*03 haplotype for PvCS and PfCS responders.In contrast,HLA-DRB1*01 and HLA-DQB1*05 allelic groups were associated with a lack of antibodies to P.vivax and P.falciparum CSP repeats,and the haplotype DRB1*01~DQB1*05 was also associated with non-responders,including non-responders to P.malariae.Conclusions:Our results show that in low transmission settings,naturally acquired antibody responses against the CSP repeats of P.vivax,P.falciparum,and P.malariae in a single cross-sectional study may not represent a valuable marker for monitoring recent malaria exposure,especially in an area with a high prevalence of P.vivax.Furthermore,HLA class II molecules play an important role in antibody response and require further study with a larger sample size.It will be of interest to consider HLA analysis when using serosurveillance to monitor malaria exposure among genetically diverse populations. 展开更多
关键词 MALARIA circumsporozoite protein Serological marker Human leucocyte antigen IgG antibody Porto Velho Rondônia Brazil
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