沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位及抗原性研究

目的分析沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位并探讨其抗原性。方法利用PCR技术获得衣原体CT841基因,将基因序列克隆到载体pGEX6p,转化大肠杆菌XL1-blue,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT841。融合蛋白经纯化后免疫小鼠制备特异性抗体,间接免疫荧光法分析CT841在感染细胞中的分布特征;ELISA法分析CT841的抗原性。结果CT841原核表达重组体成功构建;CT841在感染细胞的表达模式与主要外膜蛋白MOMP相似,而与衣原体蛋白酶样活性因子CPAF及包涵体膜蛋白IncA的分布模式不同;CT841与衣原体感染患者、猴、鼠血清均发生强烈的免疫反应。结论沙眼衣原体蛋白酶CT841是定位于衣原体菌体上的免疫优势抗原。

泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清抗衣原体免疫优势蛋白抗体的检测

目的检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清中的抗衣原体质粒编码蛋白3（Pgp3）、抗外膜蛋白复合物B蛋白c端肽（OmcBc）、抗ct841编码蛋白（CT841）和抗热休克蛋白60（HSP60）抗体。方法将编码上述4种蛋白基因的重组质粒和空质粒转化人大肠杆菌，IPTG诱导表达，并用谷胱甘肽磁珠进行纯化后包被ELISA孔板。收集天津医科大学总医院性病门诊泌尿生殖道沙眼衣原体感染者和未感染者血清各20份。ELISA法检测血清中上述蛋白抗体。结果20份沙眼衣原体感染者血清中Pgp3、OmcBc、CT841和HSP60抗体的检出率分别是14例（70％）、9例（45％）、8例（40％）、5例（25％）；20份无沙眼衣原体感染者血清中，仅1例检测到HSP60抗体。结论上述4种衣原体蛋白中，Pgp3的抗原性最强，抗体检出率最高；HSP60的抗原性最弱，抗体检出率最低。