改良CTAB法提取不同作物总RNA技术研究

为提高操作效率,本研究开发出一种简洁有效的作物总RNA提取方法。研究以油菜、棉花、花生、小麦、马铃薯、玉米、大豆、西葫芦等作物的不同组织为试材,通过CTAB法、改良CTAB法及TanSzol Reagent试剂盒法提取总RNA,检测结果发现,经过改良后的CTAB法提取的总RNA质量较高。在油菜花瓣、小麦、花生、西葫芦叶片中,该方法获得了较高的总RNA得率,分别为24.5、23.7、26.4、17.35μg/mL;OD260/280和OD260/230值分别为1.90、1.73、1.72、1.80和2.10、1.50、2.01、1.70。综合比较以上3种方法,改良后的CTAB法适用于油菜、小麦、花生、西葫芦等作物的总RNA提取,为后续分子生物学检测奠定了基础。

CTAB-silica Method for DNA Extraction and Purification from Castanea mollissima and Ginkgo biloba

A new method CTAB-silica for DNA extraction and purification from the leaves and buds of Castanea mollissima and Ginkgo biloba was tested. The method is based on the silica-based purification protocol developed by Boom et al. (1990). By modifying the protocol, plant genome DNA could be extracted easily from dormant buds, mature leaves, and other parts of plant. Our results showed that the purified DNA was of high purity and could be analyzed by PCR. Furthermore, this CTAB-silica method took much less time for a successful DNA purification process compared to the traditional methods (CTAB and SDS). By our method, the suitable DNA can be extracted and purified from over 10 plant samples by one person in an hour.

对CTAB法提取菠菜基因组DNA实验的优化设计

CTAB法是一种经典的提取植物DNA的方法,但传统的提取方法存在RNA污染、DNA提纯率不高等问题。基于这些问题,文章对实验步骤进行了优化,并将使用改良方法提取的菠菜叶片DNA通过紫外分光光度法进行检测。结果表明,使用改良方法提取的DNA其浓度及纯度显著提高,有效提升了实验教学的质量和效率。

CTAB辅助合成氧化钨及其对乙二醇甲醚的气敏特性

以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为表面活性剂,二水合钨酸钠(Na_(2)WO_(4)·2H_(2)O)为钨源,采用水热法合成纳米氧化钨(WO_(3))。通过扫描电子显微镜(SEM)、X射线衍射仪(XRD)和X射线光电子能谱仪(XPS)对WO_(3)的表面形貌、晶体结构和化学成分进行表征,测试其对乙二醇甲醚的气敏特性,研究CTAB对WO_(3)的形貌、晶体结构和乙二醇甲醚气敏特性的影响。结果表明,CTAB可调控WO_(3)的形貌,添加质量分数5%的CTAB不仅将WO_(3)的形貌由不规则的纳米颗粒调控为疏松的纳米片状,而且提高了其对乙二醇甲醚的气敏特性,在最佳工作温度370℃下其对体积分数为1×10^(-4)的乙二醇甲醚的响应值达15.1,并且具有良好的重复性、长期稳定性与气体选择性。最后探讨了WO_(3)对乙二醇甲醚的气敏机理。

珍稀濒危树种金钱槭的基因组DNA提取方法研究

[目的]明确高效提取金钱槭基因组DNA的方法。[方法]以金钱槭幼嫩叶片为材料,采用4种不同方法提取金钱槭基因组DNA,并通过紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳检测、限制性内切酶酶切和扩增保守基因片段等方法比较不同DNA的提取效率。[结果]高盐低pH法因操作时间较长导致DNA损失较多,提取到的DNA虽然杂质含量较低,但浓度也较低。SDS法提取效果不佳,提取到的DNA含量少且完整性差。尿素法提取的DNA质量最差,降解严重,难以用于后续分子生物学研究。改良CTAB法可以大量提取能够用于酶切及PCR扩增的DNA。[结论]金钱槭DNA高效提取方法的确定可以为相关的分子生物学研究提供科学依据和技术参考。

改良CTAB法快速提取棉花DNA

针对棉花（Ｇｏｓｓｐｉｕｍ）富含棉酚、多糖等其它次生干扰物质这一特点而设计的一种快速分离和纯化棉花总ＤＮＡ（ｇＤＮＡ）的方法。该方法是对ＣＴＡＢ（ｃｅｔｙｌｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ）法的改良，它在ＣＴＡＢ法的基础上，首先用ＤＩＥＣＡ（ｄｉｅｔｈｙｌｄｉｔｈｉｏｃａｒｂａｍｉｃａｃｉｄ）抑制酚氧化酶的活性，然后用活性炭和ＰＶＰ４０（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ）排除棉酚等其它次生干扰物质。试验证明，该方法比较简便、快速、经济、有效，得到的ｇＤＮＡ完全可以满足ＰＣＲ等分子生物学分析。

基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨

应用CTAB法、改良CTAB法、改良CTAB-高盐沉淀法对毛竹基因组DNA进行了提取,并用紫外分光光度计(UV3300)、琼脂糖凝胶电泳和PCR分析对提取的DNA进行了检测,对DNA的产量、质量、PCR效果等方面进行了综合比较。结果表明:改良CTAB-高盐沉淀法是提取高质量毛竹基因组DNA的较好方法。

一种适用于动物与植物总DNA提取的方法——改良CTAB法

[目的]介绍一种简单、高效且能用于提取动物与植物的总DNA的方法。[方法]采用改良CTAB法,从24个花生品种嫩叶及小白鼠的肝、肺和肾中提取DNA,进行琼脂糖电泳和蛋白核酸分析仪检测及PCR扩增检验。[结果]所提取DNA电泳条带清晰,整齐均匀,OD260/OD280值介于1.77～1.83,用于PCR扩增获得理想效果。[结论]该研究介绍的改良CTAB法提取动物和植物的总DNA,满足开展PCR扩增的要求。

用改进的CTAB法提取香菇基因组DNA

通过用改进的CTAB法提取27个香菇菌株的基因组DNA,并分别用紫外、琼脂糖凝胶电泳和PCR技术检测提取DNA样品的质量和产量,证明该方法可以用于香菇基因组DNA的提取,为香菇基因组DNA的提取建立了一种简单可靠的新方法.

改良CTAB法提取高质量香蕉叶片总RNA

以巴西香蕉叶片为试验材料,采用改良CTAB法提纯香蕉叶片总RNA。结果表明,改良CTAB法提取的香蕉叶片总RNA的28S、18SrDNA条带清晰、整齐,A260/A280值大于2.0,无需任何纯化处理即可用作香蕉MuACTIN基因的扩增模板,经RT-PCR扩增获得了带型清晰的目的条带,说明利用此法分离的RNA纯度和浓度符合RT-PCR的要求;而CTAB法提取的总RNA产量较低,且纯度不高。说明改良CTAB法能有效从富含多酚和多糖的香蕉叶片中提取高质量的总RNA。

一种适用于动物与植物总DNA提取的方法——改良CTAB法(英文)

关于动物和植物基因组DNA的提取方法国内外有很多报道，但同一方法通常只能较好的从动物或植物提取总DNA。在前人报道的基础上，该研究对常用的CTAB法进行了适当修改，获得了一种从动物和植物中均能有效提取DNA的方法。

改良Chelex-100法和CTAB法用于转基因抗草甘膦大豆检测效果的比较

以转基因抗草甘膦大豆为研究材料,分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取基因组DNA,以提取DNA的浓度和纯度,同时以PCR扩增大豆的内源基因(lectin)及外源特异性序列(CaMV35S,nos,Cp4-epsps)的效果对两种方法进行比较和评价。结果表明:虽然改良Chelex-100法DNA提取纯度不高,但是提取效率与常规CTAB法相当,而且改良Chelex-100法能够快速在1 h之内从大豆中提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰。因此,改良Chelex-100法可以替代CTAB法提取DNA用于转基因检测,该方法具有经济、简便、快速的特点。

改良CTAB-LiCl法提取枣总RNA体系的建立

试验以枣树田间枝条的枝皮及组培苗为材料,应用改进的CTAB法进行了总RNA的提取。针对枣组织中富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用β-巯基乙醇和PVP去除酚类,KAc及无水乙醇去除多糖,LiCl沉淀过夜的方法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,A260/A280介于1.8～2.0之间,A260/A230均大于2.0,证明得到的RNA纯度、完整性和产率均较高,蛋白、多糖及酚类等去除较彻底。结果表明,本试验建立的改良CTAB-LiCl法适于进行枣总RNA的提取。

杜鹃花叶片总RNA的改良CTAB法提取

目的研究杜鹃花叶片总RNA的提取方法。方法一种适合富含次生代谢产物的杜鹃花叶片总RNA的提取方法——改良CTAB法。采用CTAB作为去污剂,分别用氯仿和水饱和酚反复抽提以及高浓度NaCl沉淀,以去除蛋白质、多糖和次生代谢物等杂质,最后用无水乙醇沉淀获得总RNA。结果该方法不仅使所获得的总RNA完整性好,纯度高,而且操作简单、快速、成本低廉。结论该方法对杜鹃花等富含次生代谢产物的植物特别是富含多酚、多糖的材料的总RNA提取具有借鉴意义。

改良CTAB法提取林木树种基因组DNA的研究

目的:验证改良CTAB法提取不同林木树种基因组DNA的效果,寻求一种对于不同林木树种基因组DNA提取普遍使用的方法。方法:采用改良的CTAB法提取22种木本植物基因组DNA,并对其进行定性、定量分析及酶切分析。结果:采用本法可以去除多糖和其他次生代谢物并获得高质量的DNA。结论:该方法可以作为一种适于在实验室进行的林木树种基因组DNA的提取方法。

一种快速提取小麦基因组DNA的改良CTAB方法

旨在寻求一种微量、快速提取小麦DNA的方法。以小麦幼叶为材料,用改良CTAB法、改良SDS法、沸水浴法提取小麦叶片总DNA,通过琼脂糖凝胶电泳法、紫外吸收法和PCR检测DNA完整性和纯度。改良CTAB法提取小麦基因组DNA质量和纯度高、无降解,每人每天可以轻松提取200个DNA样品,对转基因植株的PCR检测显示扩增目标条带清晰一致,无假阳性,试验结果理想。改良SDS法所提DNA纯度和浓度虽略不如改良CTAB法,但仍然符合实验要求。沸水浴法提取量少且杂质多,PCR无有效扩增,结果不理想。改良CTAB法提供了一种简便、快速微量小麦DNA提取方法,适用于PCR和其他分子生物学研究。

改良CTAB法提取番石榴总DNA的初步研究

以番石榴为试材,采用CTAB、SDS和改良的CTAB法分别从新鲜的番石榴叶片中提取DNA,并对其进行琼脂糖凝胶电泳检测和SCoT-PCR分析。结果表明:3种方法均可以从番石榴的叶片中提取DNA,但改良的CTAB方法通过加入漂洗液2次洗涤,能够较好的去除样品中的多酚、多糖和蛋白质等物质,可以较好的从新鲜的叶片中提取较高质量的DNA,并可以用于SCoT-PCR标记分析。

改良CTAB法和高盐低pH值法提取花生DNA的效果

采用改良CTAB法和高盐低pH法提取花生总DNA,结果表明,高盐低pH法提取的花生DNA分子量略小,DNA有一定程度的降解,但得率大大高于CTAB法,按我们稍有改动的实验方法,每克鲜重的叶片,可提取1000μg以上的DNA。两种方法提取的DNA均可酶切完全,RAPD-PCR扩增,结果相同。高盐低pH值法廉价、步骤少、易掌握,是提取花生DNA较好的方法。

CTAB法用于染病烟草植株中烟草丛顶病毒RNA的提取

CTAB法是一种广泛用于从染病植物中提取总核酸,并用于后续相关病原物PCR检测的核酸提取法,已普遍运用于DNA病毒、植原体、细菌、真菌侵染植物的总DNA提取和病原检测。本文尝试将CTAB法用于一种由RNA病毒(烟草丛顶病毒)引起的烟草丛顶病染病组织总核酸的提取,以总核酸进行烟草丛顶病毒的RT-PCR检测,并与常规RNA病毒核酸提取法——Trizol法作比较。结果表明CTAB法和Trizol法提取的核酸用于烟草丛顶病毒RT-PCR检测时,均能扩增到目的条带,检测结果一致。在对复合侵染材料进行检测时发现,CTAB法提取的染病植物组织总核酸既包括DNA也包含RNA,有利于对DNA和RNA病原物同时进行检测;CTAB法所用试剂较Trizol法便宜,毒性小,且提取的核酸量较多、保存时间较长。因此CTAB法是一种高效、简便、经济的从烟草丛顶病染病组织中提取烟草丛顶病毒RNA的方法。

用改进的CTAB法提取肉苁蓉基因组DNA

研究了肉苁蓉(Cistanche deserticola)基因组DNA的分离提取方法.由于肉苁蓉组织内含有大量的多糖类及蛋白等物质,严重干扰DNA的抽提,在对其进行若干预处理之后,采用改进的CTAB法提取基因组DNA.根据外观、琼脂糖凝胶电泳检测、D260/D280的测定和PCR扩增表明,用改进的CTAB法提取肉苁蓉基因组DNA,所得DNA无论是纯度还是完整性都比较好,可以直接用于RAPD反应体系.