大鼠CTLA4-FasL融合基因重组腺相关病毒载体的构建、制备及表达

目的检测大鼠CTLA4-FasL重组腺相关病毒载体感染大鼠关节炎性成纤维样滑膜细胞后目的基因的表达。方法构建大鼠CTLA4-FasL融合基因重组腺相关病毒载体,制备重组病毒,体外感染从佐剂诱导关节炎的大鼠关节中分离的炎性成纤维样滑膜细胞,利用Flag标签纯化目的蛋白,ELISA和Western blot等方法检测目的蛋白的表达。结果获得含有大鼠CTLA4-FasL融合基因的重组腺相关病毒,感染炎性成纤维样滑膜细胞后能够分泌性表达目的蛋白。结论构建并制备的CTLA4-FasL重组腺相关病毒能够有效感染炎性成纤维样滑膜细胞并促使期表达CTLA4-FasL融合蛋白,为今后关节炎治疗的体内实验研究奠定了基础。

腺病毒载体介导的CTLA4-FasL基因转移联合应用供者脾细胞输注促进异基因小鼠皮肤移植耐受

目的:探讨腺病毒介导CTLA4 -FasL基因转移联合应用供者脾细胞输注延长小鼠皮肤移植物存活的作用及其机制。方法:在移植的第0天,C5 7BL 6 (H 2 b,B6 )小鼠经尾静脉注射BALB c(H 2 d)小鼠脾细胞和5×10 9空斑形成单位 毫升(pfu ml)CTLA4 - FasL重组腺病毒(AdCTLA4 - FasL) ,同一天进行皮肤移植,每天观察移植物存活情况。耐受小鼠尾静脉取血,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定CTLA4 FasL融合蛋白的体内表达;于第2 0天对受体小鼠进行迟发型超敏反应、单向混和淋巴细胞反应(MLR)、IL- 2逆转试验、过继转移实验和嵌合体检测等耐受状态的检测,以探讨耐受机制。结果:经尾静脉输注供体脾细胞及AdCTLA4 - FasL的B6小鼠,皮肤移植物的平均存活时间达(42 8±2 6 )天(n =6 ) ,而对照的未处理组,绿色荧光蛋白(EGFP)腺病毒处理组,重组腺病毒AdCTLA4Ig组和AdCTLA4 FasL处理组的平均存活时间为(10 .1±0 . 4 1)天(n =6 )、(10-.5±1.4 )天(n =6 )、(12 . 8±1. 1)天(n =6 )、(2 0 .0±2 .5 )天(n =6 ) ,差异具有显著意义(P <0 .-0 1) ;皮肤移植物长期存活的受体小鼠对供体抗原的低应答可以通过脾细胞被过继转移;DTH反应受到抑制、MLR活性特异性降低,且可以被外源性IL 2部分逆转。结论:供体脾细胞输注和腺病毒介导CTLA4 -

肌肉注射CTLA4-FasL重组腺相关病毒抑制大鼠关节炎的实验研究

目的观察CTLA4-FasL融合基因能否有效抑制大鼠关节炎。方法在动物造模免疫第2天,以肌肉注射方式导入CTLA4-FasL和EGFP(对照)重组腺相关病毒(rAAV),持续观察和测量2组动物的临床指标包括关节指数、踝关节厚度和体质量等,并对踝关节的组织学表现如滑膜增生和炎性细胞浸润等进行了检测。结果应用大鼠佐剂诱导关节炎动物模型,明确了重组AAV病毒可介导目的基因CTLA4-FasL于体内表达;与rAAV.EGFP对照组相比,rAAV.CTLA4-FasL处理组在临床学和组织学表现上均有效抑制了大鼠关节炎。结论 CTLA4-FasL融合分子很可能是具有潜在研究价值的类风湿性关节炎治疗分子。

共表达2个独立的抗关节炎分子TNFR-Fc和CTLA4-FasL重组表达系统的建立与鉴定

目的构建能同时独立表达双抗关节炎分子TNFR-Fc和CTLA4-FasL的重组腺相关病毒(AAV)载体,并对蛋白表达进行鉴定。方法应用furin-2A新型剪切策略,构建TNFR-Fc和CTLA4-FasL双融合基因重组AAV载体,体外转染293T细胞,收集转染上清,以ELISA和Western blot等方法检测目的蛋白的表达。结果成功构建双抗炎分子重组表达载体TFCF,在转染细胞上清中检测到目的蛋白TNFR-Fc和CTLA4-FasL的独立共表达。结论获得了可同时拮抗TNF和T细胞的新型双抗关节炎分子共表达系统,为今后动物体内研究奠定了基础。

大鼠CTLA4-FasL融合基因的克隆、表达及体外生物活性研究

目的表达并纯化CTLA4-FasL重组融合蛋白,鉴定其体外生物活性,为今后将该重组基因用于真核或者病毒载体递送系统的体内研究做准备。方法用RT-PCR方法从大鼠脾细胞中钓取CTLA4和FasL胞外区基因,搭建二者融合的重组基因,以pGEX-6P-1载体表达和纯化融合蛋白;去除GST标签,获得的目的蛋白经体外流式检测分析与细胞表面的相应配体B7和受体Fas分子的结合;CCK8检测系统分析其抑制T淋巴细胞的增殖作用。结果与结论成功调取了目的基因,获得并纯化了CTLA4-FasL目的蛋白,该蛋白既可与细胞表面的B7配体结合,又可与细胞表面的Fas受体结合,并能明显抑制T淋巴细胞的增殖,为今后动物体内研究奠定了基础。

外周血PD-1、CTLA-4、T-reg、pDC与鼻咽癌患者临床特征及疗效的相关性

目的:探讨初治鼻咽癌患者治疗前外周血PD-1/CTL(%)、CTLA-4/CTL(%)、T-reg(%)、pDC与患者临床特征及即刻疗效的关系,以及以上指标在鼻咽癌患者及健康人群中的表达差异。方法:收集112例初治鼻咽癌患者治疗前临床资料及淋巴细胞亚群和树突细胞亚群数据,进行外周血PD-1/CTL(%)、CTLA-4/CTL(%)、T-reg(%)、pDC与鼻咽癌患者临床特征及即刻疗效的相关性分析,从112例鼻咽癌患者中随机选取30例患者作为病例组,年龄、性别匹配的30例同期体检健康者作为对照组,分析两组外周血PD-1/CTL(%)、CTLA-4/CTL(%)、T-reg(%)、pDC表达差异。结果:112例初治鼻咽癌患者中,年龄≥50岁组与年龄<50岁组相比,外周血PD-1/CTL(%)更高。CTLA-4/CTL(%)与T分期、N分期、TNM分期呈负相关,CTLA-4/CT(%)越高,疗效越好。T-reg(%)与N分期呈正相关,T-reg(%)与M分期存在“S”型曲线关系。pDC与N分期、TNM分期呈负相关。病例组与对照组外周血PD-1/CTL(%)、T-reg(%)差异存在统计学意义,病例组与对照组外周血CTLA-4/CTL(%)差异不存在统计学意义。结论:外周血CTLA-4/CT(%)越高,鼻咽癌T分期、N分期、TNM分期越早,外周血CTLA-4/CT(%)越高,疗效越好。外周血T-reg(%)越高,N分期越晚。当外周血T-reg(%)<20%时,鼻咽癌可能未发生远处转移,当外周血T-reg(%)为20%~50%时,外周血T-reg(%)表达越高,发生远处转移的可能越大,当外周血T-reg(%)>50%时,鼻咽癌已经远处转移的可能性大。外周血pDC越高,N分期、TNM分期越早。外周血以上指标可动态观察,有望成为预测鼻咽癌患者疗效及预后的生物标志物。

基于CD80/CTLA⁃4途径探究IL⁃7对脓毒症T淋巴细胞功能的机制研究

目的基于CD80/CTLA⁃4途径探究IL⁃7对脓毒症T淋巴细胞功能的影响。方法选取我院2021年1月1日~2023年6月6日收治的104例脓毒症患者,分离患者外周血中T淋巴细胞并纯化,刺激培养T淋巴细胞并分为3组,即对照组、IL⁃7组和CYAL⁃4组。流式细胞仪分别检测T淋巴细胞凋亡率和增殖代数;ELISA检测淋巴细胞IL⁃7、IFN⁃γ、TNF⁃α水平;流式细胞仪检测淋巴细胞表面CD80表达;免疫荧光法检测T淋巴细胞表面CTAL⁃4表达。结果与对照组相比,IL⁃7组和CTAL⁃4组T淋巴细胞凋亡率明显降低(分别为45.17±4.02、48.06±4.08),T淋巴细胞增殖代数(分别为6.01±1.04、5.92±1.02)、T淋巴细胞中IL⁃7(分别为115.46±9.07、112.39±9.01)、IFN⁃γ(分别为21.46±2.15、20.07±2.12)、TNF⁃α(分别为347.15±2.26、340.87±12.08)水平明显增加(P<0.05);但IL⁃7组T淋巴细胞凋亡率、增殖代数、IL⁃7、IFN⁃γ、TNF⁃α水平和CTAL⁃4组相比差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,IL⁃7组和CTAL⁃4组T淋巴细胞中CD80(分别为6.28±0.87、6.31±0.89)和CTAL⁃4阳性率(分别为3.68±0.57、3.65±0.55)明显降低(P<0.05);IL⁃7组T淋巴细胞中CD80和CTAL⁃4阳性率和CTAL⁃4组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL⁃7可抑制脓毒症患者T淋巴细胞凋亡,促进T淋巴细胞增殖,促进T淋巴细胞中IL⁃7、IFN⁃γ、TNF⁃α水平,其作用机制可能与抑制CD80/CTLA⁃4途径有关。

PD-1/CTLA-4双抗治疗妇科恶性肿瘤的疗效和安全性观察

目的分析妇科恶性肿瘤患者应用PD-1/CTLA-4双抗治疗后的血常规、影像学等相关数据,评价该药物在妇科恶性肿瘤患者治疗中的有效性及安全性。方法选取22例妇科恶性肿瘤患者,均接受程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)/靶向细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)双抗治疗加或不加化疗或靶向治疗,观察近期疗效、不良反应发生率。结果CR患者4例,占18.2%,PR 2例,占9.1%,SD 6例,占27.3%,总有效率27.3%(CR+PR),临床获益率54.5%(CR+PR+SD)。PD 10例,占45.5%。随访至2023年10月31日,存活患者14例,占63.6%,死亡患者8例,占36.4%。治疗相关不良事件(TRAEs)发生率95.5%(21/22),其中重度不良反应发生率为50.0%(11/22):血红蛋白降低发生率9.1%(2/22),白细胞减少发生率27.3%(6/22),中性粒细胞减少发生率13.6%(3/22),ALT及AST升高、血小板减低、过敏反应发生率均为4.5%(1/22)。与免疫治疗相关的重度不良反应发生率为:重度血红蛋白降低、重度血小板减低、重度肝功能损伤均为4.5%(1/22)。结论应用PD-1/CTLA-4双抗治疗晚期/复发妇科恶性肿瘤患者临床获益率较高,不良反应发生率低,具有较高的推广价值。

CTLA-4、STAT3在宫颈鳞状上皮内病变及宫颈癌组织中的表达及其意义

目的分析细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)、信号传导及转录激活因子3(STAT3)在宫颈鳞状上皮内病变(SIL)与宫颈癌(CC)组织中的表达及其意义。方法将42例慢性宫颈炎患者、61例SIL患者与65例CC患者分别纳入对照组、SIL组、CC组,以专用人乳头瘤病毒(HPV)标本采样刷采集所有患者的宫颈脱落细胞,采用免疫组化法检测所有患者的CTLA-4、STAT3表达;同时,收集所有患者的一般资料,分析CTLA-4、STAT3阳性表达与患者临床病理特征的关系。结果CC组CTLA-4、STAT3阳性表达率高于SIL组与对照组,且SIL组CTLA-4、STAT3阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CTLA-4、STAT3表达与SIL患者的病理分级有关,与CC患者的国际妇产科联盟(FIGO)分期有关(P<0.05);CTLA-4、STAT3表达与SIL患者年龄无关,CTLA-4、STAT3表达与CC患者年龄、淋巴结转移、病理类型、宫颈肌壁浸润深度无关(P>0.05)。结论CTLA-4、STAT3在SIL、CC患者的机体内呈异常表达,随着疾病等级与分期的增加,两者阳性表达率不断提高。

腺病毒介导CTLA4-FasL基因转移诱导大鼠心脏移植物长期存活的作用

目的 探讨腺病毒介导细胞毒T淋巴细胞相关抗原 (CTLA4 ) FasL基因转移延长异基因大鼠心脏移植物存活的作用及其相关机制。方法 供体DA大鼠心脏移植给受体LEW大鼠后 ,经门静脉注入 5× 10 9空斑形成单位 /毫升 (pfu/ml)CTLA4 FasL腺病毒 (AdCTLA4 FasL) ;随后 ,通过每天触摸受体大鼠腹壁 ,记录心脏移植物存活时间。受体大鼠尾静脉取血 ,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定CTLA4 FasL融合蛋白的体内表达 ;通过过继性转移试验、混合淋巴细胞反应 (MLR)及白细胞介素 (IL) 2逆转实验、细胞毒T细胞 (CTL)活性测定、辅助性T淋巴细胞前体 (HTLp)和细胞毒T淋巴细胞前体 (CTLp)频数测定及辅助性T细胞 (TH) 1/ 2型细胞因子检测 ,探讨耐受机制。结果 经AdCTLA4 FasL处理的受体大鼠 ,异基因心脏移植物平均存活时间达 (71 0± 2 3 7)d(n =6 ) ,而对照的未处理组、绿色荧光蛋白 (EGFP)腺病毒处理组和细胞毒T淋巴细胞相关抗原 4免疫球蛋白 (CTLA4Ig)腺病毒处理组平均存活时间分别为 (5 7± 0 5 )d(n =6 )、(5 2± 0 4 )d(n =6 )和 (4 5 7± 12 4 )d(n =6 ) ,差异具有显著意义 (均P <0 0 5 )。心脏移植物长期存活的受体大鼠对供体抗原的低应答可以被过继转移 ;MLR活性特异性降低 ,且不被外源性IL 2逆转 ;CTL活?

CTLA4-FasL双功能融合蛋白分子抑制混合淋巴细胞反应及促进淋巴细胞凋亡

目的 构建人CTLA4 FasL融合蛋白真核表达载体 ,表达CTLA4 FasL融合蛋白 ,通过体外实验初步研究其生物学特性。方法 通过特异引物分别扩增出CLTA4和FasL胞外区的cDNA ,将它们拼接后 ,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中 ,体外表达纯化。Westernblot分析CTLA4 FasL融合蛋白的抗原性。体外细胞结合试验研究其结合特异性配体作用。混合淋巴细胞反应研究其抑制免疫应答的效应。结果 测序证实所扩增的PCR产物分别是CLTA4和FasL胞外区的cDNA ,其序列与文献报道相符。成功构建了pcDNA3.1 CTLA4 FasL真核表达载体。Westernblot分析结果显示 ,表达获得的蛋白具有CTLA4和FasL的抗原性。体外细胞结合试验显示 ,CTLA4 FasL融合蛋白可以分别与Jur kat细胞表面的Fas受体和Raji细胞表面的B7分子结合。混合淋巴细胞反应结果显示 ,该融合蛋白可以有效抑制异基因淋巴细胞的刺激作用及诱导淋巴细胞凋亡 ,并显示了显著的协同效应。结论 成功构建了CTLA4 FasL融合蛋白真核表达载体 ,体外表达并纯化了CTLA4 FasL融合蛋白 ,体外实验证实CTLA4

三陰乳腺癌PD-L1(SP142)與CTLA-4、PTEN表達的關係研究

目的探討三陰乳腺癌PD-L1(SP142)與CTLA-4、PTEN表達的關係和意義。方法收集鏡湖醫院2008年1月~2018年6月間病理科136例乳腺癌標本,按乳腺癌分子分型分為三陰乳腺癌(TNBC)、管腔A型、管腔B型及HER2型乳腺癌,採用免疫組化檢測各型乳腺癌PD-L1(SP142)、CTLA-4和PTEN表達情況,並分析它們之間的關係。結果136例乳腺癌中,32.4%的病例PD-L1(SP142)陽性,其中48%(24/50)TNBC、11.9%(5/42)管腔A型、20%(3/15)管腔B型和41.4%(12/29)HER2型PD-L1(SP142)陽性;43.4%的病例CTLA-4陽性,其中52.0%(26/50)TNBC、31.0%(13/42)管腔A型、33.3%(5/15)管腔B型和50.9%(15/29)HER2型CTLA-4陽性;28.0%的病例PTEN陽性,其中52.0%(26/50)TNBC、31.0%(13/42)管腔A型、33.3%(5/15)管腔B型和50.9%(15/29)HER2型PTEN陽性。TNBC的PD-L1(SP142)表達與CTLA-4表達呈正相關(Spearman=0.409,P<0.05),與PTEN表達呈負相關(Spearman=-0.318,P<0.05)。結論TNBCPD-L1(SP142)與CTLA-4表達的正相關關係,提示聯合免疫治療可能使TNBC患者獲益,而TNBCPD-L1(SP142)與PTEN表達的負相關關係,提示TNBC同時遭受免疫逃逸和基因突變的雙重打擊,因此適合免疫治療和靶向PTEN聯合治療。

重组腺病毒AdCTLA4-FasL联合供者骨髓细胞输注促进混合嵌合体形成和小鼠皮肤移植耐受

在不对受体去髓处理的情况下,用重组腺病毒AdCTLA4-FasL结合供者骨髓移植诱导混合嵌合体和同种皮肤移植耐受,结果显示,获得了持久宏嵌合体(macrochimerism)(140d时,供体细胞>20%).同时,这种嵌合体促进了稳定的供体特异性耐受,BALB/c小鼠的皮肤移植物在B6受体小鼠中长期存活(平均存活时间(themeansurvivaltime,MST)大于200d),而来源于ICR小鼠的第三者皮肤移植物被该嵌合体小鼠正常排斥.用该方法处理的B6小鼠在接受皮肤移植14d后,辅助性T淋巴细胞前体(HTLp)和细胞毒T淋巴细胞前体(CTLp)的频数降低到很低的水平,表明AdCTLA4-FasL能够迅速促进全面的外周耐受,从而有利于供体骨髓细胞植入.接受皮肤移植140d后,供体皮肤仅在形成长期嵌合体的受体小鼠中继续存活,这些小鼠体内供体特异性的HTLp和CTLp的频数减少,提示长期的皮肤移植物耐受与稳定的混合嵌合体有关,中枢性T细胞删除可能是耐受维持的主要机制.

BTLA、CTLA-4基因多态性与肝癌TACE联合靶向治疗疗效及预后相关性

目的探讨B及T淋巴细胞弱化因子(BTLA)、细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)基因多态性与肝癌经动脉插管化疗栓塞(TACE)联合靶向治疗疗效及预后相关性。方法选取2021年1月至2021年12月期间南通大学附属医院介入放射科收治的新发85例肝癌患者作为研究对象,均行TACE联合靶向治疗,根据RECIST实体瘤疗效评价标准将患者分为治疗有效组(n=58)、疾病进展组(n=27),比较2组临床资料、BTLA、CTLA-4基因多态性,分析BTLA、CTLA-4基因多态性与疗效的相关性,并于治疗后18个月电话随访生存状况,对比不同基因型患者生存状况,分析其与生存预后的相关性。结果CTLA-4 rs231775、rs733618、rs3087243、rs4553808位点、BTLA rs2171513、rs3112270、rs1982809、rs16859629位点基因型均符合HardyWeinberg遗传平衡定律;治疗有效组BTLA rs3112270位点AG、GG基因型比例、rs1982809位点GA、AA比例、rs16859629位点CC基因型、CTLA-4 rs231775位点AA基因型比例、rs3087243位点GA、AA基因型低于疾病进展组,BTLA rs3112270位点AA基因型比例、rs1982809位点GG比例、rs16859629位点TT基因型、CTLA-4 rs231775位点GG基因型比例、rs3087243位点GG基因型高于疾病进展组(P<0.05);单因素、多因素分析显示,BTLA rs3112270 A>G、rs1982809 G>A、rs16859629 T>C、CTLA-4 rs231775 A>G、rs3087243 G>A与疗效相关(P<0.05);BTLA rs3112270位点AA、AG基因型患者18个月生存率高于GG基因型患者,rs1982809位点GG、GA基因型患者18个月生存率高于AA基因型患者,rs16859629位点TT基因型患者18个月生存率高于TC、CC基因型患者(P<0.05);CTLA-4 rs231775位点GG、GA基因型患者18个月生存率高于AA基因型患者、rs3087243位点GG基因型18个月生存率高于GA、AA基因型患者(P<0.05);单因素、多因素分析显示,BTLA rs3112270 A>G、rs1982809 G>A、rs16859629 T>C、CTLA-4 rs231775 A>G、rs3087243G>A与生存预后相关(P<0.05)。结论BTLA基因rs3112270、rs1982809、rs16859629、CTLA-4基因rs231775、rs3087243位点多态性与肝癌TACE联合靶向治疗疗效、预后密切相关,以期为预估TACE治疗提供参考。

鸡CTLA-4蛋白在昆虫细胞中的表达及其单克隆抗体的制备

旨在制备鸡细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的特异性单克隆抗体,为家禽免疫检查点和疫苗研发提供有益制剂。利用杆状病毒表达系统体外表达鸡的CTLA-4蛋白,以其为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,经B淋巴细胞融合技术制备、筛选出针对鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体。通过间接免疫荧光、蛋白免疫印迹、流式细胞术等方法分析抗CTLA-4单克隆抗体的生物学特性。结果显示:构建了在Sf9昆虫细胞中表达CTLA-4蛋白的重组杆状病毒,成功筛选出3株能稳定分泌抗鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体,分别命名为:mAb-CTLA4-3D7、mAb-CTLA4-5A4、mAb-CTLA4-6A12。亚类鉴定表明,mAb-CTLA4-3D7为IgG2a, Lambda链;mAb-CTLA4-5A4为IgG3,Kappa链;mAb-CTLA4-6A12为IgG2a, Kappa链。3株单克隆抗体均能与转染真核表达质粒pCAGGS-CTLA-4-Flag的DF-1细胞和感染重组杆状病毒rBac-CTLA-4的Sf9昆虫细胞反应。单克隆抗体mAb-CTLA4-3D7与鸡的PBMC有较好的结合活性,且能与CD3+T淋巴细胞结合,结合率约为16%。本研究首次成功制备了抗鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体,并分析了其反应活性及生物学特性,为免疫检查点在禽病的发病机制、信号通路、疫苗研发等研究领域提供了材料。

PH敏感型阿霉素/CTLA-4 siRNA纳米载体抑制肾细胞癌的生长

目的探索PH敏感型阿霉素/CTLA-4 siRNA纳米载体是否可以激活抗肿瘤免疫并抑制肾透明细胞癌的生长。方法化学合成PH敏感型阿霉素/CTLA-4 siRNA纳米载体(P-LDs),电镜观测其形态,差示扫描量热法测定粒径;流式细胞术检测脾淋巴细胞对P-LDs的摄取;Western blot检测脾淋巴细胞CTLA-4的表达;活体成像观测P-LDs的体内分布及肿瘤的大小;免疫组化法检测肿瘤组织中CTLA-4、IFN-γ及Ki67的水平。结果P-LDs呈均一球形,粒径为60 nm左右;在较低PH条件下,P-LDs可以高效介导siRNA转染脾淋巴细胞(P<0.0001),降低CTLA-4的表达(P<0.001);P-LDs在体内可以有效介导siRNA转染肿瘤细胞(P<0.01),抑制肿瘤生长;P-LDs治疗后的肿瘤组织中CTLA-4表达量明显降低(P<0.0001),IFN-γ的含量显著升高(P<0.0001),增殖标记Ki67的含量显著降低(P<0.001)。结论PH敏感型纳米载体P-LDs可以将阿霉素和si-CTLA-4高效富集于肿瘤组织,增强局部抗肿瘤免疫反应的发生,抑制肿瘤生长。

免疫检查点抑制剂CTLA-4在实体肿瘤治疗中的临床应用

近年来,免疫治疗成为实体肿瘤治疗的新方法,大量免疫制剂被开发并应用于临床,其中以免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors, ICIs)应用最为广泛,为肿瘤治疗开启了新时代。而以细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4, CTLA-4)为代表的ICIs类药物丰富了肿瘤免疫治疗方法,开启了双免疫疗法的全新治疗模式。本文就CTLA-4在晚期实体肿瘤治疗中的临床应用进行综述,以期为肿瘤免疫治疗提供参考。

白蛋白结合型紫杉醇联合CTLA-4抑制剂治疗非小细胞肺癌的效果

目的研究白蛋白结合型紫杉醇联合细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA)-4抑制剂治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的效果。方法回顾性分析60例老年NSCLC患者,按照临床方案进行分组,单用白蛋白结合型紫杉醇患者为对照组(n=30),白蛋白结合型紫杉醇联合CTLA-4抑制剂患者为研究组(n=30)。观察两组一定疗程治疗后临床疗效、细胞免疫指标、肿瘤标志物指标、血清炎性因子水平及不良反应。结果研究组治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05);用药前,两组免疫指标、肿瘤标志物指标、血清炎性因子水平差异均无统计学意义(P>0.05),用药后,两组上述指标水平均明显改善,且研究组改善更明显(均P<0.05);研究组毒副反应发生率低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合使用白蛋白结合型紫杉醇和CTLA-4抑制剂,对于NSCLC患者的治疗效果显著,总体疗效优异,具有较高安全性。

骨肉瘤中PD-1和CTLA-4的表达与患者临床病理特征及预后的相关性

目的探讨PD-1和CTLA-4在骨肉瘤中的表达及其临床病理意义。方法收集2007—2016年南部战区总医院初诊初治骨肉瘤患者58例,运用免疫组织化学EnVision法检测PD-1、CTLA-4蛋白的表达。结果PD-1阳性31例(53.4%),阴性27例(46.6%);CTLA-4阳性19例(32.8%),阴性39例(67.2%);PD-1和CTLA-4双阳性12例(20.7%),双阴性20例(34.5%),单阳性26例(44.8%)。PD-1阳性与是否行新辅助化疗、肿瘤复发和转移有关,PD-1阳性患者无病生存期及总生存期更短(P<0.05);CTLA-4阳性与Ennecking分期较晚有一定关联(P=0.051);PD-1和CTLA-4双阳性表达较双阴性和单阳性患者术后复发和转移比例显著升高(P<0.05),且生存期更短(P<0.05)。结论PD-1和CTLA-4阳性表达的患者预后不良,双阳性患者的预后较差,可作为骨肉瘤免疫治疗的有效依据。