黄芩 柴胡及其配伍提取物对心肌炎小鼠心肌组织CVB3m RNA复制及IFNm RNA表达的影响

目的:研究黄芩、柴胡及其配伍提取物对心肌炎小鼠心肌组织CVB3mRNA复制及IFNmRNA表达的影响。方法:将Balb/c小鼠随机分为:柴胡组、黄芩组、配伍组,模型组和正常对照组。腹腔注射CVB3m病毒诱导Balb/c小鼠心肌炎模型,采用RT-PCR技术,检测各组小鼠给药后不同时间点心肌组织中CVB3m RNA的复制和IFNm RNA的表达情况。结果:3个给药组心肌组织中CVB3m-RNA的量明显低于模型对照组,其中黄芩组和配伍物组抗病毒作用明显;柴胡组和配伍组均可诱生干扰素,与模型组比较有显著差异。结论:黄芩提取物组具有明显抗病毒作用;柴胡在疾病早期具有明显抗病毒作用,且具有明显诱生干扰素的作用;配伍提取物组具有明显抗病毒和诱生干扰素作用,在疾病极期表现明显优势。

反复CVB3m感染对小鼠心肌的影响

目的 研究反复病毒感染对小鼠心肌的损伤 ,观察转化生长因子β1(TGF-β1)在反复病毒性心肌损伤心肌基质胶原重建中的作用。方法 通过 3次反复且增量 CVB3 m病毒感染小鼠 ,建立慢性心肌损伤模型 ,于首次感染后第 74d处死小鼠 ,病理、组织化学及电镜分析心肌病理损伤和胶原系统改变 ,计算胶原容积分数。用EL ISA法测定血清 TGF-β1含量。结果 反复病毒感染后小鼠心功能降低 ,心肌胶原容积分数高于对照组 (P <0 .0 5) ,基质胶原明显增生重建 ,主要表现为瘢痕修复和间质纤维化。反复病毒感染组血清 TGF-β1含量 (0 .10 3 5± 1.2 70 0 ) μg/L 高于对照组 (P <0 .0 5)。结论 反复病毒感染对小鼠心肌的影响主要是基质胶原系统的增生重建 ,持续病毒感染和

CVB3m病毒致低硒低维生素E鼠心肌损伤的发病机制

目的 为深入研究CVB3m病毒感染导致的低Se低VE鼠心肌病变中氧化损伤的作用。方法 1周龄乳鼠给予低Se低VE饲料喂养 ,4周后腹腔接种病毒 ,7d后处死 ,测定全血谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -Px)活性以及肝脏中脂质过氧化物 (LPO)含量 ,光镜下观察心肌的病理改变。结果 Se和VE联合缺乏鼠感染CVB3m病毒 7d后 ,小鼠全血GSH -Px活性下降 ,肝脏中LPO水平增加 ,光镜下小鼠心肌病变检出率和严重程度均高于补Se常VE病毒组。

CVB3m对免疫功能低下小鼠心肌损伤的病理观察

目的 观察免疫功能低下小鼠感染 CVB3m后心肌损伤的特点。方法 雄性昆明小鼠随机分成 4组 ,I对照组 ; 照射组 ; 病毒组 ; 照射 +病毒组。照射组 4Gy X-射线全身照射 ;病毒组常规腹腔接种 CVB3m;照射 +病毒组先照射 ,于照射后次日接种 CVB3m。观察各组小鼠接种病毒后第 3、7、14、2 1天心肌光镜改变 ,及第 14天心肌电镜改变。结果 病毒组小鼠注射病毒后第 7天 ,病变最重 ,病毒性心肌炎 (VMC)检出率为 5 7% ,以后逐渐恢复 ;照射 +病毒组第 7天 VMC检出率为 6 4.7% ,第 14天为 87.5 % ,第 2 1天为 10 0 % ,呈逐渐加重趋势。第14天电镜观察 :照射 +病毒组线粒体明显肿胀 ,嵴断裂 ,并伴有严重的空泡变。结论 全身照射条件下小鼠感染CVB3m后 ,VMC检出率增高 。

柴胡提取物对CVB3m感染小鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的探讨柴胡提取物调节心肌细胞凋亡的作用机制.方法以柯萨奇病毒嗜心肌株(CVB3m)腹腔注射诱导BALB/c小鼠病毒性心肌炎模型,将实验小鼠分为正常对照组、模型组、柴胡提取物组,柴胡提取物组每天予0.2ml/10g的浓度为2mg/ml的柴胡提取物灌胃,正常对照组、模型组予以等量生理盐水灌胃,于造模后第10天处死,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,采用免疫组化、RT-PCR法检测各组小鼠心肌中Fas、Bcl-2、Caspase3表达.结果正常组小鼠心肌未检测到凋亡的心肌细胞,Fas、Bcl-2、Caspase3均有不同程度表达,模型组可见大量心肌细胞凋亡,且Fas、Bcl-2、Caspase3表达均强于对照组(P＜0.01),柴胡提取物组心肌细胞凋亡明显减少,与模型组比较差异显著(P＜0.01),Fas、Caspase3表达明显降低,Bcl-2表达轻度升高.结论柴胡提取物可以抑制病毒性心肌炎时心肌细胞凋亡,明显下调Fas及Caspase3表达,轻微上调Bcl-2表达.

柴胡 黄芩提取物对CVB3m感染小鼠心肌损伤影响的实验研究

目的:观察柴胡、黄芩提取物对CVB3m感染小鼠心肌细胞损伤的保护作用.方法:通过建立CVB3m腹腔注射诱导的BALB/c小鼠VMC模型,观察柴胡、黄芩提取物对CVB3m感染小鼠发病后症状积分、各组小鼠VMC的发病率和死亡率、心脏重量系数、心肌病理组织学、心脏超微结构变化影响,全面评价柴胡、黄芩提取物对VMC小鼠的整体保护作用.结果:1.感染小鼠多在3～4天后出现病态表现,症状严重者可导致死亡,死亡多发生在3～7天.模型组100%发病,总死亡率70%,平均生存时间为8.9天;柴胡提取物组的发病率与模型组无显著差异,而死亡率明显低于模型组:黄芩提取物组的发病率及死亡率均明显低于模型组.2.病毒感染后,小鼠心脏重量增加,体重下降,心脏重量系数增高,发病症状积分也渐增高,模型组尤为明显,与正常组比较有差异显著(P＜0.05).柴胡提取物组、黄芩提取物组对感染小鼠心肌病理组织学、电镜超微结构改变均有明显改善作用.结论:柴胡、黄芩提取物对感染小鼠有明显的整体保护作用,使小鼠死亡率明显降低,生存质量明显提高,对心肌细胞损伤有明显保护作用.

黄芪对心肌炎小鼠心肌穿孔素mRNA和CVB3m mRNA表达的影响

目的探讨黄芪注射液治疗小鼠柯萨奇B3(CVB3)病毒性心肌炎(VMC)的疗效及其机制。方法BALB/c小鼠24只腹腔感染柯萨奇病毒B3亲心肌细胞株(CVB3m)后,随机等分为两组:黄芪治疗组(黄芪注射液每天10g/kg腹腔注射)和对照组。实验第8天留取心肌,分别进行心肌病理检查,心肌穿孔素(perforin,PFP)mRNA和CVB3m mRNA逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)分析,并对心肌组织PFP mRNA和CVB3m mRNA表达水平进行相关性分析。结果(1)心肌组织病理改变:黄芪治疗组明显轻于对照组;(2)心肌PFP mRNA表达水平RT-PCR半定量:黄芪治疗组心肌PFP mRNA的表达明显低于对照组(1.10±0.07与1.31±0.12,P<0.01);(3)心肌CVB3m mRNA表达水平RT-PCR半定量:黄芪治疗组心肌CVB3m mRNA表达明显低于对照组(1.07±0.04与1.18±0.02,P<0.01);(4)心肌PFP mRNA水平与CVB3mmRNA水平呈显著正相关(r=0.68,P<0.01)。结论PFP介导的细胞毒性作用在病毒性心肌炎的发病中起重要作用。黄芪对小鼠急性心肌炎模型中心肌组织CVB3m病毒复制有明显的抑制作用,心肌组织中PFP mRNA表达水平与心肌组织CVB3m mRNA的表达水平的变化具有同步性,黄芪对CVB3m诱导的小鼠急性心肌炎模型有显著的治疗作用。

应用嗜鼠心肌Coxsackie B_3病毒反复感染致BALB/c小鼠心肌损伤

应用嗜鼠心肌ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠重复腹腔注射，连续３次，间隔３０天，末次注射后１０天处死小鼠。光学显微镜检查发现，小鼠心肌可见不同时期的病灶（坏死灶、瘢痕），心肌损伤检出率达１００％。应用ＴＵＮＥＬ法检测发现，８２．５０％感染组鼠心肌中可见散在心肌细胞凋亡，与对照组（２３．０８％）比较，Ｐ＜０．０１，有极显著性差异。提示ＣＶＢ３ｍ重复感染可致ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠慢性心肌损伤，心肌细胞凋亡参与心肌损伤的发生与发展。

柯萨奇B_4和B_(3M)病毒重叠感染对低硒昆明鼠T细胞亚群的影响

目的：观察低硒，补硒鼠先后感染ＣＶＢ４，ＣＶＢ３Ｍ两种病毒七天后，小鼠脾脏Ｔ细胞亚群的变化。方法：小鼠先后感染ＣＶＢ４，ＣＶＢ３Ｍ两种病毒七天后，检测脾脏Ｔ细胞亚群细胞数，血清中和抗体及心肌组织病毒滴度。结果：在低硒感染组ＣＤ４，ＣＤ８，ＣＤ３均显著下降，而补硒感染组ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８Ｔ淋巴细胞亚群都明显升高，心肌组织病毒，病变程序及检出率低硒病毒组显著重于补硒组。血清中和抗体效价低硒组显著低于补硒组。结论：硒缺乏可以导致机体免疫功能的低下，而ＣＶＢ４，ＣＶＢ３Ｍ病毒的二重感染导致低硒鼠的免疫功能进一步低下。

低硒与Coxsackie B_(3m)病毒感染对BALB/c小鼠肝脏脂质过氧化物代谢的影响

用国产低硒食用酵母合成低硒饲料（硒０．０１３ｍｇ／ｋｇ，ＶＥ含量为２０ｍｇ／１００ｇ）喂养断奶后ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠，５周后腹腔接种嗜鼠心肌病毒ＣＶＢ３ｍ１０３ＴＣＤ５００．１ｍｌ，７天后处死建立低硒状态下病毒性心肌炎模型，测定肝脏组织中脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量及全血中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性。结果表明低硒感染ＣＶＢ３ｍ小鼠肝组织中ＬＰＯ含量明显高于常硒病毒感染组及常硒对照组（Ｐ＜０．０１）；低硒感染ＣＶＢ３ｍ病毒组小鼠全血ＧＳＨ－Ｐｘ活力也最低。结果提示：低硒因素加重病毒感染引起ＧＳＨ－Ｐｘ活力降低，ＬＰＯ堆积。

薄芝醇提取物体外抗亲心肌柯萨奇B_3病毒作用的研究

体外试验表明ＧＥ具有明显抑制ＣＶＢ３ｍ繁殖和保护病毒感染细胞作用。

感染Coxsackie B_(3m)病毒小鼠心肌NOS_Ⅱ蛋白表达的研究

给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种嗜鼠心肌ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ３病毒（ＣＶＢ３ｍ），感染后３、５、７、１２、１５、２０、３０天分批处死小鼠。应用免疫组化法检测发现，感染后５天，小鼠心肌可见ＮＯＳⅡ蛋白的阳性表达，７～１５天时表达最明显，２０天后逐渐减少。表达ＮＯＳⅡ蛋白的细胞主要位于炎性病灶的周围。

CVB_(3m)重复感染心肌致心室重构的实验研究

目的探讨CVB3m重复感染致病毒性心肌炎心肌结构的改变。方法用梯度倍增法连续4次经腹腔注射CVB3m病毒液感染昆明鼠,分别于末次感染后10、30、60d处死动物,电镜下观察心肌细胞超微结构的改变,HE染色观察心肌病变程度和分布,VG染色观察心肌纤维增生情况。结果⑴电镜下显示末次感染后10d肌丝走行紊乱,线粒体大部分肿胀,少数嵴溶解消失,肌浆网扩张,溶酶体糖原颗粒增多。30d时肌丝紊乱程度减轻,糖原减少,核周有轻度的低电子密度区,线粒体嵴仍有断裂或絮状变,基质密度降低。60d时心肌间质中血管周围有大量纤维素的沉积,胶原纤维合成增多。⑵HE染色显示末次感染后10d心肌损伤严重,30d时仍可见小灶坏死,60d时未检出心肌损伤。⑶VG染色表明末次感染后10d心肌即出现较弱的胶原染色,30d时胶原明显可见,60d时心肌组织的胶原显著增加,心肌组织血管周围胶原面积(PCVA)和心肌胶原容积分数(CVF)均显著增加。结论CVB3m重复感染可导致急性期严重的心肌坏死,慢性期心肌胶原沉积和心肌纤维化。

苦参总碱有效成份对柯萨基B3m病毒感染的HeLa细胞的…

研究了苦参总碱中有效成份对柯萨基Ｂ３ｍ病毒（ＣＶＢ３ｍ感染的ＨｅＬａ细胞的保护作用。结果表明将含上述成份的浓度为１５的针剂稀释至１：８时，对ＨｅＬａ细胞的毒性作用消失。当ＳＦＡ浓度在２００μｇ／ｍｌ至３．１２５μｇ／ｍｌ时，产生明显的抗病毒活性，使受感染的ＨｅＬａ细胞在「＾３Ｈ」ＴｄＲ掺入，ＭＴＴ比色结晶紫染色等指标评价下，加ＳＦＡ的病毒感染组明显好于感染对照组。

柯萨奇B3m病毒致T-2毒素染毒鼠心肌损伤的病理观察

目的 观察 T- 2毒素染毒小鼠感染柯萨奇 B3m病毒 (CVB3m)后心肌损伤的特点。方法 BAL B/C小鼠随机分成 4组 ,病毒组腹腔接种病毒液 ;毒素 +病毒组接种病毒前 T- 2毒素隔日灌胃 ,3周后腹腔接种与病毒组同等剂量的病毒液 ;毒素组单纯 T- 2毒素隔日灌胃 ;对照组生理盐水灌胃 ,腹腔接种 16 4 0营养液。观察各组小鼠心肌光镜、普通电镜、酶学电镜改变及心肌病毒核酸持续感染情况。结果 毒素 +病毒组心肌损伤明显重于病毒组和毒素组 ,病灶纤维化明显 ,可见结缔组织增生、瘢痕形成。线粒体空泡变明显 ,酶活性产物严重脱失。结论 T- 2毒素染毒小鼠感染 CVB3m后 ,心肌病变加重 。

新型中药复方制剂防治CoxB_3感染小鼠急性实验性心肌炎的形态定量学研究

目的:观察新型中药复方制剂心康口服液预防和治疗柯萨奇B3（CVB3m）感染小鼠急性病毒性心肌炎形态学及形态定量学改变的作用。方法:将小鼠随机等分为模型组、阳性药（干扰素、Ribavilin）对照组、心康口服液组及正常对照组,并腹腔接种CVB3m病毒液建立病毒性心肌炎模型。预防组在用药2d后建立病毒性心肌炎模型,连续用药20-22d,观察比较第5、10和20d小鼠心脏肉眼及组织形态学改变并进行形态定量学测量,所得数据用SPSS/PC软件包作统计学处理。结果:心康口服液中、小剂量组及干扰素组第20d时心脏表面重度病变检出率与病毒组有显著意义P<0.01;心肌组织重度损伤（心肌细胞大片坏死崩解）检出率第20d时均低于病毒感染对照组、Ribav-ilin对照组及干扰素对照组,其中,中、小剂量组与病毒组有显著意义P<0.01;心肌病变面积/全心面积比值第10d及20d时心康口服液中、小剂量组及干扰素对照组与病毒对照组有显著意义P<0.01;平均病变面积预防用药第10d及20d,治疗用药第20d心康口服液中、小剂量组及干扰素组与病毒感染对照组有显著意义P<0.01。结论:心康口服液对CVB3m病毒感染小鼠的预防性及治疗性给药可保护心肌,减轻心肌损伤及促进损伤心肌修复,其预防作用类似干扰素,治疗作用优于Ribavilin,预防用药疗效较治疗用药为好?

肉桂油治疗小鼠CVB_(3m)病毒性心肌炎的实验研究

目的:研究肉桂油(OC)对柯萨奇病毒B3m(CVB3m)诱发性小鼠病毒性心肌炎(VMC)的治疗作用.方法:0.1mLCVB3mip建立BALB/c小鼠VMC模型.正常对照组同法接种0.1mL不含病毒的Eagle液,与感染病毒小鼠隔离饲养.于接种病毒72h后给药,OC治疗组(49.1,36.7,26.5mg/kg肉桂油,ig)、阳性药物组(50mg/kg黄芪注射液,ip)、模型组与正常对照组(2500mg/kg生理盐水,ig),连续给药1wk.观察指标:累计死亡率与中位生存时间;接种病毒后10d心肌组织光、电镜组织病理学检查;心肌匀浆MDA含量、SOD活性;血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)含量;21d心肌组织光镜病理检查.结果:OC49.1和36.7mg/kg治疗组可降低小鼠死亡率,延长中位生存时间,降低急性期血清中CK,CKMB含量以及心肌中MDA含量,提高SOD活性;减轻急性期、亚急性期小鼠心肌组织的坏死与钙化,与模型组比较差异显著(P<0.05).结论:OC具有治疗柯萨奇病毒B3m诱发性小鼠VMC的作用.

柯萨奇B3m病毒致低硒低维生素E鼠心肌损伤的实验研究

目的 探讨柯萨奇病毒 (CV) B3m感染低 Se低 VE鼠心肌损伤的发病特点。方法 1周龄乳鼠分别给予低 Se低 VE和补 Se常 VE饲料喂养 ,4周后腹腔接种病毒 ,对照组接种等量 RPMI16 40培养液 ,7d后处死 ,光镜下观察心肌的病理改变。结果 CVB3m感染的 Se和 VE均缺乏鼠的心肌病变检出率为 93.3% ,病变为多发性大面积灶状坏死 ,融合成片 ,炎性细胞较少浸润 ,与急性克山病的病理改变类似 ;而补 Se常 VE组仅见散发间质炎性灶 ,面积较小 ,伴有大量的炎细胞 ,检出率为 16 .7%。结论 低硒低维生素 E状态下 ,柯萨奇病毒

穿孔素在慢性心肌损伤中的表达及其意义

目的 探讨穿孔素在柯萨奇病毒 B组 3型 (CVB3m )致 T- 2毒素染毒小鼠心肌损伤中的表达及其意义。方法 实验组 BAL B/ C小鼠 1.0 m g/ kg体重 T- 2毒素隔日灌胃 ,3周后腹腔接种 0 .1ml内含 10 0 0TCID50 的 CVB3m病毒液。对照组生理盐水灌胃、腹腔接种 0 .1m l 16 40营养液。观察心肌病理改变 ,同时用 RT-PCR技术对心肌组织中 CVB3m RNA和穿孔素 m RNA表达进行检测。结果 CVB3m感染 T- 2毒素染毒小鼠心肌出现慢性损伤 ,可见纤维结缔组织增生和坏死灶瘢痕修复。心肌组织中持续表达 CVB3m RNA和穿孔素 m R-NA。结论 CVB3m RNA和穿孔素 m RNA的持续表达可能是 CVB3m致 T-

中药对病毒性扩张型心肌病小鼠心肌ICAM-1的影响

目的:通过观察益气养阴、活血化瘀方对病毒性扩张型心肌病小鼠心肌ICAM-1表达水平的影响。方法:210只Balb/c小鼠随机分为4组。通过反复多次腹腔注射柯萨奇B3m病毒,建立病毒性扩张型心肌病小鼠模型。中药低剂量组、中药高剂量组用益气养阴、活血化瘀方治疗。于实验终点观测各组小鼠心肌病理形态学改变、死亡率、体重、心脏质量指数变化,SABC法检测小鼠心肌ICAM-1表达水平。结果:中药低剂量组、中药高剂量组小鼠心肌ICAM-1表达水平显著低于模型组(P<0.01),且心肌病理改变亦较模型组轻微。结论:益气养阴、活血化瘀方可下调病毒性扩张型心肌病小鼠心肌ICAM-1表达水平,减轻炎性细胞损伤和自身免疫损伤。