CX3CR1基因249V/I多态性与早发冠心病及血脂比值的相关性

目的探讨趋化因子Fractalkine受体CX3CR1基因位点249V/I多态性与早发冠心病以及血脂比值的相关性。方法入选患者分为早发冠心病组（n=149,年龄〈50岁）、晚发冠心病组（n=150,年龄〉65岁）和健康对照组（n=149,年龄47-93岁）,均接受血脂水平检测,计算总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值（TC/HDLC）、载脂蛋白B/载脂蛋白A1比值（ApoB/ApoA1）,应用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性方法对CX3CR1基因位点249V/I多态性分布进行分析,比较CX3CR1基因多态性及血脂比值在三组之间的差异性。结果等位基因I249在三组的分布频率比较差异有统计学意义（P〈0.0001）;早发冠心病组TC/HDLC和ApoB/ApoA1比值明显高于晚发冠心病组（P〈0.0001）,且独立于249V/I基因多态变异。结论 CX3CR1等位基因I249变异与冠心病的发病年龄存在相关性。高血脂比值与冠心病的发病年龄存在相关性。

CX3CR1基因多态性与冠心病的相关性

目的研究Fractalkine受体CX3CR1基因多态性(249V/I和280T/M)与冠心病的相关性。方法应用聚合酶链反应限制片长多态性方法对139例冠心病患者和90例对照者的CX3CR1基因多态性进行分析,比较CX3CR1基因多态性在两组之间的差异性。结果等位基因I249在对照组中的分布频率明显高于冠心病组(P<0.05);冠心病组280T/M基因型和等位基因频率分布与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论 Fractalkine受体CX3CR1等位基因I249变异可能与冠心病的发病危险性下降有关,CX3CR1基因多态性与中国南方汉族人群冠心病的发生存在相关性。

CX3CR1基因多态性与冠心病关联的荟萃分析

目的 探讨CX3CR1-V249I、T280M与冠心病（CAD）的关联性。 方法 检索中英文数据库，以得到CX3CR1-V249I、T280M与CAD易感性关系的病例对照研究，采用Meta分析方法合并V249I、T280M与CAD关联的OR值，同时进行文献发表偏倚检验。结果 共纳入文献6篇。对于V249I，共纳入病例1551人，对照1804人，I型相对于V型合并OR=0.85（95%CI=0.67-1.08，P〉0.05）；对于T280M，共纳入病例1555人，对照1801人，M型相对于T型合并OR=0.82（95%CI=0.70-0.96，P〈0.05）。结论 T280M为CAD的保护性因素，V249I与CAD的发生无关联。

包头市汉族人群CX3CR1基因多态性研究

目的:探讨CX3CR1基因多态性在包头汉族人群中的分布,以了解不同地域和民族CX3CR1基因型及等位基因频率的差异,明确CX3CR1基因多态性的遗传易感性。方法:自2009年1月1日至2009年10月30日前瞻性登记包头医学院第一附属医院住院的包头市汉族缺血性脑卒中患者163例(病例组)和同期门诊的汉族健康体检者100例(对照组),采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测CX3CR1基因T280M、V249I多态性分布。结果:对照组CX3CR1基因T280M表现为TT(95.0%)、TM(5.0%)型,V249I表现为VV(88.0%)、VI(12.0%)型,缺乏MM、II型;病例组CX3CR1基因T280M表现为TT(82.8%)、TM(16.0%)和MM(1.2%)型,V249I表现为VV(73.0%)、VI(25.2%)和II(1.8%)型,两组基因型别比较差异均有统计学意义(P<0.05),T、V等位基因在CX3CR1的基因多态性中起着主要作用。结论:包头市汉族缺血性脑卒中人群CX3CR1基因型以TT、VV型为主,健康人群缺乏MM、II型,T280M、V249I中T、V等位基因位点的突变可能增加缺血性脑卒中的易感性。

趋化因子受体CX3CR1基因T280M多态性在云南彝族人群中的分布

目的研究云南省晋宁县彝族人群CX3CR1基因T280M多态性分布的情况,为探讨CX3CR1基因相关性疾病的发病机制奠定基础.方法采用PCR-RFLP技术对居住在云南省晋宁县268例彝族健康个体的CX3CR1基因T280M多态性进行分析,计算MM、MT、TT基因型频率和M、T等位基因频率,与其他人群该位点多态性进行比较.结果云南省晋宁县彝族CX3CR1基因的MM、MT、TT基因型频率分别为1.12%、11.94%和86.94%,M和T等位基因频率分别为7.09%和92.91%.与汉族、维吾尔族、希腊、法国、塞尔维亚、印度、意大利和高加索人群比较,无论是基因型分布还是基因频率差异有统计学意义(P<0.05);但与景颇族比较中差异无统计学意义(P>0.05).结论 CX3CR1基因T280M多态性分布存在民族、种族差异,且种族间的差异大于民族间的差异.

糖尿病肾病患者CX3CR1基因V249I多态性与炎症介质的关系

目的研究糖尿病肾病患者Fractalkine(FKN)受体CX3CR1基因V249I多态性与炎症介质NF-κb、FKN、IL-6、TNF-α的关系。方法应用聚合酶链反应限制片段长度多态性方法及测序法对80例糖尿病肾病(DN组)患者、119例糖尿病(DM组)患者和118例对照者(C组)的CX3CR1基因多态性进行分析,同时检测各组血清中NF-κb、FKN、IL-6、TNF-α含量。结果等位基因249I在对照组(20.33%)中的分布频率明显高于DN组(17.23%)和DM组(8.75%)(χ2=9.698,P=0.002);血清中NF-κb、FKN、IL-6、TNF-α含量DN组高于DM组,DM组高于C组,差异均有统计学意义(各指标F值分别为23.318、52.507、8.821、12.013;P值分别为0.000、0.000、0.001、0.000);DN组及DM组中VI+II基因型FKN含量较VV基因型FKN含量明显增加(F=21.216;P=0.000);DN组及DM组中VI+II基因型NF-κB含量较VV基因型含量明显减少(F=15.361;P=0.000);各组不同基因型中IL-6的含量并无显著差异(F=1.387;P=0.053)。结论 FKN受体CX3CR1等位基因V249I变异可能与糖尿病肾病的发病危险性下降有关;CX3CR1多态性有可能通过影响肾脏的炎症过程而参与DN的发生发展。

趋化因子受体CX3CR1基因V249I多态性在云南彝族人群中的分布

目的研究云南省彝族健康人群CX3CR1基因V249I多态位点分布情况以及与其他人群之间的差异,为探讨CX3CR1基因相关疾病分子机制提供理论基础。方法使用PCR-RFLP技术检测云南省晋宁县双河乡268例彝族健康个体CX3CR1基因V249I位点多态性,分别计算基因型频率和等位基因频率,并与其它人群该位点多态性分布相比较。结果晋宁县彝族人群CX3CR1基因VV、VI、II基因型频率分别为86.53%、12.25%、1.22%;V、I等位基因的频率分别为92.65%和7.35%。与已报道的日本人、法国人、意大利人、高加索人、希腊人、印度人、塞尔维亚人与维吾尔族人、汉族人、新疆汉族人相比,CX3CR1基因V249I位点基因型分布和基因频率差异均具有统计学意义(P <0.05);与傣族人、景颇族人、湖南汉族人、包头汉族人无论从基因型分布还是基因频率均差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 CX3CR1基因V249I多态性分布在部分民族和种族之间存在一定的差异,其中不同种族之间的差异更为显著。

CX3CR1基因多态性与颈动脉内-中膜增厚的关系

目的探讨Fractalkine（FKN）受体CX3CR1基因多态性V249I和T280M与颈动脉内-中膜增厚（IMT）的相关性。方法选取117例颈动脉IMT病人和93例无增厚对照者,通过聚合酶联反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR-RFLP）确定基因型。结果T280M和TM与TT的OR值为1.896,与颈动脉IMT有关（95%CI：1.015-3.542,P=0.043）,而V249I和VI与VV之间差异无显著意义（95%CI：0.531-1.600,P=0.772）。多变量Logistic回归分析显示,T280M是颈动脉IMT的独立危险因素（95%CI：1.247-8.297,P=0.016）。结论CX3CR1 T280M是颈动脉IMT的一个独立危险因素,而V249I在颈动脉粥样硬化过程中不起主要作用。

CX3CR1多态性与中药治疗2型糖尿病肾病尿蛋白疗效的关系

目的观察CX3CR1-V249I基因多态性与中药治疗2型糖尿病肾病疗效的关系。方法糖尿病肾病患者108例随机分为对照组(西医治疗)和中药组(西医治疗联合中药参芪地黄汤加减),予相应治疗3个月。全部患者治疗开始前均接受CX3CR1-V249I基因多态性检测。治疗前、后检测糖化血红蛋白、尿白蛋白、尿α1微球蛋白(α1MU)、血β2微球蛋白(β2MU)、趋化因子Fmetalkine(FKN)、核因子-κb(NF-κb)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等。结果 108例中CX3CR1-V249I野生型(VV)87例,突变型(Ⅵ+Ⅱ)21例。治疗后两组不同基因型患者尿白蛋白、尿α1MU、血β2MU较治疗前均有明显下降(P<0.05)。中药组突变型疗效明显优于对照组突变型[尿白蛋白:(642.7±42.1)mg/L比(815.4±59.7)mg/L,P<0.05;尿α1MU:(73.21±10.06)mg/L比(84.5±11.01)mg/L,P<0.05;血β2MU:(37.42±9.04)mg/L比(51.12±10.57)mg/L,P<0.05]。中药组治疗后血清NF-κB、FKN、IL-6、TNF-α含量较治疗前明显减少(P<0.05);与对照组突变型比较,中药组突变型患者下降更明显,差异有统计学意义[NF-κb:(0.32±0.07)ng/m L比(0.53±0.09)ng/m L,P<0.05;FKN:(0.75±0.09)ng/m L比(0.91±0.14)ng/m L,P<0.05;IL-6:(121.21±22.65)pg/m L比(140.26±22.1)pg/m L,P<0.05;TNF-α:(57.16±8.31)ng/m L比(69.12±16.55)ng/m L,P<0.05]。结论参芪地黄汤能有效减少2型糖尿病肾病患者尿白蛋白、尿α1MU、血β2MU、FKN、NF-κb、IL-6、TNF-α含量,保护肾脏组织,这一作用在CX3CR1-V249I突变型患者中更加明显。

沉默CX3CR1对炎性痛小鼠痛阈的影响

目的探讨沉默CX3CR1后炎性痛小鼠的痛阈变化。方法雄性C57BL6小鼠20只,体重30～40g,采用随机数字表法,将其随机均分为两组:沉默CX3CR1组(S组)和阴性对照组(C组)。两组均采用右侧跖底皮下注射完全氟氏佐剂50μl的方法制备小鼠炎性痛模型。S组于造模后12h鞘内注射PEI/CX3CR1-siRNA,C组鞘内注射PEI/NC-siRNA。分别于造模前(基础值)、造模后1、3、5和7d时测定右侧机械缩足阈值(MWT)、热刺激缩足潜伏期(TWL)和跖底厚度;造模后7d处死小鼠观察脊髓fractalkine及其CX3CR1的表达以及炎性介质白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的释放情况。结果与C组比较,S组在造模后1d起右侧MWT、TWL升高,右侧跖底厚度降低,造模后7dCX3CR1的表达降低,IL-1β、TNF-α含量减少(P<0.05)。结论 fractalkine/CX3CR1和炎性疼痛关系密切,沉默CX3CR1基因可以有效缓解炎性痛小鼠的热痛敏和机械痛敏状态。

受体CX3CR1基因敲除对同种异系小鼠气管移植术后排斥反应的影响

目的探讨趋化因子受体CX3CR1基因敲除对同种异系小鼠气管移植后排斥反应的影响。方法将24只小鼠分为同系移植对照组、异系移植对照组、基因敲除移植组,每组各4对。基因敲除移植组、同系移植对照组受体和供体均为BABL/c小鼠;异系移植对照组供体为BABL/c小鼠,受体为C57BL/6小鼠;基因敲除移植组供体为BABL/c小鼠,受体为CX3CR1基因敲除小鼠。各组均行颈背部气管移植,每只受鼠移植2段气管。4周后取出各受鼠移植气管段,石蜡包埋,切片,HE染色,镜下观察管腔纤维化阻塞情况;采用ELISA法检测受鼠血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平。结果同系移植对照组8个移植气管段均无管腔阻塞,阻塞分数为0;异系移植对照8个移植气管段均出现管腔阻塞,移植气管管腔内充满黏液,镜下见管腔内有大量增生的成纤维细胞,阻塞分数为8.0;受体敲除移植组8个移植气管段中1个出现管腔受挤压、扭曲,1个阻塞不明显,其余6个均未出现较明显的管腔纤维化阻塞,移植气管管腔内充满黏液,镜下见管腔内有大量增生的成纤维细胞,阻塞分数为0.96。移植后4周同系移植对照组、异系移植对照组、基因敲除移植组血清HMGB1水平分别为(29.8±1.6)、(83.6±1.4)、(19.8±0.9)ng/mL,基因敲除移植组明显低于异系移植对照组(P<0.05),但与同系移植对照组比较,P>0.05。结论受体CX3CR1基因敲除可明显减轻气管移植后排斥反应。

转染CX3CR1基因对小鼠骨髓间充质干细胞向Fractalkine趋化能力的影响

目的:研究在Transwell共培养体系中,转染CX3CR1基因对小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向趋化因子Fractalkine(FKN)趋化能力的影响。方法:采用差速贴壁法分离纯化小鼠MSCs,体外培养、传代扩增,流式细胞术检测细胞表面抗原标志和细胞周期;将携带有趋化因子受体CX3CR1基因及绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的慢病毒(LV-CX3CR1-EGFP)及空载体病毒(LV-CON-EGFP)转染小鼠MSCs细胞,RT-PCR法分别检测空白对照组、实验组、阴性对照组细胞中CX3CR1 mRNA表达情况,Western blot印记法检测CX3CR1蛋白的表达水平,并通过Transwell共培养体系观察不同转染组细胞向趋化因子FKN的迁移情况。结果:成功获得了细胞形态均一,生长状态良好的MSCs;细胞CD29、CD44、CD34有阳性表达;阴性对照组和空白对照组小鼠MSCs不表达CX3CR1基因;构建的慢病毒过表达载体pUbi-MSC-CX3CR1-EGFP能成功转染至小鼠MSCs中,并使转染后的MSCs表达CX3CR1 mRNA及蛋白。在Transwell共培养体系中,转染CX3CR1基因的小鼠MSCs向趋化因子FKN趋化能力明显强于各对照组(P=0.000),其中阴性对照组浸润至下室的细胞数为:(13.80±2.17)个每高倍镜视野(n=5)。实验组浸润至下室的细胞数为:(35.80±3.34)个每高倍镜视野(n=5)。FKN抗体阻断组浸润至下室的细胞数为(14.80±1.92)个每高倍镜视野(n=5)。结论:转染CX3CR1基因能有效增加小鼠MSCs向趋化因子FKN趋化的能力。

女性糖尿病周围神经病变相关基因筛选及生物信息学分析

目的通过对GEO数据库中糖尿病周围神经病变(DPN)相关基因芯片进行生物信息学分析,获取DPN关键基因及信号通路。方法在GEO数据库中下载DPN相关基因芯片,利用R语言分析DPN女性患者与正常对照组的差异基因(DEGs)并进行可视化,根据基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)对差异基因进行注释,预测其功能与相关通路,利用STRING数据库构建蛋白质相互作用网络筛选核心基因。结果分析芯片GSE95849获取差异基因4746个,其中上调基因2218个,下调基因2528个。其中TFAP2C、ESR1、CX3CR1、FGL2处于蛋白质相互作用核心位点。结论差异基因主要参与MAPK通路,通过血糖稳态、炎症作用、神经元发育等参与DPN发病过程,为DPN的诊断及治疗提供新的思路。

CX3CR1基因多态性与维持性血液透析治疗终末期肾病患者微炎症状态的关联

目的探讨CX3CR1基因多态性与维持性血液透析(MHD)治疗终末期肾脏病(ESRD)患者微炎症状态的关联。方法选取2018年5月-2021年5月绍兴市柯桥区中医医院医共体总院行MHD治疗ESRD患者88例(ESRD组)和健康志愿者88名(对照组);分析纳入对象基本资料,采用免疫比浊法检测外周血C-反应蛋白(CRP),酶联吸附法检测外周血白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CX3CR1和CX3CL1水平,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测外周血CX3CR1基因rs3732378、rs3732379多态性并分析基因型、等位基因频率分布情况,分析不同基因型ESRD患者外周血炎性因子和CX3CR1、CX3CL1水平。结果ESRD组肌酐、甘油三酯、CRP、IL-6、TNF-α、CX3CR1和CX3CL1高于对照组(P<0.05),肾小球滤过率低于对照组(P<0.001);ESRD组患者CX3CR1基因rs3732378基因型A/A频率、A等位基因频率和rs3732379基因型C/C频率、C等位基因频率高于对照组(P<0.05),rs3732378基因型G/G频率、G等位基因频率和rs3732379基因型T/T频率、T等位基因频率低于对照组(P<0.05);rs3732378 A/A基因型ESRD患者的CRP、IL-6、TNF-α、CX3CR1和CX3CL1高于A/G+G/G基因型ESRD患者(P<0.05);rs3732379 C/C基因型ESRD患者的CRP、IL-6、TNF-α、CX3CR1和CX3CL1高于C/T+T/T基因型ESRD患者(P<0.05)。结论ESRD患者存在微炎症状态且CX3CR1水平呈升高趋势,CX3CR1基因多态性与ESRD患者的微炎症状态存在密切关系。

小鼠CX3CR1基因重组慢病毒过表达质粒的构建及鉴定

目的构建小鼠CX3CR1基因重组慢病毒过表达质粒,并对其进行鉴定。方法根据GenBank登录的小鼠CX3CR1基因序列设计引物,PCR扩增CX3CR1基因,将其定向克隆至载体pUbi-MCS-EGFP,经菌落PCR和序列测定,将鉴定正确的重组慢病毒质粒转染293T细胞,显微镜下观察病毒的绿色荧光,并根据荧光表达情况计算转染病毒滴度。结果 CX3CR1基因PCR产物经琼脂凝胶电泳鉴定,可见约1 000 bp的目的条带;经菌落PCR鉴定及序列测定,重组慢病毒过表达质粒pUbi-MCS-CX3CR1-EGFP构建正确,转染293T细胞48 h后,可见绿色荧光表达,经计算,病毒滴度为2×108TU/ml。结论成功构建小鼠CX3CR1基因重组慢病毒过表达质粒pUbi-MCS-CX3CR1-EGFP,为研究慢病毒介导的CX3CR1基因转染骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)及其归巢能力奠定了基础。