青藤碱调节CXCR4-STAT3轴对卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和血管生成拟态的影响

目的:探讨青藤碱(Sinomenine)对卵巢癌细胞增殖、迁移和血管生成拟态的影响及作用机制。方法:使用不同浓度(0、0.25、0.50、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)的青藤碱分别处理A2780细胞24、48 h, CCK-8法检测细胞存活率。将A2780细胞随机分为对照(Control)组、CXCR4激活剂基质细胞衍生因子-1(SDF-1)(SDF-1,100 ng/mL)组、CXCR4抑制剂普乐沙福(Plerixafor, 500 ng/mL)组、青藤碱(Sinomenine, 1.0 mmol/L)组、Sinomenine+SDF-1(1.0 mmol/L Sinomenine+100 ng/mL SDF-1)组,分别检测A2780细胞增殖、迁移与侵袭,体外血管生成拟态形成实验检测青藤碱对血管生成拟态的影响,Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)、上皮细胞激酶(EphA2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、MMP-2、CXC趋化因子受体4(CXCR4)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达。结果:青藤碱可有效抑制A2780细胞增殖,且呈浓度依赖性;青藤碱可显著抑制A2780细胞迁移、侵袭及血管生成拟态形成,并下调血管生成拟态标志蛋白VEGF、EphA2、MMP-9、MMP-2表达,抑制CXCR4、p-STAT3表达(P<0.05),青藤碱的这一抑制作用可被CXCR4激活剂减弱。结论:青藤碱可能通过抑制CXCR4-STAT3轴,抑制卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭及血管生成拟态形成。

吴茱萸碱调节SDF-1α/CXCR4信号通路对颅内动脉瘤血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的探究吴茱萸碱通过调节基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号通路对颅内动脉瘤(IA)血管平滑肌细胞(VSMCs)的增殖和凋亡的作用。方法24只小鼠随机分为对照组和IA组,每组12只。IA组通过定位手术注射弹性蛋白酶制造IA模型小鼠,然后通过HE染色观察动脉组织变化。随后将小鼠主动脉血管平滑肌细胞(MOVAS)先用MTT法检测吴茱萸碱浓度对细胞的活性影响,然后将MOVAS分为ctrl组、Model组(H_(2)O_(2)诱导损伤组)、低浓度吴茱萸碱组(0.50μmol/L)、高浓度吴茱萸碱组(1.00μmol/L)、高浓度吴茱萸碱+CTCE-0214组(1.00μmol/L吴茱萸碱+10 mg/kg SDF-1α/CXCR4激活剂)。CCK-8试剂盒检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测SDF-1α、CXCR4、BAX、增殖细胞核抗原(PCNA)、平滑肌22α(SM22α)和平滑肌α肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达。结果与对照组正常动脉组织比较,IA组的IA组织出现明显的病理变化,损伤严重。在MOVAS细胞实验中,与ctrl组比较,Model组的细胞凋亡率、SDF-1α、CXCR4、BAX蛋白表达增加,而细胞存活率、PCNA、SM22α、α-SMA含量降低(P<0.05)。与Model组比较,低浓度吴茱萸碱组、高浓度吴茱萸碱组的细胞凋亡率、SDF-1α、CXCR4、BAX蛋白表达降低,而细胞存活率、PCNA、SM22α、α-SMA含量升高(P<0.05);与高浓度吴茱萸碱组比较,高浓度吴茱萸碱+CTCE-0214组细胞凋亡率、SDF-1α、CXCR4、BAX蛋白表达升高,而细胞存活率、PCNA、SM22α、α-SMA含量降低(P<0.05)。结论吴茱萸碱可能通过抑制SDF-1α/CXCR4信号通路进而抑制颅内动脉瘤血管平滑肌细胞的凋亡,促进其增殖。

西格列汀激活基质细胞衍生因子-1/CXC趋化因子受体4信号通路对脂多糖诱导的人牙周膜干细胞增殖、凋亡、炎症和成骨分化的影响

目的 探讨西格列汀对脂多糖(LPS)诱导的炎症微环境下人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖、凋亡、炎症和成骨分化的影响及分子机制。方法 体外培养hPDLSCs,用不同浓度的西格列汀处理后检测细胞活力,以确定后续西格列汀实验浓度。采用1μg/mL LPS刺激诱导24 h建立hPDLSCs炎症模型并分为空白组、对照组、西格列汀低浓度组(0.5μmol/L)、西格列汀中浓度组(1μmol/L)、西格列汀高浓度组(2μmol/L)、西格列汀高浓度+基质细胞衍生因子-1 (SDF-1)/CXC趋化因子受体4 (CXCR4)通路抑制剂(AMD3100)组(2μmol/L+10μg/mL)。细胞计数试剂盒-8检测培养24、48、72 h后的hPDLSCs增殖活性;流式细胞术检测培养72 h后hPDLSCs凋亡情况;诱导成骨分化21 d后茜素红染色检测hPDLSCs成骨分化能力,试剂盒测定hPDLSCs中碱性磷酸酶(ALP)活性;酶联免疫吸附检测hPDLSCs培养上清液中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测hPDLSCs中成骨分化相关基因Runt相关转录因子2 (RUNX2)、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)及SDF-1和CXCR4 mRNA表达;Western blot检测hPDLSCs中SDF-1、CXCR4蛋白表达。结果 与空白组比较,对照组hPDLSCs增殖活性、矿化结节数量、染色强度、ALP活性和RUNX2、OCN、OPN mRNA及SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白表达水平显著降低,凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高(P<0.05);与对照组比较,西格列汀低、中、高浓度组hPDLSCs增殖活性、矿化结节数量、染色强度、ALP活性和RUNX2、OCN、OPN mRNA及SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白表达水平依次升高,凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平依次降低(P<0.05);AMD3100可部分逆转高浓度西格列汀对LPS诱导的hPDLSCs的作用效果(P<0.05)。结论 西格列汀可能通过激活SDF-1/CXCR4信号通路促进LPS诱导的炎症微环境下hPDLSCs的增殖和成骨分化,抑制hPDLSCs凋亡和炎症反应。

甲基莲心碱调节SDF-1/CXCR4信号通路对糖尿病肾病的影响

目的·探讨甲基莲心碱(neferine,Nef)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织的作用及其相关机制。方法·采用高脂饲料喂食联合腹腔注射链脲佐菌素的方法构建DN模型大鼠,并将造模成功的大鼠随机分为DN组、Nef(低、中、高)剂量组、Nef高剂量+通路拮抗剂(AMD3100)组,每组10只。同时,选10只普通大鼠作为正常组。检测6组大鼠的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、24 h尿蛋白、血清糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平及肾指数。分别采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H-E)染色、马松(Masson)染色观察6组大鼠的肾组织的病理变化。采用硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测肾组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,分别采用水溶性四氮唑(water soluble tetrazolium,WST-1)法、钼酸铵法检测肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性。分别采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测肾组织中基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)、CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)的mRNA以及蛋白表达。采用高糖(30 mmol/L葡萄糖)诱导大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,以建立DN细胞模型。将该细胞分为对照组、高糖(HG)组、HG+Nef(低、中、高)剂量组(即HG+Nef-L、M、H组)、HG+Nef-H+AMD3100组。分别采用WST-1法、钼酸铵法检测模型细胞中SOD、CAT活性,采用TBA法检测MDA含量,分别采用qPCR、Western blotting检测SDF-1、CXCR4的mRNA及蛋白表达,采用CCK-8法、流式细胞术检测细胞活力和凋亡率。结果·与DN组比较,Nef(低、中、高)剂量组和Nef高剂量+AMD3100组大鼠的FBG、24 h尿蛋白、HbA1c、Scr、BUN水平以及肾指数、MDA水平均较低,SDF-1、CXCR4的mRNA和蛋白表达以及SOD、CAT活性均较高(均P<0.05),肾组织病理损伤、纤维化程度有所减轻,且均呈剂量依赖性;AMD3100能减弱高剂量Nef对DN大鼠的肾保护作用。与HG组比较,HG+Nef-L、M、H组NRK-52E细胞的活力,SOD、CAT活性,SDF-1、CXCR4的mRNA和蛋白表达均较高,MDA含量及凋亡率均较低(均P<0.05);AMD3100可逆转Nef-H对NRK-52E细胞损伤的保护作用。结论·Nef可能通过激活SDF-1/CXCR4信号通路来控制DN大鼠的血糖水平并提高其抗氧化能力,从而发挥肾保护作用。

趋化因子CXC亚家族受体4在食管鳞癌组织中表达情况及预后价值分析

目的 探索趋化因子CXC亚家族受体4(CXCR4)在食管鳞癌(ESCC)组织中的表达情况及其与ESCC患者临床病理特征和预后的相关性。方法 本研究为回顾性队列研究,抽取蚌埠医学院第一附属医院2018年1月至12月行食管癌根治术的ESCC患者术后切片共107例作为研究组,选取其中21例患者的癌旁组织作为对照组。采用免疫组织化学染色测定两组CXCR4表达情况,分析107例ESCC患者的临床病历资料,研究CXCR4表达情况与患者临床病理特征和预后的关系。结果 研究组CXCR4阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、分化程度、侵犯深度、淋巴结转移情况ESCC患者癌组织中CXCR4表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,CXCR4阳性表达患者总生存期及无病生存期低于阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归模型分析显示,肿瘤侵犯深度、分化程度、淋巴结转移情况及CXCR4表达水平是ESCC患者总生存期、无病生存期的独立影响因素(P<0.05)。结论 ESCC患者癌组织中CXCR4阳性表达率升高,CXCR4高表达可能促进ESCC对食管的侵犯及淋巴结转移。CXCR4在ESCC中的高表达可能与患者预后较差有关。

淫羊藿苷调节SDF-1/CXCR4信号通路对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的探讨淫羊藿苷调节基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXC型趋化因子受体4(CXCR4)信号轴对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法将从PCOS模型组大鼠卵巢组织中成功分离的颗粒细胞分为PCOS组、淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷中剂量组、淫羊藿苷高剂量组、重组大鼠SDF-1蛋白(Rr-SDF-1)组、淫羊藿苷高剂量+Rr-SDF-1组,另取从正常对照组大鼠卵巢组织中成功分离的颗粒细胞作为对照组。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测卵巢颗粒细胞上清液中卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、黄体生成素(LH)水平;CCK-8法、EdU染色检测颗粒细胞增殖;流式细胞术检测颗粒细胞凋亡;Western blot检测颗粒细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的胱天蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、SDF-1、CXCR4蛋白表达。结果与对照组比较,PCOS组FSH水平、光密度(OD)_(450)值、EdU阳性细胞率降低,T、LH水平、细胞凋亡率、Bax、Cleaved Caspase-3、SDF-1、CXCR4蛋白表达水平升高(P<0.05)。与PCOS组比较,淫羊藿苷低、中、高剂量组FSH水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率均依次升高,T、LH水平、细胞凋亡率、Bax、Cleaved Caspase-3、SDF-1、CXCR4蛋白表达水平均依次降低;Rr-SDF-1组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05)。与淫羊藿苷高剂量组比较,淫羊藿苷高剂量+Rr-SDF-1组FSH水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率降低,T、LH水平、细胞凋亡率、Bax、Cleaved Caspase-3、SDF-1、CXCR4蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论淫羊藿苷可能通过抑制SDF-1/CXCR4信号通路抑制PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡。

miR-30b靶向CXCR4对子宫腺肌症模型小鼠子宫内膜间质细胞的影响及机制研究

目的探究miR-30b对子宫腺肌症(AM)模型小鼠子宫内膜间质细胞(ESCs)的影响,并进一步探究其可能的潜在调控机制。方法选取24只ICR雌性小鼠,制备AM动物模型,另选取4只ICR小鼠作为正常对照;HE染色观察造模小鼠子宫病理学变化;反转录荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测AM模型小鼠及正常小鼠子宫组织中miR-30b表达情况。分离并培养AM模型小鼠ESCs,随机分为对照组(Control组)、miR-30b过表达组(miR-30b组)和miR-30b过表达阴性对照组(miR-NC组);qRT-PCR检测各组细胞中miR-30b表达;MTT法、Transwells法和流式细胞术分别检测细胞增殖、迁移、凋亡能力;蛋白质印迹(Western blot)检测细胞中趋化因子受体4(CXCR4)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达;双荧光素酶报告验证miR-30b和CXCR4的靶向关系。结果24只小鼠中AM造模成功22只(91.67%)。与正常小鼠相比,AM模型小鼠子宫扭曲变形且明显粗壮,表面可见明显突出的腺肌病结节,子宫肌层发育紊乱,内膜间质受到浸润,内膜间质细胞侵入肌肉内层。miR-30b在AM模型小鼠子宫组织中显著低表达(P<0.05),而过表达miR-30b可以降低模型小鼠ESCs的增殖能力和侵袭能力、加速细胞凋亡(P<0.05),且过表达miR-30b可显著降低ESCs中VEGF、CXCR4蛋白表达水平(P<0.05)。miR-30b直接靶向CXCR4。结论miR-30b可能通过直接靶向调控CXCR4表达,进而促进ESCs的增殖和侵袭,抑制细胞凋亡,参与AM发病。

孕妇血清CXCL12和CXCR4水平检测联合多普勒超声检查在凶险性前置胎盘诊断中的应用价值研究

目的探讨孕妇血清CXC趋化因子配体12(CXC chemokine ligand 12,CXCL12)和CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)水平检测联合多普勒超声在凶险性前置胎盘诊断中的应用价值。方法收集2020年6月~2023年1月河北省沧州中西医结合医院收治的90例凶险性前置胎盘患者作为研究对象,根据产后病理结果分为胎盘植入组(n=38)和无胎盘植入组(n=52),另选取同期于河北省沧州中西医结合医院孕检且孕周与患者相匹配的健康孕妇(胎盘附着于子宫前壁)90例为对照组。比较各组血清CXCL12和CXCR4水平;ROC曲线分析血清CXCL12,CXCR4,多普勒超声对胎盘植入的诊断效能;以术后病理结果为金标准,四表格法计算血清CXCL12,CXCR4联合多普勒超声对发生胎盘植入的诊断效能。结果对照组、无胎盘植入组、胎盘植入组血清CXCL12(2.75±1.26 ng/ml,5.82±2.14 ng/ml,10.24±3.58 ng/ml),CXCR4(1.84±0.78 ng/ml,4.47±1.83 ng/ml,8.32±2.763 ng/ml)表达水平依次升高,差异具有统计学意义(F=158.998,199.141,均P<0.05)。CXCL12,CXCR4和多普勒超声联合检测诊断胎盘植入的AUC为0.948,敏感度和特异度分别为92.11%,86.54%,优于CXCL12,CXCR4,多普勒超声各自单独预测(Z=2.266,2.682,3.472,P=0.023,0.007,0.001)。结论凶险性前置胎盘患者血清CXCL12,CXCR4表达水平显著升高,血清CXCL12和CXCR4联合多普勒超声对凶险性前置胎盘患者胎盘植入的发生具有较好的诊断效能。

SDF-1/CXCR4信号轴在MSCs修复损伤组织中作用的研究进展

骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有自我更新和多向分化潜能,在损伤组织修复中起着重要作用。基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)信号轴是由SDF-1与其受体CXCR4相互作用构成的耦联分子对,能够进行细胞间信号转导、诱导细胞的定向迁移,参与细胞的多种生物学过程。研究证实,SDF-1/CXCR4信号轴在MSCs参与心肌缺血、肾脏病变、骨组织损伤等损伤组织修复过程中有重要的促趋化和增殖的作用。本文简要介绍了SDF-1和CXCR4的分子结构,重点阐述了SDF-1/CXCR4信号轴在MSCs参与相关损伤组织修复中的作用,归纳总结了该领域的研究进展,并展望了该领域未来的发展方向,为深入理解SDF-1/CXCR4信号轴及其在MSCs参与组织损伤修复过程中的作用提供理论基础,也为临床上更好地将MSCs应用于损伤组织修复提供参考。

血清基质细胞衍生因子1、CXC趋化因子受体4水平在青年缺血性脑卒中病人中表达变化及临床意义

目的探讨基质细胞衍生因子1(SDF-1)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)水平在青年缺血性脑卒中病人中的表达及临床意义。方法回顾性选取2019年1月至2021年1月黄冈市中心医院收治的94例青年缺血性脑卒中病人。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测两组受试者血清SDF-1、CXCR4水平。比较不同临床表现中血清SDF-1、CXCR4的水平变化。对青年缺血性脑卒中病人自出院后进行3个月随访,根据改良Rankin量表(mRS)评分对病人的预后情况进行评估,其中预后良好组76例,预后不良组18例。分析血清SDF-1、CXCR4在不同预后组的水平以及与青年缺血性脑卒中病人病理特征和预后的相关性。受试者操作特征(ROC)曲线分析血清SDF-1、CXCR4对青年缺血性脑卒中病人预后的预测价值。结果梗死面积>4 cm^(2)[(6.18±1.46)μg/L、(7.24±1.71)μg/L]、美国国立卫生院神经功能缺损量表(NIHSS)评分>15分[(5.98±1.41)μg/L、(7.15±1.68)μg/L]、格拉斯哥昏迷(GCS)评分>8分[(6.28±1.49)μg/L、(7.23±1.72)μg/L]的病人血清SDF-1、CXCR4水平均明显高于梗死面积≤4 cm^(2)[(4.57±1.16)μg/L、(5.47±1.39)μg/L]、NIHSS评分≤15分[(5.02±1.34)μg/L、(6.11±1.47)μg/L]、GCS评分≤8分的病人[(5.06±1.38)μg/L、(6.08±1.45)μg/L](P<0.05)。预后不良组病人血清SDF-1、CXCR4水平[(7.01±1.71)μg/L、(8.73±1.95)μg/L]明显高于预后良好组[(5.43±1.25)μg/L、(6.17±1.49)μg/L](P<0.05)。血清SDF-1、CXCR4与青年缺血性脑卒中病人梗死面积、NIHSS评分、GCS评分、MRS评分均为显著正相关(P<0.05)。血清SDF-1、CXCR4水平对青年缺血性脑卒中病人预后不良预测价值的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.84、0.83,灵敏度分别为72.20%、66.70%,特异度分别为88.20%、85.50%。结论青年缺血性脑卒中病人血清SDF-1、CXCR4水平与病人病理程度及预后有一定的相关性,二者对青年缺血性脑卒中病人不良预后有较优的预测价值。

脂联素调控SDF-1α/CXCR4信号轴在炎症微环境下牙周膜干细胞成骨分化中的作用

目的 研究脂联素通过调控基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号轴对炎症微环境下牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化中的影响。方法 原代培养PDLSCs后取第三代细胞进行分组处理,进行成骨分化诱导并用10 ng/mL肿瘤坏死因子-α(TNF-α)模拟微炎症环境、用10μg/mL脂联素处理、转染阴性对照(NC)或SDF-1α的siRNA。成骨诱导第3、5、7 d时,检测碱性磷酸酶(ALP)活性,骨钙素(OCN)、骨保护素(OPN)、SDF-1α、CXCR4的m RNA表达,SDF-1α的含量;成骨诱导第21 d时,进行茜素红染色、观察钙盐沉积情况。结果 炎症微环境下PDSCSs的成骨分化及SDF-1α/CXCR4信号轴的激活均受到抑制;脂联素在炎症微环境下促进PDSCSs的成骨分化及SDF-1α/CXCR4信号轴的激活;转染SDF-1α的siRNA后,SDF-1α/CXCR4信号轴的激活受到抑制,脂联素在炎症微环境下促进PDSCSs成骨分化的作用也被抑制。结论 脂联素通过激活SDF-1α/CXCR4信号轴促进炎症微环境下PDSCSs的成骨分化。

基于TLR4/NF-κB信号通路及血清CXCL16、ACA评价依达拉奉右莰醇对ACI神经功能的保护作用

目的基于Toll样受体(TLR)4/核因子κB(NF-κB)信号通路及血清CXC型趋化因子配体16(CXCL16)、抗心磷脂抗体(ACA)评价依达拉奉右莰醇治疗急性脑梗死(ACI)的疗效及神经功能保护作用。方法将102例ACI患者根据是否使用依达拉奉右莰醇分为两组:观察组(n=54)均在常规治疗基础上接受依达拉奉右莰醇治疗,对照组(n=48)未用依达拉奉治疗。对比两组治疗前及治疗7d、14d、30d后神经功能缺损量表(NIHSS),治疗前及治疗14d检测血清TLR4、NF-κB、白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、CXCL16、ACA,随访3个月采用改良Rankin量表(mRS)评价预后。结果治疗后7d、14d、30d,两组NIHSS评分均下降,而观察组明显低于对照组(P<0.05)。治疗14d后,两组血清TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α、CXCL16、ACA水平均下降,且观察组明显低于对照组(P<0.05)。随访3个月,观察组mRS均分低于对照组(P<0.05),但两组预后差异无统计学意义(79.63%vs 68.75%,P>0.05)。结论依达拉奉右莰醇用于ACI的治疗可保护神经功能,其机制可能与调节TLR4/NF-κB信号通路及血清CXCL16、ACA表达有关。

五味子甲素对去卵巢骨质疏松大鼠SDF-1/CXCR4信号通路的影响

目的探究五味子甲素对去卵巢骨质疏松症大鼠的治疗作用以及对基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号通路的影响。方法采用去卵巢法构建骨质疏松症大鼠模型,将建模成功的60只大鼠随机分为模型组、五味子甲素低(20 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组、阿仑膦酸钠(1 mg/kg)组、五味子甲素高剂量+SDF-1/CXCR4通路抑制剂(AMD3100)(40 mg/kg+5 mg/kg)组,每组12只。另取12只大鼠作为假手术组(手术过程中仅暴露卵巢不切除)。建模结束后,各组给予对应药物干预,每天1次,连续12周。采用双能X射线骨密度仪检测大鼠左、右股骨骨密度(BMD);酶联免疫吸附法检测大鼠血清中Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(CTX-Ⅰ)、骨钙素(OC)水平;HE染色观察大鼠股骨组织病理学变化;荧光定量PCR法检测大鼠股骨组织中SDF-1、CXCR4信使RNA(mRNA)水平;蛋白印迹法检测大鼠股骨组织中SDF-1、CXCR4蛋白水平。结果假手术组大鼠股骨组织骨小梁结构正常,排列规则;与假手术组相比,模型组大鼠股骨组织骨小梁稀疏断裂,数量减少,排列紊乱,左、右股骨BMD、血清中OC、CTX-Ⅰ水平、股骨组织中SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,五味子甲素低、高剂量组大鼠股骨组织病变程度依次减轻,左、右股骨BMD、血清中OC、CTX-Ⅰ水平、股骨组织中SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白水平依次升高(P<0.05);阿仑膦酸钠组和五味子甲素高剂量组大鼠股骨组织病理学变化及各项指标差异比较均无统计学意义(P>0.05);AMD3100可逆转高剂量五味子甲素对骨质疏松症大鼠上述指标的改善效果(P<0.05)。结论五味子甲素可抑制骨质疏松症大鼠BMD的下降,减轻大鼠股骨组织病变,改善大鼠骨质疏松,其机制可能与激活SDF-1/CXCR4信号通路有关。

血清miR-1246、CXCL12和CXCR4水平预测非小细胞肺癌患者术后预后的效能

目的观察血清miR-1246、趋化因子基质细胞衍生因子-1(CXCL12)和CXC趋化因子受体4(CXCR4)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者术后预后中的预测价值。方法选择2019年1月至2020年6月在该院手术治疗的98例NSCLC患者为NSCLC组。选择同期该院肺部良性疾病患者75例和健康体检者75例分别纳入肺良性疾病对照组和健康对照组。比较3组血清miR-1246、CXCL12和CXCR4水平,比较不同特征及不同预后NSCLC患者血清miR-1246、CXCL12和CXCR4水平,分析3项指标预测NSCLC术后两年内发生预后不良的效能。结果NSCLC组术前血清miR-1246水平明显低于肺良性疾病对照组和健康对照组,肺良性疾病对照组也明显低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组中,术后miR-1246水平较术前明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组术前血清CXCL12和CXCR4水平较肺良性疾病对照组和健康对照组明显升高,肺良性疾病对照组明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组中,术后血清CXCL12和CXCR4水平较术前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化、Ⅲ+Ⅳ期和有淋巴结转移的NSCLC患者血清miR-1246水平明显低于高中分化、Ⅰ+Ⅱ期和无淋巴结转移的NSCLC患者,差异有统计学意义(P<0.05);而低分化、Ⅲ+Ⅳ期和有淋巴结转移的NSCLC患者血清CXCL12和CXCR4水平明显高于高中分化、Ⅰ+Ⅱ期和无淋巴结转移的NSCLC患者,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良者血清miR-1246水平明显低于预后良好者,而预后不良者血清CXCL12和CXCR4水平明显高于预后良好者,差异有统计学意义(P<0.05)。3项指标联合检测的灵敏度为82.1%,特异度为84.7%,曲线下面积为0.910,其AUC明显高于miR-1246(Z=3.131,P=0.002)、CXCL12(Z=2.998,P=0.003)和CXCR4(Z=3.022,P=0.003)单独检测。结论miR-1246、CXCL12和CXCR4参与了NSCLC的发生、发展过程,联合检测miR-1246、CXCL12和CXCR4预测NSCLC术后两年内发生预后不良具有较高的效能。

益肺平喘汤联合噻托溴铵对COPD患者肺功能及血清Galectin-3、SDF-1、CXCR4水平的影响

目的:探讨益肺平喘汤联合噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能及血清半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)水平的影响。方法:选取2017年1月~2019年1月南宁市中医医院肺病科收治的68例COPD患者,根据随机数字表法分为对照组和观察组,各34例。对照组接受噻托溴铵治疗,观察组在对照组接受益肺平喘汤联合噻托溴铵治疗。对比两组患者临床疗效和治疗后中医症状积分、慢性阻塞性肺疾病评估测试(CAT)评分、6min步行距离(6MWD)、肺功能和血清Galectin-3、SDF-1、CXCR4水平及不良反应发生情况。结果:观察组临床总有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后观察组中医症状积分、CAT评分和血清Galectin-3、SDF-1、CXCR4水平明显低于对照组,6MWD明显长于对照组,第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、FEV_(1)/FVC、呼气流量峰值(PEF)明显高于对照组(P<0.05);两组患者均未出现明显不良反应。结论:益肺平喘汤联合噻托溴铵治疗COPD疗效确切,可显著改善肺功能,提升运动耐力,降低血清Galectin-3、SDF-1、CXCR4水平,且安全性高,值得临床推广。

血浆CXCL12、CXCR4水平与急性心肌梗死患者严重程度及预后的相关性研究

目的 分析血浆CXC趋化因子配体12(CXCL12)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)水平与急性心肌梗死(AMI)患者严重程度及预后的相关性。方法 选择2019年10月至2020年12月湖州市中心医院收治的AMI患者100例作为观察组,其中预后良好亚组68例,预后不良亚组32例;另择同期本院100名健康体检者作为对照组,检测血浆CXCL12、CXCR4、血脂指标、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、超敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。采用Pearson相关分析血浆CXCL12、CXCR4水平与AMI患者冠脉病变程度、冠脉斑块性质、梗死类型的相关性。采用ROC曲线分析CXCL12、CXCR水平对AMI患者不良预后的预测效能。结果 观察组血浆CXCL12、CXCR4水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。冠脉病变程度为重度的患者血浆CXCL12、CXCR4水平高于轻度、中度患者,中度患者高于轻度患者,易损斑块患者血浆CXCL12、CXCR4水平高于非易损斑块患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。预后不良亚组年龄、NT-proBNP、hs-cTnT、hs-CRP、TNF-α、CXCL12、CXCR4水平高于预后良好亚组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关分析显示,CXCL12、CXCR4水平与冠脉病变程度均呈正相关(r=0.876、0.859,均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,年龄、NT-proBNP、hs-cTnT、hs-CRP、TNF-α、CXCL12、CXCR4均为AMI患者预后的影响因素(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,入院1周CXCL12、CXCR4的AUC高于入院时,入院时和入院1周CXCL12、CXCR4联合预测的AUC均高于单独预测。结论 AMI患者血浆CXCL12、CXCR4水平升高,与病情严重程度及预后密切相关。

甲状腺肿瘤CD44v6与CXCR4的表达及其意义

目的探讨甲状腺肿瘤中CD44v6、趋化因子受体4(CXCR4)的表达及意义。方法免疫组化检测200例甲状腺癌(淋巴结转移阳性100例)以及20例甲状腺腺瘤中CD44v6和CXCR4的表达。结果甲状腺癌组CD44v6及CXCR4的阳性表达率分别为72%和69%,显著高于甲状腺良性腺瘤组的20%和15%;淋巴结转移组CD44v6和CXCR4表达的阳性表达率分别为88%和91%,显著高于无转移组的56%和47%;不同病理类型、临床分期和生存期甲状腺癌中CD44v6和CXCR4的阳性表达率显著不同。结论CD44v6及CXCR4在甲状腺良恶性肿瘤的鉴别诊断,甲状腺癌淋巴结转移与否的判断和预后估计等方面有重要意义。

SDF-1和CXCR4在鼠角膜碱烧伤新生血管中的表达

目的探讨大鼠角膜碱烧伤后基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)及其CXC受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)在角膜组织中的表达变化规律,以及CXCR4特异性拮抗剂AMD3100对角膜新生血管的影响。方法采用1mol·L-1氢氧化钠溶液建立SD大鼠角膜碱烧伤模型,用RT-PCR和Western blot检测大鼠角膜碱烧伤后不同时间点SDF-1和CXCR4的mRNA和蛋白的表达,用免疫组织化学SP法检测大鼠角膜碱烧伤后SDF-1和CXCR4在角膜组织中的阳性表达。另设碱烧伤对照组和碱烧伤治疗组,碱烧伤后分别给予0.1mL生理盐水和AMD3100球结膜下注射,比较2组大鼠角膜新生血管面积和角膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的含量。结果碱烧伤后SDF-1阳性表达于浅层角膜基质细胞、角膜上皮细胞和炎性浸润细胞,CXCR4阳性表达于炎性浸润细胞、角膜上皮细胞和血管内皮细胞。正常大鼠角膜组织中可检出微量SDF-1和CXCR4 mRNA和蛋白表达;碱烧伤后2d,SDF-1 mRNA和蛋白水平明显升高,7d、10d分别是正常水平的3.8倍和21.0倍;CXCR4 mRNA和蛋白水平在碱烧伤后2d明显升高,7d、10d分别是正常水平的1.9倍和17.5倍。碱烧伤治疗组碱烧伤后7d、10d、14d时新生血管面积均小于碱烧伤对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。碱烧伤治疗组碱烧伤后2d、5d、7d、10d、14d角膜组织中VEGF蛋白的含量均稍低于对照组,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 SDF-1与其受体CXCR4的相互作用可能参与了碱烧伤诱导的角膜新生血管形成,AMD3100能有效抑制角膜新生血管的形成,有可能成为治疗角膜新生血管的方法之一。

口腔鳞癌中趋化因子受体CXCR4和CCR7表达及其与临床病理特征的关系

目的检测CXC类趋化因子受体4(chemokine CXC motif receptor 4,CXCR4)和CC类趋化因子受体7(chemokine CCmotif receptor 7,CCR7)在口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中表达,探讨其与OSCC临床病理特点及颈淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测64例OSCC组织原发灶、39例转移淋巴结组织和10例正常口腔黏膜组织中CXCR4及CCR7的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果 OSCC组织细胞中CXCR4、CCR7蛋白的阳性表达率分别为62.5%、65.6%,明显高于正常口腔黏膜组织细胞(P<0.01),其中有淋巴结转移组表达率分别为74.36%、84.62%,无淋巴结转移组表达率分别为44%、36%,差异均有统计学意义(P<0.05),而CXCR4、CCR7在淋巴结转移灶中的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR检测结果也证实,CXCR4及CCR7在OSCC细胞中均有阳性表达。此外,CXCR4及CCR7的表达与肿瘤的分化程度、侵袭程度和TNM分期密切相关(P<0.05),而与年龄、性别和肿瘤大小无关(P>0.05)。结论趋化因子受体CXCR4、CCR7的表达与OSCC侵袭发展和淋巴结转移密切相关。CXCR4、CCR7有可能成为OSCC治疗的新靶点。

CXCR4小干扰RNA对人大肠癌细胞SW480迁移能力的抑制作用

目的:探讨CXC族趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)小干扰RNA对人大肠癌细胞株SW480迁移能力的抑制作用。方法:将与CXCR4 mRNA互补的小干扰RNA(siRNA)及阴性对照Non-silencing dsRNA以阳离子脂质体包埋后转染人大肠癌细胞株SW480,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后SW480细胞CXCR4 mRNA表达的变化,采用Western blotting检测转染细胞CXCR4蛋白表达的变化,采用Transwell迁移实验检测大肠癌细胞SW480迁移能力的变化。结果:与正常对照组和Non-silencing dsRNA相比,siRNA各浓度组对SW480细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达均有明显的抑制作用(P<0.01),其抑制效应具有浓度依赖性(P<0.01)。与正常对照组和Non-silencing dsRNA相比,siRNA各剂量组对肿瘤细胞迁移有明显抑制作用(P<0.01),其抑制效应具有剂量依赖性(P<0.01);siRNA在终浓度为50、100和200 nmol/L时对SW480细胞的迁移抑制率分别为20.5%、37.5%和52.9%。结论:CXCR4小干扰RNA通过下调CXCR4 mRNA和蛋白的表达显著抑制人大肠癌细胞SW480的迁移,并呈剂量依赖性。