延胡索通过靶向CXCL17激活AMPK信号通路下调PD-L1抑制EB病毒感染诱导的胃癌免疫逃逸

目的探讨延胡索对EB病毒(EBV)阳性胃癌细胞免疫逃逸的作用及其靶向CXCL17影响EBV阳性胃癌细胞免疫逃逸的机制。方法GEO2R在线分析软件筛选EBV阳性胃癌组织中的差异表达基因。采用EBV阴性胃癌AGS细胞和EBV阳性胃癌SUN-719细胞进行实验。实时qPCR和Western blotting检测EBV阴性和EBV阳性胃癌细胞中CXCL17表达。将CXCL17 siRNA转染EBV阳性胃癌细胞,Western blotting检测细胞PD-L1表达;将EBV阳性胃癌细胞与T细胞共培养,CCK-8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。用延胡索提取物(2、4、8μg/mL)处理EBV阳性胃癌细胞,Western blotting检测细胞CXCL17和PD-L1表达;将EBV阳性胃癌细胞与T细胞共培养,CCK-8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。将CXCL17过表达质粒转染延胡索提取物(8μg/mL)处理的EBV阳性胃癌细胞,Western blotting检测细胞PD-L1和p-AMPK表达;将EBV阳性胃癌细胞与T细胞共培养,CCK-8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果CXCL17在EBV阳性胃癌组织和细胞中表达上调(P<0.05)。沉默CXCL17降低EBV阳性胃癌细胞PD-L1表达,抑制与T细胞共培养的EBV阳性胃癌细胞增殖并促进细胞凋亡(P<0.05)。延胡索处理降低EBV阳性胃癌细胞CXCL17和PD-L1表达,抑制与T细胞共培养的EBV阳性胃癌细胞增殖并促进细胞凋亡(P<0.05);过表达CXCL17逆转了延胡索处理对EBV阳性胃癌细胞PD-L1表达和细胞增殖的抑制作用及细胞凋亡的促进作用(P<0.05);过表达CXCL17还降低了延胡索处理的EBV阳性胃癌细胞p-AMPK表达(P<0.05)。结论CXCL17在EBV阳性胃癌细胞中表达上调,延胡索通过下调EBV阳性胃癌细胞CXCL17表达抑制胃癌细胞免疫逃逸,其机制可能与激活AMPK信号通路有关。

趋化因子CXCL17在胃癌组织中的表达及其临床相关性研究

目的:分析趋化因子CXCL17在胃癌及癌旁正常组织的表达及分布情况,并探讨其差异表达的临床意义。方法:分别采用实时荧光定量PCR和免疫组化对40例术后切除的胃癌及相应癌旁正常胃组织CXCL17的表达及分布情况进行检测。通过临床病理分析及Kaplan-Meier生存曲线的分析,明确CXCL17在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。结果:CXCL17蛋白和mRNA的表达在胃癌组织较癌旁正常组织明显降低(P<0.05)。临床病理数据分析显示,CXCL17表达的下调与胃癌分化程度有关(P<0.01),与病人性别、年龄、淋巴结转移、原发部位肿瘤大小、肿瘤分期、癌胚抗原表达水平等未见明显相关性。Kaplan-Meier生存分析显示,CXCL17高表达组相对低表达组有明显的生存延长(P<0.05)。结论:CXCL17可作为胃癌预后的关键因素之一参与胃癌的发生发展。

幽门螺杆菌根除者胃内菌群特征及其与CXCL17相关性

目的通过比较幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)根除成功者、H.pylori感染者及无H.pylori感染史者胃内菌群差异,探讨H.pylori根除对胃内菌群的影响。方法选取6例H.pylori根除成功者、12例H.pylori感染者和13例无H.pylori感染史者胃黏膜标本,研磨匀浆组织后提取基因组,扩增16S rDNA基因V3~V4高变区,构建425 bp左右扩增片段,基于Illumina Miseq PE250测序平台测序。测序数据经过生物信息处理,通过97%一致性将序列聚类得到OTU,经聚类及物种注释后获得每个样本在各分类水平的分布情况。三组样本进行α多样性和β多样性分析,统计分析三组胃黏膜菌群差异。此外,通过物种差异与关联分析预测差异菌属与CXCL17关系及差异功能通路。结果H.pylori根除成功组与无H.pylori感染史组胃黏膜菌群结构相似。与H.pylori感染组相比,α多样性分析后者胃黏膜菌群多样性显著降低,但菌群丰度无差异。β多样性结果显示,各组组内的菌群结构相似度高,而前两组组间菌群结构相似且与后者组间的菌群相似度较低。胃黏膜趋化因子CXCL17与棒状杆菌属(Corynebacterium)和微球菌属(Micrococcus)呈负相关。胃液趋化因子CXCL17与普氏菌属(Prevotella)呈负相关。各组间代谢途径存在差异且有H.pylori感染史组涉及更多疾病相关代谢途径,而无H.pylori感染史组则无。结论H.pylori感染导致胃黏膜菌群发生紊乱,根除H.pylori能逆转这种改变,使胃黏膜菌群恢复至与无H.pylori感染史者相似状态。抗菌趋化因子CXCL17与胃内部分菌群具有相关性,提示胃内菌群与机体局部免疫系统可能互相作用。

CXCL17蛋白促进顺铂诱导HepG2肝癌细胞自噬形成

目的探讨CXCL17调节肝癌细胞化疗耐药产生的机制。方法构建过表达CXCL17的HepG2细胞系。实验分为过表达CXCL17组,空白质粒组以及对照组。转染的细胞提取总蛋白,Western blot检测蛋白表达状态,流式细胞仪及电镜检测药物作用后的细胞变化。结果 CXCL17过表达的HepG2细胞株较其亲代细胞对顺铂引起的细胞毒作用和凋亡敏感性下降,但是尚未完全被抑制,而细胞内的自噬增加,线粒体损伤减少,溶酶体增多。结论 CXCL17通过促进细胞自噬参与调节HepG2细胞的化疗耐药。

CXCL17在肿瘤中表达意义及功能的研究进展

CXCL17是趋化因子家族最新成员,其受体最近才被确认为GPR35并命名为CXCR8。CXCL17-CXCR8(GPR35)生物轴可能与肿瘤的增殖、凋亡、不良预后等有关。但目前关于这两种分子的功能作用尚不清楚,处于初级研究阶段。

CXCL17调控肝细胞癌发生发展的作用机制研究进展

肝细胞癌是世界上常见、恶性程度很高的肿瘤之一,在中国恶性肿瘤中发病率和病死率高,肝癌的非手术治疗措施疗效不佳。CXC族趋化因子配体17(CXCL17)作为目前最后被发现的CXC家族趋化因子,它的差异表达与肝细胞癌的发生发展、肝脏肿瘤微环境关系密切。随着对CXCL17及其受体(GPR35)功能的不断研究,有望为肝细胞癌提供新的临床治疗思路。

胃癌组织中趋化因子及其受体相关变化及作用分析

目的:筛选胃癌组织中趋化因子及其受体的表达量变化,分析其相关作用,并挑选CXCL17验证其与胃癌的相关性。方法:应用趋化因子基因芯片技术检测胃癌组织及癌旁正常组织中各趋化因子的差异表达情况,通过生物信息学分析差异表达基因的相关作用。从中挑选出CXCL17进行验证,在癌症基因组图谱数据库中进行mRNA水平验证,并进行免疫组织化学染色进行蛋白水平验证,并分析其临床相关性。结果:基因芯片检测结果显示差异在2倍以上的基因共49个,主要与免疫应答及炎症反应等相关。而通过TCGA数据分析发现CXCL17 mRNA在胃癌肿瘤组织中表达量降低(P<0.01),CXCL17蛋白表达量在肿瘤组织中亦明显降低(P<0.05),且CXCL17表达量的下调与胃癌分化程度有关(P<0.01)。结论:通过基因芯片技术筛选胃癌微环境中相关趋化因子变化情况,并验证了CXCL17与胃癌发生发展的相关性。

VCC-1在肝癌患者血、尿和癌组织中的表达及其意义

目的检测VCC-1及VEGF在原发性肝癌患者血、尿和癌组织中的表达情况,并探讨它们在乙肝相关性肝癌发生、发展中的作用及临床意义。方法应用ELISA法检测40例原发性肝癌血、尿标本中VCC-1及VEGF术前及术后第1、5、7天的浓度,并同时检测40例正常人和13例因乙肝后肝硬化、门静脉高压、脾功能亢进行脾切除+贲门周围血管离断+肝活检患者术前血、尿标本中VCC-1及VEGF的浓度。应用免疫组化的方法检测40例肝癌术后癌组织及癌旁组织和13例肝硬化活检组织中VCC-1及VGGF的表达情况。结果肝癌组术前血、尿中VCC-1和血清中VEGF的浓度高于正常对照组和肝硬化组(P<0.05),肝硬化组与正常组血、尿VCC-1及血清中VEGF无明显差异(P>0.05)。肝癌组术后1、5、7天血、尿中VCC-1及血清VEGF浓度明显高于术前。肝癌组织VCC-1、VEGF免疫组化阳性率高于癌旁组和肝硬化组织(P<0.05),癌旁组织和肝硬化组织之间无明显差异。肝癌组织中VCC-1的阳性表达与肿瘤存在脉管癌栓、TNM分期具正相关性(P<0.05);肝癌组织中VEGF的阳性表达与肝癌的TNM分期及肿瘤直径具有相关性。结论肝癌患者血、尿及癌组织中VCC-1表达增高,且与VEGF的表达具有正相关,提示VCC-1可能参于肝癌的进展及转移。

新型趋化因子CXCL17

趋化因子是一类具有趋化作用的细胞因子。CXCL17是2006年发现的CXC族趋化因子中的一个新成员。该因子有明显的促血管生成作用,由此可促进多种肿瘤的生长;然而在胰腺肿瘤中却通过抗肿瘤免疫等作用而抑制肿瘤的发生。除了在血管生成和肿瘤发生中的作用外,CXCL17还有抗菌抗炎作用,且在粘膜中有恒定表达,推测其在维持粘膜的无菌性中起一定作用。CXCL17如此多样的功能日益引起了人们的关注。本文介绍有关CXCL17的最新研究进展。