CXCR1/2受体拮抗剂-G31P对小鼠腹水型肝癌淋巴转移潜能的影响

目的:建立小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCA-P/L6足趾转移动物模型,观察CXCR1/2受体拮抗剂-G31P对该模型转移潜能的影响。方法:用小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCA-P/L6制造足趾转移动物模型。同时背部皮下注射CXCR1/2受体拮抗剂G31P或生理盐水作为实验组和对照组。肉眼观察转移模型中小鼠足垫原位移植瘤出现的时间和瘤体的状态、淋巴结肿大情况,记录小鼠健康状况。第21天时,解剖小鼠,取各部位淋巴结并测量其最长径,并取足垫皮下原位移植瘤及可疑转移脏器,制作病理切片。切取部分淋巴结RT-PCR检测淋巴结中CXCR2、KC、MIP2 mRNA的表达水平。结果:两组小鼠体重和原位移植瘤体积即足趾体积比较具有显著性差异(P<0.05)。对照组小鼠双侧腹股沟淋巴结、腋窝淋巴结、主动脉旁淋巴结直径均大于实验组(P<0.05),且转移率有显著差异,病理检测显示对照组小鼠各部位淋巴结瘤细胞呈片状分布,异性型明显,并可见多核的巨瘤细胞。实验组小鼠淋巴结中只有一小部分可见个别散在瘤细胞。RT-PCR显示对照组小鼠足垫原位移植瘤MIP-2 mRNA表达明显增高。结论:CXCR1/2受体拮抗剂-G31P可以有效抑制小鼠腹水型肝癌淋巴转移。

右归丸通过调节CXCL8/CXCR1/2信号通路及Ang-1,Ang-2表达促进大鼠卵巢血管生成的作用

目的:研究补肾中药复方右归丸对自然衰老致卵巢功能低下的大鼠血管生成的影响与CXC趋化因子8(CXCL8)/趋化因子受体1/2(CXCR1/2)信号通路及血管生成素-1(Ang-1),血管生成素-2(Ang-2)的关系,探讨其改善卵巢功能的作用机制。方法:将56只雌性SD大鼠随机分为青年组8只、自然衰老致卵巢功能低下的雌性大鼠模型组48只,青年组大鼠常规饲养,48只模型组大鼠常规饲养过程中做5~7 d阴道脱落细胞学涂片,将连续4个动情周期阴道细胞学表现为动情周期长、之后持续动情、反复假妊娠的大鼠作为初老大鼠,连续10 d表现为角化细胞指数高于50%的青年大鼠作为青年组。模型建立后,将存活造模大鼠随机分为初老空白组,结合雌激素组(65μg·kg^(-1)·d^(-1)),左归丸组(33 g·kg^(-1)·d^(-1)),右归丸低、中、高剂量组(1.2,2.4,4.8 g·kg^(-1)d^(-1)),青年组和初老空白组以等体积生理盐水灌胃,持续30 d。实验结束后,苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠卵巢组织形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠卵巢组织中趋化因子CXCL8,CXCR1,CXCR2,Ang-1,Ang-2的蛋白表达水平;免疫组化标记大鼠卵巢组织中趋化因子CXCL8,CXCR1,CXCR2,Ang-1,Ang-2蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠卵巢组织中趋化因子CXCL8,CXCR1,CXCR2,Ang-1,Ang-2 mRNA表达。结果:与青年组比较,初老空白组各级生长卵泡数、黄体数、血管数目数量少且闭锁卵泡多(P<0.01),卵巢组织CXCL8,CXCR1及CXCR2水平蛋白和mRNA水平显著上升(P<0.01),卵巢组织中Ang-1及Ang-2蛋白和mRNA水平明显下降(P<0.05);与初老空白组相比,各用药组初老大鼠的各级生长卵泡数、黄体数、血管数目明显增加(P<0.05),而闭锁卵泡数明显减少(P<0.05),卵巢组织CXCL8,CXCR1及CXCR2水平蛋白和mRNA水平明显下降(P<0.05),卵巢组织中Ang-1及Ang-2蛋白和mRNA水平明显上升(P<0.05)。结论:右归丸可以通过下调大鼠卵巢组织中CXCL8,CXCR1及CXCR2水平,上调Ang-1和Ang-2水平,促进卵巢血管生成,改善大鼠的卵巢功能。

原发性胆汁性肝硬化患者外周血IL-8及其受体CXCR1、CXCR2的表达及临床意义

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血浆白介素-8(IL-8)和外周血单个核细胞(PBMC)中IL-8、白介素-8受体1(CXCR1)、白介素-8受体2(CXCR2)、G蛋白耦联受体激酶5(G protein-coupled receptor kinase 5,GRK5)的表达变化及其临床意义。方法用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测25例PBC患者和25例健康人对照组PBMCs中IL-8、CXCR1、CXCR2、GRK5的mRNA水平,western blot检测CXCR1、CXCR2蛋白表达水平,ELISA法检测血浆IL-8的含量,连续监测法测定血清碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)含量,并对各指标进行相关性分析。结果 PBC组血浆中IL-8浓度[(73.43±13.24)pg/mL]明显高于对照组[(34.76±10.12)pg/mL](P<0.01)。PBC组IL-8、CXCR1、CXCR2、GRK5的mRNA相对表达水平[M(P25,P75)]为2.17(0.96,2.84)、1.71(0.97,3.26)、1.64(0.95,2.56)、1.86(1.34,2.30),高于对照组的0.99(0.48,1.35)、0.99(0.39,1.24)、1.06(0.56,1.32)、0.99(0.53,1.28),差异有统计学意义(P均<0.05)。western blot结果提示,CXCR1、CXCR2的蛋白质水平也较对照组升高。PBC组血清ALP活性为128.0(99.5,164.5)IU/mL,对照组为51.0(42.3,62.0)IU/mL,P<0.01;PBC组GGT活性为85.0(43.5,138.0)IU/mL,对照组为14.0(12.0,16.8)IU/mL,P<0.01。PBMC中IL-8 mRNA表达水平与CXCR1存在正相关,相关系数(r)=0.420,P<0.05;CXCR1与CXCR2呈正相关(r=0.441,P<0.05);CXCR2与GRK5呈正相关(r=0.515,P<0.01);血清ALP与GGT呈正相关(r=0.702,P<0.01),其他指标之间无相关关系。结论 PBC患者外周血IL-8及其受体水平升高,推测IL-8及其受体信号转导过程可能在PBC的发病过程中起重要作用,为PBC的免疫干预治疗途径提供新的方向,但其与PBC的严重程度并无明显相关关系。

IL-8及其受体在大肠癌细胞中的表达、功能及相互作用

IL-8在人体正常细胞中不表达,但在许多恶性肿瘤细胞中高表达,其中包含大肠癌。IL-8与细胞表面G-蛋白偶联受体(CXCR1/CXCR2)结合,促进肿瘤细胞生长、血管形成和转移,通过丝氨酸-苏氨酸激酶激活,蛋白酪氨酸激酶(PTK)活化,Rho-鸟苷三磷酸酶(Rho-GTPases)活化等特异信号传导途径成为肿瘤微环境重要调节因子。IL-8受体使表皮生长因子受体(EGFR)配体脱落,激活EGFR参与CXCR1和CXCR2活化过程,正调节IL-8产物,诱导IL-8的表达,并发出促细胞生长信号,促进肿瘤生长、血管生成等。本文对IL-8和IL-8受体CXC1/2在大肠癌的高表达以及对肿瘤生物学的影响进行综述。

IL-8及其受体药物与疾病的研究进展

白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8),又称趋化因子CXCL8(CXCL8),是一种炎性趋化性因子。IL-8通过受体CXCR1和CXCR2产生多种生物学功能,包括促炎性细胞趋化、促血管生成、促有丝分裂和诱导细胞增殖等。研究发现IL-8与多种疾病尤其是肿瘤的发生发展关系密切,特异性地阻断IL-8及其受体CXCR1/2有望成为多种疾病的潜在治疗策略。

IL-8受体拮抗剂G31P拮抗小鼠旋毛虫感染的实验研究

目的通过检测感染旋毛虫的小鼠膈肌中IL-8受体CXCR1/2的表达以及肌肉组织纤维化程度,探讨G31P对旋毛虫囊包形成的影响以及防治效果。方法 30只雌性BALB/c小鼠随机分成三组:阳性模型对照组(n=12,皮下注射生理盐水),G31P治疗组(n=12,皮下注射G31P)和阴性正常对照组(n=6,皮下注射生理盐水)。阳性模型对照组与G31P治疗组小鼠应用口饲法感染旋毛虫囊包,(100±5)个/只,于感染后第10天皮下注射G31P(500μg/kg),1次/2d,连续14d,阳性对照组和阴性对照组分别皮下注射等量生理盐水。感染24d后无菌解剖小鼠,收取膈肌组织,用于HE染色和免疫组化分析。结果与阳性模型对照组相比,G31P治疗组旋毛虫囊包数量明显减少(P<0.01),而且囊包大多形成不完整、纤维化程度轻。炎症因子受体CXCR1和CXCR2的表达均显著低于模型组(P<0.01)。结论 G31P具有下调膈肌组织中炎症因子IL-8受体CXCR1和CXCR2表达的作用,从而拮抗旋毛虫囊包纤维化的形成,并对旋毛虫幼虫虫体结构的完整性产生一定的影响。