TNF-α通过CXCL10/CXCR3信号通路促进结肠癌细胞上皮间质化的相关分子机制

目的 探讨TNF-α通过调控结肠癌SW480细胞CXCL10/CXCR3轴的表达影响上皮间质化(EMT)及其分子机制。方法 培养人结肠癌SW480细胞,分别通过TNF-α、siRNA-CXCR3处理细胞,将细胞分为对照组(NC组)、TNF-α刺激组(TNF-α组)及TNF-α刺激+siRNA-CXCR3沉默组(TNF-α+si-CXCR3组)。通过Real-time PCR检测各组细胞CXCL10、CXCR3及上皮间质化相关基因的mRNA表达量;Western Blot检测各组细胞CXCL10/CXCR3通路蛋白及上皮间质化相关蛋白表达量的影响;免疫组化检测细胞中上EMT上皮标志物上皮细胞钙粘蛋白(E-cad)与EMT间质标志物波形蛋白(Vimentin)的变化情况;划痕实验检测各组细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果 TNF-ɑ组细胞中通路基因CXCL10、CXCR3的m RNA水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞中CXCR3水平低于TNF-α组,差异有统计学意义(P<0.05);TNF-ɑ组细胞中CXCL10、CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量高于NC组,E-cad的蛋白表达量低于NC组,差异有统计学意义;TNF-α+si-CXCR3组细胞CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量低于TNF-ɑ组,E-cad的蛋白水平高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组中Vimentin的表达量高于NC组,E-cad的表达量低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+siCXCR3组中Vimentin的表达量低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05),E-cad的表达量高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组迁移能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞迁移能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-ɑ组细胞的侵袭能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞侵袭能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α能够诱导结肠癌SW480细胞发生上皮间质化,并促进其迁移、侵袭水平,这一过程可能与激活CXCL10/CXCR3信号通路有关。

CXCR3在宫颈癌组织中的表达及意义

探讨趋化因子受体-3(CXCR3)在宫颈癌组织中的表达及其相应的临床意义。方法 选取广东省农垦中心医院2020年6月31日-2021年12月31日96例宫颈癌患者的蜡块标本为实验组,另取30例因子宫良性肿瘤切下的患者正常子宫颈组织标本为对照组,用免疫组织化学染色法检测两组宫颈组织中CXCR3蛋白的表达情况,比较其在组织中的表达差异。用Cox回归分析与宫颈癌患者的疾病发展情况的有关因素。结果 CXCR3蛋白在癌变的组织中颜色较深,实验组的阳性表达率是57.35%,明显比对照组(8.33%)的高(P<0.05)。CXCR3蛋白在FIGOⅡ期、肿瘤细胞呈现低分化、肿瘤细胞已经向淋巴结扩散转移的癌组织中阳性表达率更高,此类患者的1年生存率显著降低(P<0.05);DXDR3阳性患者1年生存率为55.56%,明显比阴性表达患者(80.95%)的低(P<0.05);FIGOⅡ期、肿瘤细胞低分化、有淋巴结转移、CXCR3阳性被证实是宫颈癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论 CXCR3在宫颈癌患者中的表达水平与宫颈癌的发生、发展及预后密切相关,可作为临床宫颈癌监测和治疗的参考指标。

CXCL10/CXCR3轴在急性呼吸窘迫综合征中的作用

CXC趋化因子配体10(CXCL10)/CXC趋化因子受体3(CXCR3)信号轴是介导Th1型免疫反应的重要通路,通过放大炎性风暴广泛参与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的发生发展,同时促进血管内皮凋亡、抑制修复可增加肺血管血栓形成的可能,此外也因可调节细胞迁移、限制细胞外基质沉积发挥抗肺纤维化的保护作用。本文系统讨论了CXCL10/CXCR3信号轴在ARDS发生发展作用中的不同调节机制,为ARDS的诊治提供新思考和潜在可能性。

雷公藤多苷对高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡及CXCL10/CXCR3轴的影响

目的 探讨雷公藤多苷(TG)对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2凋亡及CXC趋化因子配体10(CXCL10)/CXC趋化因子受体3(CXCR3)轴的影响。方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并分为对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖培养基)、高糖组(含25 mmol/L葡萄糖培养基)和12.5、25、50 mg/L TG组(分别用12.5、25、50 mg/L的TG和25 mmol/L葡萄糖培养基)。四甲基偶氮唑盐比色法检测HK-2细胞活力;流式细胞术检测HK-2细胞凋亡情况;2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯法检测HK-2细胞活性氧(ROS)水平;黄嘌呤氧化酶法检测HK-2细胞超氧化物歧化酶(SOD)水平;酶联免疫吸附试验检测HK-2细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;蛋白免疫印迹法检测HK-2细胞凋亡蛋白[胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9]以及CXCL10、CXCR3蛋白表达。结果 与对照组比较,高糖组HK-2细胞活力、SOD水平显著降低,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达升高(P<0.05);与高糖组比较,12.5、25、50 mg/L TG组HK-2细胞活力、SOD水平升高,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达降低,且高剂量效果更好(P<0.05)。结论 TG可抑制高糖诱导的HK-2细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,其机制可能与抑制CXCL10/CXCR3轴有关。

CXCR3A参与甲状腺乳头状癌发生发展机制的研究

目的:研究CXCR3A对于甲状腺乳头状癌(PTC)发生发展中的意义。方法:选取2020年5月—2021年5月在黑龙江省医院通过手术切除治疗PTC的患者,采用免疫组化测定并比较CXCR3A、CXCL10在PTC和癌旁正常组织中表达,明确PTC组织中CXCR3A及CXCL10表达水平和PTC患者的临床特点的关系,探讨CXCR3A与CXCL10的相关性。结果:CXCR3A在PTC组织的表达水平较在癌旁正常组织中高,差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL10在PTC组织的表达水平较在癌旁正常组织中高,差异有统计学意义(P<0.05)。CXCR3A和CXCL10在PTC组织中的表达率高低与肿瘤的TNM分期、是否存在淋巴结转移密切相关(χ^(2)=6.634、20.514、8.772、16.869,P<0.05)。CXCR3A在PTC组织的表达与CXCL10在PTC组织的表达呈正相关(r=0.561,P<0.05)。结论:PTC组织中CXCR3A及CXCL10表达增加,并且呈现正相关,CXCR3A与CXCL10的相互作用促进甲状腺乳头状癌的发生发展。

基于mTOR/S6K1通路探究CXCR3对糖尿病肾病足细胞损伤、凋亡、自噬的影响

目的 探究趋化因子受体(CXCR)3对糖尿病肾病足细胞损伤、凋亡、自噬的影响及其作用机制。方法 将分化成熟的小鼠肾脏足细胞MPC-5分为对照组,模型组,si-NC组和si-CXCR3组,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞24 h、48 h和72 h细胞活力,流式细胞法检测各组细胞凋亡水平,Western印迹检测细胞凋亡关键蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3表达水平,ELISA法检测各组细胞白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8,肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,qPCR及Western印迹检测各组细胞自噬相关蛋白(beclin)1、人自噬相关蛋白(ATG)5及ATG7表达水平,同时检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/蛋白核糖体S6蛋白激酶(mTOR/S6K1)信号通路关键蛋白的蛋白表达水平及其磷酸化修饰水平。结果 与对照组相比,模型组和si-NC组细胞增殖受到显著抑制,并且随着时间增加抑制能力增强,与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞增殖显著提高(P<0.05);与对照组相比,模型组和si-NC组细胞凋亡均显著增加(P<0.05);与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞凋亡显著降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组和si-NC组细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α释放显著增加(P<0.05);与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α显著降低,但仍高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,模型组和si-NC组细胞自噬相关蛋白Beclin1、ATG5及ATG7表达水平显著降低,而与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组显著升高(P<0.05);与对照组相比,模型组和si-NC组细胞mTOR、S6K1蛋白表达水平显著升高,其磷酸化修饰也相应增加,而与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞mTOR,S6K1蛋白表达水平显著降低,磷酸化修饰也相应降低(P<0.05)。结论 沉默CXCR3可以提高小鼠肾足组细胞活性,降低细胞凋亡,减少炎症因子释放,对肾足细胞具有保护作用,其机制可能通过增强自噬,调控mTOR/S6K1信号通路活性及磷酸化修饰相关。

CXCR3基因敲除小鼠慢性乙型肝炎病毒复制模型的建立

目的建立CXCR3基因敲除小鼠慢性乙型肝炎病毒复制模型。方法繁育CXCR3基因敲除小鼠,并抽提组织DNA进行聚合酶链反应及凝胶电泳鉴定基因型。CXCR3基因敲除小鼠纯合子9只与野生型C57BL/6小鼠9只同时高压水注射pAAV/HBV1.2质粒,按既定时间点采血检测HBsAg、HBeAg、HBV DNA,以及取肝组织行免疫组织化学检测HBcAg表达。结果本实验室繁殖的CXCR3基因敲除小鼠均为纯合子基因型。在pAAV/HBV1.2质粒转染后第1天,CXCR3基因敲除小鼠与野生型C57BL/6小鼠血清HBsAg水平分别为1134.69±244.42和1759.63±881.20(P=0.096);第4天分别为5305.29±1395.06和7493.29±658.63(P=0.003);第15天分别为1615.04±1187.16和1536.19±1046.02(P=0.905);第40天为229.45±79.27和228.19±295.02(P=0.996);第1天血清HBeAg水平分别为6.65±1.50和20.61±4.03(P=0.000);第4天为6.33±1.61和9.79±2.31(P=0.007);第15天为3.52±1.97和2.85±0.74(P=0.425);第40天为1.28±0.06和1.90±1.01(P=0.431);第10天血清HBVDNA水平分别为4.38±0.22 lgcopies/ml和6.56±0.16lgcopies/ml(P=0.008);第15天为4.41±0.88lgcopies/ml和5.69±0.04lgcopies/m(l P=0.177);第25天为4.48±0.04lgcopies/ml和6.44±0.16lgcopies/ml(P=0.004);第40天为3.66±0.45lgcopies/ml和5.20±0.28lgcopies/ml(P=0.055);两组血清HBV DNA持续存在,在转染后第40天仍为阳性。肝组织HBcAg持续阳性,在转染后第4天、15天和40天均呈高表达,但CXCR3基因敲除小鼠肝组织HBcAg表达较低。结论我们成功建立了CXCR3基因敲除小鼠慢性HBV复制模型,可用于进一步研究CXCR3基因及其配体与HBV感染的关系。

趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性

目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11)外周血、脾脏以及胸腺中CD4+T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达。结果自然流产模型组外周血CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05,P<0.01);但三个指标与正常非孕组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组脾脏CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),高于正常非孕组(P<0.05);而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组胸腺CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.05),高于正常非孕组(P<0.01);而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05);CCR5与其他两组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4+T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用。

人CXCR3基因转染细胞株的构建、鉴定及初步功能研究

目的:构建含有人CXCR3基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达人CXCR3分子的基因转染细胞株L929-CXCR3,研究CXCR3与其配体Mig、IP-10及I-TAC相互作用引起的L929-CXCR3的迁移效应。方法:TRIzol一步法从经PHA和IL-2活化的人PBMC中抽提总RNA,RT-PCR扩增人CXCR3全长基因,装入逆转录病毒载体pEGZ-term,与两辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,收集培养上清感染L929细胞,500μg/mlzeocin加压筛选获得稳定表达人CXCR3分子的基因转染细胞株L929-CXCR3。采用流式细胞术和RT-PCR分别从蛋白及基因水平对CXCR3的表达进行鉴定。Transwell分析L929-CXCR3细胞在Mig、IP-10及I-TAC作用下的迁移率。结果:构建了含人CXCR3基因的重组逆转录病毒载体,建立了人CXCR3基因转染细胞株L929-CXCR3,其膜表面CXCR3分子的阳性表达率为98.4%;趋化L929-CXCR3发生迁移的最小配体浓度分别为Mig10ng/ml、IP-105ng/ml及I-TAC1ng/ml,相应迁移率分别为2.46%、2.34%及2.24%。结论:L929-CXCR3细胞株的建立为研究CXCR3信号转导与生物学功能及制备相应的单克隆抗体奠定了基础。

兔抗人CXCR3-B分子N端多肽多克隆抗体的制备与初步应用

目的： 获得兔抗人CXCR3-B分子N端第1～19、第17～35及第33～51个氨基酸多肽的多克隆抗体, 并对多克隆抗体进行初步鉴定和应用.方法： 应用Fmoc法化学合成CXCR3-B分子N端第1～19、第17～35及第33～51个氨基酸多肽, 经C18的RP-HPLC纯化后, 通过高碘酸钠法将纯化的CXCR3-B分子的多肽与KLH交联;皮下注射抗原免疫日本大耳白兔, 加强免疫得到抗血清, 应用蛋白G纯化获得多克隆抗体.对纯化的抗体进行ELISA、免疫印迹、免疫组化等初步鉴定和应用.结果： 分别化学合成CXCR3-B分子N端第1～19、第17～35及第33～51个氨基酸多肽, 纯化后多肽纯度分别为98%、 88.54%及80%, 达到免疫用抗原标准.多肽与KLH交联, 用于免疫动物.经纯化后的抗体效价分别为1∶ 32 000（0.1 mg/L）, 1∶ 4 000（3 mg/L）和1∶ 1 000（10 mg/L）.3种多肽的抗体可特异识别胎心组织中相对分子质量（Mr）约为50的CXCR3-B分子, 相应抗原定位于3种多肽的抗体可特异识别胎心组织中的血管内皮细胞.结论： 所制备的多克隆抗体可应用于ELISA、免疫印迹和免疫组化等实验, 为确定CXCR3-B分子的组织及细胞分布和定位、寻找CXCR3-B相互作用的分子提供了有力的工具.

趋化因子受体CXCR3 mRNA在银屑病患者皮损部位的表达

目的:了解CXCR3 mRNA在银屑病皮损部位的表达水平及其与银屑病区域严重性指数(PASI)的关系。方法:应用RT-PCR法检测了33例银屑病患者皮肤中CXCR3 mRNA的表达水平,设30例健康对照;将检测结果与PASI进行了相关性分析。结果:银屑病皮损部位真皮CXCR3 mRNA表达水平为1.44±0.67,明显高于对照(0.59±0.29,P<0.01)及非皮损部位皮肤(1.00±0.75,P<0.01),但与PASI之间无相关性;银屑病非皮损部位真皮该受体的表达水平也显著高于对照组(P<0.05)。结论:CXCR3参与了银屑病真皮的病理变化。

围绝经期干眼患者眼表CXCR3表达与性激素的相关性分析

目的本文通过分析围绝经期干眼患者和非围绝经期干眼患者血液中雌二醇(E2)、睾酮(T)、促黄体生产素(LH)表达水平的变化及CXCR3在结膜上皮细胞中的阳性表达率,探讨以E2、T、LH为代表的性激素与以CXCR3为代表的趋化因子受体家族的相关性及其在围绝经期干眼发病机制中的作用。方法选择干眼患者60例(120眼),分为围绝经期干眼组30例(60眼)及非围绝经期干眼组30例(60眼),分别进行泪液分泌试验、泪膜破裂时间、角膜荧光素染色检查,采用化学发光免疫法分别测定血清中E2、T、LH水平,采用结膜印迹细胞学的方法获取两组患者的结膜上皮细胞后,应用流式细胞术分析方法检测两组患者结膜上皮细胞中CXCR3的表达,比较两组性激素和CXCR3表达率的差异及CXCR3阳性表达的相关因素。结果围绝经期干眼组泪膜破裂时间为(2.90±1.37)s、基础泪液分泌值为(4.00±2.49)mm,均显著低于非围绝经期干眼组的(4.44±1.94)s和(6.67±2.69)mm(均为P<0.05);两组角膜荧光素染色评分值分别为(0.90±0.57)分和(1.00±1.32)分,组间相比差异无统计学意义(P>0.05)。围绝经期干眼组血清中E2为(28.22±32.34)μg·L-1、T为(13.68±14.12)ng·L-1,相对于非围绝经期干眼组的(40.39±39.51)μg·L-1和(20.84±1.16)ng·L-1均较低;LH水平为(25.47±14.53)mIU·L-1,较非围绝经期干眼组的(18.15±11.40)mIU·L-1高,但2组间3个指标的差异均无统计学意义。围绝经期干眼组CXCR3阳性率为(2.64±0.47)%,显著高于非围绝经期干眼组的(0.62±0.07)%(P<0.01)。CXCR3阳性率与泪膜破裂时间、基础泪液分泌值均呈显著的负相关(分别为r=-0.753、-0.684,均为P<0.05);CXCR3阳性率与E2、T、LH均呈不显著的正相关(分别为r=1.472、0.583、2.331,均为P>0.05)。结论围绝经期干眼患者性激素水平稍紊乱,E2与T降低,LH相对升高,三者与CXCR3阳性率不存在显著相关性。干眼的发病与趋化因子家族介导的炎性细胞浸润有密切关系。

人CXCR3B基因转染细胞株的构建、鉴定及生物学功能研究

目的:克隆人CXCR3B基因,并构建含有该目的基因的真核表达载体,获得稳定表达人CXCR3B分子的基因转染细胞株L929-huCXCR3B。方法:采用PCR方法从pMD19-T/huCXCR3A质粒中扩增人CXCR3B基因,通过双酶切装入真核表达载体pIRES2-EGFP中;脂质体法转染L929细胞,G418加压筛选阳性克隆;分别用RT-PCR方法与免疫荧光技术分析阳性克隆中人CXCR3B在mRNA和蛋白水平的表达。MTT分析基因转染细胞株L929-huCXCR3B在Mig(monokineinduced by IFN-γ,IFN-γ诱导的单核因子)作用下的增殖能力。结果:成功克隆了人CXCR3B基因并构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/huCXCR3B,转染该载体后获得了稳定表达人CXCR3B的基因转染细胞株L929-huCXCR3B,膜表面CX-CR3B分子的阳性表达率为93%。该基因转染细胞与其配体Mig共培养24、48及72 h,抑制率分别为41.44%、44.01%和24.80%。结论:L929-huCXCR3B细胞株的建立为研究CXCR3B信号转导及制备相应的单克隆抗体(mAb)奠定了基础。

趋化因子受体CXCR3在胃癌中的表达

背景近年来,趋化因子及其受体在肿瘤转移中的作用引起了重视,但有关趋化因子受体CXCR3在胃癌中的表达尚无报道。目的检测胃癌组织和细胞系中CXCR3在mRNA和蛋白水平的表达,为进一步研究其在胃癌转移中的作用奠定基础。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测胃癌细胞系CXCR3mRNA的表达,蛋白质印迹法(Westernblotting)检测胃癌组织和细胞系CXCR3蛋白的表达,流式细胞仪检测胃癌细胞系表面CXCR3的表达。结果在所检测的胃癌组织中,CXCR3蛋白的表达量明显高于相应癌旁组织。所检测的胃癌细胞系均有CXCR3mRNA和CXCR3蛋白表达,但仅KATOⅢ细胞表面CXCR3的表达较明显。永生化胃上皮细胞系GES鄄1的CXCR3蛋白表达量明显低于胃癌细胞系。结论胃癌细胞系有CXCR3表达,胃癌组织中CXCR3的表达高于癌旁组织。

小鼠CXCR3基因转染细胞株的构建、鉴定及生物学功能研究

目的：构建含有小鼠CXCR3基因的重组逆转录病毒载体，获得稳定表达小鼠CXCR3分子的基因转染细胞株L929-mCXCR3，研究CXCR3与其配IP-10相互作用引起的L929-mCXCR3的迁移效应。方法：取1只雌性BALB／c小鼠（7周龄），尾静脉注射0．5mgConA／只，12h后取其脾脏，研磨成细胞悬液后，分离获得脾脏细胞；用含5万U／L人IL-2的RPMll640培养基培养3d；收集细胞，TRIzol一步法抽提总RNA，RT—PCR扩增小鼠CXCR3全长基因，装入逆转录病毒载体pEGZ—term，与两辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T，收集含完整逆转录病毒颗粒的293T培养上清感染L929细胞，重复感染3次，筛选获得含Zeocin抗性的稳定表达小鼠CXCR3分子的基因转染细胞株。采用流式细胞术（FCM）和RT—PCR对CXCR3分子的表达进行鉴定。Transwell分析基因转染细胞株L929-mCXCR3在IP．10作用下的迁移能力。结果：构建了含小鼠CXCR3基因的重组逆转录病毒载体，建立了稳定表达小鼠CXCR3分子的基因转染细胞株L929-mCXCR3，其膜表面CXCR3分子阳性表达率为97．0％；该基因转染细胞株在IP-10的介导下可定向迁移，迁移率为4．356％。结论：L929-mCXCR3细胞株为研究CXCR3信号通路的生物学特性、肿瘤转移模型的建立和抗小鼠CXCR3单克隆抗体的研制奠定了基础。

三痹颗粒对CIA模型大鼠血清CXCR3、CXCR4mRNA的影响

观察三痹颗粒对Ⅱ型胶原诱发类风湿关节炎(CIA)模型大鼠病变关节细胞趋化因子受体的影响,探讨其抗炎作用机制。方法:将CIA模型大鼠随机分为模型组、三痹颗粒高剂量组、三痹颗粒中剂量组、三痹颗粒低剂量组、另取空白组。三痹颗粒高、中、低剂量组于初次免疫第15天分别给予三痹颗粒蒸馏水溶液灌胃,模型组和空白对照组灌服同体积的生理盐水,连续灌服20天,观察大鼠足踝关节肿胀度以及关节炎指数的变化,RT-PCR法测定大鼠外周血趋化因子受体3(CXCR3)、趋化因子受体4(CXCR4)mRNA含量。结果:第21天,与空白组比较,模型组及三痹颗粒各组足容积明显增大,差异有统计学意义(P<0.05);第35天时,与模型组比较,三痹颗粒高、中剂量组足容积的上升程度减慢,进一步减轻关节炎症反应程度,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,中药各剂量组大鼠关节炎评分指数明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,三痹颗粒各组大鼠外周血CXCR3mRNA、CXCR4mRNA的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:三痹颗粒能够抑制CIA模型大鼠外周血CXCR3、CXCR4的表达,从而减慢CIA模型大鼠足容积的上升程度,降低关节炎指数,抑制炎症反应。

银屑病患者淋巴细胞与中性粒细胞中趋化因子受体CXCR3 mRNA的表达

目的:了解银屑病患者外周血淋巴细胞与中性粒细胞中CXC型趋化因子受体CXCR3 mRNA的表达水平及其与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)之间的关系.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测进行期斑块型银屑病患者33例及其中16例患者治疗后外周血淋巴细胞及中性粒细胞中CXCR3 mRNA的表达水平,设30例健康人作为正常对照,并将检测结果与PASI进行了相关性分析.结果:斑块型银屑病患者外周血淋巴细胞中CXCR3 mRNA表达水平为1.12±0.81,明显高于健康对照组(0.28±0.28,P<0.01)与治疗后患者(0.57±0.61,P<0.05),并与PASI之间呈明显正相关(r=0.516,P<0.05);而中性粒细胞中CXCR3 mRNA表达水平为1.72±1.68,与健康对照组(1.27±1.17)及同一组患者治疗后(1.27±1.01)相比均无明显差异(P>0.05).结论:CXCR3可能主要通过活化与趋化外周血淋巴细胞而参与了银屑病的发病机制.

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞上CXCR3表达的初步观察

目的 :探讨趋化性细胞因子受体CXCR3在慢性乙型肝炎症发生机制中的作用。方法 :采用流式细胞术 ,检测炎症活动程度不同患者外周血淋巴细胞表面CXCR3的表达 ,及其在CD4 + 和CD8+ T细胞上的分布。结果 :慢性乙肝患者外周血CXCR3+ 淋巴细胞和单核细胞明显增多 ,以CXCR3+ CD8+ T细胞的增加更明显。结论 :趋化因子受体CXCR3与其配体的相互作用 。

细胞因子受体CXCR3过表达对胃癌患者预后的研究

目的探讨细胞因子受体CXCR3过表达对胃癌患者预后的临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测96例胃癌患者肿瘤组织及临近非肿瘤组织的CXCR3及其变体形式表达情况,通过qRT-PCR方法检测40例新鲜胃癌标本及临近非肿瘤组织CXCR3mRNA水平,采用Western blotting检测10例胃癌组织及临近非肿瘤组织CXCR3蛋白表达情况。结果与临近非肿瘤组织比较,肿瘤组织CXCR3表达均上升,且CXCR3过表达与肿瘤侵袭(P=0.030)和迁移率(P=0.019)呈负相关,与患者总生存率(P=0.001)改善呈正相关。多变量统计分析结果显示CXCR3是胃癌患者疾病预后的独立因素[HR=0.379(0.196~0.734);P=0.004]。CXCR3 2种变体CXCR3-A和CXCR3-B在胃癌组织表达中均显著上升(P=0.006,0.002),其中CXCR3-B mRNA水平显著高于CXCR3-A,CXCR3-B/CXCR3-A平均比例为1.80。结论 CXCR3表达检测对胃癌患者疾病预后的具有临床价值,且CXCR3-B表达上升提示患者疾病预后良好。