华法林相关基因CYP2C9、VKORC1、CYP4F2的多态性分布

目的研究CYP2C9、VKORC1、CYP4F2基因多态性在陕西省宝鸡地区汉族人群中的分布情况,为华法林个体化用药提供遗传依据。方法选取2022年1月至2023年5月在宝鸡市中医医院心内科接受华法林治疗并进行相关基因检测的住院患者475例,采用飞行时间质谱仪对华法林药物相关基因CYP2C9、VKORC1、CYP4F2分别进行检测,然后对检测结果的基因多态性进行分析。结果华法林药物相关各基因分布频率符合Hardy-Weinberg equilibrium规律,475例患者VKORC1基因型分别是AA型、AG型、GG型,基因频率分别为83.79%,15.58%,0.63%;CYP2C9基因型分别是*1/*1型、*1/*3型、*1/*2型,基因频率分别为95.17%,4.74%,0.11%,未检出*2/*2、*2/*3、*3/*3基因型;CYP4F2基因型分别是*1/*1型、*1/*3型、*3/*3型,基因频率分别为52.40%,39.37%,8.21%。各基因型分布在患者不同性别、年龄之间无统计学差异。结论陕西宝鸡地区汉族人群华法林药物基因VKORC1(c.-1639G>A)以变异型为主,包括纯合变异和杂合变异,而CYP2C9(*1、*2、*3)和CYP4F2(*1,*3)以野生型为主。

CYP4F2和CYP24A1基因多态性与肺结核并糖尿病的相关性

目的:探讨CYP4F2和CYP24A1基因单核苷酸多态性(SNP)与肺结核并糖尿病的关系。方法:选取230例肺结核并糖尿病患者作为肺结核并糖尿病(Case)组,同期212例体检健康者作为对照(Control)组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测CYP4F2和CYP24A基因多态性,采用Logistic回归分析两组间各SNP位点等位基因频率和基因型频率的分布差异,并按不同遗传模型对rs1570669位点基因型分布进行分析。结果:CYP4F2 rs2108622和rs3093106位点、CYP24A1 rs2296241位点的基因型和等位基因频率在Case组和Control组中无均统计学差异。CYP24A1 rs2762934位点AG基因型频率Case组高于Control组,GG和AA基因型频率Case组低于Control组,组间差异具有统计学意义。rs2762934位点A等位基因的频率Case组高于Control组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:CYP4F2 rs2108622和rs3093106位点、CYP24A1 rs2296241位点与肺结核并糖尿病均不相关。CYP24A1位点多态性与肺结核并糖尿病相关,基因型杂合子个体比纯合子个体发生肺结核并糖尿病的风险高,A等位基因可能增加患病风险。

CYP4F2基因调控区G421C与原发性高血压的相关分析及鉴定

目的 探讨高血压候选基因CYP4F2基因调控区G421C多态位点与原发性高血压的相关性及其作用机制.方法 采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态方法检测196例高血压患者和219名正常对照者的G421C位点等位基因和基因型频率,报告基因检测CYP4F2基因G421C的启动子活性,凝胶阻滞实验鉴定G421C多态所在的Myb反应元件.结果 G421C位点的基因型和等位基因频率在原发性高血压和正常对照者间差异具有显著性（P＜0.05）,携带GG纯合子基因型的个体患病风险增高（OR=1.87,95%CI 1.11～3.13,P＜0.05）;421G等位基因启动子活性明显低于421C启动子（P＜0.05）;421G位点位于Myb反应元件中,而421C位点破坏了该基序.结论CYP4F2基因调控区的G421C多态与原发性高血压发生相关,421G等位基因通过与Myb反应元件结合抑制该基因的转录.

老年患者CYP4F2(rs2108622)基因多态性对华法林剂量的影响

目的：观察 CYP4F2（rs2108622）基因多态性对房颤老年患者（65～75岁）口服华法林剂量的影响。方法选择60例老年房颤患者，服用华法林后国际标准化比值（INR）维持在1．6～2．5之间3个月后，用 PCR 检测 CYP4F2（rs2108622）基因序列。结果具有 CYP4F2（rs2108622）C/C 等位基因的患者服用华法林的剂量明显低于具有 C/T 和 T/T 变异体等位基因的患者（P ＜0．05）。结论CYP4F2（rs2108622）基因的多态性影响老年患者口服华法林的剂量。

CYP4F2基因单核苷酸多态性与日本高血压的相关性研究

目的:研究在不同性别中,CYP4F2基因单核苷酸多态性与日本高血压的关系。方法:249例日本原发性高血压患者和207例年龄匹配的对照(日本人)分别分为整体组、男性组、女性组。选择CYPF2基因的5个SNPs(rs3093105、rs3093135、rs1558139、rs2108622、rs3093200),应用TaqManSNP基因分型的方法进行基因分型,分析CYP4F2基因单核苷酸多态性与高血压的相关性。结果:高血压患者和对照相比较,rs1558139基因型的显性模式分布(CCversusCT+TT)在整体组和男性组中显著不同(P=0.037,P=0.005),高血压患者的CC基因型频率显著高于对照的CC基因型频率。Logistic回归分析显示,在剔除高血压主要危险因素的干扰后,男性组rs1558139的CC基因型分布在高血压患者和对照之间仍然保持差异(P=0.026),而整体组高血压患者和对照之间CC基因型分布的差异消失(P=0.247)。对于男性,高血压组的C等位基因频率显著高于对照组(P=0.025)。结论:CYP4F2基因rs1558139的CC基因型和C等位基因可做为日本男性高血压的基因标记。

中国北方汉族人群CYP4F2基因rs2108622多态性与原发性高血压的相关性研究

目的:探讨我国北方汉族人群CYP4F2基因单核苷酸多态性位点rs2108622与原发性高血压的相关性。方法:采用病例-对照研究的方法,选取在北京安贞医院就诊的北方汉族原发性高血压者765例(HT组)和同期健康体检血压正常者477例(NT组)。应用TaqMan荧光定量法对CYP4F2基因rs2108622进行基因分型,评估该多态性位点与我国北方汉族人群原发性高血压发病风险的关系。结果:rs2108622位点在HT组和NT组的基因型分别为AA型61/35、AG型296/162、GG型403/273;A等位基因频率分别为27.5%/24.7%,G等位基因频率分别72.5%/75.3%。两组间基因型和等位基因频率分布,差异均无统计学意义(分别为P=0.218,P=0.123)。多因素Logistic回归分析显示:等位基因模型(OR=1.147,95%CI=0.853!1.543)、显性模型(OR=0.788,95%CI=0.549!1.131)、隐性模型(OR=1.153,95%CI=0.549!2.422)、纯合子模型(OR=1.018,95%CI=0.48!2.157)、加性模型(OR=0.872,95%CI=0.649!1.172)均未发现该多态性位点与原发性高血压存在相关性。根据性别进行亚组分析显示:男性亚组中A等位基因频率在HT组(27.5%)高于NT组(23.7%),但差异无统计学意义(P=0.096)。而在女性亚组中各基因型和等位基因频率分布两组间比较,亦均差异无统计学意义(P=0.579和P=0.677)。结论:本研究发现CYP4F2基因rs2108622多态性位点可能与中国北方汉族人群原发性高血压的发病不存在相关性。

CYP4F2基因多态性与云南汉族人群冠心病的相关性研究

目的:研究CYP4F2基因多态性与中国云南汉族人群冠心病(CHD)的相关性。方法:采用Sequenom Mass ARRAY对云南汉族人群198名正常人(对照组)和514例CHD病人(CHD组)CYP4F2基因rs2108622、rs3093135两个单核苷酸多肽位点的多态性进行基因分型,分析该基因多态性与CHD的相关性。结果:对照组和CHD组两个等位基因频率分布差异有统计学意义(P<0.01);校正年龄、性别、体质量指数等因素后logistic回归分析显示rs2108622位点携带T等位基因者患CHD的风险降低(P<0.05);rs3093135位点携带A等位基因者患CHD风险降低(P<0.05)。结论:CYP4F2基因多态性与云南汉族人群CHD发生风险相关。

CYP4F2基因单核苷酸多态与缺血性脑卒中的相关性

目的 探讨CYP4F2基因多态与中国北方汉族人群缺血性脑卒中的相关性。方法采用病例-对照研究，检测CYF4F2基因rs2108622、rs3093100、rs3093105、rs3093135、rs1558139位点，以及该基因rs2108622-rs3093100-rs3093105-rs3093135构成的单倍型在对照组、IS组及不同性别组中的多态分布。结果CYP4F2基因rs2108622位点GG基因型可能是男性缺血性脑卒中患者的独立的风险因素（P=0.018，OR=2.53，95％CI1.15～5.56），且其风险性主要来源于G等位基因（P=0.013,OR=1.48，95％CI1.09～2.02）。rs2108622-rs3093100．rs3093105-rs3093135构成的GGGT单倍型与男性缺血性脑卒中具有相关性，GGGT单倍型可能是Is的危险单倍型（OR=1.545，95％CI1.144～2.087，P=0.004）。结论CYP4F2基因的多态与男性IS具有相关性，可显著增加男性IS的患病风险。

CYP4F2基因单核苷酸多态性与日本心肌梗死的相关性研究

目的:研究在日本不同性别中,CYP4F2基因单核苷酸多态性与心肌梗死的关系。方法:234例心肌梗死患者和248例年龄匹配的对照分别分为整体组,男性组,女性组。选择CYPF2基因的5个SNPs(rs3093105、rs3093135、rs1558139、rs2108622、rs3093200),应用TaqMan SNP基因分型的方法进行基因分型,并应用病例对照分析的方法进行相关性研究。结果:对于男性,心肌梗死患者rs2108622的G等位基因频率远远高于对照(P=0.001)。结论:CYP4F2基因rs2108622的G等位基因与日本男性心肌梗死相关,可做为日本男性心肌梗死的易感基因标记。

维生素K代谢相关基因CYP4F2参与凝血因子FⅨ活化的研究

目的探索维生素K代谢相关基因CYP4F2对维生素K依赖性凝血因子活化(凝血因子FⅨ为例)的影响。方法构建同时含有CYP4F2-cDNA片段与FⅨ-cDNA片段的pIRES质粒,通过酶切验证。使用Lipofectamine 2000转染试剂,将构建成功的pIRES-FⅨ-CYP4F2质粒以及pIRES-FⅨ质粒、pIRES空白对照质粒瞬时转染LO2细胞。在不同质粒转染的细胞中,通过Western blotting验证CYP4F2和FⅨ蛋白的表达,应用FⅨa Assay检测试剂盒检测FⅨa活性。结果经酶切证实,pIRES-FⅨ-CYP4F2质粒构建成功。Western blotting证实,pIRES-FⅨ及pIRES-FⅨ-CYP4F2质粒成功转染LO2细胞。FⅨa Assay检测发现,在过表达FⅨ的LO2细胞培养上清和细胞裂解液中,FⅨa活性较对照组显著升高;当同时过表达CYP4F2和FⅨ后,LO2细胞培养上清和细胞裂解液中的FⅨa活性较单独过表达FⅨ组明显降低。结论维生素K代谢相关基因CYP4F2的过表达对维生素K依赖性FⅨ的活化具有抑制作用。

中原地区汉族和回族中国人群CYP2C9~* 3、VKORC1-1639G>A和CYP4F2~* 3的遗传多态性

目的探讨参与华法林药物反应的功能性变异体CYP2C9~*3、VKORC1-1639G>A和CYP4F2~*3在中原地区汉族和回族中国人群的遗传多态性。方法提取285例无血缘关系的健康中国志愿者(包括175例汉族和110例回族)外周血DNA进行基因型分析。CYP2C9~*3和VKORC1-1639G>A的基因型频率通过多聚酶链反应-限制性片段长度多态性的方法检测,而CYP4F2~*3的基因型通过多聚酶链反应-Sanger测序的方法检测。将中原地区汉族和回族CYP2C9~*3、VKORC1-1639G>A和CYP4F2~*3的等位基因频率与文献已报道的高加索人和非洲人频率进行比较。结果汉族和回族的CYP2C9~*3等位基因频率分别为3.7%和5.5%。回族CYP2C9~*3等位基因频率显著高于已报道的非裔美国人频率(2.0%,P<0.05)。汉族和回族VKORC1-1639A等位基因频率分别为90.3%和87.3%。汉族和回族VKORC1-1639A等位基因频率都显著高于已报道的非裔美国人频率(10.8%,P<0.05)和高加索人频率(40.6%,P<0.05)。汉族和回族CYP4F2~*3等位基因频率分别为26.3%和22.3%。汉族和回族CYP4F2~*3等位基因频率都显著高于已报道的非裔美国人频率(11.7%,P<0.05),但显著低于已报道的高加索人频率(34.2%,P<0.05)。结论中原地区汉族和回族中国人群具有相似的CYP2C9~*3、VKORC1-1639G>A和CYP4F2~*3的遗传多态性频率,但与文献已报道的非洲人和高加索人频率存在显著差异。

CYP4F2基因多态性与原发性高血压易感性的相关性研究

目的 探讨浙江地区不同性别汉族人群中CYP4F2基因多态性与原发性高血压易感性的相关性.方法 以690例原发性高血压患者（观察组）和656例非高血压患者（对照组）为研究对象,运用TaqMan荧光定量法对CYP4F2（rs1558139、rs2108622）进行基因分型,应用非条件logistic回归和多因子降维法软件按性别分析CYP4F2基因多态性与高血压的相关性.结果 两组间无论男女,其年龄、BMI、总胆固醇、甘油三酯的差异均有统计学意义（均P＜0.01）,而且两组间男性饮酒和体力活动分布的差异有统计学意义（P＜0.05）.仅在女性对象中,观察组rs2108622的A等位基因的分布频率明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.男性中rs1558139 CC基因型进入最终模型（P＜0.05）;女性中rs2108622 AA＋AG基因型进入最终模型,但差异无统计学意义（P ＞0.05）.MDR分析未见CYP4F2基因多态与环境暴露之间存在交互作用.结论 CYP4F2 rs1558139 CC基因型可增加男性患高血压的风险.

CYP4F2基因多态性与冠心病的相关性

目的研究CYP4F2基因多态性与冠心病(CAD)的相关性。方法对285例汉族CAD患者(冠心病组)和264例非CAD患者(对照组)进行问卷调查,采用高温连接酶检测反应技术进行基因扩增和基因分型,分析CYP4F2基因的2个单核苷酸多态性位点rs1558139和rs2108622多态性与CAD的相关性。结果 CAD组吸烟史和体重指数(BMI)均显著高于对照组(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)CAD组显著低于对照组(P=0.000),CAD组男性患者比例明显高于女性(P=0.001);CAD组CYP4F2基因rs1558139的基因型频率和等位基因频率与对照组无显著差异(P>0.05),rs2108622的CC基因型频率在CAD组和对照组间差异显著(P<0.05)。结论 CAD患者的危险因素是男性、有吸烟史、高BMI;CYP4F2基因rs1558139多态性与CAD无明显相关性,CYP4F2基因rs2108622多态性与CAD相关,携带CC基因型的患者发生CAD的风险增加。

CYP4F2真核荧光表达载体的构建及其对HK2细胞ACE表达水平的影响

旨在构建重组CYP4F2基因真核绿色荧光蛋白表达载体pAcGFP-CYP4F2,并转染到人肾近曲小管上皮细胞HK2中表达,为研究CYP4F2在真核细胞中的功能提供一个有效的载体;对CYP4F2过表达对HK2细胞中血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)表达的影响进行初步研究。从肝癌细胞HepG2中提取总RNA,反转录成cDNA模板,通过PCR扩增出CYP4F2目的片段,纯化后经限制性内切酶酶切,T4连接酶连接到pAcGFP1-C1载体上,转化E.coliDH5α宿主菌,获得阳性克隆;通过PCR扩增、双酶切鉴定和测序分析,确认重组质粒完整正确;抽提重组质粒,转染HK2细胞株,荧光显微镜观察荧光蛋白表达,RT-qPCR和Western blot检测CYP4F2在细胞中mRNA表达。RT-qPCR检测ACE的表达。结果显示,CYP4F2基因目的片段成功重组,获得的重组质粒,保持了目的片段的特异性和序列完整性。荧光显微镜可观察到细胞内GFP的表达;RT-qPCR和Western blot证实CYP4F2基因在转染的细胞内表达增高。RT-qPCR结果显示,转染重组质粒后细胞ACE表达有所增高。成功构建了真核绿色荧光蛋白表达载体pAcGFP-CYP4F2,CYP4F2过表达会提高HK2细胞ACE的mRNA水平。

CYP4F2基因多态性影响华法林初始治疗效果的临床研究

目的研究心脏瓣膜置换术后口服华法林抗凝治疗的初始剂量的个体化区别,分析CYP4F2 rs2108622基因型对口服华法林初始剂量的影响。方法入选广东省心血管病研究所2000年至2008年瓣膜置换术后口服华法林抗凝治疗的患者,回顾患者一般资料、临床资料、用药剂量、国际标准化比值(international normalizedratio,INR)和进入治疗窗时间(INR≥1.8)、超出治疗窗时间(INR>3.5)。结果本次研究共有769例患者资料齐全,民族均为中国汉族,其中CYP4F2基因型为CC型的患者占65.8%(n=506),CT型28.7%(n=221),TT型5.5%(n=42)。按基因型不同分别分析进入治疗窗(INR>1.8)和过度抗凝(INR>3.5)的时间发现,不同基因型之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CYP4F2基因型多态性对于口服华法林初始剂量存在一定的影响。

LNA-taqman探针实时荧光PCR快速检测CYP4F2-C1347T,CYP2C9*3,VKORC1-C1173T与VKORC1-G1639A基因多态性方法的建立

目的建立一种基于LNA-taqman探针实时荧光PCR检测华法林剂量相关基因型维生素K单氧酶CYP4F2,维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)和细胞色素P4502C9(CYP2C9)的方法。方法针对CYP4F2-1347C>T,CYP2C9*3,VKORC1-1173C>T与VKORC1-1639G>A四个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别设计一套等位基因特异性探针与引物,并对LNA-taqman探针特异性进行评价。提取150例接受华法林治疗患者外周血样本基因组DNA进行检测,同时对部分实时荧光PCR产物样品进行验证。结果 (1)LNA-taqman探针检测方法特异性高,没有交叉性。(2)150例患者中,CYP4F2-1347C>T基因型CC,CT和TT分别有87,56和7例,各占58%,37.3%和4.7%;CYP2C9*3基因型*1/*1和*1/*3分别有142和8例,各占94.7%和5.3%,未检出纯合子*3/*3基因型;VKORC1-1173C>T基因型TT,TC和CC分别有127,20和3例,各占84.7%,13.3%和2%;VKORC1-1639G>A基因型AA,AG和GG分别有124,23和3例,各占82.7%,15.3%和2%。结论基于LNA-taqman探针的实时荧光PCR分型方法具有操作简便,价格低廉,结果准确可靠等特点,适于临床实验室对CYP4F2,CYP2C9*3,VKORC1的基因分型。

CYP4F2 polymorphism as a genetic risk factor for major hemorrhagic complications in Chinese patients on warfarin therapy

Warfarin is a commonly used anticoagulant with a narrow therapeutic range and risk of hemorrhagic complications. After CYP2C9 and VKORC1, CYP4F2 was confirmed as the third principle genetic determinant of warfarin dose variability.

药物基因CYP4F2和CYP3A4在中国汉族人群中的分布

目的:探讨中国汉族人群中药物基因CYP4F2和CYP3A4基因多态性的分布情况。方法:收集2015年5月至2016年5月在广州市妇女儿童医疗中心就诊的汉族儿童1 311例为研究对象,其中男855例、女456例,包括川崎病694例、非川崎病617例。收集外周静脉血进行CYP4F2 rs2108622、CYP3A4rs2242480基因PCR扩增和序列分析。采用Hardy-Weinberg平衡进行总体样本的等位基因分布频率检测。分析性别与上述基因的基因型分布的关系;按疾病类型进行分组,分析疾病类型与上述基因的基因型和等位基因分布的关系。结果:纳入本研究的汉族儿童1 311例,基因检测显示CYP4F2 rs2108622的CC、CT、TT基因型频率分别为59.57%(n=781)、35.39%(n=464)和5.04%(n=66),其中最小T等位基因频率为22.7%; CYP3A4 rs2242480的CC、CT、TT基因型频率分别为51.26%(n=672)、40.43%(n=530)和8.31%(n=109),其中最小T等位基因频率为28. 5%。。按性别分组,上述基因的基因型分布组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。按疾病类型分为川崎病组(n=694)和对照组(n=617),川崎病组与对照组CYP3A4 rs2242480基因型分布差异有统计学意义(P<0.05),而等位基因分布差异无统计学意义(P>0.05);川崎病组与对照组CYP4F2 rs2108622基因型及等位基因分布差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:中国汉族儿童华法林药物基因CYP4F2 rs2108622以野生型为主,而CYP3A4 rs2242480以变异型为主,包括纯合变异和杂合变异。

湖北恩施地区土家族人群CYP4F2基因多态性及血清硒含量与冠状动脉疾病的相关性

目的:探讨湖北恩施地区土家族人群C YP4F2基因多态性与冠状动脉疾病(coronar yar ter y disease,CAD)易感性的关系,以及血清硒水平与CYP4F2基因多态性在CAD发生中的交互作用。方法:采用成组病例-对照研究方法,选择湖北恩施地区土家族人群CAD患者100例,对照组人群100例,采用PCR检测CYP4F2基因多态性,氢化物发生原子荧光光谱法测定血清硒水平。结果:CAD组血清硒水平显著低于对照组;CYP4F2基因rs1558139与CAD风险无明显关系;r s 2 1 0 8 6 2 2多态性与C A D风险有明显关系,携带C C基因型的患者发生C A D的风险增加,此外CYP4F2基因rs1558135多态性与CAD风险有明显关系,rs3093135位点携带A等位基因者患CAD风险降低。血清硒水平低与CYP4F2 rs2108622 CC基因型者在CAD发生中有正交互作用。结论:湖北恩施土家族人群血清硒水平与CAD发生负相关;血清硒水平低与CYP4F2 rs2108622 CC基因型者之间存在协同作用,使CAD发生的危险性显著增加。

CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林使用剂量的影响

目的:探讨CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林使用剂量的影响。方法:采用PCRRFLP法检测157例口服华法林抗凝治疗房颤患者CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性,登记并计算患者INR稳定在1.5~3.0时一周的平均日剂量。比较不同基因型房颤患者华法林日用量的差异。结果:INR稳定在1.5~3.0时,CYP2C9*1/*1个体使用华法林剂量[(2.73±0.80)mg·d^(-1)]显著高于*1/*3使用量[(1.83±0.51)mg·d^(-1)];VKORC1TT基因型携带者使用剂量[(2.56±0.79)mg·d^(-1)]显著低于CT基因携带者使用量[(3.31±0.75)mg·d^(-1)];CYP4F2 CC基因型使用剂量[(2.58±0.78)mg·d^(-1)]显著低于TT基因携带者使用量[(3.21±1.04)mg·d^(-1)];GGCX CC基因型使用剂量[(2.49±0.89)mg·d^(-1)]显著低于GG基因型使用量[(3.04±0.75)mg·d^(-1)]。多因素回归分析结果显示CYP2C9、VKORC1和GGCX与个体华法林剂量有关。结论:CYP2C9、VKORC1和GGCX基因多态性可能与个体华法林使用剂量差异有关。