EFFECT OF VERAPAMIL ONCa^（2＋） INFLUX ANDCVB3－RNA REPLICATION IN CULTURED NEONATALRAT HEART CELLS INFECTED WITH CVB3

The effect of verapamil on Ca2+ influx across the myocardial plasma membrane and coxsackie virus B3 ( CVB3)-RNA replication in cultured neonatal rat heart cells infected with CVB3 was investigated. It was found that the Ca2+ influx could be inhibited significantly (P<O. 01) by verapamil (1 μmol/L) after infection of heart cells for 48h. However, when the cultured heart cells infected with CVB3 and treated with verapamil (Iμmol/L and 10 nmo/L) at the same time for 48h, the amounts of CVB3-RNA in myocytes were significantly higher than that in infected control group (P<O. 05). These phenomena suggest that the increase of Ca2+ influx of cultured heart cells infected with CVB3 could be inhibited by some calcium antagonists, e. g. verapamil at the early stage. On the other hand, verapamil might accelerate viral replication in myocardium. Thus, although verapamil could be beneficial for decreasing the secondary Ca2+ damages and improve the myocardial electric activity, it isn’t a sensible choice for therapy in early stage of virus infection with cardiac symptoms.

黄芪对柯萨奇B_3病毒感染培养大鼠心肌细胞Ca^（2＋）内流及该病毒RNA复制

本研究结果发现，黄芪对柯萨奇Ｂ_３病毒（ＣＶＢ_３）感染大鼠心肌细胞及正常对照心肌细胞的Ｃａ^（２＋）内流均呈显著抑制作用（ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５））；若在病毒感染１ｈ后加黄芪，经４８ｈ培养，对正常对照及感染细胞的Ｃａ^（２＋）内流亦有抑制作用（Ｐ＜０．０５）；同时细胞中ＣＶＢ_３－ＲＮＡ含量显著少于病毒对照组（Ｐ＜０．００１）。提示黄芪具有钙拮抗作用，可减少病毒感染引起的心肌Ｃａ^（２＋）内流量，有可能减轻感染细胞的继发性Ｃａ^（２＋）损伤；且对细胞中病毒ＲＮＡ的复制具有抑制作用，显示了其在病毒性心肌炎临床治疗上的应用价值。

瓜蒌皮提取物对大鼠主动脉PDC Ca^(2+)内流的影响

为了研究瓜蒌皮治疗冠心病的有效成分，用醚醇法和水煎醇沉法提取瓜蒌皮的有效成分，并用^(４５)Ｃａ跨膜测量方法研究各提取物对大鼠主动脉ＰＤＣ钙通道Ｃａ^(２＋)内流的影响。发现氯仿和醇溶物能阻滞Ｃａ^(２＋)内流，水溶物具有相反的作用，其中氯仿提取物浓度为３０ ｍｇ／ｍＬ时，使Ｃａ^(２＋)内流量比对照下降３１．５７％。实验结果表明瓜蒌皮中可能有７种组分具有治疗冠心病的活性。

巯亚硝基卡托普利对环匹阿尼酸引起的平滑肌细胞胞浆游离Ca^(2+)浓度升高作用的影响

目的 探讨巯亚硝基卡托普利 (S nitrosocaptopril,CapNO)对Ca2 + 池操纵性Ca2 + 内流信号转导过程的影响。方法 以Fura 2荧光探针测定胞浆游离Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i)。结果 ①CapNO(2 0～ 12 0 μmol·L-1)呈浓度依赖性抑制环匹阿尼酸 (cyclopiazonicacid ,CPA)引起的[Ca2 + ]i 升高 ,80 μmol·L-1CapNO为最大效应浓度。相同浓度的captopril对CPA升高 [Ca2 + ]i 无明显抑制作用。②在 80 μmol·L-1CapNO抑制CPA引起 [Ca2 + ]i 升高作用的基础上 (31%± 11% ) ;随后加入 1μmol·L-1硝苯地平不能降低 [Ca2 + ]i,再加入 2 0 μmol·L-1SK&F96 36 5 (最大效应浓度 )可进一步降低 [Ca2 + ]i(5 4%± 18% ) ,其中SK&F96 36 5净抑制率为 2 4%± 10 % ,与SK&F96 36 5单独作用抑制率(5 4%± 11% )比较差异有显著性。③不同顺序给予最大效应浓度CapNO (80 μmol·L-1)和tyrphostinAG490 (2 μmol·L-1)对CPA引起 [Ca2 + ]i 升高存在交叉抑制作用。结论 CapNO可通过阻断电压依赖性Ca2 + 通道和Ca2 + 池操纵性Ca2 + 通道抑制CPA引起的 [Ca2 + ]i 升高 ,CapNO对CPA引起 [Ca2 + ]i 升高的阻断作用存在酪氨酸激酶 (Janus2亚型 )

大鼠主动脉α_1肾上腺素能受体激活引起Ca^（2＋）内流的特性

在大鼠主动脉平滑肌标本上，０．５μｍｏｌ．Ｌ－１硝苯吡啶能完全阻断由１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ引起的血管收缩和４５Ｃａ内流；并部分抑制苯肾上腺素引起的血管收缩效应和４５Ｃａ内流；６ｍｍｏｌ·Ｌ－１普鲁卡因能完全阻断无钙Ｋｒｅｂｓ液中苯肾上腺素引起的血管收缩和４５Ｃａ外溢，且部分阻断正常Ｋｒｅｂｓ液中苯肾上腺素引起的血管收缩和４５Ｃａ内流；０．５μｍｏｌ·Ｌ－１硝苯吡啶和６ｍｍｏｌ·Ｌ－１普鲁卡因合用能阻断苯肾上腺素引起的Ｃａ２＋内流。提示：α１受体兴奋后引起的细胞外Ｃａ２＋内流可分为硝苯吡啶敏感和不敏感两部分，而后者受细胞内Ｃａ２＋释放调节。

蛋白酪氨酸激酶抑制剂对脑血管平滑肌细胞Ca^(2+)池操纵性Ca^(2+)内流的影响

目的 研究蛋白酪氨酸激酶和蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂对牛脑血管平滑肌细胞 (CSMC)Ca2 + 池操纵性Ca2 + 内流的影响。方法 采用培养的CSMC ,在生物荧光双波长影像分析系统用Fura 2 /Am荧光探针测定单个细胞内游离Ca2 + 浓度。结果 (1)蛋白酪氨酸激酶抑制剂 (genistein ,2 5 ,5 ,10 μmol·L-1)能浓度依赖性降低内皮素 1(ET 1,10 -7mol·L-1)刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,抑制率分别为5 6%± 2 .9%、2 5 6%± 3 9%、48 9%± 3 7% ;蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂 (vanadate ,2 ,4,8μmol·L-1)能浓度依赖性升高CPA刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,增加比率分别为8 2 %± 3 9%、18 8%± 4 9%、46 6%± 6 9% ;(2 ) genistein(2 5 ,5 ,10 μmol·L-1)能浓度依赖性降低ATP(10 μmol·L-1)刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,抑制率分别为 6 7%±2 6%、2 4 6%± 6 5 %、5 1 3 %± 6 9% ;vanadate (2 ,4,8μmol·L-1)能浓度依赖性升高ATP刺激引起的CSMCCa2 +内流 ,增加比率分别为 4 8%± 2 0 %、2 8 5 %± 4 6%、49 6%± 3 3 % ;(3 ) genistein (2 5 ,5 ,10 μmol·L-1)能浓度依赖性降低环匹阿尼酸 (Cyclopiazonicacid ,CPA ,10 μmol·L-1)刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,抑制率分别为 6 5 %± 3 0 %、2 2 5 %± 5 2 %、

药物对病毒感染培养心肌细胞Ca^（2＋）内流及CVB_3－RNA复制的影响

应用放射性同位素￣（４５）Ｃａ￣（２＋）示踪技术及光敏生物素标记ｃＤＮＡ探针杂交方法，观察了维拉帕米、黄芪、地塞米松等药物对感染柯萨奇Ｂ＿３病毒（ＣＶＢ＿３）的大鼠培养心肌细胞Ｃａ￣（２＋）内流及细胞中ＣＶＢ＿３－ＲＮＡ复制的作用。结果发现：在病毒感染４８ｈ，上述三药均可显著减少感染细胞及正常对照的心肌Ｃａ￣（２＋）内流（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）；若在病毒感染后即加入上述药物，经４８ｈ培养后，黄芪组细胞中的ＣＶＢ＿３－ＲＮＡ含量显著少于病毒对照组（Ｐ＜０．００１），维拉帕米则显著增加（Ｐ＜０．０１）．而地塞米松对其无影响。提示黄芪与地塞米松具有一种与维拉帕米相似的减少病毒感染心肌Ｃａ￣（２＋）内流的作用，有可能减轻感染细胞的继发性Ｃａ￣（２＋）损伤；但三种药物对感染细胞中病毒核酸的复制有不同作用，可作为临床治疗病毒性心肌炎时的参考。

呋塞米对α_1肾上腺素受体亚型引起的Ca^(2+)内流的影响

目的 探讨Cl-通道开放在不同α1肾上腺素受体亚型引起的Ca2 +内流中的作用。方法 采用Fura 2 /AM荧光分光光度法 ,测定胞浆游离Ca2 +浓度 ,观察Cl-通道阻断剂呋塞米 ,钙通道阻断剂SK&F96 36 5和硝苯地平对不同α1肾上腺素受体亚型 (α1A、α1B AR)引起的Ca2 +内流的影响 ,并加以比较。结果 2 5 ,5和 10 μmol·L-1呋塞米呈浓度依赖性地抑制了α1A和α1B AR亚型引起的Ca2 +内流 ;对α1A AR引起的Ca2 +内流的抑制率分别为 8 3 %± 6 1% ,2 3 8%±14 8%和 40 7%± 19 3% ,对α1B AR引起的Ca2 +内流的抑制率分别为 12 0 %± 5 4% ,19 2 %± 4 9%和 31 9%±4 9%。α1A AR引起的Ca2 +内流被最大抑制浓度 ( 2 0 μmol·L-1)的SK&F96 36 5抑制后 ,不能被 10 μmol·L-1呋塞米进一步抑制 ;而α1B AR引起的Ca2 +内流被 2 0 μmol·L-1SK&F96 36 5抑制后 ,仍能被 10 μmol·L-1呋塞米进一步抑制 ,抑制率为 6 6 %± 3 2 %。结论 参与α1A和α1B AR引起的Ca2

谷氨酸对牛大脑中动脉平滑肌细胞胞浆静息Ca^(2+)和ATP触发的Ca^(2+)内流的影响

目的 观察谷氨酸对牛大脑中动脉平滑肌细胞有无直接的激动作用以及对ATP触发的Ca2 + 内流有无影响 ?方法 采用Fura 2荧光法测定胞浆内Ca2 + 变化技术 ,在培养的乳牛大脑中动脉平滑肌细胞上观察药物的作用。结果 谷氨酸 (10～ 2 0 0 μmol·L-1)不能增加或减少细胞胞浆静息游离Ca2 + 浓度 ([Ca2 + ]i)和ATP触发的Ca2 + 内流 (谷氨酸 :10～ 40 0 μmol·L-1)。结论 谷氨酸对大脑中动脉平滑肌细胞信息Ca2 + 水平和Ca2 + 内流均无直接的影响。

钙流拮抗药对眼镜蛇心脏毒升高大鼠心肌胞浆Ca^（2＋）作用的影响

Ｆｕｒａ－２荧光测定实验显示，眼镜蛇心脏毒（ＣＴＸ）能明显升高新鲜分离的大鼠心肌细胞的胞浆Ｃａ２＋浓度。维拉帕米在完全阻断高Ｋ＋引起胞浆Ｃａ２＋升高的浓度下（１μｍｏｌ·Ｌ－１）．能明显抑制ＣＴＸ作用，但不能阻断之。１．５μｍｏｌ·Ｌ－１ＣＴＸ使离体大鼠Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ心脏收缩幅度逐渐减少，最后心脏停搏于收缩期。维拉帕米及硝苯吡啶均能明显延长心脏的搏动时间，但不能阻止ＣＴＸ引起的心脏停搏。结果提示，ＣＴＸ引起膜去极化使电位依赖性Ｃａ２＋通道开放不是ＣＴＸ触发Ｃａ２＋内流的唯一机理。

高血压病患者血小板Na^+-H^+交换与Ca^(2+)内流、Ca^(2+)结合力的关系

细胞内pH对血管平滑肌结构和功能有重要影响,本文通过观察高血压病患者血小板Na^+-H^+交换活性、血小板Ca^(2+)内流和Ca^(2+)结合力等指标,探讨了细胞Na^+-H^+交换活性和Ca^(2+)代谢与血压间的关系。

酪氨酸激酶抑制剂对cyclopiazoni cacid引起的大鼠主动脉血管环收缩效应的影响

目的 探讨酪氨酸激酶在Ca2 +池操纵性Ca2 +内流中的作用。方法 记录大鼠胸主动脉环收缩反应。结果 ①不同剂量酪氨酸激酶抑制剂 genistein (1～ 10 0 μmol·L-1)和tyrphostin 2 5 (Tyr 2 5 ,1～ 30 μmol·L-1)均以浓度依赖性抑制cyclopiazonicacid (CPA)引起的平滑肌收缩平台期。Tyr 2 5的最大作用浓度为 10 μmol·L-1,抑制率为 42 %±11%。② 10 μmol·L-1Tyr 2 5和 1μmol·L-1nifedipine(Nif)对CPA引起电压依赖性Ca2 +通道 (VDCC)开放过程的抑制作用存在部分交叉。③ 1μmol·L-1Nif预处理阻断VDCC作用后 ,10 μmol·L-1Tyr 2 5只能部分阻断CPA引起的Ca2 +池操纵性Ca2 +通道 (SOCC)开放过程 ,再加入 6 0 μmol·L-1SK&F96 36 5可完全阻断SOCC的开放过程。结论 CPA引起平滑肌的收缩过程中 。

High-frequency repetitive transcranial magnetic stimulation promotes neural stem cell proliferation after ischemic stroke

Prolife ration of neural stem cells is crucial for promoting neuronal regeneration and repairing cerebral infarction damage.Transcranial magnetic stimulation(TMS)has recently emerged as a tool for inducing endogenous neural stem cell regeneration,but its underlying mechanisms remain unclea r In this study,we found that repetitive TMS effectively promotes the proliferation of oxygen-glucose deprived neural stem cells.Additionally,repetitive TMS reduced the volume of cerebral infa rction in a rat model of ischemic stro ke caused by middle cerebral artery occlusion,im p roved rat cognitive function,and promoted the proliferation of neural stem cells in the ischemic penumbra.RNA-sequencing found that repetitive TMS activated the Wnt signaling pathway in the ischemic penumbra of rats with cerebral ischemia.Furthermore,PCR analysis revealed that repetitive TMS promoted AKT phosphorylation,leading to an increase in mRNA levels of cell cycle-related proteins such as Cdk2 and Cdk4.This effect was also associated with activation of the glycogen synthase kinase 3β/β-catenin signaling pathway,which ultimately promotes the prolife ration of neural stem cells.Subsequently,we validated the effect of repetitive TMS on AKT phosphorylation.We found that repetitive TMS promoted Ca2+influx into neural stem cells by activating the P2 calcium channel/calmodulin pathway,thereby promoting AKT phosphorylation and activating the glycogen synthase kinase 3β/β-catenin pathway.These findings indicate that repetitive TMS can promote the proliferation of endogenous neural stem cells through a Ca2+influx-dependent phosphorylated AKT/glycogen synthase kinase 3β/β-catenin signaling pathway.This study has produced pioneering res ults on the intrinsic mechanism of repetitive TMS to promote neural function recove ry after ischemic stro ke.These results provide a stro ng scientific foundation for the clinical application of repetitive TMS.Moreover,repetitive TMS treatment may not only be an efficient and potential approach to support neurogenesis for further therapeutic applications,but also provide an effective platform for the expansion of neural stem cells.

钩藤碱和异钩藤碱对^(45)Ca转运的影响

在离体家兔主动脉条.钩藤碱和异钩藤碱明显减少KCl(77.0 mmol·L^(-1))溶液所致45Ca内流量、不影响去甲肾上腺素所引起的45Ca内流和外溢。结果表明.钩藤碱和异钩藤碱对电位依赖性钙通道具有阻滞作用。

三七皂甙单体2A-1-1对高血压患者血小板钙内流的影响

目的 观察三七皂甙单体2A - 1 - 1对高血压患者血小板钙内流的影响,并探讨其对血小板受体操纵性钙通道(ROC)的作用。方法 采用Fura - 2 Am荧光探针双波长测定细胞胞浆游离钙离子浓度( [Ca2 + ]i)技术,以Nifedipine为对照观察2A - 1 - 1体外对环匹阿尼酸(CPA)介导的高血压患者血小板钙内流变化。结果 高血压患者血小板静息钙和钙内流均高于正常人(P <0 .0 5 ) ;2A - 1 - 1 ( 5、1 0、2 0 μmol L)可抑制CPA介导的高血压患者血小板钙内流(P <0 .0 5或0 .0 1 ) ;Nifedipine( 2 0 μmol L)不能抑制CPA介导的高血压患者或正常人血小板钙内流(P >0 .0 5 )。结论 2A - 1 - 1可能通过抑制高血压患者血小板ROC ,减少钙内流,从而降低其血小板活性。

甲基莲心碱对血管平滑肌α受体引起^（45）Ca外溢与内流的影响

在血管平滑肌，甲基莲心碱能明显减少苯肾上腺素引起的４５Ｃａ内流量，不影响高钾引起的４５Ｃａ内流；而硝苯吡啶几乎完全阻断后一种的４５Ｃａ内流。甲基莲心碱不抑制４５Ｃａ外溢。

Effect of Astragalus Membranaceus on Ca^(2+) Influx and CVB3 RNA Replication in Cultured Neonatal RatHeart Cells Infected with CVB3

Here was investigated the effect of Radix Astragalus Membranaceus IAM) on Caz+ influxacross the myocardial plasma membrane and coxsackie virus B3 ( CVB3 ) -RNA replication in cultured neonatalrat heart cells infected with CVB3 . It was found that the Oa2+ intlux could be inhibited signiticantly by AM bothin heart cells intected with CVB3 for 48 hours and in normal control heart cells. In addition. the Caz+ intluxand the amounts of CVB3-RNA in rnyocytes simultaneously intected with CVB3 and treated with AM for 48hours were statistically decreased compared with that in CVB3-infected contrOI cells. These phenomena sug-gested that AM could exert the effects of decreasing the secondary Ca2+ damages, irnproving the abnormalmyocardial electric activity and inhibiting replication of CVB3-RNA in myocardium. Thus, it is a rationalchoice to treat patients with AM in viral myocarditis.

苦参碱的镇痛作用部位及机制研究

目的 研究苦参碱的镇痛作用部位及机制。方法 采用小鼠醋酸扭体法、热板法 ,观察用药后扭体反应数、舔后足潜伏期及脑组织 NO含量的变化。结果 苦参碱侧脑室注射 (icv) 0 .2 5 ,0 .5 mg/ kg,ip或 iv 3.75 ,7.5 ,15 ,30mg/ kg均可显著减少小鼠扭体反应数 ,并呈量效关系 ;ip与 iv同等剂量的苦参碱 ,对小鼠扭体反应的抑制程度多以iv为强 ,给药后各时段的 ip抗扭体半数有效量 (ED5 0 )均大于 iv抗扭体 ED5 0 ;ip苦参碱 7.5 ,30 mg/ kg可显著降低醋酸致痛小鼠脑组织 NO含量 ;进一步研究发现苦参碱延长小鼠舔后足潜伏期的作用可被氯化钙所拮抗 ,而被维拉帕米所增强。结论 苦参碱的镇痛作用部位在中枢 ,其镇痛作用可能与影响 Ca2 + 内流和减少

异紫堇啡碱对血管平滑肌钙内流和钙释放的影响

目的研究异紫堇啡碱（ＩＳＯＣ）对血管平滑肌钙内流和钙释放的影响，以初步阐明其作用方式。方法利用兔胸主动脉螺旋条标本观察ＩＳＯＣ对去甲肾上腺素（ＮＡ）及ＫＣｌ量效曲线的影响和对无钙液中ＮＡ、ＣａＣｌ２复钙、咖啡因缩血管效应的影响。结果ＩＳＯＣ１０μｍｏｌ·Ｌ－１对ＮＡ的量效曲线呈非竞争性拮抗作用，而对高钾的作用则不明显。在无钙液中，ＩＳＯＣ１００μｍｏｌ·Ｌ－１能明显抑制ＮＡ所致的收缩及复钙后外钙内流诱发的收缩，ＩＳＯＣ１０及３０μｍｏｌ·Ｌ－１则只作用于前者；各实验浓度的ＩＳＯＣ对咖啡因在无钙液中的缩血管作用均无影响。结论ＩＳＯＣ抑制受体中介的钙释放和钙内流，但不是典型的钙拮抗剂。