CacyBP/SIP对子宫内膜异位症间质细胞侵袭、迁移及血管生成的影响

目的探讨钙周期素结合蛋白(Calcyclin-Binding Protein/Siah-1-Interacting Protein,CacyBP/SIP)对子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)间质细胞侵袭、迁移及血管生成的作用机制。方法选取2021年1月至2022年12月在石家庄市妇幼保健院产科就诊的60例EMs患者为研究对象,经腹腔镜手术,取子宫内膜组织并分离子宫内膜间质细胞。使用重组CacyBP/SIP慢病毒、抑制剂转染细胞之后检测病毒、抑制剂转染结果,实验分为5组,分别为CacyBP/SIP慢病毒组、慢病毒阴性对照组、CacyBP/SIP抑制剂组、抑制剂阴性对照组及未治疗组。定量PCR鉴定各组细胞CacyBP/SIP水平,Transwell法检测各组细胞侵袭、迁移,MTT比色法检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,免疫印迹法检测各组细胞血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)表达水平。结果与抑制剂阴性对照组比较,CacyBP/SIP慢病毒组24、48、72 h细胞增殖升高(P<0.05),与CacyBP/SIP慢病毒组比较,CacyBP/SIP抑制剂组的细胞增殖降低(P<0.05);与抑制剂阴性对照组比较,CacyBP/SIP慢病毒组CacyBP/SIP水平、细胞侵袭数量、迁移数量及VEGF、COX-2蛋白表达升高(P<0.05),与CacyBP/SIP慢病毒组比较,CacyBP/SIP抑制剂组的上述指标降低(P<0.05);未治疗组、慢病毒阴性对照组、抑制剂阴性对照组、CacyBP/SIP慢病毒组、CacyBP/SIP抑制剂组细胞凋亡率分别为8.54%±0.26%、8.42%±0.38%、8.46%±0.19%、3.38%±0.15%、18.42%±1.23%,与抑制剂阴性对照组比较,CacyBP/SIP慢病毒组细胞凋亡率降低(P<0.05),与CacyBP/SIP慢病毒组比较,CacyBP/SIP抑制剂组细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论CacyBP/SIP的低表达可降低EMs间质细胞的增殖、侵袭及迁移能力,推测其通过抑制VEGF、COX-2基因,可抑制血管生成。

结肠癌细胞中CacyBP/SIP的表达及核转位现象

目的:拟明确CacyBP/SIP在结肠癌细胞中的表达及定位,探讨CacyBP/SIP在结肠癌发生发展中的意义.方法:采用Westernblot对3种结肠癌细胞系中CacyBP/SIP的表达进行检测;间接免疫荧光细胞内染色检测CacyBP/SIP在结肠癌细胞中的定位以及给予KC1、胃泌素(10-8mol/L)刺激后CacyBP/SIP的定位;激光共聚焦检测胃泌素刺激后结肠癌细胞中Ca2+浓度的变化.结果:HT29及SW480结肠癌细胞中均表达CacyBP/SIP,Lovo细胞中未检测出CacyBP/SIP.间接免疫荧光显示CacyBP/SIP主要位于结肠癌细胞的胞质中,给予KC1刺激后CacyBP/SIP转位至细胞核,洗脱KC1后,CacyBP/SIP位于胞质;给予胃泌素刺激后亦可观察到CacyBP/SIP转位至细胞核;与无胃泌素刺激的细胞相比,给予胃泌素刺激的细胞内Ca2+浓度显著高于对照组f25.33±0.57vs21±1,P<0.05).结论:CacyBP/SIP在结肠癌细胞中表达,且主要定位于胞质,当细胞内Ca2+浓度升高后转位至细胞核,提示CacyBP/SIP可能通过入核来参与结肠癌的发生发展.

二氯化钴致人结肠癌细胞系CacyBP/SIP核转位

目的观察和探讨低氧可否引起人结肠癌细胞系CacyBP/SIP核转位。方法用人结肠癌细胞系HCT-116的cDNA序列,用分子克隆法构建过表达CacyBP/SIP的绿荧光慢病毒载体,转染至结肠癌SW480细胞,用CoCl2作为刺激因子,激光共聚焦显微镜和Western blot检测CacyBP/SIP的表达及定位。结果构建了过表达CacyBP/SIP的慢病毒载体,转染至结肠癌细胞,CoCl2刺激前CacyBP/SIP定位和表达主要在细胞胞质,刺激后CacyBP/SIP定位和表达在细胞胞质和胞核。结论 CoCl2刺激后可致CacyBP/SIP核转位。

前列腺素E_2对结肠癌细胞CacyBP/SIP核转位的影响

目的用前列腺素E2刺激结肠癌细胞,观察和探讨可否引起CacyBP/SIP核转位。方法根据hCacyBP/SIP序列设计引物,PCR扩增、酶切、连接、转化等分子克隆法构建含有钙周期素结合蛋白(CacyBP/SIP)的慢病毒重组质粒,PCR鉴定、测序;将构建好的带有绿荧光蛋白的CacyBP-Lentivirus载体转染至结肠癌SW480细胞,用激光共聚焦显微镜检测CacyBP/SIP表达定位;前列腺素E2刺激后激光共聚焦显微镜、Western blot观察CacyBP/SIP在细胞中的定位。结果激光共聚焦和Westernblot发现:前列腺素E2刺激前CacyBP/SIP定位和表达主要在细胞胞质,用100μmol/L前列腺素E2刺激1h,CacyBP/SIP定位和表达在细胞胞质和胞核。结论前列腺素E2刺激可以引起CacyBP/SIP由胞质转位至细胞核。

CacyBP/SIP基因siRNA的筛选

目的探讨靶向钙周期素结合蛋白(CacyBP/SIP)基因的3对小干扰RNAs(small interference RNA,siRNAs)转染人乳腺癌细胞MDA-MB-231后,能否抑制CacyBP/SIP基因的表达。方法化学合成3对CacyBP/SIP特异性siRNA(CacyBP/SIP-siRNA),分别转染MDA-MB-231细胞,RT-PCR法、Western blotting方法分别检测转染前后MDA-MB-231细胞的CacyBP/SIPmRNA和蛋白的水平。结果 CacyBP/SIP-siRNA001成功转染入人乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR结果显示,siRNA001组CacyBP/SIP mRNA的表达量为NC-siRNA阴性对照组的(25.2±1.34)%,siRNA002和siRNA003则为(64.8±0.58)%和(77.5±1.27)%,CacyBP/SIP-siRNA001转染后能够抑制MDA-MB-231细胞中CacyBP/SIPmRNA,沉默效率为(74.8±0.75)%(P<0.05),Western blotting证实了siRNA001的沉默作用。结论 CacyBP/SIP-siRNA001能显著沉默MDA-MB-231细胞中CacyBP/SIP mRNA和蛋白的表达。

人结肠癌细胞中CacyBP/SIP核转位差异表达基因的验证

目的验证细胞周期聚合酶链反应(PCR)芯片筛选出来的差异表达基因。方法胃泌素刺激的SW480细胞作为实验组,无胃泌素刺激的SW480细胞作为对照组。用蛋白免疫印迹(Western blot)法对胃泌素刺激前后的钙周期素结合蛋白(CacyBP/SIP)表达定位进行检测;用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对细胞周期PCR芯片筛选出的差异表达基因周期素依赖性蛋白激酶8(CDK8)和细胞周期蛋白依赖性激酶亚基2(CKS2)进行验证。结果胃泌素刺激前CacyBP/SIP主要表达于细胞质,刺激后可同时表达于细胞质和细胞核;同细胞周期PCR芯片结果一致,基因CDK8和CKS2在实验组的表达量较对照组明显上调(P<0.05)。结论胃泌素刺激可使CacyBP/SIP发生核转位;基因芯片筛选出的差异基因大体可靠,对筛选出的差异基因可以进行进一步研究。

CacyBP/SIP基因沉默对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

目的观察干扰小RNA(siRNA)介导的Cacy BP/SIP基因沉默对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响。方法化学合成Cacy BP/SIP基因序列特异性siRNA(Cacy BP/SIP siRNA),采用脂质体法转染siRNA至MDA-MB-231细胞(Cacy BP/SIP siRNA组),MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率。Realtime PCR和Western blotting检测MDA-MB-231细胞内Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白的表达。另设阴性对照组和空白对照组。结果与阴性对照组和空白对照组比较,Cacy BP/SIP siRNA组MDA-MB-231细胞增殖能力显著下降(P<0.05),细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。Caspase-3和Bax mRNA及蛋白表达上调(P<0.05),Bcl-2 mRNA及蛋白表达下调(P<0.05)。结论靶向沉默乳腺癌MDA-MB-231细胞中Cacy BP/SIP基因表达后,可以抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡,其作用可能通过下调Bcl-2表达,上调Caspase-3和Bax表达发挥诱导细胞凋亡的作用。

表皮生长因子对CacyBP/SIP过表达慢病毒载体转染的结肠癌细胞CacyBP/SIP核转位的影响

目的观察和探讨表皮生长因子对钙周期素结合蛋白(CacyBP/SIP)过表达慢病毒载体转染结肠癌细胞CacyBP/SIP核转位的影响。方法构建含有CacyBP/SIP的慢病毒重组质粒并转染至结肠癌SW480细胞。采用激光共聚焦显微镜及Western blot法观察100 ng/mL表皮生长因子刺激前后CacyBP/SIP蛋白在胞质、胞核中的定位及表达变化。结果激光共聚焦和Western blot检测结果发现,表皮生长因子刺激前CacyBP/SIP均主要定位和表达于细胞质,刺激1 h后CacyBP/SIP定位和表达于细胞胞质和胞核。结论表皮生长因子刺激过表达CacyBP/SIP慢病毒载体转染的结肠癌细胞可引起CacyBP/SIP由胞质转位至细胞核。

CacyBP/SIP在不同大肠组织中的表达及临床意义

目的:检测钙周期素结合蛋白[calcyclin(S100-A6)-binding-protein,CacyBP/Siah-1 interactingprotein,SIP]在大肠各种组织中的表达,探讨其在大肠癌发生发展中的作用.方法:采用免疫组织化学技术检测10例正常大肠组织、17例大肠增生性息肉、26例大肠腺瘤和50例大肠癌组织中CacyBP/SIP的表达.采用Western blot检测3例大肠癌及相应癌旁正常组织中CacyBP/SIP的表达.并分析CacyBP/SIP与大肠癌临床病理资料之间的关系.结果:CacyBP/SIP在正常大肠、大肠增生性息肉、大肠腺瘤及大肠癌组织中的表达率分别为0(0/10)、17.7%(3/17)、26.9%(7/26)、52.0%(26/50),CacyBP/SIP在大肠增生性息肉中的表达与正常大肠组织中的表达比较无统计学差异(P>0.05),而在大肠腺瘤组织、大肠癌组织中的表达与正常大肠组织比较差异均有统计学意义(P<0.05).Western blot显示CacyBP/SIP在大肠癌组织中的表达明显高于其相应癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05).CacyBP/SIP在大肠癌组织中的表达与大肠癌患者的性别、年龄、组织分化程度、TNM分期之间比较均无统计学差异(P>0.05).结论:CacyBP/SIP在大肠腺瘤组织、大肠癌组织中高表达,可能参与了大肠癌的发生发展.

稳定敲除CACYBP/SIP基因的MCF-7细胞株的构建及其细胞增殖的变化

目的利用CRISPR/Cas9系统构建CACYBP-/-乳腺癌MCF-7基因缺陷细胞株,并研究该基因敲除株对细胞增殖能力的影响。方法设计特异sgRNA序列,构建Lenti-CAS9-sgRNA-puro质粒,转染MCF-7细胞,puromycin抗性筛选,Cruiser检测sgRNA活性,极限稀释法筛选单克隆株,Western blot检测CACYBP/SIP蛋白的表达,Brdu和MTT试剂盒检测CACYBP/SIP缺失后细胞增殖能力。结果成功构建Lenti-CAS9-sgRNA-puro质粒,puromycin最佳筛选浓度为0.9μg/mL,sgRNA1活性最高,获得的单克隆系测序唯一敲除CACYBP/SIP的MCF-7细胞株增殖能力减弱(P<0.05)。结论敲除CACYBP/SIP的MCF-7细胞株增殖能力减弱。

siRNA下调CacyBP/SIP表达对人乳腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的:探讨靶向钙周期素结合蛋白(calcyclin binding protein/Siah-1-interacting protein,CacyBP/SIP)基因的小干扰RNA(small interfering,siRNA)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡及侵袭的影响。方法:化学合成3条针对CacyBP/SIP基因的特异性siRNA,采用脂质体法转染MDA-MB-231细胞;分别采用实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测siRNA转染前后MDA-MB-231细胞中CacyBP/SIP mRNA及蛋白的表达情况。分别采用平板克隆形成实验、MTT法、FCM法及Transwell小室实验检测CacyBP/SIP-siRNA对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。结果:与空白对照组和阴性对照组比较,转染CacyBP/SIP-siRNA后乳腺癌MDA-MB-231细胞中CacyBP/SIP mRNA(P<0.05)及蛋白的表达被下调。MDA-MB-231细胞增殖受到抑制,克隆形成能力下降,凋亡率增加(P<0.05),侵袭能力下降(P<0.05)。结论:CacyBP/SIP-siRNA能下调MDA-MB-231细胞中CacyBP/SIP mRNA和蛋白的表达,从而抑制MDA-MB-231细胞的增殖及侵袭能力,诱导细胞凋亡,因此CacyBP/SIP可能参与了乳腺癌的恶性生物学行为。

乳腺癌组织中CacyBP/SIP的表达情况及临床病理意义

目的:探讨钙周期素结合蛋白(Cacy BP/SIP)在乳腺癌组织中的表达及临床病理意义。方法:应用免疫组织化学染色检测Cacy BP/SIP在86例乳腺癌组织、20例癌旁相对正常乳腺组织及16例乳腺腺病组织中的表达情况并分析临床病理意义。结果:免疫组织化学结果显示,在86例乳腺癌组织、20例癌旁组织、16例乳腺腺病组织中Cacy BP/SIP蛋白的阳性表达率分别为75.6%(65/86)、30.0%(6/20)和43.8%(7/16),差异有统计学意义(P<0.05);Cacy BP/SIP蛋白在乳腺癌组织中的表达与组织学分级、淋巴结转移及TNM分期有统计学意义(P<0.05);Cacy BP/SIP蛋白表达与ER(r=0.275)、HER2(r=0.256)有相关性(P<0.05)。结论:Cacy BP/SIP在乳腺癌组织中高表达,且与ER、HER2的表达呈正相关,可能作为癌基因参与乳腺癌的恶性表型。

浅析射频SiP多物理场耦合分析关键技术

射频系统级封装(SiP)的多物理场耦合分析问题已经成为限制其可靠性提升的关键因素。当前,射频SiP的多物理场耦合分析内容主要包括模型建立和数值算法,然而,模型建立方法以及算法的适用性与选择方法是一大难点。同时随着物理场和射频SiP模型复杂度的不断提高和计算需求的不断攀升,现有部分分析方法存在计算量大、适配不佳等问题亟待优化。本文对多物理场模型的建立方法及射频SiP关键物理场单场和耦合场方程进行了总结归纳,从方法特点和适用条件两个方面对有网格与无网格四种数值算法展开阐述,同时列举了若干种多物理场耦合优化方法,从建模、求解和耦合方式的角度为实现简化建模、加速计算、优化结果等目标提供了方法和建议,可以为射频SiP的多物理场耦合分析和改进工作提供参考。

基于递归认证测试的SIP协议形式化分析

文章以形式化分析方法证明协议安全为研究目的,以具有灵活性、开放性、可伸缩性等特性的SIP协议为研究对象,运用基于串空间理论改进的递归认证测试形式化分析方法,分析了一种BAN逻辑证明安全的SIP身份认证协商协议,发现了该协议执行过程中协议格式不准确、易受中间人攻击的缺陷,并提出了针对该协议缺陷的改进方案。结果表明,文章所提出的递归认证测试形式化分析方法比BAN逻辑更适用、更有效,同时改进方案也增强了SIP身份认证协商协议的安全性。

基于SIP的应急通信调度台设计

针对各应急救援场景中通信网络复杂多样,普通调度台的指挥通信系统相互独立等问题,提出一款基于SIP的应急通信调度台的构建方案;详细介绍了调度台的各硬件模块构成,阐述了SIP软交换技术在方案中的应用。调度台支持接入数字和模拟通信网络以实现语音通信并通过有线和无线的多种宽带通信方式实现多媒体视频通信;基于SIP软交换技术,针对不同应急救援场景下的应急通信需求,提出了全融合通信概念,完成统一指挥调度。

微型组合导航SIP芯片的PDN电热协同仿真与优化

随着SIP芯片逐步小型化和集成化,导致芯片对PDN的直流压降、电流密度以及系统的温升控制要求越来越高.本文通过改变载流导体的面积来改善直流压降和电流密度过高的问题,同时针对芯片温升研究通过合理优化热过孔阵列的孔径、过孔数量以及镀铜厚度来减小热阻以达到控制芯片温升的目的.仿真结果表明,增加载流导体的面积能有效降低直流压降和电流密度,且还留有很大的裕量;而热过孔阵列的合理布局能有效控制芯片温升,从而提升了芯片的功能和可靠性.

基于SIPS理论模型的美食短视频传播城市形象策略研究

智能媒体时代,短视频为大众主动参与城市形象的建构与传播提供了新的视角和实践。美食因其独特魅力,成为城市独有的特殊符号和城市形象传播的重要载体。以短视频垂直细分领域下的美食短视频作为切入点,解析美食短视频在城市形象传播上的重要性,厘清其在传播城市形象过程中存在的问题,结合SIPS模式,分别从共鸣、确认、参与、共享四个阶段,提出优化美食短视频传播城市形象的策略。

SiP堆叠封装回流焊过程翘曲研究

SiP堆叠封装技术已经逐渐用于高密度、高性能的集成电路封装中。以SiP堆叠封装为研究对象,对回流焊堆叠工艺中封装的翘曲进行了仿真分析,研究了不同塑封厚度和塑封材料热膨胀系数对封装翘曲的影响。结果表明,在回流焊升温阶段封装整体翘曲呈现上凸变形,在回流焊降温阶段封装整体翘曲呈现下凹变形,且回流焊降温阶段封装翘曲最大。塑封厚度的增加可以减小在回流焊过程中封装产生的翘曲,而塑封料热膨胀系数的增加则会使封装翘曲变得更为严重。因此通过增加塑封厚度以及减小塑封料的热膨胀系数均可以有效减小回流焊过程中SiP堆叠封装产生的翘曲。

基于SIP技术的固态硬盘电路设计

存储系统小型化、高性能需求与日俱增,为此设计了一款基于SiP技术的固态硬盘电路,用于验证存储系统SiP电路的可行性。该SiP电路内部以SSD控制模块为核心处理单元,集成了用于数据存储的NAND颗粒、用于固件存储的SPI Flash以及电源管理等元器件。在搭建的软硬件平台上进行底层ATA指令验证以及与传统分离式存储系统的对比性能测试,证明了应用SiP技术的存储系统具备高性能、小型化、低功耗等诸多优势,为后续SiP存储系统的设计和验证奠定了一定的技术基础。

基于SIPS模型的短视频二次传播策略研究

伴随着新媒体的崛起,信息的传播方式变得更加多元化。信息接收者与信息传递者之间的界限变得更为模糊,由共享与转发行为形成的二次传播也在信息传递中占据了重要地位。本文对二次传播形成的影响因素进行研究,在内容上首先对研究背景、相关概念、二次传播对国内短视频发展的影响做了简要叙述,其次通过将SIPS模型带入广告视频的传播中,合理运用SIPS模型的传播特征、兴趣和共鸣的内在规律、双向沟通和及时性响应理论,为短视频的二次传播提供新的思路。