钙结合蛋白calbindin-D28k在人输卵管组织的表达(英文)

本研究旨在探讨育龄妇女输卵管中钙结合蛋白calbindin-D28k(CaBP-D28k)的表达和变化。33例月经规律、有正常生育史的育龄妇女,因子宫肌瘤、子宫腺肌症行子宫切除术(一并切除输卵管),输卵管取材均包括峡部、壶腹部和伞部,按月经周期分为增生早期组6例,增生中期组5例、增生晚期组5例,分泌早期组7例,分泌中期组5例和分泌晚期组5例。采用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应法检测CaBP-D28k在人输卵管组织中的表达。结果显示,人输卵管组织中存在CaBP-D28k蛋白及mRNA表达。CaBP-D28k蛋白表达于输卵管上皮细胞的胞浆中,在月经周期同一时期,输卵管峡部、壶腹部、伞部的表达无明显差别(P>0.05)。在月经周期中,CaBP-D28k蛋白表达在增生早、中期最低,而在增生晚期和分泌早期明显增高(P<0.05),分泌中、晚期显著下降(P<0.05)。CaBP-D28k蛋白阳性表达分布在月经周期中出现再分布,在增生早、中期呈灶状或片状弥散分布在胞浆中,增生晚期和分泌早、中期CaBP-D28k蛋白呈聚集的颗粒状集中在细胞顶部,至分泌晚期则仍呈灶状或弥散状分布;CaBP-D28kmRNA表达也随月经周期发生变化,在增生晚期和分泌早期明显增高(P<0.05)。结果表明,人输卵管组织中存在CaBP-D28k蛋白及mRNA表达,且具有周期性变化。

钙结合蛋白Calbindin-D28K在人健康和龋坏牙齿中免疫定位

目的 :探讨Calbindin -D2 8K(CaB)在牙髓损伤修复过程中的作用。方法 :用免疫组化ABC法观察CaB在健康和龋坏人恒牙牙髓中的表达 ,并用图像分析系统进行半定量分析。结果 :CaB在正常和龋病牙髓中成牙本质细胞、前期牙本质、血管内皮细胞及神经纤维中均有表达。在中龋和深龋组部分牙髓细胞CaB弱阳性表达。中龋组成牙本质细胞数目增多 ,胞浆、胞突及部分胞核强阳性。深龋组前期牙本质层变薄 ,成牙本质细胞空泡变性 ,见单层扁平的成牙本质样细胞 ,胞浆及核染色强阳性。成牙本质细胞浆中CaB含量在中、深龋组明显增加。血管内皮细胞中三组间CaB含量无显著性差异。结论

钙结合蛋白Calbindin-d28k在雌(女)性生殖中的作用

钙结合蛋白Calbindin-d28k(CaBP-d28k)是一种维生素D依赖性钙结合蛋白,参与了多种生殖事件。本文综述了CaBP-d28k的结构特点,在雌(女)性生殖系统的表达、作用及其调节。

人卵巢组织中钙结合蛋白Calbindin-d28k蛋白和基因的表达

目的:分析钙结合蛋白Calbindin-d28k(CaBP-d28k)在人卵巢组织中的表达。方法:收集人卵巢组织标本23例,采用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应法检测CaBP-d28k在人卵巢中的蛋白及mRNA表达。结果:人卵巢中存在CaBP-d28k蛋白及其mRNA表达,CaBP-d28k蛋白定位于卵泡中的卵母细胞、颗粒细胞,以及少量的卵泡膜细胞和黄体中的粒黄体细胞和膜黄体细胞的胞浆中。卵泡各时期CaBP-d28k蛋白阳性表达强度由弱渐强依次为原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡。结论:人卵巢中多种细胞表达钙结合蛋白CaBP-d28k,其表达随卵母细胞成熟而增强。

1,25(OH)_2D_3对培养人牙乳头细胞Calbindin-D28K表达和矿化能力的影响

目的 :研究 1,2 5 (OH) 2 D3 对培养人牙乳头细胞Calbindin -D2 8K(CaB)表达和矿化能力的影响。方法 :用 10 -8mol/L 1,2 5 (OH) 2 D3 矿化液处理长期培养的第 2 8天细胞 2 4h ,用放射免疫和免疫组化方法 ,观察CaB表达和碱性磷酸酶 (ALP)、骨钙蛋白 (OC)的变化。同位素示踪方法观察 1,2 5 (OH) 2 D3 对胞外基质4 5Ca2 + 的影响。结果 :加入1,2 5 (OH) 2 D3 后ALP活性约为对照组的 4倍 ;OC含量约为对照组的 1.5倍。CaB在培养 2 8d牙乳头细胞及其胞外基质中表达 ,而在培养 14d牙乳头细胞中CaB免疫反应阴性。 1,2 5 (OH) 2 D3 可加强CaB表达 ,并使胞外基质对4 5Ca2 + 摄取量增加 1.5倍。结论 :1,2 5 (OH) 2 D3 有促进人牙乳头细胞矿化作用 ,表现在不仅能刺激OC、ALP的活性 ,而且可刺激具有分化表型的牙乳头细胞中CaB的合成 ,增加基质对Ca2 + 的摄取。证实促进牙乳头细胞的钙转导是CaB在矿化过程中的作用之一 ,推测CaB被“俘获”在基质中时有诱导Ca2 + 聚集和直接贮存的作用。

钙结合蛋白Calbindin-D28K在人牙胚发育过程中的表达

目的 :研究人牙胚不同发育时期Calbindin -D2 8K(CaB)的表达 ,以期分析CaB在人牙体硬组织形成过程中的作用 ,为探明人牙齿矿化过程中经细胞钙转导机制提供实验依据。方法 :免疫组化ABC染色。结果 :人牙胚蕾、帽状期成釉器无CaB的表达 ;钟状早期成釉器的内釉细胞及部分牙乳头表面处于分化状态的细胞弱阳性染色 ;钟状晚期成釉器的成釉细胞、成牙本质细胞及部分胞核呈现强阳性染色。结论 :CaB参与了人釉质及牙本质的形成过程 ,并且在人牙胚发育过程中的CaB表达具有时间特异性及细胞特异性。

上皮钙通道基因在维生素D受体和Calbindin-D28k双基因敲除鼠中的变化

目的研究上皮钙通道TRPV5和TRPV6基因与维生素D受体(VDR)和钙结合基因Calbindin-D28k的关系,以及肾钙的重吸收减少是否与TRPV5和TRPV6基因表达减少有关。方法制备VDR和CaBP-D28k双基因敲除小鼠,普通和高钙食物喂养下,检测野生型鼠(WT),CaBP-D28(-/-),VDR(-/-),和VDR(-/-)/CaBP-D28k(-/-)鼠的体重、摄食量及血尿参数值,用实时RT-PCR的方法检测各种鼠肾脏TRPV5和TRPV6的mRNA水平。结果普通饮食下,双基因敲除小鼠尿钙的分泌和血清甲状旁腺激素水平更高。TRPV5和TRPV6两者的表达在CaBP-D28k敲除鼠中均无变化,而在VDR敲除鼠和双基因敲除鼠中下调的幅度相当。高钙饮食下,VDR及双基因敲除小鼠的血离子钙水平正常。所有小鼠这两个基因的表达普遍降低,而在VDR和双基因敲除鼠中的表达更低。结论这些结果证实了上皮钙通道基因受钙和维生素D的调节,CaBP-D28k的缺失对两者无影响。肾钙的重吸收减少与TRPV5和TRPV6基因表达无明显关系。

辛伐他汀诱导K562细胞凋亡过程中细胞内钙离子浓度、Calbindin-D28K和calpain基因的变化

目的:观察辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时细胞内Ca2+浓度、Ca2+调节蛋白(Calbindin-D28K,D28K)和Ca2+激活蛋白(calpain)基因变化,以探讨K562细胞凋亡机制。方法:常规培养细胞24 h,20μmol/L辛伐他汀处理K562细胞48 h;流式细胞技术检测细胞凋亡率和Ca2+浓度,PCR技术检测D28K和calpain基因。结果:20μmol/L辛伐他汀作用K562细胞24、48、72 h凋亡率改变分别为(6.10±0.35)%、(14.15±0.42)%、(30.70±0.65)%,随药物作用时间延长细胞凋亡率增加;辛伐他汀作用K562细胞12、24、48、72 h,游离钙荧光强度变化为52.93±2.85、19.63±1.56、13.81±1.05、7.84±0.98,各处理组荧光强度与对照组相比升高(P<0.05);与相同时间对照组比较,calpain和D28K基因分别在辛伐他汀作用K562细胞24 h和48 h后上调(P<0.05)。结论:辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时细胞内Ca2+浓度显著升高,细胞内Ca2+浓度调节蛋白D28K和calpain基因上调,这些改变可能是辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的机制之一。

MPTP诱导的帕金森病鼠脑内Calbindin-D28k表达的免疫组化研究

目的探讨Calbindin-D28k在帕金森病发病过程中的作用。方法健康C57BL/6J小鼠采用MPTP腹腔注射建立帕金森病动物模型,动物存活期分别为14d和28d。应用ABC免疫组化结合图像分析技术观察Calbindin-D28k在不同脑区的表达。结果帕金森病鼠脑内黑质和腹侧被盖区Calbindin-D28k的表达在28d比对照组增加,造模后海马CA1区Calbindin-D28k的表达在14d和28d两个时间点均比对照组增加;而在脑皮质Calbindin-D28k的表达在造模14d和28d均较对照组降低。结论不同脑区神经元可能由于Calbindin-D28k含量的不同而对MPTP的敏感性不同;帕金森病鼠不同脑区Calbindin-D28k表达的变化,可能是脑内神经元启动自我保护机制引起Calbindin-D28k在不同脑区重新分配,以达到保护损伤神经元的目的。

Calbindin-D28k与肌动蛋白在人健康及龋坏牙齿中的分布

目的 探讨Calbindin -D2 8k与肌动蛋白在健康和龋坏人恒牙中的分布相关性及意义。方法 用免疫组化方法分别检测Calbindin -D2 8k与肌动蛋白在正常、中龋和深龋人牙中的表达并观察比较。结果 正常组Calbindin -D2 8k在前期牙本质远髓 2 / 3区域染色阳性 ,肌动蛋白在成牙本质细胞及位于矿化牙本质中的细胞突呈阳性 ;中龋组位于前期牙本质中的成牙本质细胞突Calbindin -D2 8k与肌动蛋白均呈强阳性 ,Calbindin -D2 8k在病损区前期牙本质全层呈阳性且较正常组明显增强 ;深龋组Calbindin -D2 8k染色部位主要位于成牙本质细胞核。结论 在第三期牙本质形成活跃的成牙本质细胞中Calbindin -D2 8k与肌动蛋白的分布变化具有一致性 ,均与牙本质基质的分泌有关。

含Calbindin-D28K mRNA的神经元在大鼠前脑中的分布—原位杂交组织化学法观察

本实验应用原位杂交组织化学技术,利用同位素标记的寡核苷酸探针,对大鼠前脑含Calbindin-D28 K mRNA的神经元的分布状况进行了详细的观察。结果发现在不同脑区或核团中,标记神经元的数量和标记强度各不相同。某些部位含许多强阳性神经元,如:前嗅核、大脑皮质、尾壳核、缰核、下丘脑、齿状回及中脑和杏仁复合体中的部分核团;然而,在另外一些脑区中,标记细胞呈中等阳性,如:嗅球的球旁细胞、盖带、梨状区内核、海马的CA1区中的锥体细胞层以及丘脑和杏仁核复合体中的部分核团。少数脑区中的标记细胞呈弱阳性,且数量较少,如;嗅结节、隔区、斜角带核等。这些结果表明含Calbindin-D28K mRNA的神经元在大鼠前脑中具有区域特异性分布特点,从而提示Calbindin-D28K在神经系统中的某些部位可能具有重要的作用。

Calbindin-D28k在出生前人海马本部及下托神经元的表达及其变化

本实验采用免疫组织化学方法研究了１３～３８ 周人胎儿海马本部及下托含Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 神经元的分布和发育。结果表明：在１３～１４ 周时，许多含Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 锥体细胞可见于ＣＡ１ 区锥体细胞层中部及深部，随着胎龄增大，ＣＡ１ 区含Ｃａｌ－ｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 锥体细胞的数量及密度逐渐下降，最终消失，并且这种下降及消失首先从含Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 锥体细胞区浅部开始，然后向深部推进；在１３～２８ 周期间，ＣＡ２ 和ＣＡ３ 区也有许多含Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 锥体细胞，但至３２ 周以及其后，ＣＡ３ 和ＣＡ２ 区则不见含Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 锥体细胞，仅在ＣＡ２ 与ＣＡ１ 交界区见到少量弱染的含Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 锥体细胞。此外，在２８～３８ 周期间，ＣＡ３ 和ＣＡ２ 区锥体细胞层周围可见许多含Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 的苔藓纤维，其密度随胎龄增大而增加。１４～３８ 周期间，许多含Ｃａｌｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 的锥体细胞也出现于下托锥体细胞层全层及前下托锥体细胞层浅部（细胞岛区）及中部。这些区域含Ｃａｌ－ｂｉｎｄｉｎ－Ｄ２８ｋ 锥体细胞的数量及染色强度在１４～２４

小鼠肾发育中Calbindin-D28k的定量分析

目的观察Calbindin-D28k在小鼠肾发生发育中的表达规律。方法应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾Calbi-ndin-D28k的表达进行定量检测。结果胚龄12 d Calbindin-D28k表达量极低;胚龄14 d到胚龄16 d表达量增加;胚龄16 d到胚龄18 d表达量无显著性变化;胚龄18 d到生后7 d表达量明显增加;生后7 d到生后14 d,Calbindin-D28k表达量减少。生后14 d到生后40 d,Calbindin-D28k表达量无显著性差异。结论从胚龄12 d到生后7 d期间Calbindin-D28k表达的逐渐增强与小鼠肾钙离子转运能力的完善可能有一定的关系。

CALBINDIN-D28K在神经系统中的分布及功能

众所周知,钙离子(Ca^(2+))是生物体内一种具有重要功能的二价阳离子。在神经系统中,Ca^(2+)参与许多重要的活动过程,加:某些神经递质的合成及释放、快速轴浆运输及膜的兴奋性的变化、甚至长时程增强(Long-term potentiation)及记忆的形成过程等。在这些活动过程中,Ca^(2+)主要是通过参与细胞内外及细胞内的信息传递而起作用的。然而,Ca^(2+)的这一作用往往需要一种蛋白质的介导或调节。

Calbindin-D28k mRNA在帕金森病小鼠脑内的表达变化

目的 探讨钙结合蛋白D28k(CaBP)在帕金森病(PD)发病机制中的作用。方法 将1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)按30mg/kg体重腹腔注射给C57BL小鼠,建立PD鼠模型。用反转录PCR及原位分子杂交方法检测PD鼠和正常鼠脑内CaBP mRMA的表达变化。结果 与正常鼠对比,CaBP mRNA在PD鼠的海马、纹状体、黑质等脑区的表达水平明显下调。结论 CaBP可能通过对特定脑区神经元的保护作用来抵御PD的发生。

小鼠Calbindin-D28k基因体外表达及其抗凋亡作用的研究

目的:研究钙结合蛋白D28k(calbindin-D28k,CaBP)体外表达及其对神经元细胞抗凋亡作用。方法:RT-PCR从小鼠脑组织中扩增出小鼠CaBP的cDNA片段;重组构建pTH-CB质(pcDNA3-TH-CB),脂质体包裹pTH-CB质粒转染MN-9D细胞(多巴胺能杂交瘤神经元细胞);RT-PCR、免疫沉淀法检测CaBP的cDNA在细胞内表达情况;Hoechst染色、Caspase-3活性检测、AnnexinV/PI法对CaBP过表达的抗凋亡作用进行检测。结果:小鼠脑组织RT-PCR扩增出785bp条带,测序结果与Genebank中报道完全一致。脂质体包裹重组构建pTH-CB质粒转染MN-9D细胞后,转染pTH-CB质粒的MN-9D细胞中,CaBP的mRNA表达量和CaBP水平显著高于转染pc-DAN3组和正常MN-9D细胞组(P<0.05),3种细胞凋亡检测方法结果显示,CaBP过表达的细胞抗凋亡能力显著提高。结论:体外克隆CaBP的cDNA能在细胞内表达,过表达的CaBP通过抑制细胞的caspase-3活性,起抗凋亡作用。

鸡脊髓背角胶状质中calbindin-D28k阳性终末的超微结构及与substance P阳性终末之间的联系

目的观察鸡脊髓背角胶状质中calbindin-D28k(CB)阳性终末的超微结构及其与含有substance P(SP)中央末梢之间的联系。方法应用免疫电镜技术观察鸡脊髓背角胶状质中CB阳性终末的超微结构,并应用激光共聚焦显微镜观察鸡脊髓背角胶状质中CB和SP阳性突触小球中央末梢之间的关系。结果电镜下观察:1)突触小球中含有心小泡的中央末梢呈CB免疫阳性;2)突触小球内或外的部分含小泡的树突呈CB免疫阳性;以及3)突触小球外的部分轴突呈CB免疫阳性。在突触结构内,CB免疫阳性反应物主要分布于突触后膜上。免疫荧光双标记法显示,SP阳性的含有心小泡的中央末梢呈CB阳性。结论突触小球的中央末梢中CB与SP共存,提示CB可能通过其钙离子缓冲作用,参与脊髓的痛觉调制。

大鼠Calbindin-D28K样阳性脊髓投射神经元亚群分布方式

目的 研究大鼠红核 脊髓投射神经元Calbindin D2 8K样免疫反应 (CaBP LI)表现形式及其分布特点。方法 采用霍乱毒素B亚单位结合胶体金 (CB Au)逆行标认神经元复合免疫细胞化学反应的非荧光双标方法。结果 红核 脊髓投射神经元表现为两种亚型 :一种为CaBP LI阴性神经元 ;另一种为CaBP LI阳性神经元。两种神经元在红核具有特殊的分布方式 ,头侧水平CB Au标认的红核 脊髓投射神经元均呈CaBP LI阴性 ,向尾侧CaBP LI阳性神经元数目逐渐增多。脑室注射L型钙离子通道激动剂BayK86 4 4仅引起CaBP LI免疫反应强度增加 ,并未改变两种神经元的分布方式 ,头侧CB Au标认的红核 脊髓投射神经元仍表现CaBP LI阴性。结论 大鼠红核 脊髓投射神经元的CaBP LI阳性和CaBP LI阴性两种亚型及其分布特点说明 ,这些神经元的性质并非均一 ,并可能与红核 脊髓投射神经元对钙超载具有不同的耐受性有关。

Calbindin-D28k在小鼠肾脏输尿管芽的表达规律和定位

目的观察Calbindin-D28k在小鼠肾脏输尿管芽的表达规律和定位。方法应用免疫组织化学技术结合图像分析方法对各组小鼠肾脏输尿管芽Calbindin-D28k的表达进行观察。结果胚龄12d,Calbindin-D28k在输尿管芽微弱表达;胚龄14d在输尿管芽分支表达增强。胚龄16d在输尿管芽壶腹表达强烈,且在S小体与输尿管芽壶腹连接处表达。此后Calbindin-D28k表达逐渐增强。结论在小鼠肾脏发育过程中,Calbindin-D28k在胚龄12d胎鼠肾脏输尿管芽微弱表达,之后随胚(日)龄增加其表达量逐渐增加,表达部位为输尿管芽上皮细胞胞浆内。

Calbindin-D28k在胚胎期小鼠肾组织的表达

目的观察Calbindin-D28k在胚胎发育不同时期小鼠肾组织中的表达规律,探讨Calbindin-D28k在胚胎小鼠肾发育中的作用。方法应用免疫荧光技术及蛋白印迹技术(Western blotting)对胚龄10、12、14、16、18 d小鼠肾组织中Calbindin-D28k的表达进行定性观察和半定量分析。结果Calbindin-D28k在胚龄12 d胎鼠肾输尿管芽开始微弱表达,之后随胚龄增加其表达量逐渐增加。胚龄12 d在输尿管芽表达;胚龄14 d在输尿管芽Y型分支表达;胚龄16 d在输尿管芽壶腹表达,且在S小体与输尿管芽壶腹连接处有少量表达;胚龄18 d定位于连接小管、皮质集合管上皮细胞胞浆内。结论推测Calbindin-D28k可能对胚胎小鼠肾集合管系的发育有一定作用。