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Development of a Detection Method for Assaying Calf Intestine Alkaline Phosphatase Activity
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作者 Lin Lin Lai Xiaofang +4 位作者 Li Yi Liu Yixiong Lan Quanxue Lai Xintian Yang Guowu 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2015年第3期152-155,166,共5页
[ Objective] This study was to develop a detection method for assaying calf intestine alkaline phasphatase activity in scientific research. [ Method ] By simulating the conditions and buffers for assaying calf intesti... [ Objective] This study was to develop a detection method for assaying calf intestine alkaline phasphatase activity in scientific research. [ Method ] By simulating the conditions and buffers for assaying calf intestine alkaline phosphatase used in the scientific research, the parameters influencing substmte concentration, reaction duration, eoloration time and buffer pH were optimized. [ Result] The activity of alkaline phosphatase detected varied hugely among different buffers, and potassium ferricyanide solution added with boracic acid achieved the stable coloration. The optimal water bath time was determined as 10 rain, and the substrate concentration was optimized as 0.04 moL/L. The increasing temperature did not have a large influence on low temperature enzymatic activity while did on high coneentration enzymatic activity. When the buffer pH was 7.0 - 8.0, the detection stability of alkaline phosphatase could be maintained well The ion intensity of buff- er had little effects on alkaline phasphatase activity. [ Conclusion] A detection method for assaying calf intestine alkaline phosphatase activity in scientific research was successfully developed in this study. 展开更多
关键词 alkaline phosphatase calf intestine Activity detection Ultraviolet spectrophotomctry Scientific research
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金属离子对牛小肠碱性磷酸酶的影响 被引量:3
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作者 张营 余同 +1 位作者 赵欣平 高举 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第6期835-838,842,共5页
经Tris-HCl缓冲液抽提,硫酸铵分级分离沉淀,2次DEAE-32柱层析和SephadexG-150凝胶过滤,从牛小肠中得到碱性磷酸酶(ALP),提纯倍数为50.69倍,比活为48.87U/mg,酶液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测呈现单一条带。该酶... 经Tris-HCl缓冲液抽提,硫酸铵分级分离沉淀,2次DEAE-32柱层析和SephadexG-150凝胶过滤,从牛小肠中得到碱性磷酸酶(ALP),提纯倍数为50.69倍,比活为48.87U/mg,酶液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测呈现单一条带。该酶催化底物对硝基苯磷酸二钠(pNPP)水解反应的最适pH值为9.7,最适温度为45℃。研究了多种金属离子对牛小肠碱性磷酸酶活性的影响,结果表明:一价金属离子Na+、K+对酶活力没有影响;不同的二价金属离子对酶的影响不同,过渡态金属离子中,Ni2+、Co2+对酶的活力影响不大,Mg2+、Ca2+、Mn2+对酶有不同程度的激活作用,Zn2+、Cu2+对酶有抑制作用;重金属离子Pb2+、Cd2+对酶的活力起抑制作用。 展开更多
关键词 牛小肠 碱性磷酸酶 金属离子
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小牛肠碱性磷酸酶活性检测方法的建立
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作者 赖晓芳 林霖 +4 位作者 李意 刘奕雄 兰全学 赖心田 杨国武 《安徽农业科学》 CAS 2014年第18期5870-5873,共4页
[目的]建立适用于科研用小牛肠碱性磷酸酶活性的检测方法。[方法]通过模拟科研中小牛肠碱性磷酸酶的使用条件及缓冲液,并研究不同底物浓度、反应时间、显色时间、缓冲液pH等对酶活性检测的影响。[结果]使用不同缓冲液对酶活性进行检测... [目的]建立适用于科研用小牛肠碱性磷酸酶活性的检测方法。[方法]通过模拟科研中小牛肠碱性磷酸酶的使用条件及缓冲液,并研究不同底物浓度、反应时间、显色时间、缓冲液pH等对酶活性检测的影响。[结果]使用不同缓冲液对酶活性进行检测,其测量值差异较大。若使用添加硼酸的铁氰化钾溶液,则可以实现颜色的稳定显示。最佳水浴时间为10min,最佳底物浓度为0.04mol/L。随着温度的增加,对低浓度酶活性的影响不大,但对高浓度酶活性的影响逐渐增大。当缓冲液pH为7.O~8.0时,能够较好维持酶活性的稳定性。缓冲液粒子强度对酶活性的影响不大。[结论]成功建立了科研用小牛肠碱性磷酸酶的活性检测方法。 展开更多
关键词 碱性磷酸酶 小牛肠 活性检测 紫外分光光度法 科研
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酶法脱磷酸化修饰酪蛋白酸钠及其体外模拟消化
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作者 胡锦华 王园园 +1 位作者 刘大松 周鹏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期35-39,共5页
以小牛肠碱性磷酸酶修饰酪蛋白酸钠(sodium caseinate,SC)为研究对象,制备得到4种磷酸化水平的SC。采用尿素电泳、微波消解-紫外可见吸收光谱和超高效液相-电喷雾-离子化-飞行时间质谱等表征手段,从不同角度鉴定了SC的脱磷酸化程度,并... 以小牛肠碱性磷酸酶修饰酪蛋白酸钠(sodium caseinate,SC)为研究对象,制备得到4种磷酸化水平的SC。采用尿素电泳、微波消解-紫外可见吸收光谱和超高效液相-电喷雾-离子化-飞行时间质谱等表征手段,从不同角度鉴定了SC的脱磷酸化程度,并在模拟婴幼儿胃、肠液中考察了不同的脱磷酸化程度对SC体外消化的影响。结果表明,SC脱磷酸化程度越高,在模拟胃液中分散程度越均匀,降解速度越快;并且在模拟肠液中进一步降解时所产生的多肽分子量越小,消化性越好。 展开更多
关键词 酪蛋白酸钠(SC) 小牛肠碱性磷酸酶(CAP) 脱磷酸化水平 模拟婴幼儿胃肠液消化 超高效液相-电喷雾-离子化-飞行时间质谱
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蛋白质磷酸化和脱磷酸化对DNA拓扑异构酶Ⅰ活力调节的研究 被引量:4
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作者 刘清泉 白龙川 +1 位作者 颜卉君 吳国利 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第4期495-499,共5页
本文以小鼠正常肝和H_(22a)腹水型肝癌细胞为材料,从中分离出纯度较高的拓扑异构酶Ⅰ和细胞质酪氨酸蛋白激酶(TPK)来研究磷酸化和脱磷酸化对拓扑异构酶Ⅰ活力的调节。结果表明TPK能活化拓扑异构酶Ⅰ。另外还发现PKA和碱性磷酸酶(CIP)能... 本文以小鼠正常肝和H_(22a)腹水型肝癌细胞为材料,从中分离出纯度较高的拓扑异构酶Ⅰ和细胞质酪氨酸蛋白激酶(TPK)来研究磷酸化和脱磷酸化对拓扑异构酶Ⅰ活力的调节。结果表明TPK能活化拓扑异构酶Ⅰ。另外还发现PKA和碱性磷酸酶(CIP)能分别活化和抑制拓扑异构酶Ⅰ。 展开更多
关键词 DNA 拓扑异构酶I 蛋白 磷酸化
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