CaSR抑制剂Calhex231通过PTH-AR途径参与创伤失血性休克大鼠血管低反应性的调节

目的:探讨钙敏感性受体(CaSR)抑制剂Calhex231(Cal)是否通过甲状旁腺素(PTH)-肾上腺素受体(AR)途径参与创伤失血性休克大鼠血管低反应性的调节。方法:检测Cal对创伤失血性休克大鼠血PTH水平的影响,并观察外源给予PTH对正常和休克大鼠血压的影响;Western blot法检测Cal对大鼠肠系膜上动脉(SMA)以及外源给予PTH对大鼠原代血管平滑肌细胞(VSMC)中2种AR亚型(α1-AR和β1-AR)蛋白表达水平的影响。结果:创伤失血性休克后大鼠血PTH水平显著升高,Cal治疗能够显著降低血PTH水平(P<0.01)。外源给予PTH能显著降低正常大鼠血压。在组织水平上,Cal能提高创伤失血性休克大鼠SMA中α1-AR蛋白表达水平(P<0.05);在细胞水平上,外源给予PTH能使大鼠原代VSMC中α1-AR蛋白表达水平降低,Cal能拮抗PTH降低α1-AR蛋白表达的作用(P<0.05)。结论:CaSR抑制剂Cal可通过降低血PTH水平、上调血管α1-AR蛋白表达水平而发挥改善休克后血管低反应性的作用。

钙敏感性受体抑制剂Calhex231对创伤失血性休克大鼠的保护作用

目的探讨钙敏感性受体（CaSR）抑制剂Calhex231对创伤失血性休克大鼠的保护作用。方法144只大鼠按随机数字表法分为6组：正常组、休克组、乳酸林格液（LR）复苏组、LR＋Calhex2310．1，1，5mg／kg复苏组，用于大鼠存活情况（每组16只）和血流动力学检测（每组8只）。64只大鼠也按随机数字表法分为4组：正常组、休克组、LR复苏组、LR＋Calhex2311mg／kg复苏组，一半用于器官血流量和肠系膜上动脉血管反应性检测（每组8只），另一半用于检测肠系膜微动脉血管反应性（每组8只）。建立创伤失血性休克大鼠模型后，休克组不复苏，LR复苏组输入2倍失血量的LR，LR＋Calhex231各组先给予1倍失血量的LR输注，然后把Calhex231加入另外1倍失血量的LR中输注。从复苏开始观察24h存活情况，输液结束后立即结扎缝合；于休克前、休克末、复苏后1，2h检测血流动力学指标[平均动脉压（MAP）、左室收缩压（LVSP）、左室压力最大上升／下降速度（±ap／dtmax）]；复苏后2h检测重要器官（肝、肾）血流量及血管反应性。结果休克组在模型完成后9h内全部死亡，LR复苏组的存活情况与休克组比较稍有改善（P〉0．05），LR＋Calhex2311mg／kg、5mg／kg复苏组24h存活率和存活时间明显高于LR复苏组（P〈0．05）。LR＋Calhex231各复苏组的血流动力学指标均高于LR复苏组，其中LR＋Calhex2311mg／kg复苏组的效果最为明显（P〈0．01），MAP、LVSP、±ap／dtmax分别恢复到正常水平的64．9％、82．4％、89．8％、77．8％；同时，LR＋Calherd2311mg／kg复苏组器官（肝、肾）血流量明显增加（P〈0．01），肝脏和肾脏的血流量分别从休克的57．2％、41．0％升高到108．7％、95．1％；LR＋Calhex2311mg／kg复苏组肠系膜上动脉及其微动脉血管的收缩反应性也明显提高（P〈0．01）。结论对于创伤失血性休克大鼠，钙敏感性受体抑制剂Calhex231可提高血管反应性，改善血流动力学和重要器官血流量，起到保护心血管功能、降低创伤失血性休克后死亡率的作用。

细胞外钙受体调节人脐静脉内皮细胞游离钙离子浓度的研究

为探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)游离钙离子浓度是否受细胞外钙受体(CaR)的调节。采用Westernblot及RT-PCR技术检测CaR在HUVEC中蛋白及mRNA表达。使用CaR激动剂精胺,负性变构调节剂Calhex231,通过钙荧光探针(Fura-2/AM)负载HUVEC检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)。结果显示:(1)HUVEC中有CaR的表达。(2)在Fura-2/AM负载HUVEC中加入精胺刺激,[Ca2+]i为△ratio=0.24±0.01,先加入Calhex231作用1min后再加入Calhex231+精胺刺激,[Ca2+]i为△ratio=0,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。由此可知,CaR调节HUVEC游离钙离子浓度。