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M1巨噬细胞培养液对ER阳性乳腺癌细胞上皮-间质转换的影响及Calpain的介导作用
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作者 詹云惠 金爱 王旭东 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第1期25-33,共9页
目的 探讨M1巨噬细胞对乳腺癌细胞上皮细胞-间充质转换(EMT)的影响及钙蛋白酶(Calpain)在其中的介导作用。方法 以人乳腺癌细胞系雌激素受体阳性(ER+)细胞MCF-7、T47D及雌激素受体阴性(ER-)细胞MDA-MB-231为模型细胞,实验分为MCF-7细胞... 目的 探讨M1巨噬细胞对乳腺癌细胞上皮细胞-间充质转换(EMT)的影响及钙蛋白酶(Calpain)在其中的介导作用。方法 以人乳腺癌细胞系雌激素受体阳性(ER+)细胞MCF-7、T47D及雌激素受体阴性(ER-)细胞MDA-MB-231为模型细胞,实验分为MCF-7细胞及T47D细胞的RPMI-1640组(RPMI-1640纯培养基培养)、M1巨噬细胞条件培养液培养组(M1-CM组)、M1-CM+Calp组[M1-CM联合Calpain抑制剂Calpeptin(50μmoL/L)处理]、M1-CM+CI-Ⅲ组[M1-CM联合Calpain抑制剂Calpain inhibitorⅢ(50μmoL/L)处理],MDA-MB-231细胞的RPMI-1640组、M1-CM组;采用划痕实验和侵袭实验检测各组中MCF-7细胞、T47D细胞、MDA-MB-231细胞的迁移能力及MCF-7细胞的侵袭能力,采用qRT-PCR检测M0巨噬细胞、M1巨噬细胞趋化因子受体7CCR7、趋化因子配体10(CXCL10)及白细胞介素-12(IL-12) mRNA表达水平,采用Western blot实验检测MCF-7细胞、T47D细胞及MDA-MB-231细胞中上皮-钙黏素(E-cad)、纤连蛋白(FN)、波形蛋白(Vim)蛋白水平表达。结果 与RPMI-1640组相比,M1-CM组ER+细胞MCF-7及T47D迁移能力增强(P<0.05),MCF-7细胞侵袭能力增强(P<0.05);ER+细胞MCF-7及T47D E-cad蛋白表达水平下调,而FN、Vim表达上调(P<0.05),而ER-细胞MDA-MB-231中只有E-cad表达上调(P<0.05);与M1-CM组相比,ER+细胞MCF-7及T47D的M1-CM+Calp组、M1-CM+CI-Ⅲ组中M1-CM诱导的ER+乳腺癌细胞EMT效应被逆转(P<0.05)。结论 M1巨噬细胞条件培养液可以促进ER+细胞人乳腺细胞的EMT,但对ER-细胞EMT无明显影响,其促进ER+乳腺癌细胞EMT信号机制可能与Calpain通路有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 M1巨噬细胞 细胞侵袭 上皮细胞-间充质转换 钙蛋白酶 雌激素受体
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针刀对肌性斜颈模型兔胸锁乳突肌中calpain-1、CD45、MMP-2、TIMP-2蛋白表达的影响
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作者 高国莉 《西部中医药》 2024年第4期13-16,共4页
目的:应用肌性斜颈兔动物模型,探讨针刀治疗肌性斜颈的作用机制及意义。方法:无水酒精注射制备动物肌性斜颈兔子模型后,选取模型兔子48只,随机分为正常组、模型组、针刀组、按摩组,每组12只。分别给予各组对应治疗,治疗2个月后各组分别... 目的:应用肌性斜颈兔动物模型,探讨针刀治疗肌性斜颈的作用机制及意义。方法:无水酒精注射制备动物肌性斜颈兔子模型后,选取模型兔子48只,随机分为正常组、模型组、针刀组、按摩组,每组12只。分别给予各组对应治疗,治疗2个月后各组分别取部分胸锁乳突肌制作标本,免疫组化法观察钙蛋白酶1(calpain-1)、分化抗原决定簇45(CD45)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子2(tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)在各组肌纤维中的表达情况。结果:与正常组比较,其余各组实验动物明显出现颈部活动受限、斜颈、头颈不对称症状,而治疗结束后,针刀组和按摩组实验动物颈部活动受限改善,无明显头颈不对称症状。calpain-1、CD45、TIMP-2的表达,与正常组比较,模型组、按摩组上调(P<0.01);与模型组比较,针刀组、按摩组下调(P<0.01);与针刀组比较,按摩组上调(P<0.01)。MMP-2表达,与正常组比较,模型组下调(P<0.01),与模型组比较,针刀组、按摩组上调(P<0.05)。结论:针刀治疗肌性斜颈效果显著,其作用机制可能与减少calpain-1、CD45、TIMP-2表达,增加MMP-2表达有关。 展开更多
关键词 肌性斜颈 胸锁乳突肌 动物模型 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶抑制因子2 分化抗原决定簇45 钙蛋白酶1
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雌二醇通过Calpain 2有限水解integrinβ4促进乳腺癌SK-Br3细胞迁移浸润的相关机制
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作者 杨琼 王婧雅 +6 位作者 王璐 周培富 何可群 严敏 毛大华 陈腾祥 张金娟 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第2期147-152,共6页
目的研究雌二醇通过calpain 2/integrinβ4促进人表皮生长因子受体(Her2)阳性的乳腺癌SK-Br3细胞迁移和浸润的相关机制。方法常规培养乳腺癌SK-Br3细胞,calpain 2的特异性抑制剂或雌二醇(E2)处理细胞,并对汇合度为60%(低密度)和90%(高密... 目的研究雌二醇通过calpain 2/integrinβ4促进人表皮生长因子受体(Her2)阳性的乳腺癌SK-Br3细胞迁移和浸润的相关机制。方法常规培养乳腺癌SK-Br3细胞,calpain 2的特异性抑制剂或雌二醇(E2)处理细胞,并对汇合度为60%(低密度)和90%(高密度)的细胞进行培养;通过细胞划痕实验检测SK-Br3细胞的迁移能力,Transwell-Matrigel实验检测SK-Br3细胞的浸润能力,免疫细胞化学技术和激光共聚焦扫描显微镜观察integrinβ4和Her2的表达与共定位,免疫共沉淀技术检测integrinβ4和Her2的相互作用,Western blot技术检测相关蛋白或蛋白片段的表达及蛋白磷酸化水平。结果划痕和浸润实验显示,相对于对照组,Calpain2抑制剂处理的SK-Br3细胞迁移和浸润能力减弱(P<0.05);免疫细胞化学成像显示,Her2和integrinβ4的共定位主要在细胞膜上,在胞浆也有少量共定位,用calpain inhibitorⅣ处理后,Her2和integrinβ4的表达减少,共定位也明显减少;免疫共沉淀实验发现,在Her2免疫沉淀物中可检测到integrinβ4,在integrinβ4免疫沉淀物中可检测到Her2;给予calpain inhibitorⅣ处理,可以减少Her2和integrinβ4之间的免疫共沉淀;Western blot检测发现,高密度培养乳腺癌SK-Br3细胞中的integrinβ4比低密度培养的水解程度高;在高密度培养条件下,E2可以促进这些integrinβ4水解片段的产生,上调calpain 2的表达,也伴随着integrinβ4水解程度的增加,同时使Src的Y418位点的磷酸化水平增高。结论高密度培养条件下,E2可通过上调和激活calpain2,促进integrinβ4的有限水解,促进integrinβ4和Her2的相互作用,磷酸化激活Src,促进SK-Br3细胞的迁移和浸润。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 雌二醇 人表皮生长因子受体2 钙激活中性蛋白酶2
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心房颤动病人IL-1β、Calpain-2水平与心脏结构重构的相关性研究 被引量:2
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作者 卢园园 李浩宇 +4 位作者 耿嘉逸 雷思思 刘晨阳 康品方 张宁汝 《蚌埠医学院学报》 CAS 2023年第1期95-99,共5页
目的:探讨心房颤动(房颤)病人血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、钙蛋白酶-2(Calpain-2)表达水平及与心脏结构重构的相关性。方法:选取确诊为房颤的病人150例为观察组,依据2020年ESC/EACTS房颤诊断和管理指南将其分为非阵发性房颤组和阵发... 目的:探讨心房颤动(房颤)病人血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、钙蛋白酶-2(Calpain-2)表达水平及与心脏结构重构的相关性。方法:选取确诊为房颤的病人150例为观察组,依据2020年ESC/EACTS房颤诊断和管理指南将其分为非阵发性房颤组和阵发性房颤组;选取同时段健康体检者120名作为对照组。分别检测血清IL-1β、Calpain-2以及超声心动图中左心室舒张期内径(LVDd)、左心房内径(LAD)、左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(FS)等指标,比较3组不同指标是否存在差异;运用Pearson相关性分析血清IL-1β、Calpain-2与超声心动图检查结果的相关性;采用二元logistic回归分析,探寻房颤的危险因素。结果:观察组中IL-1β、Calpain-2含量显著高于对照组(P<0.05),而且非阵发性房颤病人明显高于阵发性房颤病人(P<0.05)。在超声心动图指标中非阵发性房颤组LAD、LVDd均高于阵发性房颤组以及对照组(P<0.05),LVEF、FS均低于阵发性房颤组及对照组(P<0.05)。二元logistic回归分析显示IL-1β、Calpain-2是房颤发生的危险因素。Spearman相关性分析显示IL-1β、Calpain-2与LAD、LVDd呈正相关关系(P<0.01),而与LVEF、FS呈显著负相关关系(P<0.01)。结论:IL-1β、Calpain-2与LAD、LVDd呈正相关关系,参与了心脏结构重构过程,进而促进了房颤的发生与发展。 展开更多
关键词 心房颤动 白细胞介素-1Β 钙蛋白酶-2 心脏结构重构
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Changes in Urinary Metabolomics of Female Kashin-Beck Disease Patients in Qinghai-Tibet Plateau,China 被引量:1
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作者 LI Qiang ZHOU Xin +8 位作者 XUE Hong Mei WANG Jian Ling LI Ji Quan ZHAO Yan Mei CHAO Jie CHEN Yang Yang XU Li Qing ZHAO Zhi Jun WANG Li Hua 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2023年第6期537-541,共5页
Kashin-Beck disease(KBD)is a chronic,endemic,degenerative osteoarthropathic condition that is predominantly found in China's Mainland.KBD is a progressive disease,and the signs and symptoms become more severe in a... Kashin-Beck disease(KBD)is a chronic,endemic,degenerative osteoarthropathic condition that is predominantly found in China's Mainland.KBD is a progressive disease,and the signs and symptoms become more severe in adulthood owing to the continuous development of lesions in the joint cartilage[1].Although childhood KBD has largely been controlled,adult KBD is an important health concern in rural regions.Unfortunately,in the last century,many adult KBD patients still remain during serious epidemics. 展开更多
关键词 metab PLATEAU MAINLAND
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Calpain-1通过诱导内质网应激加速肺动脉高压的内皮细胞凋亡 被引量:5
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作者 孙鹤宁 鲁美丽 +3 位作者 田小雪 邓海艳 刘欢 王洪新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期723-730,共8页
目的 探究calpain-1通过内质网应激促进低氧诱导肺动脉高压肺动脉内皮细胞凋亡的作用机制。方法 C57BL/6野生型(WT)和calpain-1基因敲除小鼠(KO)低氧仓中(10%O2)饲养4周诱导肺动脉高压模型,分为WT常氧对照(WT Con)、WT低氧模型(WT Hypox... 目的 探究calpain-1通过内质网应激促进低氧诱导肺动脉高压肺动脉内皮细胞凋亡的作用机制。方法 C57BL/6野生型(WT)和calpain-1基因敲除小鼠(KO)低氧仓中(10%O2)饲养4周诱导肺动脉高压模型,分为WT常氧对照(WT Con)、WT低氧模型(WT Hypoxia)、KO常氧对照(KO Con)和KO低氧(KO Hypoxia)4组。HPAECs在低氧(3%O2)培养箱中培养24 h模拟体内肺高压微环境,分为对照(Con)、模型(Hypoxia)、低氧+MDL28170(Hypoxia+MDL)和低氧+4-PBA(Hypoxia+4-PBA)4组。应用HE染色、TUNEL、免疫组化、免疫荧光、流式、Western blot检测组织形态、细胞凋亡,calpain-1,pPERK,CHOP,GRP78,caspase-12,caspase-3,Bax, Bcl-2表达水平。结果 与WT Con组相比,WT Hypoxia组小鼠血流动力学指数、肺组织中血管壁厚度比率和血管壁面积比率明显升高,calpain-1上调、内质网应激加重(pPERK,CHOP,GRP78升高)、内皮细胞凋亡增多,caspase-12、caspase-3、Bax增加,Bcl-2降低,而KO Hypoxia组逆转上述指标异常表达,凋亡和内质网应激减轻。与HPAECs Con组相比,Hypoxia组calpain-1上调,细胞凋亡、内质网应激明显,MDL28170处理后,上述效应逆转。4-PBA处理Hypoxia组细胞,calpain-1水平变化无意义但凋亡相关蛋白受到抑制。结论 Calpain-1通过促进内质网应激加速低氧诱导肺动脉高压肺动脉内皮细胞的凋亡。 展开更多
关键词 calpain-1 低氧 肺动脉高压 肺动脉内皮细胞 内质网应激 凋亡
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Metabolomic Profiling of Mice Exposed toα-amanitin Using Ultra-performance Liquid Chromatography Quadrupole Time-of-flight Tandem Mass Spectrometry
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作者 LI Lei ZHENG Chong +11 位作者 YE Jian Fang ZHU Kai ZHOU Yi Bing LIU Jia GAO Ming WU Yu Tian LIU Yong Ting LIU Li Ya LIN Ye LI Hai Chang ZHANG Quan GUO Hua 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2023年第3期289-294,共6页
Numerous instances of poisoning caused by the ingestion of mushrooms are reported annually worldwide,with most mushroom poisoning deaths caused by the ingestion of toxic amanita fungi.Amatoxin is the main toxic compon... Numerous instances of poisoning caused by the ingestion of mushrooms are reported annually worldwide,with most mushroom poisoning deaths caused by the ingestion of toxic amanita fungi.Amatoxin is the main toxic component of amanita,andα-amanitin is one of the most potent toxins present in amatoxin[1]. 展开更多
关键词 metab ani annually
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Metabotropic glutamate receptor 1 alpha:a unique receptor variant with variable implications for Alzheimer’s disease pathogenesis
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作者 Jason HY Yeung Andrea Kwakowsky 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第10期2196-2197,共2页
Alzheimer’s disease (AD) is the leading neurodegenerative disorder globally.Despite this,there is minimal effective therapeutics proven to reduce or prevent the progression of this disease.Glutamate is the main excit... Alzheimer’s disease (AD) is the leading neurodegenerative disorder globally.Despite this,there is minimal effective therapeutics proven to reduce or prevent the progression of this disease.Glutamate is the main excitatory neurotransmitter within the central nervous system and plays a crucial role in neuronal and synaptic functions. 展开更多
关键词 ALZHEIMER metab PATHOGENESIS
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In Silico Evaluation of the Potential Interference of Boceprevir, Calpain Inhibitor II, Calpain Inhibitor XII, and GC376 in the Binding of SARS-CoV-2 Spike Protein to Human Nanobody Nb20
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作者 Yuri Alves de Oliveira Só Marcelo Lopes Pereira Junior +3 位作者 Wiliam Ferreira Giozza Rafael Timóteo de Sousa Junior Ricardo Gargano Luiz Antônio Ribeiro Júnior 《Open Journal of Biophysics》 2023年第3期35-49,共15页
Virtual screening can be a helpful approach to propose treatments for COVID-19 by developing inhibitors for blocking the attachment of the virus to human cells. This study uses molecular docking, recovery time and dyn... Virtual screening can be a helpful approach to propose treatments for COVID-19 by developing inhibitors for blocking the attachment of the virus to human cells. This study uses molecular docking, recovery time and dynamics to analyze if potential inhibitors of main protease (M<sup>pro</sup>) of SARS-CoV-2 can interfere in the attachment of nanobodies, specifically Nb20, in the receptor binding domain (RBD) of SARS-CoV-2. The potential inhibitors are four compounds previously identified in a fluorescence resonance energy transfer (FRET)-based enzymatic assay for the SARS-CoV-2 M<sup>pro</sup>: Boceprevir, Calpain Inhibitor II, Calpain Inhibitor XII, and GC376. The findings reveal that Boceprevir has the higher affinity with the RBD/Nb20 complex, followed by Calpain Inhibitor XII, GC376 and Calpain Inhibitor II. The recovery time indicates that the RBD/Nb20 complex needs a relatively short time to return to what it was before the presence of the ligands. For the RMSD the Boceprevir and Calpain Inhibitor II have the shortest interaction times, while Calpain Inhibitor XII shows slightly more interaction, but with significant pose fluctuations. On the other hand, GC376 remains stably bound for a longer duration compared to the other compounds, suggesting that they can potentially interfere with the neutralization process of Nb20. 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 Main protease Mpro BOCEPREVIR calpain Inhibitor II calpain Inhibitor XII GC376 Nanobody Nb20 In Silico
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钙蛋白酶(Calpain)抑制剂药理活性的研究进展
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作者 陈长兰 王海利 《辽宁大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第1期66-71,共6页
钙离子(Ca^(2+))作为细胞的第二信使,是参与人体内各项活动的重要调控因子,钙蛋白酶(Calpain),它是一种中性半胱氨酸蛋白酶,主要受Ca^(2+)激活,Calpain在许多生理过程中发挥了很大的作用,例如细胞周期的调控与凋亡,还有细胞信号转导和... 钙离子(Ca^(2+))作为细胞的第二信使,是参与人体内各项活动的重要调控因子,钙蛋白酶(Calpain),它是一种中性半胱氨酸蛋白酶,主要受Ca^(2+)激活,Calpain在许多生理过程中发挥了很大的作用,例如细胞周期的调控与凋亡,还有细胞信号转导和葡萄糖转运等.近年来,人们对这类酶的兴趣大大增加,因为它与脑缺血和其他神经损伤、神经退行性疾病如阿尔茨海默病、心肌缺血相关的神经细胞死亡有很大关系,因此本文对钙蛋白酶抑制剂在神经细胞损伤、失血性休克、缺血再灌注以及阿尔茨海默病研究等方面进行了综述. 展开更多
关键词 钙蛋白酶抑制剂 细胞损伤 研究
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Calpain-1 Mediated Mitochondria ROS/NLRP3 Inflammasome in Atherosclerosis
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作者 Futian Tang Mohamed Ali Awad 《Journal of Biosciences and Medicines》 2023年第4期50-59,共10页
Calpains are calcium-activated cysteine proteases. There are two main isoforms of calpain that are ubiquitously expressed in tissues, calpain μ or calpain 1, which requires micromolar Ca<sup>2+</sup> for ... Calpains are calcium-activated cysteine proteases. There are two main isoforms of calpain that are ubiquitously expressed in tissues, calpain μ or calpain 1, which requires micromolar Ca<sup>2+</sup> for activation, and calpain or 2, which requires millimolar Ca<sup>2+</sup> for activation. The presence of other calpains is tissue specific. Atherosclerosis (AS) is an important risk factor for cerebral infarction, coronary heart disease and peripheral vascular disease. It was originally thought that AS was caused by impaired lipid metabolism. This research briefly reviewed Calpain Family, the structure and activation mechanism of calpain1, Calpains in the pathogenesis of atherosclerosis, NLRP3 structural characteristics and activation, ROS/NLRP3 inflammasome activation mechanism and ROS/NLRP3 inflammasome in atherosclerosis. The research showed that the Calpain-1 may play an important role in mitochondrial ROS/NLRP3 inflammasome in atherosclerosis. 展开更多
关键词 calpain-1 ROS/NLRP3 Inflammasome Atherosclerosis (AS)
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Calpain10基因多态性与中国人2型糖尿病遗传易感性的相关性研究 被引量:34
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作者 纪立农 陈陵霞 +1 位作者 韩学尧 祝方 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 2002年第1期7-10,共4页
目的 了解 Calpain 10基因对中国汉族人 2型糖尿病遗传易感性的影响。方法 采用病例对照研究方法 ;以聚合酶链式反应 -限制性内切酶长度多态性 (PCR- RFL P)技术 ,对 2 11例 2型糖尿病患者及 12 7例正常对照 Calpain10基因 SNP4 3及 S... 目的 了解 Calpain 10基因对中国汉族人 2型糖尿病遗传易感性的影响。方法 采用病例对照研究方法 ;以聚合酶链式反应 -限制性内切酶长度多态性 (PCR- RFL P)技术 ,对 2 11例 2型糖尿病患者及 12 7例正常对照 Calpain10基因 SNP4 3及 SNP19多态性进行基因分型。结果 同对照组相比 ,SNP4 3的 G等位基因频率在 2型糖尿病人群中显著升高 (91.9% vs 85 .8% ,P=0 .0 1)。但 SNP19位点等位基因频率在上述两组中的频率分布无显著差异。此外 ,本研究还观察到在正常对照组中 ,SNP4 3GG基因型与体重指数和腰 -臀围比值增加相关。结论  Calpain 10基因 SNP4 3位点 G等位基因可直接或与其他糖尿病基因相互作用决定汉族人 展开更多
关键词 中国人 相关性研究 2型糖尿病 calpain 10基因 遗传易感性
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银杏二萜内酯葡胺注射液通过下调calpain信号通路抑制脑缺血神经细胞凋亡 被引量:22
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作者 刘秋 许治良 +4 位作者 金治全 周军 毕宇安 王振中 萧伟 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期707-711,共5页
研究银杏二萜内酯葡胺注射液(diterpene ginkgolides meglumine injection DGMI)对缺氧缺糖/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡的抑制作用及其机制。采用试剂盒、Fluo-3 AM法、... 研究银杏二萜内酯葡胺注射液(diterpene ginkgolides meglumine injection DGMI)对缺氧缺糖/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡的抑制作用及其机制。采用试剂盒、Fluo-3 AM法、Western blot检测SH-SY5Y细胞氧糖剥离损伤4h后,与药物一起复氧1h细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量、caspase-3/7酶活力、细胞质中核小体含量、胞浆游离钙离子浓度以及calpain、cleaved caspase-12蛋白量的变化。结果显示DGMI能极显著降低OGD/R损伤的SH-SY5Y细胞LDH的漏出量,抑制caspase-3/7酶活性,减少细胞核核小体的释放量,下调细胞内游离钙离子浓度、calpain和cleaved caspase-12蛋白量,抑制calpain凋亡信号通路保护神经细胞。DGMI对OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有显著的抑制作用,其作用机制可能与抑制细胞内Ca^(2+)/calpain/caspase-12/capase-3信号通路有关。 展开更多
关键词 银杏二萜内酯葡胺注射液 缺氧缺糖损伤 细胞凋亡 钙离子 calpain caspase-12
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Calpain对细胞骨架蛋白tau降解作用的研究(英文) 被引量:6
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作者 方征宇 刘世杰 +4 位作者 王小川 刘蓉 王群 陈正跃 王建枝 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期884-888,共5页
Calpain是钙依赖性中性蛋白酶 ,根据其对钙敏感性的不同 ,可分为m 和 μ calpain两型 .分别用不同浓度CaCl2 溶液孵育Wistar大鼠脑皮质匀浆液 ,并用蛋白质印迹和定量图像分析技术检测不同亚型calpain对tau蛋白的降解作用 .研究发现 :在 ... Calpain是钙依赖性中性蛋白酶 ,根据其对钙敏感性的不同 ,可分为m 和 μ calpain两型 .分别用不同浓度CaCl2 溶液孵育Wistar大鼠脑皮质匀浆液 ,并用蛋白质印迹和定量图像分析技术检测不同亚型calpain对tau蛋白的降解作用 .研究发现 :在 3 7℃用 1mmol/LCa2 + 孵育底物 15min ,可见tau蛋白明显降解 ,并在分子质量为 2 9ku处出现tau蛋白降解片段 ;当Ca2 + 浓度为 5mmol/L时 ,tau蛋白几乎全部被降解 ;这种tau蛋白降解可被calpain特异性抑制剂完全逆转 .进一步的研究发现 ,分别用 μ calpain抑制剂 (0 0 5μmol/Lcalpastatin) ,m calpain抑制剂 (10 0 μmol/LcalpaininhibitorⅣ )或总calpain抑制剂 (552 μmol/Lcalpeptin)与 1mmol/LCa2 + 共同孵育Wistar大鼠脑皮质匀浆液 ,Ca2 + 激活的tau蛋白降解分别被抑制8 6% ,92 5%和 97 8% .结果表明一定浓度的Ca2 + 可同时激活 μ calpain和m calpain ,这两种亚型calpain均参与降解tau蛋白 ,但m calpain的作用比 μ 展开更多
关键词 钙依赖性中性蛋白酶 TAU蛋白 钙离子 阿尔茨海默病 细胞骨架蛋白 calpain
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calpain与细胞凋亡 被引量:5
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作者 张巍 官大威 +1 位作者 刘嵘 周哲 《中国法医学杂志》 CSCD 2007年第6期390-392,共3页
calpain是钙激活中性蛋白酶,属于半胱氨酸蛋白水解酶超家族成员。是由分子量为80KD的催化亚单位和分子量为30KD的调解亚单位组成的异二聚体。研究最多的是calpain1和2,它们又称μ-calpain和m-calpain。calpain被认为与细胞骨架重塑、信... calpain是钙激活中性蛋白酶,属于半胱氨酸蛋白水解酶超家族成员。是由分子量为80KD的催化亚单位和分子量为30KD的调解亚单位组成的异二聚体。研究最多的是calpain1和2,它们又称μ-calpain和m-calpain。calpain被认为与细胞骨架重塑、信号转导途径、调控细胞周期、基因表达调控、某些凋亡途径以及长程增强效应等有关。calpain参与了细胞凋亡,而calpain抑制剂可以阻止细胞的凋亡。 展开更多
关键词 法医病理学 calpain calpain抑制剂 凋亡 CASPASE
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线粒体calpains与细胞凋亡关系的研究进展 被引量:5
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作者 宋必卫 樊俏玫 何治宇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期757-760,共4页
calpains是一类由Ca2+激活的内源性半胱氨酸蛋白酶。尽管先前研究认为calpains是一种胞质酶,最近研究发现μ-calpain、m-calpain、calpain10以及内源性抑制剂calpastatin也同时存在于线粒体中,在caspase依赖型和非依赖型细胞凋亡通路中... calpains是一类由Ca2+激活的内源性半胱氨酸蛋白酶。尽管先前研究认为calpains是一种胞质酶,最近研究发现μ-calpain、m-calpain、calpain10以及内源性抑制剂calpastatin也同时存在于线粒体中,在caspase依赖型和非依赖型细胞凋亡通路中均发挥着重要的作用。calpain除了与caspase相互作用外,还可剪切凋亡相关蛋白如Bcl-2、Bax、Bid等,促进Cyt-C、AIF的释放,从而参与调控细胞凋亡的病理过程。calpains作为潜在的治疗靶点,研究线粒体calpains与细胞凋亡通路的关系具有重大意义。 展开更多
关键词 线粒体 钙离子 μ-calpain m—calpain calpain10 凋亡
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血管性痴呆小鼠海马CA1区CalpainⅠ表达的变化 被引量:5
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作者 王天俊 郎静芳 +4 位作者 吕佩源 张和振 刘昌林 靳玮 郭宗成 《疑难病杂志》 CAS 2010年第2期85-87,F0003,共4页
目的探讨脑缺血—再灌注后不同时期血管性痴呆(VD)小鼠海马CA1区病理改变及CalpainⅠ表达的变化。方法243只雄性昆明小鼠随机分为假手术组(99只)和模型组(144只),VD动物模型采用双侧颈总动脉反复缺血—再灌注合并尾端放血的方法制备;分... 目的探讨脑缺血—再灌注后不同时期血管性痴呆(VD)小鼠海马CA1区病理改变及CalpainⅠ表达的变化。方法243只雄性昆明小鼠随机分为假手术组(99只)和模型组(144只),VD动物模型采用双侧颈总动脉反复缺血—再灌注合并尾端放血的方法制备;分别于造模后第4周、6周和8周测试小鼠的学习和记忆成绩,HE染色观察小鼠海马CA1区正常神经元计数,免疫组化方法观察CalpainⅠ的表达。结果造模后4周、6周和8周时模型组小鼠的学习、记忆成绩均明显劣于假手术组小鼠(P<0.05)。假手术组海马CA1区单位面积正常神经元计数分别为(102±15)个、(108±11)个和(101±12)个;模型组分别为(65±19)个、(21±3)个和(50±11)个,较假手术组均显著降低(P<0.05),其中以造模后6周损害最严重,较模型组造模后4、8周时也显著减少(P<0.05)。假手术组造模后4周、6周和8周时小鼠海马CA1区CalpainⅠ的平均OD值分别是0.030±0.003、0.031±0.003和0.029±0.003;模型组CalpainⅠ的平均OD值分别是0.099±0.009、0.121±0.010和0.115±0.010,较假手术组均显著增高(P<0.05),尤以术后6周时增高明显。结论脑缺血—再灌注6周时海马CA1区神经元损害最严重,CalpainⅠ参与了脑缺血—再灌注后小鼠VD的发生。 展开更多
关键词 痴呆 血管性 学习 记忆 calpain I表达 海马CAI区 小鼠
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日本血吸虫Calpain的DNA疫苗诱导小鼠免疫保护性研究 被引量:7
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作者 周爱琴 张仁利 +4 位作者 石淑华 龙彩虹 高世同 林敏 吴少庭 《中国热带医学》 CAS 2003年第1期5-7,共3页
目的 研究日本血吸虫中国大陆株Calpain的DNA疫苗对Balb/c小鼠的免疫保护性作用。方法 大量制备pVAC质粒DNA和pVAC -CalpainDNA疫苗 ,Balb/c小鼠 5 0只 ,随机均分为对照组和实验组 ,对照组每只小鼠的股四头肌注射接种 10 μgpVAC质粒D... 目的 研究日本血吸虫中国大陆株Calpain的DNA疫苗对Balb/c小鼠的免疫保护性作用。方法 大量制备pVAC质粒DNA和pVAC -CalpainDNA疫苗 ,Balb/c小鼠 5 0只 ,随机均分为对照组和实验组 ,对照组每只小鼠的股四头肌注射接种 10 μgpVAC质粒DNA ,实验组以同样方式注射 10 μgpVAC -CalpainDNA疫苗 ,第 3周加强免疫一次。第 4周每只小鼠经腹部皮肤感染 ( 2 5± 1)条尾蚴 ,感染 6周后剖杀 ,从门静脉灌流收集计成虫数、碎脾计T淋巴细胞总数、从各鼠肝脏的同一部位切下小块肝组织 ,置 5 %KOH溶液消化后 ,计算每克肝组织虫卵数 ,比较减虫率、减雌率和减卵率。于免疫前、第一次免疫后 2周和感染后 2周分别从尾静脉采血 ,用ELISA测定抗体水平。结果 与对照组相比 ,实验组获得 36.84%的减虫率、36.36%的减雌率和 43.31%的减卵率 ,感染后实验组小鼠IgG抗体水平升高幅度大于对照组 ,对照组T淋巴细胞数显著多于实验组。结论 CalpainDNA疫苗可诱导小鼠产生较好的免疫保护作用 。 展开更多
关键词 日本血吸虫中国大陆株 calpain DNA疫苗 免疫保护 动物实验
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过敏毒素C5a通过Calpain途径致VEC凋亡损伤 被引量:3
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作者 胡厚祥 李保胜 +2 位作者 刘利 陈彩宇 吕凤林 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期424-427,共4页
目的探索C5a是否与LPS、毒源性大肠杆菌O157产生的外毒素—V毒素(verotoxin)具有相似的可以导致血管内皮细胞(VEC)凋亡的作用。方法流式细胞仪检测细胞凋亡发生率,首先探讨rhC5a刺激的质量浓度,分别为0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL和1.... 目的探索C5a是否与LPS、毒源性大肠杆菌O157产生的外毒素—V毒素(verotoxin)具有相似的可以导致血管内皮细胞(VEC)凋亡的作用。方法流式细胞仪检测细胞凋亡发生率,首先探讨rhC5a刺激的质量浓度,分别为0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL和1.5μg/mL刺激12 h检测VEC凋亡发生率;在rhC5a质量浓度均为1μg/mL条件下,时间分别为2 h、6 h、12 h、18 h和24 h,检测VEC凋亡发生率。Western blot方法检测凋亡相关蛋白。结果在rhC5a质量浓度为0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL和1.5μg/mL刺激12 h诱导的凋亡发生率分别为4.58%、7.87%、17.94%和19.03%。在确定rhC5a质量浓度1μg/mL的条件下,VEC发生凋亡呈时间依赖关系,在2 h、6 h、12 h、18 h和24 h的时相,细胞凋亡发生率分别为4.58%、12.78%、18.12%、19.08%和19.96%。rhC5a刺激VEC细胞,calpain-2蛋白表达呈时间依赖性,而calpain-1蛋白的表达为浓度依赖性。结论C5a可以导致VEC细胞发生凋亡,calpain参与了这类细胞的凋亡进程。 展开更多
关键词 内皮细胞 凋亡 rhC5a calpain
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Calpain在卡铂引起的耳蜗Ⅰ型传入神经系统损害中的作用 被引量:3
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作者 丁大连 王家东 Richard J.Salvi 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2001年第1期1-3,T001,共4页
目的研究观察Calpain在灰鼠耳蜗内的定位及其注射卡铂后不同时间的表现。方法应用免疫细胞化学方法在透射电镜下观察卡铂引起的耳蜗毛细胞及其传入神经系统中 Calpain的活动变化。结果发现卡铂首先损坏耳蜗Ⅰ型传入神经... 目的研究观察Calpain在灰鼠耳蜗内的定位及其注射卡铂后不同时间的表现。方法应用免疫细胞化学方法在透射电镜下观察卡铂引起的耳蜗毛细胞及其传入神经系统中 Calpain的活动变化。结果发现卡铂首先损坏耳蜗Ⅰ型传入神经的树突并伴有 Calpain的破坏活动。结论卡铂引起的耳蜗 I型传入神经系统的早期破坏可能是由于细胞内形成的高钙浓度激活了Calpain的活性,由此导致了I型传入神经原的蛋白质水解变性。 展开更多
关键词 卡铂 副作用 耳蜗神经 药物不良反应 外毛细胞 卡配因 代谢 calpain
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