黔产苗药土党参趁鲜蒸制炮制工艺研究及炮制前后对小鼠脾虚动物模型的影响

目的研究黔产苗药土党参趁鲜蒸制炮制工艺,明确最佳炮制工艺条件;探讨土党参蒸制前后对脾虚模型小鼠的改善作用,进一步为临床应用提供参考。方法以党参炔苷、总多糖、醇溶性浸出物、水溶性浸出物为评价指标,采用综合评分法,优选土党参趁鲜蒸制炮制工艺;采用“大黄苦寒泻下+饮食失节+劳倦过度”联合法,建立小鼠脾虚动物模型,以参苓白术散为阳性对照,通过比较外观体征、脏器指数、负重游泳时间,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)的含量,研究土党参趁鲜蒸制前后对小鼠脾虚动物模型的影响。结果不同炮制方法对土党参内在质量影响较大,趁鲜蒸制法综合评分值最高,其中趁鲜蒸制20 min(0.8672)>趁鲜蒸制50 min(0.7252)>趁鲜蒸制40 min(0.6846);而烘干后蒸制60 min(0.0025)综合评分值最低。同时,生品和趁鲜蒸制品均可改善小鼠脾虚动物模型外观体征(P<0.05),提高脾脏脏器指数(P<0.05),延长负重游泳时间(P<0.05),降低AST、ALT、ALP、CRE、BUN含量(P<0.01),减少IL-4/IFN-γ水平(P<0.01),且趁鲜蒸制品作用强于生品(P<0.05)。结论土党参优选的炮制方法为:取新鲜药材,洗净,趁鲜蒸制20 min后切厚片(2-4 mm),60℃烘干;趁鲜蒸制后对小鼠脾虚动物模型的改善作用较强。

长叶轮钟草根腐病病原菌分离鉴定及生物学特性研究

目的:分离、鉴定长叶轮钟草根腐病病原,并研究其生物学特性。方法:采用PDA培养基,从感染了根腐病的长叶轮钟草根系进行病原菌分离纯化及致病力测定,同时进行形态和分子生物学鉴定,并测定两株病原菌的生长曲线、产孢量和镰刀菌酸产量。结果:从发病的长叶轮钟草根系分离鉴定到两株病原菌,将两株菌回接后都能引发长叶轮钟草根系病变,发生褐变干枯,菌株ClF02的致病力强于ClF01。经形态学和分子生物学鉴定,菌株ClF01、ClF02分别为尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum和芬芳镰刀菌Fusarium redolens。两株菌的外观、菌丝、孢子等形态特征存在差异,易区分。在相同培养条件下,尖孢镰刀菌和芬芳镰刀菌的生长速率和孢子产量无显著差异,而尖孢镰刀菌镰刀菌酸的产量为芬芳镰刀菌的2.55倍。结论:分离到的两株病原菌分别为尖孢镰刀菌和芬芳镰刀菌,均为导致长叶轮钟草根腐病的病原菌,并了解了这两株菌的生物学特性,为长叶轮钟草根腐病的防治奠定了理论基础。

土党参多糖对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨土党参多糖对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用。方法将KM小鼠随机分为7组,假手术组、模型组、舒血宁组(100 mg.kg-1)、尼莫地平组(100 mg.kg-1)及土党参多糖高、中、低剂量组(300、150、75 mg.kg-1)。采用反复缺血/再灌注法造模,观察小鼠海马区神经元形态,测定小鼠脑组织中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、乙酰胆碱(ACh)、葡萄糖含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、乙酰胆碱酯酶(AChE)和ATP酶活性。结果土党参多糖各剂量组可明显减轻小鼠海马区神经元损伤,降低脑组织中MDA和NO含量(P<0.05或P<0.01),而对SOD、GSH无明显影响;多糖中剂量组能明显提高ACh含量(P<0.01),而低、高剂量组与模型组相比差异无显著性;中、高剂量组能明显降低AChE活性,提高ATP酶、糖代谢活性(P<0.05或P<0.01)。结论土党参多糖对小鼠脑缺血/再灌注损伤具有保护作用,可能与其神经营养、抗氧化、代谢调控、降低乙酰胆碱酯酶活性有关。

高效液相色谱法测定土党参中党参炔苷的含量

目的测定土党参中党参炔苷的含量，为土党参的质量控制及引种栽培等提供科学依据。方法采用高效液相色谱法分析，依利特-ODS2（250mm×4．6mm，5μm），以乙腈-水（20：80）为流动相，检测波长为270am。结果测定了贵州11个不同产地的土党参中党参炔苷的含量，其范围为0．686～4．035mg·g^-1。结论该方法快速简便，重复性好，可用于土党参的质量评价。

土党参多糖对小鼠的抗疲劳作用

研究土党参多糖对小鼠抗疲劳作用的影响。实验随机将小鼠分为4组,分别为空白对照组以及土党参多糖低剂量组(100mg/(kg.d))、中剂量组(200mg/(kg.d))、高剂量组(400mg/(kg.d)),灌胃给药21d后,考察其对小鼠爬杆时间、游泳时间以及血乳酸、血中尿素氮、肝糖原含量的影响。结果表明:土党参多糖能延长小鼠爬杆时间,增加小鼠游泳耐力,降低血乳酸、血清尿素氮的含量、增加肝糖原的含量,与空白对照组比较差异显著(P<0.05)。说明土党参多糖对小鼠具有很好的抗疲劳作用。

神经营养因子样土党参多糖促进小鼠学习记忆作用的实验研究

目的探讨具有神经营养因子(NGF)样活性的土党参多糖对小鼠学习记忆的作用效果。方法以东莨菪碱、亚硝酸钠、乙醇分别造成小鼠学习记忆获得障碍、记忆巩固障碍和记忆再现障碍,采用跳台法、Y水迷宫法和暗箱法进行观察。结果 土党参粗多糖(150 mg/kg和300 mg/kg)、土党参多糖纯组分(150 mg/kg和300 mg/kg)及脑复康(500 mg/kg)均可使小鼠逃避伤害刺激的反应速度加快,错误次数明显减少,遭电击时间缩短(与模型组比较,P<0.01或P<0.05),两药的效果相近(P>0.05)。结论 具有NGF样活性的土党参多糖具有改善小鼠学习记忆能力的作用。

土党参多糖对小鼠耐缺氧能力的影响

目的探讨土党参多糖(CJP)对小鼠耐缺氧能力的影响。方法把KM小鼠分为给药组和空白组,建立小鼠亚硝酸钠所致缺氧、常压缺氧以及缺血缺氧再灌注模型,观察小鼠在缺氧条件下存活时间以及常压缺氧条件下小鼠耗氧量,检测小鼠缺血缺氧再灌注后血红蛋白及红细胞含量变化。结果 CJP低、中、高3个剂量组与空白组比较,存活时间在亚硝酸钠所致缺氧条件下,分别延长了17.48%,21.22%,30.70%;常压缺氧条件下分别延长了4.63%、10.36%、17.87%;3个剂量组小鼠单位时间耗氧量比空白组明显降低(P<0.05);缺血缺氧再灌注后给药组血红蛋白及其红细胞含量增加。结论土党参多糖能够提高小鼠耐缺氧的能力。

土党参多糖铁配合物的制备及其理化性质

以土党参多糖（Campanumoea javanica polysaccharide，CJP）和氯化铁（FeCl3）为底物合成土党参多糖铁配合物（CJP-Fe^3＋）。采用邻菲罗啉分光光度法测定配合物中铁含量，分析配合物的理化性质、稳定性和还原性，通过红外光谱法对其结构进行表征。结果表明：实验制备的CJP-Fe^3＋为红棕色无定型粉末，铁含量达到22．81％；定性鉴定结果表明CJP-Fe^3＋中不存在游离的Fe^3＋，稳定性实验结果显示CJP与Fe^3＋形成了稳定的配合物，在空气中不易分解。CJP-Fe^3＋在pH3～12范围内可以稳定存在，在此酸碱度范围内配合物结构不会被破坏。CJP-Fe^3＋有望被开发为新型的补铁剂。

大花金钱豹根的化学成分研究

目的:研究大花金钱豹根的化学成分。方法:采用现代色谱技术对大花金钱豹根的正丁醇萃取部位进行分离和纯化,根据化合物光谱数据进行结构鉴定。结果:从大花金钱豹根中分离纯化得到7个化合物,分别鉴定为:柯伊利素-7-O-β-D-葡萄糖苷(1)、腺苷(2)、9-α-D-arabinofuranosyladenine(3)、党参炔苷(4)、cordifolioidynes B(5)、正丁基-β-D-吡喃果糖苷(6)、(E)-2-hexenyl-β-D-glucopyranoside(7)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到,所有化合物均为首次从金钱豹属植物中分离得到。

轮钟花属的恢复及其花粉和种皮证据

轮钟花属的恢复及其花粉和种皮证据洪德元潘开玉（中国科学院植物研究所系统与进化植物学开放研究实验室北京１０００９３）ＴＨＥＲＥＳＴＯＲＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＧＥＮＵＳＣＹＣＬＯＣＯＤＯＮ（ＣＡＭＰＡＮＵＬＡＣＥＡＥ）ＡＮＤＩＴＳＥＶＩＤＥＮＣＥＦＲＯＭ...

土党参多糖对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症的影响

研究土党参多糖(CJP)对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症的影响。小鼠腹腔注射环磷酰胺,建立白细胞减少模型,以高、中、低3个不同剂量的土党参多糖分别灌胃给药,测定外周血象、脏器指数、骨髓DNA。给药组与模型组比,小鼠白细胞数量明显增高(P<0.01),脾脏指数、胸腺指数差异不明显,中剂量组骨髓DNA明显增加(P<0.05)。土党参多糖对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症有升高白细胞和促进小鼠骨髓造血功能的作用。

土党参多糖促进小鼠胃肠运动的初步研究

将KM小鼠分组后,分别灌胃给予土党参多糖(100、200、400 mg/kg)及生理盐水,连续给药30 d,以小鼠食物利用率、体重增重率、血清中D-木糖含量及小肠墨汁推进率为检测指标,考察土党参多糖对小鼠胃肠改善作用。结果表明:土党参多糖能够增加小鼠食物利用率及体重增重率,促进D-木糖吸收及明显增加胃肠抑制小鼠墨汁推进率,对小鼠胃肠运动有促进作用。

黔产党参属和金钱豹属药用植物种子电镜扫描研究

采用扫描电镜对贵州产党参属和金钱豹属的10种药用植物种子进行扫描观察。结果表明,10种植物的种子在形态、大小、表面文饰等方面均存在一定差异,可作为物种鉴定的依据之一。

红果参叶中总黄酮的提取工艺初步探讨

目的:研究红果参叶中总黄酮的最佳提取工艺条件。方法:利用单因素和正交试验,考察提取时间、乙醇溶液体积分数、液固比3个因素对总黄酮得率的影响。结果:红果参叶中总黄酮的最佳提取工艺条件为:85%(体积分数)的乙醇作为提取溶剂、提取时间10 min、料液比1∶30(g/mL)。在此条件下,总黄酮提取率可达4.76%。结论:乙醇超声法可用于红果参叶中总黄酮的提取,其中料液比对提取率的影响最大。

长叶轮钟草生药学研究

目的对长叶轮钟草进行生药鉴定。方法采用生药学显微鉴定方法研究长叶轮钟草的药材横切面和粉末显微特征。结果长叶轮钟草药材断面和粉末显微鉴别特征明显。茎的横切面有较为典型的环状细胞带和分泌腔,其粉末显微特征中石细胞、导管、棕色块、非腺毛细胞为特征性的鉴别成分。结论长叶轮钟草药材断面特征和粉末显微组织鉴定可靠,可作为长叶轮钟草的鉴定依据。

粤北林下土党参优质栽培技术

介绍了土党参的形态特征、生态习性。从选地、田间管理、病虫害防治及采收等方面讲述了土党参的栽培技术,为土党参在粤北林下栽培提供了理论依据及实施方法。

不同采收期苗药土党参中党参炔苷、总多糖和总黄酮含量的测定以及土党参最佳采收期的确定

分别采用高效液相色谱法(HPLC)和紫外-可见分光光度法(UV-Vis)测定不同采收期(1~12月)土党参中党参炔苷、总多糖、总黄酮含量,并用总评归一化法确定其最佳采收期。在土党参样品中加入甲醇,超声提取40 min,过0.45μm滤膜,用HPLC测定滤液中的党参炔苷含量。在土党参样品中加入80%(体积分数)乙醇溶液,回流2次,每次1 h,过滤后,滤渣以水为介质在微波炉中消解2次,每次5 min,稀释后加入50 g·L^(-1)苯酚溶液和硫酸,于100℃水浴加热10 min,冰水浴中冷却20 min,用UV-Vis在490 nm下测定总多糖含量,用葡萄糖作为对照品绘制标准曲线。在土党参样品中加入60%(体积分数,下同)乙醇溶液,回流2次,每次1 h,过滤、浓缩并稀释,加入50 g·L^(-1)亚硝酸钠溶液、100 g·L^(-1)硝酸铝溶液和40 g·L^(-1)氢氧化钠溶液,用60%乙醇溶液稀释至10 mL,用UV-Vis在509 nm下测定总黄酮含量,用芦丁作为对照品绘制标准曲线。以Hassan法计算党参炔苷、总多糖和总黄酮的归一值,以总归一(OD)值确定最佳采收期。结果显示:党参炔苷、总多糖和总黄酮的质量浓度均在一定范围内与其对应的峰面积(党参炔苷)和吸光度(总多糖和总黄酮)呈线性关系,党参炔苷的检出限(3S/N)、总多糖的检出限(3.143s)、总黄酮的检出限(3.143s)分别为0.131,0.046,0.071 mg·L^(-1)。方法用于实际样品的分析,峰面积(党参炔苷)和吸光度(总多糖和总黄酮)的相对标准偏差(n=6)均不大于3.0%,平均加标回收率分别为98.8%,99.1%,98.5%;10月份的OD值较高,可将其确定为土党参最佳采收期,此时党参炔苷、总多糖和总黄酮的质量分数分别为3.08,185.15,5.85 mg·g^(-1)。

土党参多糖对半乳糖联合三氯化铝致阿尔茨海默病小鼠脑损伤的影响

目的研究土党参多糖(CJP)对D-半乳糖联合三氯化铝所致小鼠脑神经损伤的影响。方法采用皮下注射D-半乳糖联合灌胃三氯化铝造成小鼠神经系统损伤。以小鼠学习记忆成绩、脑组织中的丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽(GSH)及乙酰胆碱(Ach)等含量变化为考察指标,考察CJP对脑损伤小鼠的影响。结果与模型组比较,CJP能改善脑损伤小鼠的学习记忆,提高脑中GSH、超氧化物歧化酶(SOD)含量,降低脑中NO和MDA水平。结论 CJP对D-半乳糖联合三氯化铝所致的小鼠脑损伤有一定的改善作用。

红果参果化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

为了探究红果参果化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性。本实验以红果参果为材料,采用溶剂法制备红果参果乙醇提取物和粗多糖。采用紫外分光光度法测定其总黄酮、总花色苷、总多酚和多糖含量,进一步通过超高效液相色谱-飞行时间-串联质谱技术分析其化学成分。利用α-葡萄糖苷酶抑制模型考察粗多糖、乙醇提取物及其主要代表成分的体外α-葡萄糖苷酶抑制作用。结果表明,5个批次的红果参果粗多糖多糖含量为27.59%~37.59%;乙醇提取物的总黄酮含量为1.22%~1.77%,总花色苷为0.90%~1.14%,总多酚含量为13.11%~18.85%。红果参果乙醇提取物化学成分丰富多样,从中共鉴定出21个化合物,其中包含10个黄酮、3个有机酸、3个花色苷、3个酚酸、1个氨基酸和1个聚炔类成分。红果参果乙醇提取物、粗多糖和代表化合物木犀草素的α-葡萄糖苷酶的IC50分别为7.52、37.43和8.03μg/mL,明显高于阳性对照阿卡波糖(616.17μg/mL)。本研究初步明确了红果参果的物质基础,并首次报道了红果参果具有潜在抗糖尿病活性,为红果参果的开发利用提供理论参考。

土党参茎段的愈伤组织诱导与植株再生

为了建立土党参愈伤组织途径的高效再生体系,以无菌苗的带芽茎段为外植体,接种于含有不同植物激素的MS培养基中,探讨不同植物激素对愈伤组织诱导、再分化出芽以及生根的影响。结果表明:在不同处理中可获得2种类型的愈伤组织,黄色致密愈伤(类型Ⅰ)和杂夹有少量白色球形体细胞胚的黄色疏松愈伤(类型Ⅱ),细胞分裂素主导着愈伤组织类型的形成。米黄色致密状胚性愈伤(类型Ⅰ)的适宜配方为MS+1.0 mg·L^(-1)2,4-D+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)NAA,米黄色疏松愈伤组织(类型Ⅱ)的适宜配方为MS+1.0 mg·L^(-1)2,4-D。致密愈伤组织在含有细胞分裂素(6-BA、KT、TDZ)的培养基上可分化出芽点进而形成不定芽块,转接到MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)GA3+0.1 mg·L^(-1)NAA培养基后,芽伸长并增殖为丛生芽。单芽体经300 mg·L^(-1)IBA溶液浸泡15 min后,转接于不含任何植物激素的MS培养基上,生根率为100%;将生根良好的植株移栽到泥炭土、蛭石、珍珠岩体积比1∶1∶1的基质中培养30 d,成活率为73.3%。通过愈伤组织途径建立了土党参的高效再生体系,为种苗繁育、多倍体育种、转基因操作和细胞突变育种提供了技术基础。