气相色谱-质谱法分析福建地区橄榄中橄榄肉和橄榄仁挥发油成分

采用同时蒸馏萃取装置,对产自福建地区的橄榄中的橄榄肉和橄榄仁中的挥发油进行提取,测得橄榄肉、橄榄仁挥发油含量分别为0.96%、1.57%;并用气相色谱-质谱联用技术进行分析鉴定,结合计算机质谱图库检索技术对分离的化合物进行结构分析,鉴定出橄榄肉中有10种化学组分,占总挥发性物质总含量的66.05%;鉴定出橄榄仁中有32种化学组分,占总挥发性物质总含量的88.94%。应用峰面积归一化法确定了各成分的相对含量。结果表明:橄榄肉中主要含有丁化羟基甲苯(38.09%)、石竹烯(6.82%)等;橄榄仁中主要含有石竹烯(36.25%)、α-石竹烯(8.13%)等。

橄榄多酚类物质研究进展

橄榄是中国传统的药用植物,其中多酚类物质是橄榄重要的功效成分之一。目前,橄榄多酚类物质研究较为广泛,常用的提取方法包括温浸法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超声与微波协同辅助提取法等,分离纯化后采用液相色谱或液质联用技术鉴定多酚类物质的种类和成分,并对其抗氧化、抗病毒、抗菌消炎、抗癌抑癌、解酒护肝和提高机体免疫等方面的药理活性进行验证。此外,橄榄多酚类物质合成和代谢分子机理也已经被初步阐释。基于上述研究报道,本文进一步对橄榄多酚类物质后续研究方向和产业化开发利用前景进行展望。

橄榄品种果实营养成分的比较

以潮汕地区6个橄榄[Canarium album(Lour.)Raeusch]品种果实为材料,分析其营养品质,为选育优良橄榄品种提供依据。采用2,6-二氯酚靛酚滴定法、考马斯亮蓝染色法、碱滴定法、阿贝折射仪测定法和火焰原子吸收光谱法分别测定6个橄榄品种果实的维生素C、蛋白质、有机酸、可溶性固形物(TSS)和钙等营养品质的含量。结果显示,在这6个橄榄品种中,蛋白质含量以丰玉1号为最佳,可溶性固形物含量以饶甜1号和呐种并列第一,有机酸含量以鸡心为最高,维生素C含量以丰玉2号为最好,而钙含量则以呐种位居榜首。丰玉1号和呐种可作为鲜食良种加以重点选育并推广,丰玉2号和饶甜1号适宜鲜食,可作配套品种推广,而鸡心和土呐适宜加工。

热空气处理诱导冷藏橄榄果实抗冷性及其与膜脂代谢的关系

【目的】研究热空气处理对冷藏橄榄果实抗冷性的影响及其与脂氧合酶(LOX)活性和膜脂脂肪酸组分变化的关系。【方法】采后‘檀香’橄榄[Canarium album(Lour.)Raeusch cv.Tanxiang]果实38℃热空气处理30 min,采用0.015 mm厚的聚乙烯薄膜袋密封包装,在(2±1)℃下贮藏。贮藏期间定期测定橄榄果实冷害指数和细胞膜透性,果皮LOX活性和膜脂脂肪酸组分。【结果】与对照果实比,38℃热空气处理30 min降低冷藏橄榄果实冷害指数、细胞膜透性和果皮LOX活性,提高果皮棕榈油酸(C16:1)、亚油酸(C18:2)和亚麻酸(C18:3)等不饱和脂肪酸相对含量,降低肉豆蔻酸(C14:0)、棕榈酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)等饱和脂肪酸相对含量,抑制果皮脂肪酸不饱和指数和脂肪酸不饱和度下降。【结论】热空气处理通过降低冷藏橄榄果实果皮LOX活性而减少膜脂不饱和脂肪酸的降解,维持较高的膜脂脂肪酸不饱和程度,从而增强橄榄果实抗冷性、减轻冷藏橄榄果实冷害的发生。

采收期对冷藏橄榄果实贮藏期间冷害的影响

针对‘檀香’橄榄果实冷藏期间易发生冷害现象,本实验研究了7个采收期（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ）对（2±1）℃、相对湿度85%-90%条件下冷藏橄榄果实冷害的影响。定期测定贮藏期间橄榄果实冷害指数、果皮褐变指数、果实好果率和质量损失率、果实呼吸强度和细胞膜相对渗透率、果实表面色度角、果皮叶绿素含量、果肉可溶性固形物、可滴定酸、可溶性总糖和还原糖含量的变化。结果表明：与采收期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ相比,采收期Ⅴ能保持冷藏橄榄果实较低的冷害指数、果皮褐变指数、果实质量损失率和较高的好果率,降低果实呼吸强度和呼吸峰值,延缓果实细胞膜相对渗透率升高,保持中后期较高的果实表面色度角、果皮叶绿素含量、果肉可溶性固形物、可滴定酸、可溶性总糖和还原糖含量。因此认为,采收期Ⅴ可作为减轻冷藏‘檀香’橄榄果实冷害发生的适宜采收成熟度。

不同成熟度橄榄果实冷藏期间细胞壁代谢对采后冷害的响应特性

研究冷藏期间橄榄果实细胞壁代谢的变化,探讨不同成熟度橄榄果实冷害发生与细胞壁组分含量、细胞壁降解酶活性的关系。以白露、寒露、立冬、大雪节气时采摘的‘檀香’橄榄果实为材料,在温度(2±1)℃、相对湿度85%~90%冷库内贮藏,定期测定橄榄果实冷害指数、果肉细胞壁组分含量和细胞壁降解酶活力的变化。结果表明,不同成熟度橄榄果实冷藏期间冷害发生与其细胞壁组分降解密切相关,冷害指数与离子结合型果胶(ionic-soluble pectin,ISP)、共价结合型果胶(covalent-soluble pectin,CSP)、半纤维素和纤维素含量呈负相关;且果胶甲酯酶(pectin methylesterase,PME)、多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)、β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-Gal)和纤维素酶(cellulase,CEL)等细胞壁降解酶的活力变化不平衡或活力提高是导致冷藏橄榄果实细胞壁结构解体、细胞壁代谢异常、冷害发生的主要原因。同时,与成熟度Ⅰ、Ⅲ和Ⅶ的橄榄果实相比,成熟度Ⅴ保持较低的果实冷害指数及冷藏中后期果肉PME、PG、β-Gal和CEL活力,延缓冷藏中后期果肉水溶性果胶、ISP、CSP、半纤维素和纤维素含量降低。因此认为,成熟度Ⅴ的橄榄果实可较好维持细胞壁结构的完整性,有效减轻冷害发生。

青橄榄叶的化学成分研究

对橄榄科橄榄属青橄榄树叶子的化学成分进行了研究。从乙酸乙酯萃取部位分得8个化合物,经理化及光谱方法鉴定分别为:没食子酸乙酯(Ⅰ)、东莨菪素(Ⅱ)、没食子酸(Ⅲ)、穗花杉双黄酮(Ⅳ)、肌醇(Ⅴ)、槲皮素(Ⅵ)、β-谷甾醇(Ⅶ)、4,5-去氢诃子裂酸三乙酯(Ⅷ)。其中化合物Ⅷ为新化合物,化合物Ⅴ、Ⅵ为首次从该属植物中得到,化合物Ⅳ、Ⅶ为首次从该植物中得到。

橄榄WRKY转录因子的克隆及其在低温胁迫下的表达分析

【目的】探讨橄榄WRKY转录因子的序列特征及其在生长发育与低温胁迫过程中的调控作用。【方法】以'福榄1号'橄榄为材料,采用RT-PCR技术克隆了4个WRKY转录因子家族成员(分别命名为CaWRKY21、CaWRKY33、CaWRKY50和CaWRKY55),并对其进行生物信息学和qRT-PCR表达模式分析,同时研究橄榄低温胁迫过程中总抗氧化能力的变化。【结果】CaWRKY21、33、50、55开放阅读框分别为561、1 644、357和1 044 bp,预测可分别编码186、547、118和347个氨基酸,GenBank登录号为MG356652、MG356653、MG356654和MG356655。生物信息学分析表明,CaWRKY21、33、50、55的密码子偏好性普遍较弱,均编码不稳定疏水性蛋白质,其中CaWRKY21和CaWRKY55属于第Ⅱ类植物WRKY转录因子,定位于细胞核内,CaWRKY33和CaWRKY50分别属于第Ⅰ类和第Ⅲ类WRKY转录因子,可能分别定位在内质网膜和细胞质中;聚类分析发现,橄榄与番木瓜、甜橙、桉树WRKY的亲缘关系较近。低温胁迫过程中,随着温度下降,橄榄总抗氧化能力和CaWRKY21、33、50、55表达水平均明显上升,在-3℃处理组中达到最高点;此外,它们均呈现器官特异性表达。【结论】WRKY转录因子可能参与橄榄器官形态建成,并且受低温胁迫显著诱导。

采后‘长营’和‘惠圆’橄榄果实的耐贮性比较

品种的差异是影响采后橄榄果实品质和货架期的重要因素之一。比较研究福建省2个主栽橄榄品种‘长营’和‘惠圆’果实的贮藏性差异。采后‘长营’和‘惠圆’橄榄果实经清洗并用抑霉唑杀菌剂处理（1.0 m L/L浸果5 min）,晾干后用0.015 mm厚的聚乙烯薄膜袋密封包装,在（8±1）℃下贮藏140 d。贮藏期间定期测定果实呼吸强度、细胞膜透性、好果率、失重率和果皮褐变指数的变化。结果表明：2个品种的橄榄果实呼吸强度在贮藏0-60 d内上升,贮藏60 d之后下降;果实细胞膜透性、失重率和果皮褐变指数都随着贮藏时间的延长而上升;果实好果率随着贮藏时间的延长而下降。但‘长营’和‘惠圆’橄榄果实的耐贮性不同。在同一贮藏期间,‘惠圆’橄榄果实的呼吸强度、细胞膜透性和果皮褐变指数都高于‘长营’橄榄果实,而好果率则低于‘长营’橄榄果实。据此认为,‘长营’橄榄果实比‘惠圆’果实更耐贮性,其原因可能与‘长营’橄榄果实可以保持较低的呼吸强度和较完整的细胞膜结构有关。

橄榄基因组AFLP扩增体系的优化

为建立适于橄榄研究用的AFLP技术体系,以10个橄榄品种为材料,对其基因组DNA从酶切、连接、预扩增和选择性扩增等方面进行条件优化。研究结果表明,DNA模板用量为500 ng,酶切体系中限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ各加入3 U,37℃水浴4 h;连接体系中T4DNA连接酶加入1.5 U,16℃连接6 h;并利用优化后的预扩增体系和选择性扩增体系筛选出6对适合于橄榄AFLP分析的引物组合:E/AAC-M/CAT、E/AAC-M/CTT、E/ACA-M/CAA、E/AGG-M/CAA、E/ACC-M/CAA、E/ACT-M/CAT。采用该体系得到的电泳条带清晰可靠、多态性好,可用于对橄榄遗传多样性的研究。

竹叶与松针黄酮提取液对橄榄果实的保鲜效果

提取箬竹和马尾松叶片总黄酮作为天然保鲜剂用于橄榄浸泡处理,以研究竹叶和松针黄酮提取液对橄榄果实的保鲜效果。结果表明,不同浓度的竹叶和松针黄酮提取液均能对橄榄果实起到一定的保鲜作用,其中393 mg/L竹叶黄酮提取液、330 mg/L松针黄酮提取液处理的橄榄果实好果率均高于对照,贮藏第77天时,橄榄好果率分别为76.11%、78.89%。2种处理均可延缓果实可溶性总糖含量下降,促进多酚含量下降,提高橄榄果实的糖酚比,能有效改善橄榄果实贮藏期内的鲜食品质。

橄榄新品种棱尖橄榄的选育

棱尖橄榄是从本地土橄榄的实生群体中,通过单株选育而成的鲜食型新品种。果实长椭圆形,成熟果实黄色,果形端正,果肉黄绿色,果核两端长尖。平均单果质量8.84 g,可食率83.7%,可溶性固形物含量(w,后同)为12.3%,总糖4.3g·100 g^(-1),可滴定酸9.65 g·kg^(-1),维生素C 18.6 mg·100 g^(-1),粗纤维3.4%,单宁9.06×10^(3)mg·kg^(-1),钙842 mg·kg^(-1),口感化渣、涩轻、橄榄风味较浓,回甘明显。该品种树冠圆头形,树姿开张,分枝能力较强,当年高接,第三年可开花结果。每年3月至12月份抽梢3~4次,春梢3月上中旬萌动,至5月上中旬停止生长成为结果枝,5月中旬初花,5月底为盛花期。盛花期时间较短,6月上旬为终花期。果实生育期190~210 d,果实成熟期为12月中下旬,是晚熟品种。ISSR结果分析表明,棱尖橄榄与其他橄榄品种均不在同一类群上。在广东省潮汕地区种植,10 a(年)结果树每666.7 m^(2)产量达647.5 kg,表现丰产、稳产。

橄榄种子休眠生理与层积效应

探究橄榄种子休眠生理与层积对种子萌发和幼苗生长的影响效应,为橄榄及其他核果类果树种子休眠生理研究和种苗繁育提供参考。以未层积种子(层积0 d)为对照,对橄榄种子进行不同时间(每10 d一处理,共10个处理)的层积处理,研究橄榄种子在层积过程中营养物质、激素水平等生理生化变化,以及不同层积时间种子的萌发和幼苗生长情况。结果表明:层积处理缩短了橄榄种子发芽启动时间,对橄榄种子萌发均有促进作用。层积90 d和100 d的橄榄种子发芽率最高,均为82.22%,比CK种子(53.33%)高54.17%,发芽指数也显著高于其他处理时间,层积100 d的橄榄种子发芽指数是CK的8.5倍(P<0.05)。层积能提高橄榄幼苗地上部生物量,以90、100 d处理的橄榄幼苗生长最好。橄榄种子的主要营养贮藏物质是粗脂肪(70.85%~81.67%),在层积过程中呈先升后降的趋势。新鲜橄榄种子(CK)中ABA含量较高(16.64 ng/g),而GA_3未检测到。随层积时间延长,ABA与SA含量快速下降,GA_3含量增加,IAA/ABA升高,利于种子休眠解除。层积处理橄榄种子有利于其营养物质达到萌发所需水平,加快内源激素变化,促进种子发芽和幼苗地上部生长,以层积90~100 d最佳。

姜油树脂对采后橄榄果实抑菌效果和贮藏品质的影响

小孢拟盘多毛孢(Pestalotiopsis microspora)是引起橄榄果实腐烂的最主要病原菌之一。为给姜油树脂在采后橄榄果实贮藏保鲜应用提供科学依据和实践指导,本实验研究了姜油树脂对采后橄榄果实的抑菌效果和贮藏品质的影响。以‘长营’橄榄果实为材料,通过损伤接种法,研究不同剂量的姜油树脂对P. microspora接种橄榄果实的抑菌效果,并进一步探讨最佳抑菌剂量的姜油树脂对采后橄榄果实在25℃下贮藏49 d期间果实病害发生和品质的影响。结果表明:与对照比较,姜油树脂可显著抑制P. microspora侵染所致橄榄果实采后病害发生,其中姜油树脂的最佳抑菌剂量为30μL/mL;30μL/mL的姜油树脂处理可显著降低橄榄果实病害指数和果皮褐变指数(P<0.01),延缓橄榄果实可溶性固形物、可溶性总糖、可滴定酸、VC、总酚及类黄酮含量的下降,较好保持采后橄榄果实的外观颜色和营养品质。因此认为,30μL/mL的姜油树脂处理可有效控制橄榄果实采后病害发生,保持橄榄果实贮藏品质。

新鲜橄榄叶挥发油成分的气相色谱-质谱联用分析

目的分析新鲜橄榄叶挥发油成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取新鲜橄榄叶的挥发油,经气相色谱-质谱联用(GC-MS)仪分析,归一化法测得各组分的相对含量。结果鉴定了新鲜橄榄叶挥发油化合物中的47个成分,约占相对总含量的99.7%。结论新鲜橄榄叶挥发油主要化学成分及其相对含量为反式-3-己烯-1-醇(36.58%)、异香橙烯(16.26%)、β-石竹烯(6.51%)、己醛(5.66%)、异己醇(4.92%)、2-乙氧基丙烷(4.78%)、顺式-2-戊烯-1-醇(3.10%)、顺式-3-己烯乙酸酯(2.89%)、水杨酸甲酯(2.32%)、β-荜澄茄烯(1.79%)、甘香烯(1.35%)等。

橄榄果实提取物中没食子酸含量及自由基清除能力的研究

采用高效液相色谱法测定橄榄果实甲醇提取物中没食子酸的含量，并用二苯基苦基苯肼自由基（DPPH·）法研究了橄榄果实提取物的自由基清除能力。没食子酸质量浓度在8．4．42mg／L范围内，没食子酸峰面积与其进样量呈良好的线性关系（R=0．9993），没食子酸平均质量分数4．03％，相对标准偏差（RSD）（n=6）1．77％，平均回收率98．75％，RSD（n=6）1．21％。该方法简单灵敏，准确可靠，重复性好。橄榄果实甲醇提取物具有较高的自由基清除能力，DPPH·的半数抑制浓度（IC50）为40．14mg／L。

NaCl胁迫对橄榄种子萌发的影响

用不同浓度的Na Cl溶液对橄榄种子进行胁迫萌发实验,观察其发芽率和发芽后种苗的生长情况,并测定淀粉酶活性。结果表明,供试4个品种橄榄种子对盐胁迫敏感程度。当Na Cl溶液浓度≤0.8%时,4个品种橄榄种子发芽率均在90%以上;但随着Na Cl溶液浓度的增加,种子萌发吸水受到抑制,淀粉酶活性降低,发芽率、发芽指数和活力指数均呈逐渐下降趋势。但4个品种表现不一致。当Na Cl溶液浓度≤0.4%时,4个品种橄榄种子发出的幼苗基本没有影响;但当Na Cl溶液浓度增加时,4个品种橄榄胚根生长停止的临界指数:惠圆Na Cl盐度指数为1.0%;茶橄榄Na Cl盐度指数为1.2%;三方Na Cl盐度指数为1.4%;油橄榄Na Cl盐度指数为1.6%。4个品种盐胁迫敏感度:檀香﹥茶橄榄﹥三方﹥油橄榄。

橄榄发育过程中风味物质的变化规律

通过对‘长营’橄榄及其芽变品种‘清榄1号’果实发育过程中风味物质含量,包括可溶性固形物、可溶性糖、可滴定酸、单宁、黄酮、多酚的测定,初步探讨橄榄果实风味形成机理。结果表明:(1)供试橄榄果形整齐,品种间糖、酸物质含量变化整体一致,酚类物质差异大。(2)花后50~110 d,橄榄果实体积增大,风味物质积累,其中,‘清榄1号’酚类物质在花后70~90 d出现小幅度降低;(3)花后110~170 d,橄榄果实可溶性固形物与糖含量积累,其他风味物质含量降低。(4)‘长营’花后110 d采收风味较佳,‘清榄1号’花后170 d采收风味佳。研究表明,橄榄果实风味形成与糖酸等物质关系不大,与酚类物质关系密切,花后110 d为研究橄榄风味形成的关键时期。

微波辅助提取橄榄多糖的工艺研究

为了研究橄榄多糖的微波辅助提取工艺,以橄榄果实为原料,采用微波前处理-热水浸提新工艺提取橄榄多糖,通过单因素试验和正交试验研究了微波功率、微波时间、料液比、热水浸提温度、热水浸提时间和浸提次数对橄榄多糖得率的影响。结果表明,影响多糖得率的主要影响因素及次序为热水浸提时间、热水浸提温度、微波时间、微波功率,在所考察试验范围内,橄榄多糖的最佳提取工艺条件为:微波时间60s、微波功率480W、热水浸提温度100℃、热水浸提时间3.5h,在此条件下得到的橄榄多糖得率为9.38%。实验结果可为微波辅助提取橄榄多糖提供实验依据。

根系浸泡生长素对橄榄幼苗生长及其叶绿素荧光特性的影响

以1~2片真叶的橄榄健康幼苗为试材,研究2种外源生长素吲哚丁酸(IBA)和萘乙酸(NAA)在不同浓度(100、300和500μmol/L)及不同处理时间(1、3和5h)下对橄榄幼苗根系和地上部生长量的影响,并运用隶属函数法进行综合评价,对测定排名前5个处理的橄榄幼苗的叶绿素荧光特性进行分析,以探寻促进橄榄幼苗生长的最佳处理,为橄榄实生砧木苗繁育提供理论及技术依据。结果显示:(1)外源生长素能促进橄榄幼苗生长,改善根系构型,以低浓度处理和高浓度短时长的处理表现较好,能提高橄榄幼苗生长势。(2)隶属函数分析橄榄幼苗生长的综合效果排名前五的处理为:N3001>N5001>N1005>N1001>I3003,前4个均为NAA处理,平均隶属函数值均大于0.65,且对株高、茎粗、地上部生物量、总根长、总根表面积、主根长及侧根数的促进作用比IBA大。(3)叶绿素荧光特性显示,N1001处理的橄榄幼苗实际光化学量子效率Y(Ⅱ)最高且比对照显著增加了8.16%,光合电子传递速率ETR最大,非光化学淬灭系数NPQ最低且比CK显著降低了23.78%(P<0.05)。研究表明,N1001为促进橄榄幼苗生长的最佳处理,即选择100μmol/L外源生长素NAA处理橄榄实生砧木苗根系1h,能显著促进植株生长,提高幼苗的光能利用率和光合能力。