羰基还原酶产生菌Candida sorboxylosa的筛选与产酶条件优化

从采自全国各地的200余份土壤样品中,筛选得到一株能够高效合成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的菌株Candida sorboxylosa。对该菌株的产羰基还原酶条件进行的研究表明,最适发酵培养基配方:葡萄糖10 g/L,酵母提取粉50 g/L,KH_2PO_4 2.5 g/L,CuCl_2 0.02 g/L,NaCl 1 g/L。最适发酵培养条件:装液量30 mL/500 mL摇瓶,接种量1%,初始pH 5.0,该茵在此条件下发酵培养20 h,底物4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)羰基还原酶酶活达到202.42 U/L,与优化前相比,提高11.8倍。该茵在催化COBE的转化反应中,具有很好的立体选择性,产物光学纯度(e.e.%)始终大于99%。

布洛芬立体拆分菌株的筛选与离子束诱变选育

在从土壤中分离到的 15 4个菌株中 ,通过筛选及旋光度的测定得到立体选择性水解布洛芬乙酯生成S 布洛芬的菌株CandidasorboxylosaT2P。用低能离子束诱变的方法得到了几株布洛芬乙酯水解活性提高的突变菌株 ,用 4× 10 5ion/cm2 剂量的低能离子束诱变菌株CandidasorboxylosaT2P可提高S 布洛芬的产量2 0 %左右。用菌株CandidasorboxylosaT2P的培养物催化水解布洛芬乙酯所得产品的外观、熔点、旋光度和红外光谱等各项检测指标与Sigma公司的标准品S 布洛芬基本一致 ,这表明该菌株具有提高S