Protective effect of cardiomyopeptidin on cultured rat hippocampal neurons injured by anoxia reoxygenation

Cardiomyopeptidin (CMP), a small molecular polypeptide, is a new drug extracted from pig myocardium. Recently, evidence of its protective effect on myocardium injured by ischemia or anoxia has appeared.^(1,2) Neurons are also vulnerable to ischemia/anoxia. The aim of this study was to evaluate the neuroprotection of CMP in an anoxic model, which was the cultured hippocampal neurons in vitro, and to determine the relationship between CMP and expression of Bcl-2.

心肌肽素对大鼠心脏缺血-再灌注损伤的预防作用

目的 :研究小分子多肽类物质心肌肽素对大鼠心脏缺血 再灌注损伤的预防作用。方法 :在大鼠冠脉结扎致心肌缺血 再灌注损伤模型上 ,观察心肌肽素预防性给药对缺血大鼠血浆中肌酸磷酸激酶 (CPK)、乳酸脱氢酶 (LDH)活性及脂质过氧化物终产物 (MDA)含量的影响。结果 :心肌肽素预防性给药能明显降低血浆CPK ,LDH的活性与MDA含量 ,其作用具有明显的量效关系。结论 :心肌肽素对心脏缺血 再灌注损伤有预防作用 ,这可能与其减少心肌酶的释放及抗心肌脂质过氧化有关。

心肌肽素对缺血-再灌流损伤大鼠离体心脏的影响

为研究小分子多肽类物质心肌肽素抗心肌缺血 -再灌流损伤作用 ,在大鼠离体 L angendoff's心脏缺血 -再灌流损伤模型上 ,观察心肌肽素对室颤 (VF)发生率及心肌生化指标的影响。结果发现 :心肌肽素能明显降低离体缺血 -再灌流损伤心脏 VF的发生率 ;剂量依赖性地降低心肌乳酸脱氢酶 (L DH)活性和丙二醛(MDA)含量 ;提高心肌肌酸磷酸激酶 (CPK)活性。提示心肌肽素对缺血 -再灌流损伤心肌有保护作用 。

心肌肽素在心脏手术中对心肌的保护作用的临床研究

目的:考察心脏瓣膜替换术和冠状动脉旁路移植术(CABG)患者在体外循环停跳液中使用心肌肽素的安全性及对心肌的保护作用。方法:选择心脏瓣膜替换术患者44例(瓣膜替换组,又随机分为对照患者、用药患者各22例),CABG患者65例(CABG组,又随机分为对照患者33例、用药患者32例)。2组用药患者在麻醉后,静脉滴注心肌肽素1 mg/kg,30分钟给药完毕;第1次灌注时在停跳液中一次性加入心肌肽素2 mg/kg。2组对照患者给予相应的甘露醇。观察围术期血流动力学,心肌组织形态学,心肌酶学及肌钙蛋白含量的变化。结果:所有受试患者均顺利完成试验,未见明显不良反应,均康复出院。CABG组心肌组织形态学:用药患者在用药前心肌组织病变分值较对照患者显著升高(P<0.01),而用药后较对照患者显著降低(P<0.01);用药患者体外循环后心肌组织病变分值较体外循环前显著降低(P<0.01);而对照患者体外循环后心肌组织病变分值较体外循环前显著升高(P<0.01)。瓣膜替换组心肌组织形态学:体外循环前心肌组织病变分值用药患者虽高于对照患者,但无统计学意义;体外循环后用药患者显著低于对照患者(P<0.01);体外循环后对照患者心肌组织病变分值较体外循环前显著升高(P<0.01),用药患者虽有降低,但无统计学差异(P>0.05)。结论:心肌肽素在心脏瓣膜替换术和CABG患者体外循环停跳液中使用是安全的,而且对心肌有一定保护作用。

注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血再灌注能量代谢的影响

目的:探讨注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血再灌注能量代谢的影响及机制。方法:50只SD幼鼠,随机分为5组(n=10),正常对照组:心脏灌流20min稳定后,再持续灌注150min;正常+注射用心肌肽组:同正常对照组,但在灌流液中加入注射用心肌肽50mg/L;模型对照组:心脏灌流20min稳定后,停搏液停搏(缺血)90min,再恢复正常灌流(再灌注)60min,建立心肌缺血再灌注损伤模型,灌流用K-H缓冲液,停搏用ST.Thomas’II停搏液;注射用心肌肽1组(CMP1组):停搏液加入注射用心肌肽100mg/L;CMP2组:灌流液加入注射用心肌肽50mg/L及停搏液加入注射用心肌肽100mg/L)。监测不同组离体灌流心脏心率(HR)、收缩力(△T)及最大收缩速度(+dT/dtmax)和最大舒张速度(-dT/dtmax)、冠状动脉流量(CF)、复搏时间,透射电镜观察缺血再灌注损伤模型组中幼鼠心肌组织超微结构改变。进一步检测3个缺血再灌注损伤组冠状动脉流出液中肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量的变化,心肌组织能量及氧化抗氧化代谢指标、丙二醛、NO的含量,检测心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性,实时荧光定量PCR相对定量检测心肌组织iNOS,eNOS和Akr1b4mRNA表达。结果:正常对照组离体心脏长时间灌流后心功能无明显变化,注射用心肌肽对正常心脏心功能无明显影响。与模型对照组比较,两个用药组心搏功能下降轻微,冠状动脉流量较好。电镜观察可见模型对照组心肌肌原纤维断裂,线粒体肿胀,而用药组心肌组织结构较完整,线粒体未见明显肿胀变性。再灌注后,模型对照组CK-MB增加。与模型对照组比较,两个用药组的CK-MB含量低,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶、心肌总ATP酶活性相对较高,超氧化物歧化酶活性也增高,丙二醛、NO含量低,心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性下降,iNOS,Akr1b4mRNA表达下调,其中CMP2组改变更为明显(P<0.01或P<0.05)。此外eNOSmRNA表达在CMP2组升高(P<0.05),而在CMP1组中变化无统计学意义(P>0.05)。结论:注射用心肌肽可改善缺血心脏再灌注后的能量代谢,增加冠状动脉流量,提高心功能,对幼鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,灌流液及停搏液均加入注射用心肌肽对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用效果更佳。其作用机制可能与抑制心肌细胞iNOS,Akr1b4mRNA表达,减少NO生成,抑制醛糖还原酶的活性有关。

注射用心肌肽预处理对大鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的:探讨注射用心肌肽预处理对幼鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用,阐明其相应的作用机制。方法:通过结扎SD幼鼠冠状动脉左前降支建立缺血再灌注损伤模型。SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组及注射用心肌肽预处理组(CMP组)。检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(Tn-T)和心肌组织匀浆丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)、总一氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量,免疫组织化学法检测NOS2(iNOS)、NOS3(eNOS)含量及Caspase-3蛋白表达水平;光学显微镜观察心肌梗死范围,透射电镜检测心肌组织结构改变;TUNEL法观察心肌凋亡细胞。应用实时荧光定量PCR分析心肌组织iNOS、eNOS、Caspase-3mRNA表达。结果:CMP组大鼠LDH、CK-MB、Tn-T含量低于模型对照组(P<0.05或P<0.01),MDA、SOD、TNOS、iNOS含量以及Caspase-3、iNOS表达水平较假手术组增高,但低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。CMP组与模型对照组大鼠比较,坏死(AN)/缺血危险面积(AAR)下降52%(P<0.01),心肌梗死范围缩小。模型对照组大鼠心肌片状出血,炎性细胞浸润,心肌细胞严重变性坏死,心肌细胞凋亡显著;而CMP组心肌细胞变性坏死程度较轻,血管结构正常,心肌凋亡细胞水平介于假手术组和模型对照组之间。结论:注射用心肌肽预处理对大鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与减少NO生成,抑制心肌细胞Caspase-3mRNA和蛋白表达,从而减少细胞凋亡有关。

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨心肌肽素在离子通道水平的药理作用机制。方法用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录L型钙电流(ICa-L)。结果心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg.L-1使豚鼠心室肌细胞ICa-L分别增加(5±4)%、(21±5)%、(30±5)%、(55±8)%、(76±11)%、(80±9)%,半最大效应浓度(EC50)为(18±6)mg.L-1。心肌肽素50 mg.L-1使ICa-L激活时间(TTP)从(6.7±0.9)m s缩短为(5.9±0.7)m s(P<0.01);使ICa-L电流密度-电压曲线下移,但激活电压、峰电压和I-V曲线的形状不变;激活曲线向负电压方向变化,半数激活电压从(-4.3±0.4)mV减少至(-8.6±0.4)mV(P<0.05);不影响稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。结论心肌肽素浓度依赖性增强豚鼠心室肌细胞ICa-L。

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响

目的:研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响,探讨心肌肽素在离子通道水平的作用机制。方法:用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞,标准全细胞膜片钳技术记录钠电流(INa)。结果:心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg/L使豚鼠心室肌细胞INa分别减少(0±1)%、(6±2)%、(10±2)%、(15±1)%、(22±9)%、(30±6)%,呈浓度依赖性抑制INa。心肌肽素50 mg/L使INa激活时间(TTP)从(2.8±0.7)m s延长至(3.0±0.8)m s(P<0.05);使INa电流密度-电压曲线上移,但不改变激活电位、峰电位、反转电位和I-V曲线的形状;不影响稳态激活曲线、稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。结论:心肌肽素浓度依赖性抑制豚鼠心室肌细胞INa,可能是其抗心律失常作用的机制之一。

心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用

目的 :研究心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用。方法 :采用MTT比色法 ,观察阿霉素中毒心肌细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶的活力。结果 :心肌肽素及 5个分离组分均显示了促进琥珀酸脱氢酶活力的作用 ,其中P1组分活力较强 ;各组分相加亦显示促进酶活力的作用 ,但未见显示相加效应。结论 :心肌肽素对阿霉素所致心肌细胞损伤的促进修复作用 ,系各组分所含物共同作用的结果。

心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用

目的 :观察小分子多肽类物质心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用。方法 :建立培养心肌细胞阿霉素 (ADM)损伤模型 ,观察心肌肽素对心肌细胞肌酸磷酸激酶 (CPK)、乳酸脱氢酶 (LDH)及线粒体脱氢酶活性的影响 ,以荧光染料Fura- 2 -AM定量测定细胞内游离Ca2 + 浓度。结果 :心肌肽素可剂量依赖性降低细胞培养液中CPK和LDH活性及对抗细胞内线粒体脱氢酶活性下降 ,可剂量依赖性地降低培养心肌细胞 [Ca2 + ]i。结论 :心肌肽素对阿霉素损伤培养心肌细胞具有保护作用。

心肌肽素抗培养心肌细胞缺氧再给氧损伤作用

目的 观察小分子多肽类物质心肌肽素对缺氧 再给氧损伤培养心肌细胞的保护作用。方法 建立培养心肌细胞缺氧 再给氧损伤模型 ,分别以荧光微量法和光化学扩增法检测心肌细胞内脂质过氧化反应终产物MDA的含量及细胞内SOD活性 ,线粒体脱氢酶活性用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定。结果 心肌肽素可剂量依赖性地降低MDA的含量 ,提高SOD活性及增强受损细胞内线粒体脱氢酶活性。结论 心肌肽素对缺氧

心肌肽素在小型猪急性心肌缺血再灌注中的作用

目的利用小型猪急性心肌缺血再灌注的模型模拟临床急性心肌梗死患者内科再灌注治疗过程,探讨心肌肽素在小型猪急性心肌缺血再灌注中的保护作用及可能的作用机制。方法 12只小型猪分成单纯损伤组和治疗组,每组6只。X线下用球囊阻断冠状动脉左前降支血流造成心肌缺血;90 min后退出球囊,血流再通造成再灌注损伤。在心肌缺血60 min后,经静脉给予治疗组动物心肌肽素、单纯损伤组动物0.9%NaCl水溶液干预。分别在术前、用药结束和用药后24 h进行血清酶学及超声心动检查。用药24 h后,取出心脏进行TTC染色并测量梗死面积,切片行病理学检查、评分和原位凋亡检测。结果两组各有5只动物存活至实验终点,治疗组乳酸脱氢酶、肌酸激酶和肌酸激酶MB同工酶水平与单纯损伤组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组用药后24 h左心室舒张末容积较单纯损伤组增高,差异有统计学意义(P<0.05);两组的心肌梗死面积和损伤评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗组的梗死区细胞凋亡较单纯损伤组明显减少(P<0.05)。结论用小型猪急性心肌缺血再灌注模型模拟急性心梗患者内科再灌注治疗,静脉输注心肌肽素可通过减少梗死区细胞凋亡保护心肌,但对于大面积、严重心梗患者,短时间、单独使用心肌肽素不能明显减小梗死面积和改善心功能。

心肌肽素在体外循环中对心肌保护的临床研究

目的探讨心肌肽素(CMP)在体外循环中对心肌的保护作用.方法50例风湿性心脏病患者,随机分成对照组和实验组。对照组经升主动脉根部灌注冷晶体停跳液,实验组在晶体停跳液的基础上加入心肌肽素60mg/L。其它处理两组相同。从心肌酶谱(AST、CK-MB、LDH1)、心肌组织细胞形态学、心肌细胞超微结构等观察对心肌的影响。结果(1)两组病例心肌酶在升主动脉开放后显著升高,但实验组明显低于对照组,两组间差异有显著性。(2)心肌组织细胞形态学、细胞超微结构观察发现对照组因缺血、缺氧引起的心肌纤维变性、心肌横纹模糊和空泡样变显著,电镜结果显示对照组术后部分心肌纤维溶解断裂,线粒体肿胀明显;而实验组心肌细胞的形态学超微结构损伤轻。结论心肌肽素加入晶体停跳液中可加强心肌保护,减少心肌酶的释放,心肌细胞超微结构损伤轻,对心肌的保护效果优于单纯晶体停跳液。

注射用心肌肽对PCI治疗的ST段抬高型心肌梗死患者心功能的影响

背景目前,治疗ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)的首选方法是直接经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗。既往研究发现注射用心肌肽能够改善心肌缺血再灌注损伤,对接受PCI的STEMI患者临床疗效有潜在益处。目的探讨注射用心肌肽在接受PCI治疗的STEMI患者中的心肌保护作用。方法连续募集2014年7月-2017年6月在解放军总医院一中心心血管内科接受PCI治疗的STEMI患者310例。将患者随机分为心肌肽组(n=154)和对照组(n=156)。入组的患者在PCI期间至术后3 d分别静脉输注3 mg/(kg·d)的注射用心肌肽或安慰剂(0.9%氯化钠注射液)治疗。术后7~30 d使用多普勒超声心动图评估左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)的变化,术后1个月后行6分钟步行试验量化患者的运动能力,观察PCI前后患者B型脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)的变化。结果与对照组比较,心肌肽组出院后复查的LVEF显著增加(57.8%±12.8%vs 51.0%±12.1%,P<0.001),术后BNP水平显著降低[Md(IQR):848(732,940)pg/mL vs 1150(1038,1245)pg/mL,P<0.001];此外,心梗恢复期心肌肽组6分钟步行试验的距离增加[(773.7±166.2)m vs(618.2±186.3)m,P<0.001]。结论注射用心肌肽可以改善PCI治疗的STEMI患者的心功能和运动耐量,可辅助STEMI患者的PCI治疗。

心肌肽素在心肌细胞氧化应激中的作用

研究心肌肽素对过氧化氢所致心肌细胞氧应激模型中所起的作用。采用原代培养乳鼠心肌细胞,以200μmol/L过氧化氢作用2 h诱导心肌细胞造成氧化应激模型,细胞损伤前分别给予不同浓度的心肌肽素进行干预。使用RT-PCR检测Caspase-3表达变化,MTT比色法检测原代乳鼠心肌细胞的活力,黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性。过氧化氢组心肌细胞活力低于对照组,超氧化物歧化酶活性下降(P<0.05),caspase-3 mRNA表达升高;心肌肽素组细胞活力、超氧化物歧化酶活性高于过氧化氢组,而caspase-3 mRNA表达水平较过氧化氢组降低(P<0.05),不同浓度心肌肽素之间无明显差别(P>0.05)。心肌肽素对过氧化氢造成的心肌细胞损伤作用有抵抗作用且这种抵抗作用与其抑制凋亡作用有关。