人参皂苷Re对APP/PS转基因痴呆小鼠学习记忆力及海马Caspase-3、P53蛋白的影响

目的探讨人参皂苷Re对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆影响及其对海马神经元保护作用机制。方法将淀粉样前体蛋白/早老素(APP/PS)转基因小鼠分为五组,分别为对照组、AD组、低-Re组、中-Re组、高-Re组,选择人参皂苷Re中药为干扰药物,选择Morris水迷宫实验观察各种小鼠学习记忆能力,选择甲苯胺蓝染色实验观察各组小鼠海马区神经元形态,选择免疫组织化学技术观察各种小鼠半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、P53蛋白变化情况。结果与AD组比较,中低-Re组、中-Re组、高-Re组小鼠认知功能得到改善、海马区受损神经元得到修复、海马区神经元Caspase-3、P53蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论人参皂苷Re对AD的影响机制与降低其受损海马神经元凋亡有关。

心理护理对老年乳腺癌化疗患者血清PARP-1和Caspase-3蛋白表达水平的影响

目的观察心理护理对老年乳腺癌化疗患者血清中PARP-1和Caspase-3蛋白表达水平的影响。方法 80例老年乳腺癌化疗患者,随机分为常规护理组和心理护理组;两组乳腺癌患者均于化疗第1天及化疗21 d后采血,采用ELISA方法检测血清中PARP-1和Caspase-3蛋白含量;采用实时荧光定量法检测PARP-1和Caspase-3 mRNA的表达水平。结果与化疗前比较,化疗后两组PARP-1蛋白含量及mRNA的表达水平均降低(P<0.05)(P<0.01),且Caspase-3蛋白含量及mRNA的表达水平均升高(P<0.05,P<0.01)化疗后常规护理组PARP-1蛋白含量及mRNA的表达水平高于心理护理组(P<0.05),Caspase-3蛋白含量及mRNA的表达水平低于心理护理组(P<0.05)。结论心理护理能减轻老年乳腺癌患者化疗的负反应,提高术后生活质量。

槲皮素对急性心肌缺血大鼠心肌caspase-3基因蛋白表达的影响

为观察槲皮素对急性心肌缺血大鼠心肌细胞半胱氨酸蛋白酶 3 (caspase 3 )基因蛋白表达的影响 ,采用大鼠急性心肌缺血模型 ,应用免疫组织化学PAP法检测caspase 3基因蛋白的表达 ,并用图像分析系统进行定量分析。发现 :大鼠急性心肌缺血后心肌细胞caspase 3基因蛋白表达明显增强 ,槲皮素预保护可降低caspase 3基因蛋白的表达。提示 :槲皮素对急性心肌缺血损伤有保护作用 ,这种保护作用可能是通过抑制心肌细胞caspase 3基因蛋白的表达实现的。

昆母汤醇提液对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡及caspase-3表达的影响

目的观察昆母汤醇提液对人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)凋亡及对caspase-3表达的影响,探讨昆母汤治疗RA的部分作用机制。方法滑膜组织取自行关节置换术或关节镜检查术的8例活动性RA患者,分离出FLS进行原代培养,采用流式细胞仪检测法检测昆母汤醇提液对RA-FLS细胞凋亡率的影响,采用酶联免疫吸附测定法检测培养上清液caspase-3蛋白含量的变化。结果昆母汤醇提液和甲氨蝶呤均可显著促进RA-FLS的凋亡,且昆母汤醇提液促RA-FLS凋亡能力在一定程度上呈剂量依赖性。高剂量昆母汤醇提液可使TNF-α诱导的caspase-3表达量增加。结论昆母汤可能通过促进caspase-3的表达来促进RAFLS凋亡,具有治疗RA的潜在价值。

老年病毒性心肌炎患者外周血NLRP3-ASC-Caspase-1-IL-18/IL-1β-TGF-β信号通路的变化及意义

目的探究老年病毒性心肌炎患者外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3-凋亡相关斑点样蛋白(ASC)-半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1-白细胞介素(IL)-18/IL-1β-转化生长因子(TGF)-β信号通路的变化及意义。方法选择140例老年病毒性心肌炎患者,根据病程分为急性期和恢复期,另选择同期50例健康体检者,均采用聚合酶链反应检测外周单个核细胞(PBMCs)中NLRP3炎性小体、ACS、Caspase-1 mRNA水平,Western印迹检测上述三者蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附试验检测外周血IL-18、IL-1β和TGF-β水平,分析检测结果。结果140例患者检出病毒140株,其中RNA病毒86株,DNA病毒54株,主要病毒为柯萨奇病毒B、柯萨奇病毒A和疱疹病毒1型;病毒性心肌炎急性期患者NLRP3、ACS、Caspase-1 mRNA及其蛋白表达水平和血清IL-18、IL-1β、TGF-β水平均显著高于恢复期和对照组(P<0.05),恢复期和对照组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);病毒性心肌炎急性期患者NLRP3 mRNA及其蛋白表达与ACS、Caspase-1 mRNA表达和ACS、Caspase-1蛋白表达及血清IL-18、IL-1β、TGF-β水平均呈正相关(P<0.05)。结论老年病毒性心肌炎急性期患者NLRP3-ASC-Caspase-1-IL-18/IL-1β-TGF-β信号通路被激活,参与病理过程,可为疾病诊疗提供指导。

Survivin和Caspase-3在乳癌组织的表达及相关性

目的了解Survivin和Caspase-3在乳癌组织的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测56例乳癌组织和10例正常乳腺组织中Survivin和Caspase-3表达,并分析其与临床病理特征相关性。结果正常乳腺组织中未见Survivin阳性表达,Caspase-3阳性表达率为100%。乳癌组织中Survivin和Caspase-3阳性表达率分别为67.9%(38/56)、51.8%(29/56),Survivin表达与淋巴结转移有关(χ2=7.09,P<0.01),与年龄、肿瘤大小、组织学分级、临床TNM分期均无关;Caspase-3表达与年龄、肿瘤大小、组织学分级、临床TNM分期及淋巴结转移均无关。乳癌组织Survivin和Caspase-3表达呈显著负相关(r=-0.361,P<0.05)。结论Survivin和Caspase-3可通过促进或抑制细胞凋亡,对乳癌的发生和发展起重要作用。

细辛脑注射液对槐定碱致痫大鼠Caspase3及热休克蛋白-70表达的影响

目的通过对槐定碱致痫大鼠脑内Caspase3及热休克蛋白-70(hsp-70)含量的测定,探讨细辛脑注射液抗癫痫作用的机制。方法随机将42只大鼠分为6组,空白组、模型组、卡马西平阳性对照组及细辛脑低剂量组、中剂量组和高剂量组。通过免疫组化学法和Nissle染色法,研究细辛脑注射液对Caspase3和hsp-70含量的影响。结果研究表明与模型组比较,细辛脑注射液中、高剂量组可显著减轻大鼠癫痫发作(P<0.05),可使槐定碱致痫大鼠的脑组织中减少Caspase3释放,降低hsp-70在大鼠脑内的表达。结论细辛脑注射液具有良好的抗癫痫效果,可减轻大鼠癫痫发作时对脑组织的损伤。

艾灸神阙穴对衰老模型小鼠脑组织凋亡相关因子bcl-2、bax、caspase-3和p53表达的影响

目的研究艾灸神阙穴对衰老模型小鼠脑组织凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关的X基因(bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3和p53蛋白表达的影响,探讨艾灸神阙穴延缓衰老的作用机制。方法健康2月龄昆明雄性小鼠,将其随机分为青年组、衰老模型组、艾灸组;青年组不做任何处理,衰老模型组和艾灸组每日颈背部皮下注射D-半乳糖120 mg/kg,连续注射42 d;艾灸组从模型复制的第15天起开始对神阙穴进行施灸,每次灸15 min,每日1次,每周连续施灸5 d后休息2 d再灸,连续4 w。艾灸结束后取出各组小鼠脑组织,采用Western印迹法检测小鼠脑组织bcl-2、bax、caspase-3和p53的蛋白表达。结果与青年组比,衰老模型组bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.001),bax、caspase-3和p53的蛋白表达均显著升高(P<0.001,P<0.05);与衰老模型组比,艾灸组bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.001),bax、caspase-3和p53的蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论艾灸神阙穴能延缓D-半乳糖所致衰老模型小鼠的衰老,其作用机制可能与调节脑组织bcl-2、bax、caspase-3和p53的蛋白表达有关。

基于P53、Bax、Caspase-3基因表达探讨竹节参水提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

目的基于P53、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3基因表达探讨竹节参水提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响。方法以宫颈癌HeLa细胞为研究对象,给予不同浓度竹节参水提取物(0、50、100、150μg/ml)进行培养(分别为A、B、C、D组),MTT法检测HeLa细胞增殖抑制情况;TUNEL法对比HeLa细胞凋亡率;流式术观察HeLa细胞周期;苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态;RT-PCR法测定P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平。结果与A组相比,B组宫颈癌细胞增殖活力明显减弱(P<0.05);与B组相比,C组宫颈癌细胞增殖活力明显减弱(P<0.05);与C组相比,D组宫颈癌细胞增殖活力减弱。与A组相比,B组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与B组相比,C组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与C组相比,D组宫颈癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。HeLa细胞周期在竹节参水提取物的作用下G0/G1期上升,S期下降。A组未添加竹节参水提取物,HeLa细胞细胞核形态为卵圆状,染色也较为均匀;B组添加竹节参水提取物后,部分HeLa细胞细胞核形态改变,出现缩小和浓缩现象,荧光现象也增强;C、D组细胞因提取物浓度增加,细胞核形态改变加剧,荧光亮度攀升,细胞核边缘破碎。宫颈癌Hela细胞中P53、Bax、Caspase-3 mRNA表达随竹节参水提取物浓度的增加而增加。结论竹节参水提取物可以降低体外宫颈癌细胞的增殖活力,并诱导其自噬和凋亡,这可能是通过竹节参水提取物调控P53、Bax、Caspase-3基因表达来实现的。

乳腺非特殊型浸润性癌和非典型导管增生组织中Caspase-3、P53及Ki-67表达变化

目的探讨乳腺非特殊型浸润性癌、非典型导管增生组织中Caspase-3、P53及Ki-67表达变化。方法回顾性收集200例乳腺手术切除标本,其中100例非特殊型浸润性癌、100例非典型导管增生症。观察乳腺非特殊型浸润性癌、非典型导管增生组织中Caspase-3、P53及Ki-67表达变化,分析Caspase-3、P53、Ki-67三者表达的相关性及其与乳腺非特殊型浸润性癌的临床病理特征的关系。结果乳腺非特殊型浸润性癌中Caspase-3显著低于非典型导管增生组织,P53、Ki-67阳性表达例数均显著高于非典型导管增生组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Caspase-3、P53及Ki-67表达与非特殊型浸润性癌的组织学分级、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);而与非特殊型浸润性癌的年龄、肿瘤直径无关(P>0.05)。在乳腺非特殊型浸润性癌中,Caspase-3表达与P53、Ki-67呈负相关(r=0.445,P<0.05;r=0.417,P<0.05),P53与Ki-67呈显著性正相关(r=0.387,P<0.05)。结论与非典型导管增生组织相比,Caspase-3在乳腺非特殊型浸润性癌中表达较低,P53及Ki-67在乳腺非特殊型浸润性癌中表达较高,而且上述三种蛋白表达情况与肿瘤临床病理特征有关,可为临床诊断、治疗提供一定依据。

富血小板血浆通过抑制P53/Caspase-3途径改善脂多糖诱导的BV2细胞凋亡

目的探讨富血小板血浆(PRP)对脂多糖(LPS)诱导的BV2细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法BV2小胶质细胞分成正常组、10%PRP组、LPS组和10%PRP+LPS组。用LPS(1μg/ml)激活后,光学显微镜查看细胞形态变化,TUNEL法测定细胞凋亡水平。Western印迹检测p-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、p-蛋白激酶B(AKT)、P53、B细胞淋巴瘤(Bcl)-相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、Cleaved-胱天蛋白酶(Caspese)-9、Cleaved-Caspese-3和自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ蛋白表达。结果与正常组相比,LPS组BV2细胞因被激活而呈现明显的阿米巴样改变,TUNEL阳性细胞数明显增加(P<0.01)。与LPS组比较,不同浓度PRP(3%、5%、10%)显著降低了BV2细胞的活化和凋亡水平(P<0.01)。与正常组相比,10%PRP组p-PI3K和p-AKT表达明显增加(P<0.01);LPS组P53、Bax、Cleaved-Caspese-9、Cleaved-Caspese-3和LC3Ⅱ表达明显升高,p-PI3K、p-AKT和Bcl-2表达显著下调(P<0.01)。与LPS组比较,10%PRP+LPS组P53、Bax、Cleaved-Caspese-9、Cleaved-caspese-3和LC3Ⅱ表达明显降低,p-PI3K、p-AKT和Bcl-2表达明显升高(P<0.01)。结论PRP能通过P53/Caspase-3途径改善LPS诱导的BV2小胶质细胞凋亡。

糖原合酶激酶3-β对胃癌细胞生长的影响及其机制

目的观察GSK-3β功能改变对胃癌细胞生长影响并初步探讨其作用机制。方法体外MTT观察LY294002单独或联合LiCl对人胃癌细胞株SGC-7901作用。采用Western blot、RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测总GSK-3β、p-GSK-3βser9、CyclinD1和Caspase3表达。结果LY294002对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用,呈时间浓度依赖关系;LY294002干预细胞72h后,总GSK-3β表达无改变,p-GSK-3βser9和CyclinD1表达下降,caspase3表达升高;LiCl部分拮抗LY294002对细胞的生长抑制及对CyclinD1和caspase3表达的改变。结论GSK-3β对胃癌细胞生长具有抑制作用,其机制可能与阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡有关。

PI3-K/Akt信号通路对阿尔茨海默病神经元凋亡的调节作用

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K/Akt)途径是细胞内重要的促细胞存活通路之一,PI3-K被细胞外信号活化后,激活下游蛋白激酶Akt。在阿尔茨海默病(AD)的发病过程中,凋亡相关基因Bad、GSK-3、转录因子家族、caspases家族等参与了神经元的凋亡,导致神经元的大量丢失。而活化的Akt通过磷酸化Bad、GSK-3、转录因子家族、IB、caspases等使促凋亡基因失活,从而起到抑制神经元凋亡及促进神经元存活的作用,进而减少AD神经元的大量丢失,改善AD的病理变化。

2-甲基-3-羟基蒽醌诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制

为探讨2-甲基-3-羟基蒽醌抗肿瘤作用及其机制,本研究采用锥虫蓝法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞周期变化、细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞内游离钙的变化,Western blot方法检测凋亡相关蛋白caspase-4、caspase-7、caspase-9、Bcl-2、Bax、JNK、细胞色素C的表达。结果发现:2-甲基-3-羟基蒽醌时间依赖性地抑制乳腺癌细胞的生长,升高细胞内游离钙含量,降低线粒体膜电位并诱导其凋亡;药物上调Bax并下调Bcl-2蛋白的表达;诱导caspase-4、caspase-7、caspase-9、calpain的活化及细胞色素C的释放。结果提示2-甲基-3-羟基蒽醌可能通过Ca2+/calpain/caspase-4途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡。

两株NIH-3T3细胞间的基因表达差异研究

通过与细胞膜表面的受体TNFRⅠ结合,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可诱导凋亡或坏死.有两株NIH-3T3细胞在TNF刺激下分别存在两种死亡情况:NIH-3T3(R)为caspase依赖的凋亡;而NIH-3T3(S)的死亡则不依赖caspase.为了深入研究两株细胞在TNF-α诱导下选择不同死亡方式的机理,本研究利用cDNA表达谱芯片对这两株细胞的基因表达差异性进行研究,筛选出差异表达的基因,利用逆转录PCR验证,从而鉴定出两个可能与细胞死亡相关的基因:calpain6和R IP3.

NLRP3炎症小体与相关炎症信号通路在肾缺血-再灌注损伤中的作用

肾缺血-再灌注损伤(IRI)常见于肾移植术中,是引起急性肾衰竭的重要病理生理过程,严重影响受者预后。炎症反应在IRI的发病机制及病理过程中占据着重要地位。活化的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体可通过介导多种促炎因子的成熟与释放,调节机体炎症反应及相关细胞功能。本文对肾IRI中的NLRP3炎症小体及其相关炎症信号通路的作用机制进行了总结,旨在为临床肾IRI的防治提供新思路。

3-硝基丙酸建模探讨亨廷顿舞蹈病发病机制进展

亨廷顿舞蹈病是由于亨廷顿基因中CAG序列异常扩增从而产生异常的亨廷顿蛋白,导致纹状体及大脑皮层的选择性神经变性,产生相应症状,目前发病机制尚不明确。能量代谢抑制剂3-硝基丙酸处理的大鼠模型可表现出与此病相似的病理特征及一部分临床症状,建模研究纹状体选择性变性的发病机制,涉及钙蛋白酶、半胱氨酸依赖的蛋白酶(Caspase)家族、氧自由基等细胞内途径,谷氨酸、多巴胺等细胞外途径。

miR-361-3P调控转化生长因子β1诱导成骨细胞凋亡的研究

目的研究人成骨细胞内miR-361-3P对转化生长因子β1(TGF-β1)和细胞凋亡标志分子caspase 3蛋白活性表达的影响,探讨miR-361-3P/TGF-β1通路在人成骨细胞凋亡中的作用机制。方法用miR-361-3p mimic或inhibitor及TGF-β1 siRNA(siTGF-β1)转染人成骨细胞系hFob1.19;RT-qPCR和Western blotting检测caspase 3的变化;CCK-8法检测细胞的增殖和凋亡;荧光素酶基因报告实验检测miR-361-3p和TGF-β1基因的结合情况。结果在hFob1.19细胞内,miR-361-3p mimic显著下调了TGF-β1mRNA表达,同时明显抑制了细胞内的TGF-β1蛋白活性(P<0.05);miR-361-3p mimic作用hFob1.19细胞48 h后,miR-361-3p可明显抑制细胞增殖(P<0.05),导致成骨细胞内caspase 3蛋白活性明显升高(P<0.05),并减少WT-TGF-β1的荧光素酶活性;miR-361-3p inhibitor可增强hFob1.19细胞增殖,抑制细胞内caspase 3蛋白活性,而si-TGF-β1则可明显增强caspase 3活性表达。结论miR-361-3p可能通过抑制TGF-β1负向调控人成骨细胞的增殖并促进其凋亡。

褪黑素对缺血再灌注大鼠肾组织中Caspase-3表达、血浆TNF-α、IL-6及血清BUN、ScrIIGU的影响

目的观察褪黑素(MT)对缺血再灌注(IR)大鼠肾组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3表达及血浆中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平的影响。方法60只大鼠随机分为假手术组(n=10)、IR组(n=25)及IR+MT 3.0 mg/kg组(MT 3.0 mg组,n=25)。于再灌注后6 h及24 h两个时间点处死大鼠并留取下腔静脉血及肾组织标本;全自动生化分析仪检测血清BUN、Scr变化,光镜观察肾脏组织及细胞形态改变,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆IL-6、TNF-α、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,免疫组化检测Caspase-3表达,原位末端标记(TUNEL)法检测肾小管上皮细胞凋亡率。结果IR 6 h及24 h后,与IR组相比,MT 3.0 mg组血清BUN、Scr水平、Paller评分、血浆TNF-α、IL-6、hs-CRP水平、肾组织中Caspase-3蛋白表达及细胞凋亡率显著降低(均P<0.01)。结论早期给予MT可明显改善IR导致的大鼠肾损伤,保护肾脏功能。其机制与减少IL-6、TNF-α产生,降低Caspase-3表达,降低其调控的细胞凋亡有关。

利拉鲁肽对糖耐量异常OLETF大鼠胰岛白细胞介素-1β表达的影响

目的观察利拉鲁肽对糖耐量异常大鼠胰岛炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和凋亡基因caspase3表达的影响。方法 12周龄糖耐量异常OLETF大鼠分为生理盐水组和不同剂量利拉鲁肽干预组(50、100、200μg/kg),8只LETO作为正常对照组。实验12周结束时,所有大鼠均检测糖耐量试验空腹及服糖后30 min胰岛素,并检测胰岛IL-1β和caspase3 mRNA和蛋白水平。结果利拉鲁肽干预的糖耐量异常大鼠和生理盐水干预组相比,胰岛IL-1β和caspase3表达显著降低,血糖、胰岛β细胞功能及早期胰岛素分泌指数明显改善。结论利拉鲁肽可能通过抑制胰岛IL-1β炎症因子表达,从而改善胰岛功能及糖代谢,延缓或阻止糖尿病发生发展。