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胰腺导管腺癌中LMTK3、caspase 3、caspase 7的临床表达意义
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作者 李玉梅 《罕少疾病杂志》 2023年第6期48-50,共3页
目的 探讨胰腺导管腺癌中LMTK3、caspase 3、caspase 7的临床表达意义。方法 选择2017年1月~2021年4月83例胰腺导管腺癌患者作为研究对象,收集癌组织与癌旁组织石蜡包埋标本,采用免疫组织化学法检测LMTK3、caspase 3、caspase 7的表达... 目的 探讨胰腺导管腺癌中LMTK3、caspase 3、caspase 7的临床表达意义。方法 选择2017年1月~2021年4月83例胰腺导管腺癌患者作为研究对象,收集癌组织与癌旁组织石蜡包埋标本,采用免疫组织化学法检测LMTK3、caspase 3、caspase 7的表达情况。所有患者均随访,中位随访期为16个月。结果 与癌旁正常组织比较,癌组织中的LMTK3高表达率明显提高(P<0.05),而caspase 3和caspase 7高表达率明显降低(P<0.05)。癌组织中LMTK3的表达与caspase 3、caspase 7均呈负相关(r=-0.628、-0.697,P=0.021、0.015),caspase 3与caspase 7呈正相关(r=0.847,P=0.006)。LMTK3的表达与胰腺导管腺癌的临床病理特征之间均无明显关系(P>0.05),caspase 3的表达与年龄、有无神经侵犯有关(P<0.05),caspase 7的表达与肿瘤直径、有无淋巴结转移有关(P<0.05)。存活患者与死亡患者LMTK3、caspase 3、caspase 7的表达均无明显差异(P>0.05)。结论 LMTK3、caspase 3、caspase 7与胰腺导管腺癌存在一定关系,但对胰腺导管腺癌的临床意义可能有限。 展开更多
关键词 胰腺导管腺癌 LMTK3 caspase 3 caspase 7
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斑蝥酸钠维生素B_6注射液对人肺癌细胞系A549增殖抑制及核因子κB和Caspase3/7的影响 被引量:9
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作者 温省初 王一飞 +4 位作者 李爱明 李冠军 成志勇 王亚丽 石林 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第36期4176-4179,共4页
目的探讨斑蝥酸钠(SC)维生素B6注射液对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡及核因子κB(NF-κB)、凋亡分子Caspase3/7的影响。方法用不同浓度(0、1.0、2.5、5.0 mg/L)的SC维生素B6注射液处理A549细胞,观察光镜及Hoechst33342荧光染色检... 目的探讨斑蝥酸钠(SC)维生素B6注射液对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡及核因子κB(NF-κB)、凋亡分子Caspase3/7的影响。方法用不同浓度(0、1.0、2.5、5.0 mg/L)的SC维生素B6注射液处理A549细胞,观察光镜及Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡形态;用噻唑蓝(MTT)比色法检测SC维生素B6注射液对细胞增殖的抑制作用;罗丹明123检测线粒体膜电位;Caspase3/7活性检测试剂盒检测Caspase3/7活性;蛋白印迹检测NF-κB P65、I-κB蛋白表达。结果 SC维生素B6注射液对A549细胞的体外增殖有明显抑制作用,细胞形态出现明显凋亡改变,5.0 mg/L组作用A549细胞72 h后,细胞增殖抑制率最大达到67.37%。细胞线粒体膜电位检测结果显示,随着SC维生素B6注射液浓度的增加及时间的延长,线粒体膜电位逐渐减弱,同时Caspase3/7蛋白活性增强;SC维生素B6注射液作用A549细胞后NF-κB P65蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而I-κB蛋白表达水平则无显著变化。结论 SC维生素B6注射液可能通过抑制NF-κB P65表达,激活Caspase-3/7活性,从而抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 非小细胞肺 斑蝥酸钠维生素B6 A549细胞系 膜电位 线粒体 caspase3/7 NF-κB
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羊水过少对妊娠结局及胎盘组织中Cx43、Caspase7蛋白表达的影响 被引量:11
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作者 姚瑾 滕颖 《生殖医学杂志》 CAS 2020年第3期380-384,共5页
目的探讨羊水过少对母婴妊娠结局的影响,并检测胎盘组织中缝隙连接蛋白43(Cx43)、半胱氨酸肽酶7(Caspase7)蛋白阳性表达情况,分析羊水过少与Cx43、Caspase7蛋白表达之间的关系。方法选择本院2016年1月至2018年12月羊水过少的孕产妇110... 目的探讨羊水过少对母婴妊娠结局的影响,并检测胎盘组织中缝隙连接蛋白43(Cx43)、半胱氨酸肽酶7(Caspase7)蛋白阳性表达情况,分析羊水过少与Cx43、Caspase7蛋白表达之间的关系。方法选择本院2016年1月至2018年12月羊水过少的孕产妇110例作为研究组,选取同期羊水正常的产妇110例作为对照组。记录两组孕产妇围产期结局,观察新生儿不良结局情况,检测胎盘组织中Cx43、Caspase7蛋白表达水平。结果研究组的阴道顺产率(17.27%)显著低于对照组(56.36%)(P<0.05);研究组产妇的剖宫产率、产程异常发生率、新生儿不良结局总发生率分别为74.55%、16.36%、15.45%,显著高于对照组的37.27%、3.64%、5.45%(P<0.05)。研究组产妇胎盘Cx43蛋白阳性率及阳性评分分别为21.45%、(2.42±0.71)分,显著低于对照组的67.64%、(7.69±0.83)分,蛋白表达的阳性程度亦显著低于对照组(P<0.05)。研究组产妇胎盘Caspase7蛋白阳性率及阳性评分分别为65.64%、(7.69±0.83)分,显著高于对照组的18.73%、(2.42±0.71)分,蛋白表达的阳性程度亦显著高于对照组(P<0.05)。结论羊水过少产妇剖宫产率增加,产妇产程异常、新生儿不良结局总发生率上升;产妇胎盘Cx43蛋白表达下调,而Caspase7蛋白表达呈现上升趋势,可能与羊水过少有关。 展开更多
关键词 羊水过少 妊娠结局 缝隙连接蛋白43(Cx43) 半胱氨酸肽酶7(caspase7)
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益气化瘀补肾方血清对兔关节软骨细胞增殖与Caspase3/7酶活性的影响 被引量:5
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作者 胡波 唐德志 +5 位作者 赵永见 张有为 周泉 胡志俊 施杞 王拥军 《上海中医药杂志》 2010年第12期73-75,共3页
目的观察益气化瘀补肾方含药血清对体外培养的兔关节软骨细胞增殖与Caspase3/7酶活性的影响。方法取兔的膝关节软骨,将软骨细胞分离传代后,取第三代细胞,用10μg/L的IL-1β诱导正常软骨细胞退变,制备益气化瘀补肾方含药血清作为干预措... 目的观察益气化瘀补肾方含药血清对体外培养的兔关节软骨细胞增殖与Caspase3/7酶活性的影响。方法取兔的膝关节软骨,将软骨细胞分离传代后,取第三代细胞,用10μg/L的IL-1β诱导正常软骨细胞退变,制备益气化瘀补肾方含药血清作为干预措施。益气化瘀补肾方组分别加入IL-1β及不同溶度(5%,10%,20%)益气化瘀补肾方含药血清培养液,对照组分别加入IL-1β及不同溶度(5%,10%,20%)空白血清培养液,分别培养24h、48h后,采用MTT比色法检测软骨细胞增殖。另取对数生长期第三代软骨细胞分为4组:正常软骨细胞+20%空白血清;正常软骨细胞+20%益气化瘀补肾方含药血清;IL-1β诱导软骨细胞+20%空白血清;IL-1β诱导软骨细胞+20%益气化瘀补肾方含药血清。每组6个复孔,每孔100μl,各组分别用相应的血清培养24h、48h后进行检测,采用Caspase3/7试剂盒检测各组软骨细胞的Caspase3/7酶活性变化情况。结果不同浓度的益气化瘀补肾方血清均能拮抗IL-1β抑制软骨细胞增殖;与正常软骨细胞+20%空白血清组比较,IL-1β诱导软骨细胞+20%空白血清组Caspase3/7酶活性升高,差异有统计学意义(P<0.05);与IL-1β诱导软骨细胞+20%空白血清组比较,IL-1β诱导软骨细胞+20%益气化瘀补肾方血清组Caspase3/7酶活性降低,差异有统计学意义(P<0.05);正常软骨细胞+20%益气化瘀补肾方血清组的Caspase3/7酶活性与正常软骨细胞+20%空白血清组和IL-1β诱导软骨细胞+20%益气化瘀补肾方血清组差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气化瘀补肾方血清能拮抗IL-1β抑制软骨细胞增殖,下调软骨细胞Caspase3/7酶活性,从而抑制软骨细胞的凋亡。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞增殖 益气化瘀补肾方 血清药理学 caspase3/7
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脐血中Caspase7蛋白在羊水量异常产妇中的表达 被引量:3
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作者 李小琴 白彩云 《中国妇幼健康研究》 2016年第1期31-33,共3页
目的探讨Caspase7蛋白在羊水量异常和正常的产妇血清中的表达差异。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测30例羊水过少、30例羊水过多和30例羊水量正常产妇脐带血中Caspase7蛋白表达水平的情况,并加以分析。结果Caspase7蛋白在3组产... 目的探讨Caspase7蛋白在羊水量异常和正常的产妇血清中的表达差异。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测30例羊水过少、30例羊水过多和30例羊水量正常产妇脐带血中Caspase7蛋白表达水平的情况,并加以分析。结果Caspase7蛋白在3组产妇血清中均有阳性表达。羊水过少组血清中Caspase7蛋白平均浓度(160.2±25.8ng/mL)比对照组高(142.9±18.4ng/mL),差异有统计学意义(t=2.99,P<0.05)。羊水过多组血清中Caspase7蛋白平均浓度(119.2±21.5ng/mL)比对照组低(142.9±18.4ng/mL),差异也有统计学意义(t=4.59,P<0.05)。结论羊水过少或过多产妇血清中Caspase7蛋白表达异常,提示其可能与羊水量异常的发生有关。 展开更多
关键词 羊水过少 羊水过多 脐血 caspase7蛋白
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Apoptotic and nonapoptotic function of caspase 7 in spermatogenesis 被引量:2
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作者 Bin Lei Xuming Zhou +5 位作者 Daojun Lv Bo Wan Huayan Wu Liren Zhong Fangpeng Shu Xiangming Mao 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2017年第1期47-51,共5页
Recent studies have reported that caspase 7 has an apoptotic and nonapoptotic function. However, the relationship between caspase 7 and spermatogenesis remains unknown. This study aimed to investigate the possible fun... Recent studies have reported that caspase 7 has an apoptotic and nonapoptotic function. However, the relationship between caspase 7 and spermatogenesis remains unknown. This study aimed to investigate the possible function of caspase 7 during normal and abnormal spermatogenesis. The cleaved form of caspase 7 was detected in testis tissues at different postpartum times (5-14 weeks) by qRT-PCR, Western blot and immunohistochemistry (IHC). Then, the mice models of spermatogenic dysfunction were obtained by busulfan (30 mg kg-1) to further evaluate the potential function and mechanism of caspase 7. qRT-PCR and Western blot results showed that caspase 7 expression was gradually elevated from 5 to 14 weeks, which was not connected with apoptosis. IHC results revealed that caspase 7 was mainly located in spermatogenic cells and Leydig cells. In addition, spermatogenic dysfunction induced by busulfan gradually enhanced the apoptosis and elevated the expression of caspase 3, caspase 6, and caspase 9, but decreased the expression of caspase 7 in spermatogenic cells. However, when spermatogenic cells were mostly disappeared at the fourth week after busulfan treatment, caspase 7 expression in Leydig cells was significantly increased and positively correlated with the expression of caspase 3, caspase 6, and caspase 9. Therefore, these results indicate that caspase 7 has a nonapoptic function that participates in normal spermatogenesis, but also displays apoptotic function in spermatogenic dysfunction. 展开更多
关键词 APOPTOSIS caspase 7 caspaseS SPERMATOGENESIS spermatogenic dysfunction
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TRIM69可抑制紫外线和依托泊苷刺激时HeLa和HEK293T细胞系内活化型caspase7和剪切型PARP的表达 被引量:2
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作者 姚荣彦 韩永卿 +2 位作者 缪时英 王琳芳 宋伟 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第7期956-961,共6页
目的验证TRIM69蛋白是否能够抑制He La和HEK293T细胞系内活化型caspase7(cleaved caspase7)和剪切型PARP(cleaved PARP)的蛋白水平。方法构建含人源TRIM69的真核表达质粒,转染He La细胞和HEK293T细胞,筛选稳定表达TRIM69的细胞系,通过... 目的验证TRIM69蛋白是否能够抑制He La和HEK293T细胞系内活化型caspase7(cleaved caspase7)和剪切型PARP(cleaved PARP)的蛋白水平。方法构建含人源TRIM69的真核表达质粒,转染He La细胞和HEK293T细胞,筛选稳定表达TRIM69的细胞系,通过紫外线照射和凋亡诱导剂依托泊苷(etoposide)刺激处理,Western blot检测细胞内TRIM69蛋白、活化型caspase7和剪切型PARP蛋白水平的变化。结果紫外线照射和依托泊苷刺激后,与对照组相比,TRIM69过表达的细胞内活化型caspase7和剪切型PARP的蛋白水平均下降(P<0.05)。结论TRIM69蛋白的表达可抑制紫外线或依托泊苷刺激时He La和HEK293T细胞内凋亡相关蛋白活化型caspase7和剪切型PARP的蛋白水平。 展开更多
关键词 TRIM69 E3泛素连接酶 DNA损伤 caspase7 PARP
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和厚朴酚对人白血病细胞系U937细胞增殖和凋亡的影响 被引量:4
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作者 薛芳 成志勇 +4 位作者 杨琳 李世辉 张敬宇 姚丽 潘峻 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期408-412,共5页
【目的】探讨和厚朴酚(HNK)对白血病细胞系U937细胞增殖和凋亡的影响。【方法】将U937细胞和正常外周血单核细胞分别与HNK共培养,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡形态,用噻唑蓝比色法(MTT)检测HNK对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检... 【目的】探讨和厚朴酚(HNK)对白血病细胞系U937细胞增殖和凋亡的影响。【方法】将U937细胞和正常外周血单核细胞分别与HNK共培养,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡形态,用噻唑蓝比色法(MTT)检测HNK对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测凋亡;罗丹明123检测线粒体膜电位;Caspase3/7活性检测试剂盒检测Caspase3/7活性;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Caspase-3、Caspase-7mRNA水平变化。【结果】HNK对U937的体外增殖有显著抑制作用,48h半数抑制浓度(IC50)为11.8μg/mL,而对正常外周血单核细胞的IC50为40.3μg/mL,AnnexinV/PI双标染色显示,细胞凋亡与和厚朴酚呈浓度和时间依赖相关。HNK明显降低U937细胞线粒体膜电位,增加Caspase3/7活性及mRNA表达水平,但对正常外周血单核细胞的增殖抑制和凋亡作用不明显。【结论】HNK可能通过激活caspase-3/7抑制U937细胞增殖、诱导U937细胞凋亡。 展开更多
关键词 和厚朴酚 U937细胞系 膜电位 线粒体 caspase3/7
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羊水过少与胎儿窘迫以及胎盘组织水通道蛋白9和凋亡蛋白Caspase7表达的关系 被引量:12
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作者 李艳川 张雅 +1 位作者 张矛 石紫云 《中国妇幼保健》 CAS 2018年第24期5976-5979,共4页
目的探讨羊水过少与胎儿窘迫以及胎盘组织水通道蛋白9(AQP9)和凋亡蛋白Caspase7(Caspase7)表达水平的关系,为临床诊治提供参考依据。方法选取2013年2月-2016年2月在陕西省人民医院分娩的足月孕产妇187例,其中羊水量过少产妇31例(羊水过... 目的探讨羊水过少与胎儿窘迫以及胎盘组织水通道蛋白9(AQP9)和凋亡蛋白Caspase7(Caspase7)表达水平的关系,为临床诊治提供参考依据。方法选取2013年2月-2016年2月在陕西省人民医院分娩的足月孕产妇187例,其中羊水量过少产妇31例(羊水过少组),羊水量正常156例(羊水正常组),观察两组胎儿窘迫发生情况,同时采用免疫组化染色SP法检测胎盘组织AQP9和Caspase7蛋白表达。结果羊水过少组胎儿窘迫发生率为38.71%,明显高于羊水正常组7.05%,差异有统计学意义(P<0.05);羊水过少组AQP9蛋白表达为(3.34±1.06)分,明显低于羊水正常组(5.05±1.13)分,差异有统计学意义(P<0.05),而Caspase7蛋白表达为(3.61±1.01)分,明显高于羊水正常组(2.68±0.89)分,差异有统计学意义(P<0.05);胎儿窘迫组与胎儿正常组胎盘组织AQP9和Caspase7蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05);羊水过少组胎盘组织AQP9和Caspase7蛋白表达呈负相关(R=-0.416,P<0.05);羊水正常组胎盘组织AQP9和Caspase7蛋白表达无相关性(R=-0.037,P>0.05)。结论羊水过少与胎儿窘迫以及胎盘组织AQP9和Caspase7表达有一定联系,在一定程度上解释了羊水过少的发生机制。 展开更多
关键词 羊水过少 胎儿窘迫 胎盘组织 水通道蛋白9 凋亡蛋白(caspase7)
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羊水过少产妇胎盘胎膜组织中Caspase7、Cx43蛋白和mRNA的表达特点 被引量:2
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作者 高菲 《中国妇幼保健》 CAS 2018年第6期1403-1406,共4页
目的分析羊水过少产妇胎盘、胎膜组织中Caspase7、Cx43蛋白和mRNA的表达特点,揭示羊水过少的发生机制,为中晚期羊水过少产妇的治疗提供理论依据。方法选取2016年1月-2017年1月在该院产科分娩的足月产妇120例为研究对象,其中羊水过少产... 目的分析羊水过少产妇胎盘、胎膜组织中Caspase7、Cx43蛋白和mRNA的表达特点,揭示羊水过少的发生机制,为中晚期羊水过少产妇的治疗提供理论依据。方法选取2016年1月-2017年1月在该院产科分娩的足月产妇120例为研究对象,其中羊水过少产妇49例(过少组),羊水正常产妇71例(正常组)。采用免疫组化染色法和RT-PCR法检测两组产妇胎盘、胎膜组织中Caspase7、Cx43蛋白及mRNA表达水平,并探讨其临床意义。结果过少组胎膜及胎盘组织中的Cx43蛋白阳性表达率分别为10.20%、12.24%,显著低于正常组的26.76%、30.99%,差异具有统计学意义(均P<0.05);过少组胎膜及胎盘组织中的Cx43 mRNA表达水平显著低于正常组(t=10.103、9.478,均P<0.05),过少组胎膜及胎盘组织中的Caspase7 mRNA表达水平显著高于正常组(t=12.378、10.736,均P<0.05);过少组胎膜及胎盘组织中的Caspase7蛋白阳性表达率分别为53.06%、57.14%,均显著高于正常组的23.94%、25.35%,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论羊水过少产妇胎盘、胎膜组织中Caspase7蛋白及mRNA高表达、Cx43蛋白及mRNA低表达,相关指标的表达差异可能与羊水过少的发生具有一定的相关性。 展开更多
关键词 胎盘 胎膜 caspase7蛋白 CX43蛋白 羊水量过少
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NaCl胁迫下平邑甜茶根系线粒体特性和细胞死亡特征 被引量:8
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作者 马怀宇 吕德国 杨洪强 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1448-1453,共6页
以平邑甜茶(Malushupehensisvar.pingyiensis)实生幼苗为试验材料,研究NaCl浇灌后根系线粒体H2O2含量、膜电位(△ψm)和根系ATP含量的变化以及细胞死亡特征。结果表明,根系线粒体H2O2含量在0.085mol·L–1NaCl处理的第1–6天逐渐降... 以平邑甜茶(Malushupehensisvar.pingyiensis)实生幼苗为试验材料,研究NaCl浇灌后根系线粒体H2O2含量、膜电位(△ψm)和根系ATP含量的变化以及细胞死亡特征。结果表明,根系线粒体H2O2含量在0.085mol·L–1NaCl处理的第1–6天逐渐降低,在第6–15天则快速上升;线粒体△ψm在0.085mol·L–1NaCl处理的15天内一直呈下降趋势,在第6–15天下降速度明显加快;根系ATP含量在0.085mol·L–1NaCl处理的15天内始终低于对照,但保持在一个较稳定的范围内。TUNEL原位末端标记试验显示,0.085mol·L–1NaCl处理的第9天,根系石蜡组织切片上的阳性反应斑点明显增多,到第15天时阳性反应斑点密集成片,表明细胞核DNA发生了细胞程序性死亡的特征性断裂。根系中细胞程序性死亡关键酶类caspase3/7活性在0.085mol·L–1NaCl处理的第1–6天处于较低水平,其活性在第6–15天成倍上升。这些结果表明,0.085mol·L–1NaCl处理6–15天能诱导平邑甜茶根细胞发生程序性死亡,而且线粒体特性的变化与根系细胞程序性死亡密切相关。 展开更多
关键词 caspase3/7 线粒体 细胞程序性死亡 根系 盐胁迫
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Genistein通过JNK/Bcl-2信号通路诱导结肠癌细胞凋亡
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作者 赵忠新 井洪泽 +3 位作者 张庆 刘丹 许景伟 梅庆步 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期4813-4819,共7页
本研究旨在探讨染料木黄酮(genistein,Gen)诱导结肠癌细胞凋亡与JNK通路的关系及其机制。以人结肠癌SW620细胞为研究对象,实验分对照组和Gen低、中、高浓度组(10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L),荧光显微镜下采用Annexin V-FITC/PI双染法... 本研究旨在探讨染料木黄酮(genistein,Gen)诱导结肠癌细胞凋亡与JNK通路的关系及其机制。以人结肠癌SW620细胞为研究对象,实验分对照组和Gen低、中、高浓度组(10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L),荧光显微镜下采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡指数透射电镜检测细胞凋亡形态,分光光度法检测Caspase3/7活化水平,蛋白质印迹法检测P-JNK、T-JNK、Bcl-2和Bax蛋白水平。结果显示,Gen低、中、高浓度组凋亡指数显著递增(p<0.01,p<0.001)。透射电镜下,Gen低、中、高浓度组均可观察到独特的细胞凋亡形态。Caspase3/7活性升高是从Gen中浓度组开始(p<0.001)且Caspase3/7活性随Gen浓度的增加而上升(p<0.01,p<0.05)。随着Gen浓度的增加,P-JNK1、P-JNK2蛋白表达明显上升(p<0.001)。Gen低、中、高浓度组均能上调Bax蛋白的表达(p<0.01,p<0.05,p<0.001)。显著下调Bcl-2蛋白的表达是在Gen中、高浓度组出现(p<0.001)。以上结果提示,Gen可通过激活JNK通路诱导SW620细胞凋亡,并与JNK/Bcl-2通路调控线粒体内源性凋亡途径有关。 展开更多
关键词 染料木黄酮 JNK 结肠癌 细胞凋亡 caspase3/7
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沉默SETDB1对肾癌细胞生长的影响及分子机制研究 被引量:6
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作者 周颖 陈萱 《中国临床研究》 CAS 2016年第7期896-899,903,共5页
目的探讨组蛋白赖氨酸N端甲基转移酶SET结构域分支型1(SETDB1)对人肾癌细胞增殖、凋亡的影响。方法体外培养肾癌ACHN细胞及正常肾小管上皮HK-2细胞,qRT-PCR及Western blot分别检测两种细胞系中SETDB1 mRNA及蛋白的表达。采用转染SETDB1... 目的探讨组蛋白赖氨酸N端甲基转移酶SET结构域分支型1(SETDB1)对人肾癌细胞增殖、凋亡的影响。方法体外培养肾癌ACHN细胞及正常肾小管上皮HK-2细胞,qRT-PCR及Western blot分别检测两种细胞系中SETDB1 mRNA及蛋白的表达。采用转染SETDB1特异性干扰性小核糖核酸(siRNA)敲低ACHN细胞中SETDB1表达,并采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot检测SETDB1的敲低效果,CCK-8法、溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)结合试验检测细胞活力与增殖,流式细胞仪、caspase3/7活性分析检测细胞凋亡的变化。采用qRTPCR、Western blot检测沉默SETDB1后p53 mRNA及蛋白的表达水平。结果 SETDB1在肾癌ACHN细胞中表达水平明显高于正常肾小管上皮HK-2细胞(t=14.435,P<0.01);转染SETDB1特异性siRNA沉默SETDB1表达后,ACHN细胞中SETDB1 mRNA(t=13.091,P<0.01)及其蛋白表达水平明显降低;ACHN细胞活力显著降低(P<0.05);细胞内DNA复制活性明显降低(P<0.01);细胞凋亡率增加(t=6.765,P<0.01);Csapase3/7酶活性提高(t=5.763,P<0.01);同时p53 mRNA(t=9.241,P<0.01)及蛋白的表达水平显著提高。结论 SETDB1在肾癌细胞中表达升高,下调SETDB1能够通过促进p53表达而发挥抗肿瘤生长作用。 展开更多
关键词 组蛋白赖氨酸N端甲基转移酶 SET结构域分支型1 p53 caspase3 caspase7 肾癌 细胞凋亡 细胞转染
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