可舒胶囊对酒精性肝损伤小鼠肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响

目的探讨可舒胶囊对酒精所致大鼠急性肝损伤的保护作用及机制。方法采用酒精灌胃辅以高脂饲料法复制急性酒精性肝损伤小鼠模型,以血清谷酰转肽酶(GGT)、血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)水平为模型参考指标。50只雄性昆明小鼠随机分为5组:正常对照组、肝损伤模型组、可舒胶囊低、中、高剂量(0.78、1.56、3.12 g/kg)干预组,每组10只。检测小鼠肝组织天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,-8活性。结果模型组小鼠血清GGT[(4.52±0.26)U/L]、ALT[(173.09±8.79)U/L]、AST[(141.90±7.82)U/L]水平较正常对照组显著升高(P<0.01);可舒胶囊高、中、低剂量干预组小鼠血清GGT水平分别为(1.42±0.10)、(2.65±0.41)、(3.25±0.56)U/L;ALT分别为(72.19±8.19)、(78.52±9.72)、(98.95±10.70)U/L;AST水平分别为(70.27±8.19)、(77.46±5.94)、(94.57±5.26)U/L;较模型对照组显著降低(P<0.01)。模型组小鼠肝组织Caspase-3活性为(6.54±0.43)U/mgpro,Caspase-8活性为(2.71±0.23)U/mgpro,较正常对照组显著升高(P<0.01);可舒胶囊高、中、低剂量组小鼠肝组织Caspase-3活性分别为(2.57±0.33)、(3.20±0.30)、(4.32±0.35)U/mgpro;Caspase-8活性分别为(1.13±0.25)、(1.43±0.29)、(1.98±0.31)U/mgpro,较模型组显著降低(P<0.01)。结论酒精肝损伤小鼠肝组织Caspase-3与Caspase-8活性显著升高,可舒胶囊对其具有明显抑制作用。

JAK2/STAT3信号转导通路在大鼠急性脊髓损伤中对细胞凋亡的调控作用

目的研究P-JAK2(磷酸化Janus激酶2)、P-STAT3(磷酸化信号转导和转录激活子3)以及Caspase-3(半胱氨酸蛋白酶-3)在大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)中的表达变化,并探讨相互作用。方法采用健康成年雄性SD大鼠90只,体重225～275g,分为对照组(n=30)、脊髓损伤组(n=30)和AG-490(JAK2酶抑制剂)+脊髓损伤组(n=30),随机分到4h、12h、24h、72h和168h各个亚组(n=6)。应用Allen’s重物坠落法并加改良制作大鼠急性脊髓损伤模型,对照组只切除椎板不损伤脊髓。术后在相应时间点处死,HE染色观察组织形态结构,免疫组织化学检测P-JAK2、P-STAT3、Caspase-3的表达变化。结果成功建立大鼠ASCI模型并获得满意脊髓组织标本。HE染色示脊髓组织损伤严重阶段出现在ASCI后72h,而不是损伤即刻。免疫组织化学检测显示对照组大鼠脊髓组织中P-JAK2、P-STAT3、Caspase-3阳性细胞较少,在脊髓损伤组各个时间点P-JAK2、P-STAT3、Caspase-3的表达量明显高于对照组(P<0.01)。P-JAK2、P-STAT3在脊髓损伤后4h迅速上升,12h达峰值,而后逐渐下降,168h仍有表达。Caspase-3在脊髓损伤后4h迅速上升,72h达峰值,而后下降。AG-490+脊髓损伤组P-JAK2、P-STAT3、Caspase-3的阳性表达低于脊髓损伤组(P<0.01),但峰值不变。结论 ASCI可异常激活JAK2/STAT3信号转到通路,它可能对继发性脊髓损伤中细胞凋亡有着重要调控作用。

苦碟子对高同型半胱氨酸血症细胞凋亡的影响

目的通过大鼠灌胃给予蛋氨酸复制高同型半胱氨酸血症动物模型,观察苦碟子对高同型半胱氨酸血症大鼠动脉病理变化和细胞凋亡的影响。方法将雌性Wistar大鼠共28只随机分为模型组(n=8)、空白对照组(n=7)、叶酸+VitB12组(n=7)和苦碟子组(n=6)。除空白对照组外,其他组每天2次灌胃给予蛋氨酸0.75 g/kg,连续10周,复制高同型半胱氨酸血症动物模型。叶酸+VitB12组和苦碟子组同时给予叶酸+VitB12和苦碟子干预。检测各组大鼠血浆同型半胱氨酸、Caspase-3含量及动脉病理变化和平滑肌凋亡细胞计数。结果模型组大鼠灌胃给予蛋氨酸后血浆同型半胱氨酸、Caspase-3含量和平滑肌凋亡细胞计数均较空白对照组升高(均P<0.01);苦碟子组血浆Caspase-3含量和平滑肌凋亡细胞计数与模型组比较降低(均P<0.01)。结论高蛋氨酸可诱发高同型半胱氨酸血症,引发动脉粥样硬化。苦碟子对高同型半胱氨酸血症诱发的动脉粥样硬化具有预防作用,其机制与抑制细胞凋亡相关。

三氧化二砷诱导血管平滑肌细胞凋亡机制的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的机制,为其作为药物涂层支架的涂层药物提供理论依据。方法用改良的植块贴壁法体外培养SD大鼠VSMCs,应用MTT法、酶标仪法、流式细胞术等方法观察不同浓度As2O3诱导VSMCs凋亡时裂解液中线粒体跨膜电位(△Ψm)及半胱天冬蛋白酶-3(caspse-3)活性的变化。结果适宜浓度As2O3诱导VSMCs凋亡时△Ψm明显下降,与对照组相比P<0.05;裂解液中caspse-3酶活性明显增高,与对照组相比,P<0.05。结论适宜浓度的As2O3可明显促进VSMCs凋亡,其可能机制是降低△Ψm和激活caspse-3酶。