青藤Sinomenium acutum(Thunb.)Rehd.et Wils全基因组调查

青藤是一种重要的中药材,具有较高的药用价值。目前,对于青藤的分子生物学研究极为有限,基因资源比较匮乏。全基因组的破译将为其分子生物学研究的深入开展提供坚实的基础,而对青藤进行全基因组调查以明确其基因组特征可以为全基因测序方案的制定提供依据。本研究基于Illumina测序平台测定了青藤基因组,结合生物信息学方法得到基因组大小、杂合率、重复序列等特征,并采用SOAPdenovo软件对基因组进行初步组装。过滤得到168.72 G有效数据,青藤基因组大小估计为829.72 Mb;重复序列比率为51.72%,杂合率为0.48%,GC含量为34.57%;K-mer=35进行初步组装得到contigs N50为162 bp,总长为621 033 264 bp,scaffolds N50为489 bp,总长为780 536 487 bp。鉴于青藤基因组高重复序列的特点,其全基因测序可采用Illumina测序技术和Pac Bio测序技术相结合的策略,并采用Hi-C技术以及其相应的组装软件,以此获得青藤全基因组图谱。

厚朴中总鞣质提纯工艺及抗菌活性研究

通过响应面设计优化厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils.)中总鞣质的提取工艺,并进一步纯化。结果表明,厚朴中总鞣质的最佳提取工艺为料液比1∶13、提取时间100 min、乙醇浓度80%、超声功率80 W,厚朴总鞣质提取量为0.1810 mg/g,与理论值0.1888 mg/g差距小。利用正交试验考察明胶溶液沉淀法对厚朴总鞣质的最佳纯化工艺为浓缩液比重1.5 mg/mL、明胶溶液浓度4%、明胶溶液添加量8 mL/100 mg,厚朴总鞣质提取量为2.743 mg/g。利用最小抑菌浓度测定法比较总鞣质对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抗菌活性,表明厚朴中总鞣质具有一定的抗菌活性。

Chemical Constituents of Schisandra rubriflora Rehd. et Wils.

Abstract: Schisandra rubriflora Rehd. et Wils. is a traditional Chinese medicine. To search for new and bioactive components from traditional Chinese medicines and provide scientific evidence for taxonomy, the chemical constituents of the plant were investigated by various column chromatography methods (silica gel, Sephadex LH-20, and RP-18). From the aerial parts of S. rubriflora, three new megastigmane glycosides, namely (3S, 5R, 6S, 9R)-megastigmane-3, 9-diol 3-O-[α-L-arabionfuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside] (1), 7-megastigmene-3-ol-9-one 3-O-[α-L-arabionfuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside] (2), and megastigmane-3α, 4β, 9σ-triol 3-O-β-D-glucopyranoside (3), along with 14 known compounds, were isolated. The structures of the new compounds were elucidated by a combination of spectroscopic and chemical methods.

锥栗花粉生活力的研究

以26年生白露仔锥栗为试材,研究了温度、生长调节剂、硼酸等因子对锥栗花粉萌发的影响。结果表明:30～35℃温度条件最适于锥栗花粉萌发和花粉管的伸长,且低温有利于锥栗花粉的贮藏;不同浓度的赤霉素(GA3)对锥栗花粉的萌发和花粉管的伸长均有促进作用,50mg/L的GA3对花粉萌发效果最好;0.1%～0.5%硼酸(H3BO3)可促进白露仔花粉萌发。

高速逆流色谱分离制备厚朴的有效成分厚朴酚与和厚朴酚

建立了高速逆流色谱分离制备厚朴的有效成分厚朴酚与和厚朴酚的新方法,溶剂系统为石油醚乙酸乙酯甲醇1%醋酸(5∶5∶7∶3,V/V),上相为固定相,下相为流动相。从100mg厚朴粗提物制得和厚朴酚33.3mg,厚朴酚19.5mg,经高效液相色谱分析,纯度均大于99.5%,其化学结构由1HNMR和13CNMR鉴定。

青风藤的研究进展

从生药学、化学成分、药理作用及临床应用等方面综述了青风藤的研究进展,并对进一步研究和开发青风藤的目标提出了展望。

3种林木凋落物分解特征及其对赤红壤酸度及养分含量的影响

在实验室条件下对黧蒴锥〔Castanopsis fissa(Champ.ex Benth.)Rehd.et Wils.〕、湿地松(Pinus elliottii Engelm.)和尾叶桉(Eucalyptus urophylla S.T.Blakely)凋落物的分解特征及其对华南赤红壤的pH值、有机质和碱解氮、速效磷和速效钾含量的影响进行了研究。结果表明:经过1 a的分解后,黧蒴锥、湿地松和尾叶桉凋落物的失重率分别为26.48%、13.80%和28.15%;3种凋落物中全氮均为净释放模式,全磷为富集模式,黧蒴锥和尾叶桉凋落物中全钾和有机碳为净释放模式,湿地松凋落物中全钾和有机碳为富集模式。随凋落物分解时间的延长,土壤pH值呈现逐渐上升至第8个月达到峰值、之后略有下降的变化趋势;有机质含量呈波动的变化趋势;碱解氮含量呈先升高后降低的变化趋势;速效磷含量呈略有波动但总体下降的趋势;速效钾含量呈"逐渐上升—急剧下降—急剧上升—趋于平稳"的变化趋势,且均在第8个月最低。与实验初期相比,实验结束时对照组及各处理组的土壤pH值和碱解氮含量均不同程度增加、有机质含量不同程度降低、速效磷含量显著下降,对照组速效钾含量下降而各处理组速效钾含量明显提高。与对照相比,实验结束时3种凋落物均导致土壤酸度减弱、速效钾含量增加、但有机质和速效磷含量没有明显提高。3种凋落物对土壤pH值及土壤养分含量的影响有明显差异,总体上看,黧蒴锥凋落物覆盖可明显减弱土壤酸度,增加土壤有机质、碱解氮和速效钾含量,对土壤的改良效果最好。研究结果揭示:不同凋落物对土壤pH值及养分含量的影响与凋落物的成分及生物学特性有关。

湖北恩施产厚朴ISSR指纹图谱构建

目的:构建湖北恩施产厚朴的ISSR指纹图谱。方法:采用ISSR标记技术对厚朴基因组DNA进行PCR扩增。结果:2个ISSR引物即可构建恩施产厚朴的ISSR指纹图谱。引物ISSR826的扩增产物中可见构建恩施产的厚朴特征带,分子量为950 bp及550 bp。结论:ISSR标记技术可用于区分厚朴药材产地和品种。

凹叶厚朴中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的成分

凹叶厚朴是四川省人工栽种的一种用途广泛的常用中药.在发现凹叶厚朴乙醇提取物具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性基础上,通过活性跟踪,对该提取物进行了分离,发现其中的生物碱显示了较强的抑制活性.通过溶剂萃取、树脂吸附和反复硅胶柱层析等分离方法从凹叶厚朴乙醇提取物中分离得到6个生物碱,用质谱和核磁共振等波谱方法分别鉴定为木兰箭毒碱,木兰花碱,鹅掌楸碱,蕃荔枝碱,罗默碱和Lysicamine,并应用小肠α-葡萄糖苷酶模型测定了它们对α-葡萄糖苷酶的抑制作用.其中,番荔枝碱和木兰箭毒碱的抑制活性较好,分别为60%和62%;其它4个生物碱成分活性几乎相当,鹅掌楸碱为46%,罗默碱为51%,Lysicamine为49%,木兰花碱为51%.

大血藤不同器官黄酮类化合物含量的季节变化

The contents of flavonoid in the leaf and stem of Sargentodoxa cuneata (Oliv.) Rehd. et Wils. were determined. In a whole growth season, the dynamic chang of flavonoid in the leafblade of S. cuneata showed the two-peak pattern. The first peak appeared at June and the second at September. The seasonal dynamic change of flavonoids in leafstalk, annual twig and perennial stem were different and inconspicuous. The flavonoid cumulated maximally in the leafblade and the followed was seccessively annual twig, leafstalk, and perennial stem. The flavonoid content in leafblade was 31.79 mg/g(DW), while that in annual twig, leafstalk and perennial stem was 5.41 mg/g(DW), 5.30 mg/g(DW) and 3.95 mg/g(DW) respectively. There was markedly higher flavonoid content in leafblade. It is considered that the leaf of Sargentodoxa cuneata is significant in further exploitation.

川厚朴愈伤组织培养的初步研究

采用川厚朴顶芽、茎段、叶柄、叶片为外植体,采用正交设计研究不同激素及浓度组合对外植体的影响,筛选出最佳启动培养基为B5+2,4 D3 0mg·L-1(单位下同)+NAA0 5mg·L-1。川厚朴顶芽为最佳取材外植体。继代培养基配方为B5+2,4 D3 0mg·L-1+NAA0 1mg·L-1。

南五味子种子中木酯素类成分的高效液相色谱-电喷雾电离-质谱分析

目的:用高效液相色谱-电喷雾电离-质谱分析(HPLC-ESI-MS)法对南五味子种子中木酯素类成分进行了分析。方法:利用 HPLC-ESI-MS 对南五味子种子进行了初步分析研究。液相色谱条件为:色谱柱a:C_8柱(4.6mm×25mm,5μm),色谱柱 b:苯基柱(4.6mm×25mm,5μm);流动相:甲醇-水(60∶40);流速:0.4mL·min^(-1);质谱为Finnigan LCQ^(DECA)型液相色谱-电喷雾质谱联用系统。结果:得到了样品的总离子流图及相应色谱峰的 ESI-MS 质谱图,对其进行了解析,鉴别出五味子甲素、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子酯丙、五味子酯丁。结论:本方法快捷、简单、准确。

南五味子类药材的鉴别研究

目的 为南五味子药材的鉴定提供依据。方法 用性状鉴别、扫描电镜和薄层色谱方法对不同产地华中五味子及其近缘种绿叶五味子、翼梗五味子和红花五味子果实进行生药性状、种子表面微形态和薄层鉴别。结果 依据种皮表面的微形态特征可以将华中五味子、红花五味子、绿叶五味子及翼梗五味子分为 3个类型。去氧五味子素(五味子甲素 ) (deoxyschisandrin)、五味子酯甲 (schisantherin A)的薄层定性表明产于陕西平利、河南栾川、山西阳城、湖南衡山的华中五味子、绿叶五味子和红花五味子果实中都含有五味子酯甲和五味子甲素 ;翼梗五味子果实中仅含有五味子酯甲 ,而甘肃小陇山、陕西留坝产华中五味子果实中检测不到这两种成分。结论 不同产地华中五味子、红花五味子、绿叶五味子及翼梗五味子的干燥果实可以依据种皮表面的微形态特征和薄层色谱结果加以鉴别。

华中五味子抗氧化和细胞毒活性研究(英文)

我们研究了华中五味子的根、茎、叶、果实乙醇提取物对脂性自由基DPPH及超氧阴离子的清除作用,同时观察了四种不同提取物在体外对肿瘤细胞株的细胞毒作用。我们发现,华中五味子根的乙醇提取物清除自由基活性和对肿瘤细胞杀伤作用比茎、叶和果实的提取物都强,研究结果提示华中五味子的根可以作为抗氧化剂的新来源。

四川规模化栽培区产厚朴有效成分含量的影响因素研究

目的:研究厚朴有效成分含量与胸径、树高、树皮厚、海拔、经度之间的关系,为厚朴良种选育提供理论基础。方法:以四川西南地区规模化栽培区产厚朴的树皮为研究对象,采用HPLC法检测厚朴酚与和厚朴酚含量,比较不同地区间的质量差异,同时统计分析影响厚朴有效成分含量的关键因素。结果:5个栽培区产厚朴的厚朴酚含量在1.72%~2.70%之间,和厚朴酚含量在1.42%~3.23%之间,总酚含量最高的地区为都江堰(5.16%),最低的地区为汶川(3.69%);厚朴有效成分含量与其胸径、树高、树皮厚、海拔、经度均具有一定相关性。结论:四川西南地区规模化栽培区产厚朴品质较好,其有效成分含量较高;厚朴总酚含量与胸径、树高、树皮厚呈正相关;厚朴酚与海拔呈正相关,和厚朴酚与海拔、经度呈负相关。

厚朴内生真菌的研究(Ⅰ):菌种分离及其鉴定

从两个不同来源的厚朴Magnolia officinalisRehd.etW ils.的茎中,分离获得内生真菌48株,经显微形态观察,鉴定为1纲、3目、6科、16属。不同来源的厚朴内生真菌的种群、数量及分布部位存在显著差异。

HPLC法测定红花五味子木脂素的含量

目的 测定不同产地、不同部位红花五味子的五味子酯甲 ( schisantherin A)、去氧五味子素 (五味子甲素 ,deoxyschizandrin)、五味子乙素 ( schisandrin B)和五味子丙素 ( schisandrin C)含量。方法 HPL C法 ,使用 Sphere-clone ODS柱 ;流动相 :水 ( A) ,甲醇 ( B) ,梯度洗脱 :0～ 4 m in,70 % B;4～ 5 4 m in,70 %～ 10 0 % B;流速为 0 .4 m L/min;柱温 :2 5℃ ;检测波长 :2 5 4 nm。结果 五味子酯甲、甲素、乙素、丙素在红花五味子中含量分别为 0 .0 2 6 %～0.0 8 3% ,0 .0 0 7%～ 0 .94 5 % ,0 .0 0 2 %～ 0 .12 1% ,0 .0 10 %～ 0 .0 38% ,其中五味子甲素普遍存在 ,且果实中含量高于茎藤。结论 去氧五味子素是红花五味子果实的主要活性成分。

云南大花香水月季居群遗传多样性的SSR分析

利用简单重复序列（simple sequence repeat，SSR）分子标记技术对云南省分布的8个大花香水月季天然居群遗传性进行了分析，结果表明：所选用的12对SSR引物，共扩增出72个位点，其中多态性位点70个，占总条带数的97．22％；在物种水平上，总居群的Nei’s基因多样性指数（He）和香农指数（I）分别为0．3012和0．4600，说明云南地区大花香水月季居群的遗传多样性较高；大花香水月季居群内遗传变异（69．49％）大于居群间遗传变异（30．51％），说明居群内变异是其居群的主要变异来源；利用Popgene计算出两两居群间的Nei＇s遗传一致度（I）和遗传距离（D），其范围分别为0．7615～O．9348和0．0674～O．2724，再依据遗传距离进行聚类分析，结果表明居群遗传距离与地理位置无显著的相关性。

秦岭地区华中五味子SSR遗传多样性分析

目的：分析秦岭地区野生华中五味子的遗传多样性。方法：应用SSR分子标记进行遗传多样性分析。结果：9对SSR引物共检测到61条条带，每对引物扩增出5～11条，平均每对引物可扩增出6．8条，多态性比率为86．88％。遗传分化系数（Gst）为0．3524，表明秦岭地区华中五味子遗传变异主要存在于居群内，基因流（Nm）为1．1850，说明居群间存在一定基因流。通过遗传多样性参数比较，洋县居群遗传多样性最高。聚类分析可划分为2大类，第1类包括平利县、山阳县和宁强县居群；第Ⅱ类包括太白县和洋县居群。结论：秦岭地区华中五味子遗传多样性丰富，应优先选择陕西汉中市、宝鸡市和商洛市地区华中五味子居群实行就地保护与扩繁，以保证野生华中五味子可持续发展和利用。

青风藤化学成分的分离与鉴定

目的对青风藤（Sinomenium auctum（Thunb．）Rehd．et Wils．）化学成分进行分离、鉴定。方法适量干燥青藤茎用10倍量体积分数为70％的乙醇水溶液提取，减压回收乙醇，所得干浸膏研成细粉后，分别用环己烷、氯仿、甲醇超声溶取；采用ODS中低压柱色谱、制备型HPLC方法进行分离，并通过^1H-NMR、^13C-NMR、ES-MS等谱学技术对化合物进行结构鉴定。结果分离得到5个化合物，分别鉴定为穆坪马兜铃酰胺（N-trans-feruloyl tyramine, 1）、syringaresinol mono-β-D-glucoside（2）、1，2，4／3，5-cyclohexanepentol（3）、3-methoxy-6-hydroxy-17-methylrnorphinane（4）、青藤碱（sinomenine ，5）。结论化合物1～4为首次从防己属中分离得到。