猫视神经年龄相关的形态学变化

对4只青年猫(1-3龄)和4只老年猫(10-13龄)视神经进行形态计量比较研究。取两个年龄组的颅内相应部分视神经进行横向连续切片,H.E染色于光镜下观察其基本结构;相邻切片进行结晶紫染色显示胶质细胞;神经丝蛋白(NF)免疫染色显示视神经纤维,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫染色显示星形胶质细胞(AS),对实验结果进行统计学分析并绘制纤维直径谱。与青年猫相比,老年猫视神经外膜厚度、直径、面积均显著增加,视神经纤维的密度和数量显著下降,且以视神经中央部纤维密度下降最显著;纤维直径谱分析结果显示,青、老年猫纤维直径分布范围相似,但老年猫的峰直径及纤维平均直径比青年猫的显著减小;另外,老年猫视神经束中的星形胶质细胞明显膨大,胶质细胞密度以及星形胶质细胞占胶质细胞总数的百分比均显著增加。结果表明:在衰老过程中视神经纤维出现明显的丢失现象,纤维平均直径显著减小使其对视觉信息的传导速度减慢,这可能是导致老年个体视觉分析速度下降的重要原因;老年个体视神经束内胶质细胞活动增强可能对维持视神经纤维形态。

家猫视神经损伤的病理学改变

目的:动态观察视神经损伤后的病理学改变。方法:选取健康成年家猫20只,以自身左眼为对照,用自制损伤器撞击右眼视神经管,建立视神经损伤模型。在光镜与电镜下观察视神经损伤后1、3、7、14d的形态学改变。结果:光镜下视神经损伤主要表现为不同程度的神经纤维空泡样变性,电镜下视神经损伤主要表现为轴突内空泡样变性、髓鞘松解、微丝微管消失等。结论:家猫外伤性视神经损伤的动物模型与人类有很强的相似性,并有可操作性。视神经震荡伤后的病理变化以变性为主,早期施行减压手术可能挽救视力。

翼点入路在构建视神经损伤动物模型中的应用

目的探讨翼点入路在构建视神经损伤动物模型实验中的可行性。方法成年健康猫36只,按损伤时间分为正常、6h、1d、3d、7d、14d6个组,每组6只。模仿临床上翼点入路显微手术,暴露视神经,以无创血管夹夹持20s,于此后不同时间取视神经标本,应用免疫组化染色检测视神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经丝蛋白(NF)及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达,观察视神经损伤后的病理改变。结果视神经损伤后损伤侧瞳孔较正常瞳孔变大,直接对光反射消失,间接对光反射存在,直接钳夹损伤区GFAP、NF和MBP染色均减弱。结论采用翼点入路构建视神经损伤动物模型有临床及理论依据。视神经损伤后直接损伤区星形胶质细胞死亡,NF减少,髓鞘脱失。

青年猫和老年猫视神经超微结构观察比较

目的探讨青年猫和老年猫视神经年龄相关的形态学变化及可能造成的生理影响。方法取4只青年猫(2-3岁,2-2.5kg)和4只老年猫(10-13岁,2.5-3.5kg)颅内相对应部分视神经,制作横向半薄切片和超薄切片,半薄切片用甲苯胺蓝硼砂溶液染色,光镜观察、测量视神经的直径(不含外层神经膜);超薄切片标本用醋酸和柠檬酸铅染色,电镜观察、计数视神经纤维密度、测量视神经纤维外径D(含髓鞘)和内径d(不含髓鞘),按一定分级范围算出各种直径的纤维及各种d/D比值的纤维所占百分比,分别画出直方图,对实验结果进行统计学分析并绘制纤维直径谱。结果与青年猫相比,老年猫视神经直径显著增大(P<0.05);纤维数量显著下降(P<0.05)。纤维直径谱分析结果显示,青、老年猫纤维直径分布范围相似,但老年猫纤维的峰直径及纤维平均直径比青年猫的显著减小(P<0.05),老年猫视神经纤维的d/D比值亦明显降低。另外,老年猫视神经中部分轴突肿胀,髓鞘疏松、结构紊乱,板层脱离、空泡化,有的轴索髓鞘溶解。结论在衰老过程中,老年猫视神经纤维丢失,纤维直径减小,d/D比值下降,以及纤维髓鞘的松散解体,这些变化均可能导致视神经纤维对视觉信息的传导速度减慢,是老年个体视觉分析速度下降的重要原因。

猫视神经连续切片的计算机三维重建

目的制备猫视神经的连续切片,选择合适的染色方法 ,寻找合适的配准方法 ,经图像采集及初步处理后利用计算机的三维重建技术,获得可视化的猫视神经三维结构。方法利用石蜡切片技术的制备猫视神经连续切片,采用特殊的神经三色染色法进行切片染色。利用数码显微镜及Motic Images Advanced 3.0和Motic Images Assembly 1.0软件对连续的猫视神经石蜡切片进行拍照,获得猫视神经连续切片的原始图像,将原始图像在GIMP软件中经过调整亮度对比度、初步图像配准、提取神经束膜图像信息后在Amira软件下,经过计算机在手工配准的基础上进一步自动配准,把二维的切片图像重建成三维的可视化图像。结果实验所得经三色染色的连续切片的原始图像上神经束膜能较好的与周围的组织区分;利用Amira三维重建软件,重建得到猫视神经三维结构图像,重建后的猫视神经结构三维图像可进行任意的切割、旋转、回复、拍照等操作。结论实验证明在不利用标志线的条件下,通过制备视神经连续切片,经过染色拍照,手工图像配准后利用计算机自动配准技术对视神经进行三维重建是完全可行的。

放射状视神经切开手术机制的初步研究

目的观察猫眼行放射状视神经切开术(RON)后视盘结构的改变,探讨RON的临床机制。方法健康成年猫18只分为术后1、15、30、90d四组,右眼行RON。术后1d组为6只。分别于术后1、15、30、90d取材,行组织病理学观察。结果术后1d巩膜切口呈"一"型裂开,手术间隙与蛛网膜下腔相通,伴少量出血及炎性细胞浸润;15～30d切口呈"枣核"型,神经胶质细胞增生,胶原纤维沿切口缘环形增生,以Ⅰ型和Ⅲ型为主,筛孔呈长裂隙状;90d瘢痕组织将筛板和巩膜切口完全填充,Ⅲ型胶原排列不规则,边缘的筛孔形态恢复。结论手术将视盘周围的巩膜环及视神经眼内段软膜锐性切开,切口在巩膜环处呈逐渐扩宽趋势并与蛛网膜下腔相通;这可能是RON减轻临床症状的机制之一。

伽玛刀对猫视神经电生理学影响研究

目的探讨引起视神经电生理学变化的最小射线剂量。方法20只家猫随机分成5组,每组4只,1组作为对照组,其余4组分别接受10Gy、11Gy、12Gy、13Gy伽玛射线照射,分别于照射后3天、1周、半月、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月进行电生理监测,观察不同剂量下视神经电生理学的变化。结果11Gy组在伽玛刀照射后1周出现了电生理的变化,这种变化在半个月时有所恢复,随着时间的延长基本恢复正常。12Gy以上组伽玛刀照射后出现了明显电生理学的异常变化,这种变化随着时间的延长而加重。结论引起猫视神经生物学效应的最小伽玛刀剂量为11Gy;引起视神经放射性损伤的最小剂量为12Gy,这种损伤随着时间的延长而加重。

伽玛刀照射对猫视神经电生理学变化的影响

目的探讨不同剂量下伽玛射线照射后视神经电生理学的变化特点。方法20只猫随机分为5组,每组4只,1组作为对照,其余4组分别接受10Gy、11Gy、12Gy和13Gy伽玛刀的照射,分别于照射后3d、1周、半个月、1个月、2个月、3个月、4个月及5个月进行电生理监测。结果10Gy组电生理学没有变化,11Gy组在照射后1周出现了电生理学的变化,主要表现为潜伏期的延长,这种变化在半个月时有所恢复,随着时间的延长基本恢复正常。12Gy以上伽玛射线照射后出现了明显的电生理学异常变化,主要表现为潜伏期的延长和振幅的缩短,这种变化随着时间的延长而加重。结论引起视神经电生理学的变化特点与伽玛射线剂量有关,小剂量的伽玛射线可引起可逆性的变化,主要表现为潜伏期的延长。大剂量的伽玛射线可引起不可逆的视神经放射性损伤,这种损伤随着时间的延长逐渐加重,主要表现为潜伏期的延长和振幅的减小,随着时间的延长,振幅的减小更加明显。

应用翼点入路构建猫急性视神经损伤动物模型

目的构建猫急性视神经压迫损伤动物模型。方法成年健康猫36只,按损伤时间分为6 h、1 d、3 d、7 d、14 d 5个组,每组6只,正常对照组6只。模仿临床上翼点入路,显微手术暴露视神经,以无创血管夹夹持视神经20 s,行视觉诱发电位检查并研究急性视神经损伤前后视觉电生理方面的变化。以上动物按不同时间分组处死后,取视神经、视网膜标本,进行光镜电镜分析,研究损伤后视神经、视网膜的病理改变。结果视神经损伤后观察动物瞳孔较正常瞳孔变大,行闪光视觉诱发电位(FVEP)检查,P1波潜伏期延长,振幅明显降低。电镜下可见损伤后的视神经神经内膜、髓鞘、各板层、轴膜及轴索结构紊乱,视网膜神经节细胞数目减少。结论急性视神经损伤后视神经髓鞘、视网膜发生病理学方面的改变,视觉诱发电位也随之变化。采用翼点入路构建的动物模型可用于急性视神经损伤的研究。

猫视神经中S100蛋白表达的年龄相关变化

比较老年猫和青年猫视神经S100蛋白表达及胶质细胞的年龄相关变化,探讨其可能的生理作用。取老年猫(10～13龄)和青年猫(1～3龄)各4只的颅内视神经相应部分作组织切片,用免疫组织化学ABC法标记S100免疫阳性(S100-IR)细胞,Marsland-Gless染色显示胶质细胞。光镜下采用图像分析系统计数视神经中S100-IR细胞密度、胶质细胞密度及阳性反应灰度值。视神经中棕黄色S100-IR细胞分布均匀,Marsland-Gless染色的纤维横断面及胶质细胞均呈棕红色。与青年猫相比,老年猫视神经中胶质细胞密度明显增大;S100-IR细胞密度显著增加(P<0.01),胞体较大,阳性较强(灰度值显著减小,P<0.01);S100-IR细胞在胶质细胞中所占比例亦显著增大。结果表明S100-IR细胞呈明显的年龄相关性增生,这可能对衰老的神经纤维起保护作用。

放射状视神经切开手术机制的初步研究(英文)

目的:观察猫眼行放射状视神经切开术 (radial opticneurotomy,RON) 后视盘结构的改变,探讨 RON 的临床机制。方法:健康成年猫共 18 只,为术后 1d 组、术后 15d 组、术后 30d 组和术后 90d 组。术后 1d 组为 6 只。单眼行放射状视神经切开术。分别于术后 1,15,30,90d 取材,组织切片特染检查。结果:RON 术后 1d 巩膜切口呈“一”型裂开,手术间隙与蛛网膜下腔相通,伴少量出血及炎细胞浸润;15～30d 切口呈“枣核”型,神经胶质细胞增殖,胶原纤维沿切口缘环形增生,增生胶原以 III型为主,筛孔呈长裂隙状;90d 瘢痕组织将筛板和巩膜切口完全填充,I 型和 III 型胶原排列不规则,边缘的筛孔形态恢复。结论:手术可将视盘周围的巩膜环及视神经眼内段软脑膜锐性切开,切口在巩膜环处呈逐渐扩宽趋势并与蛛网膜下腔相通,这可能是 RON 减轻临床症状机制之一。

猫眼视盘微血管铸型研究

目的利用血管铸型技术观察猫眼视盘微血管的三维结构。方法采用甲基丙烯酸甲酯/丙烯酸甲酯分别经颈总动脉灌注家猫8例16眼。解剖显微镜及扫描电镜观察。结果猫眼视神经中央无大血管贯穿,视网膜及脉络膜供应血管由睫状后动脉分支形成,视盘表面放射状毛细血管由睫状视网膜动脉分支构筑。视盘血管由睫状后动脉形成的鞘膜动脉网和脉络膜动脉直接分支供应,睫状后动脉在鼻侧形成半环状样结构。结论猫眼无中央血管系统及完整的秦氏环,睫状后动脉是视盘血管的主要来源。猫眼视盘微血管构筑与人眼相似。

急性高眼压下猫眼视乳头形态变化

目的:研究随着眼压增高,视乳头各形态学参数的变化趋势,以及视乳头形态学参数对压力的敏感性。方法:1选择12只健康家猫,排除各种眼疾,利用光学相干断层扫描成像技术获得正常眼压下猫视乳头形态学参数;2通过前房灌注的方法制造急性高眼压动物模型,利用光学相干断层扫描成像技术获得在40、60、80 mm Hg眼压下猫视乳头形态学参数;3利用均值和标准差分析随着眼压增高,视乳头各形态学参数的变化趋势,利用Spearman相关性分析视乳头形态学参数对压力的敏感性。结果与结论:Bruch膜开口距离与筛板深度对压力的敏感性最强,随着眼压的升高,Bruch膜开口距离逐渐增大,筛板深度逐渐减小。Bruch膜开口距离变大与筛板深度变浅对研究青光眼病程的发展有一定的指导意义。

猫眼内压升高对视网膜节细胞及视神经的影响

在人为升高猫IOP(眼内压)条件下,记录了视网膜节细胞反应及ONR(视神经反应),并与同时记录的ERG (视网膜电图)进行了比较,发现不同视网膜节细胞的耐压性也不同,ONR 与ERG 几乎平行消失。在两只猫上同时记录了VECP(视皮层诱发电位)与ERG,发现ERG 先于VECP 完全消失,这与家兔的类似实验比较结果不同。

高眼压对视神经轴突损害的定量微机图像分析

将健康家猫２８只共５６眼随机分成７组，除正常对照组外，其余６组４８眼制成高眼压模型。用荧光眼底血管造影观察正常眼压及高眼压持续２４ｈ及４８ｈ的眼底血管荧光图像，用微机图像分析系统定量测定视神经轴突直径、总数及占视神经面积百分率；透射电镜观察视神经轴突超微结构。结果显示高眼压持续２４ｈ及４８ｈ的猫眼底荧光血管造影与正常眼压时无明显差异，而高眼压持续２４ｈ后，视神经轴突即可出现明显改变，其直径增大、数量减少、占视神经面积的百分率降低（Ｐ＜０．０５）；高眼压持续时间越长轴突损害越严重（Ｐ＜０．００１），两者呈显著相关。透射电镜检查发现高眼压持续２４ｈ后，视神经轴突的超微结构较正常有明显改变。高眼压持续时间延长，改变越明显。提示高眼压是造成视神经轴突损害的重要原因，因此对青光眼的治疗应尽早采取积极地降低眼压措施。

猫视神经压迫动物模型的建立

目的 探讨制作与肿瘤压迫的神经生物学特性相近的视神经压迫动物模型。方法 采用家猫 ,显微开颅将球囊置于视交叉前下方 ,MR检查视交叉、视神经的形态学变化 ,经电生理检查PVEP监测视觉电生理的变化 ,光镜和电镜观察神经组织的病理及超微结构变化。结果 MR示视交叉有脱髓鞘改变 ;PVEP监测示潜伏期延长 ,振幅降低 ;光镜下示神经组织广泛脱髓鞘改变 ,胶质细胞增生 ;电镜下示髓鞘结构紊乱、脱失 ,神经丝疏松 ,线粒体肿胀 ,空泡化 ,有轴索髓鞘溶解。结论 本方法制作的视神经压迫动物模型 ,与肿瘤压迫所至的视神经损伤具有相近的生物学特性 ,是一种理想的模型。

伽玛刀照射猫视神经后视神经病理学变化研究

目的 探讨引起视神经病理学变化的最小射线剂量。方法 20只家猫随机分成 5组,每组 4只, 1组作为对照组,其余 4组分别接受 10Gy、11Gy、12Gy、13Gy伽玛刀的照射,照射后 5个月,取病理,分别进行光镜及透射电镜检查,重点观察其电镜下超微病理结构的变化。结果 10Gy组结构正常, 11Gy组光镜下结构出现轻微的变化,电镜下超微病理结构出现部分线粒体肿胀。12Gy组光镜及电镜下神经组织结构紊乱,广泛变性。13Gy组神经组织结构严重紊乱,大部分髓鞘脱失、溶解,神经微丝疏松、溶解,线粒体普遍空泡化、溶解改变。结论 引起视神经病理学变化的射线剂量为11Gy,引起视神经病理学质变的最小射线剂量为 12Gy,随着剂量的增加对视神经的损伤加重。

猫慢性视神经压迫损伤模型的建立

目的建立猫慢性视神经压迫损伤动物模型。方法成年健康猫20只,按置入球囊内注入不同剂量造影剂分为健康对照组、0.2ml、0.25ml、0.35ml 4个组,每组5只。模仿临床上翼点入路,显微手术暴露视神经后,置入充盈的不可脱球囊于其下,后接导管,以注入造影剂的方式控制球囊大小,形成类似鞍区肿瘤占位,并辅以CT和视觉诱发电位检查,研究慢性视神经损伤前后视觉电生理方面的变化。以上动物按分组处死后,取视神经标本,进行电镜分析,研究视神经损伤后的病理改变。结果早期(术后2周),因占位病变(0.2cm3)在颅内代偿范围内,视觉诱发电位改变不明显。术后4周颅内占位达0.3cm3时超出颅内代偿空间,视觉诱发电位改变,颅内占位达0.35cm3时视觉诱发电位改变更为明显,表现为P1波潜伏期明显延长,振幅明显减小。结论首次建立的慢性颅内段视神经压迫损伤模型稳定,可模仿鞍区肿瘤引起的视神经病变,慢性视神经压迫的视觉诱发电位改变呈渐进性,早期在代偿范围内改变并不明显,晚期表现为P1波潜伏期延长,振幅减小,如不去除压迫难以恢复。

猫眼视神经放射状切开术后的影像改变

目的观察活体猫眼行放射状视神经切开术（RON）后的影像改变。方法健康成年猫10只，单眼行RON。分别于术前和术后1、15、30、90d行相干光断层扫描（OCT）和荧光素眼底血管造影（FFA）检查。结果OCT检测：术后第1天，显示RON切口深达筛板后，周围视网膜水肿；术后第15—30天，切口深度变浅，视网膜水肿消失；术后第90天，瘢痕组织将筛板和巩膜切口完全填充。FFA检测：术后第1天，切口为线型低荧光，横跨筛板及部分视网膜，静脉期周边血管渗漏；第15～30天，切口扩大呈枣核形，早期低荧光，晚期中央点状着染；第90天，切口处显示为早期低荧光，中晚期切口边界有清晰的荧光素着染。结论RON后的影像表现与组织修复过程相对应。

猫眼放射状视神经切开术后筛板结构研究

目的观察活体猫眼行放射状视神经切开术（RON）后筛板结构的改变，探讨RON的治疗机制及安全性。方法健康成年猫共20只，分为1个正常组和4个实验组。正常组测量解剖数据，各实验组双眼行RON，分别于术后1、15、30、90d取材，左右眼随机行视乳头组织切片特殊染色和扫描电镜检查。结果正常猫眼颞侧平坦部距离角膜缘6．8～8．6mm，后极部球壁厚度（0．78±0．06）mm，视乳头直径（1．30±0．11）mm。RON术后1d可见巩膜切口呈“V”型裂开，手术间隙与视神经鞘膜的蛛网膜下腔相通，伴少量出血及炎细胞浸润；15d切口呈“枣核”型，最宽处位于巩膜环，神经胶质细胞增殖；30d胶原纤维沿切口缘环形增生，筛孔呈长裂隙状；90d瘢痕组织将筛板和巩膜切口完全填充。结论手术可将视乳头周围的巩膜环锐性切开，未损伤视网膜大血管，切口在巩膜环处呈逐渐扩宽趋势。