期刊文献+
共找到19篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
曼氏迭宫绦虫cathepsin L样蛋白酶的生物信息学分析 被引量:2
1
作者 李奕基 梁培 《分子诊断与治疗杂志》 2017年第5期328-333,346,共7页
目的通过生物信息学预测曼氏迭宫绦虫cathepsin L样蛋白酶(Smcathepsin L样蛋白酶)的生物学特征及其潜在功能和结构,为下一步Smcathepsin L样蛋白酶参与寄生虫和宿主相互作用过程研究提供依据。方法通过NCBI的ORF finder工具对Smcatheps... 目的通过生物信息学预测曼氏迭宫绦虫cathepsin L样蛋白酶(Smcathepsin L样蛋白酶)的生物学特征及其潜在功能和结构,为下一步Smcathepsin L样蛋白酶参与寄生虫和宿主相互作用过程研究提供依据。方法通过NCBI的ORF finder工具对Smcathepsin L样蛋白酶的开放阅读框(ORF)进行分析,利用Ex PASy网站进行蛋白的物理化学参数、信号肽、跨膜螺旋和潜在分子生物学功能的预测,通过NCBI/BLAST对蛋白保守功能域进行预测。从NCBI网站获取不同物种的cathepsin L样蛋白酶序列,并利用Vector NTI suit 8.0和Tree View软件进行分析。利用SWISS-MODEL网站和SPDBV4.10软件分析Smcathepsin L样蛋白酶的三维空间结构。结果 Smcathepsin L样蛋白酶是一个全长基因,编码336个氨基酸。蛋白由2个典型的cathepsin L样蛋白酶结构域组成,序列当中有信号肽,是一个稳定的可溶性蛋白分子。三维空间立体结构分析结果显示Smcathepsin L样蛋白酶是一个保守的蛋白。Smcathepsin L样蛋白酶编码氨基酸序列与细粒棘球绦虫、链状带绦虫、多房棘球绦虫和人的cathepsin L样蛋白酶基因的同源性分别是50%、50%、49%和46%。分子进化分析显示Smcathepsin L样蛋白酶与日本血吸虫、多房棘球绦虫和链状带绦虫亲源性更近,而与其他物种,例如原虫、线虫和哺乳动物亲源性较远。结论 Smcathepsin L样蛋白酶可能是一个潜在的分泌蛋白,该蛋白能在胞外发挥作用,即在寄生虫的消化、转移、入侵及宿主-寄生虫相互作用中起着重要的作用,是一个具有潜在研究价值的多功能分子。 展开更多
关键词 曼氏迭宫绦虫 cathepsin L样蛋白酶 生物信息学分析
下载PDF
鱼糜凝胶劣化现象相关蛋白水解酶 被引量:9
2
作者 纪蓉 顾伟钢 +2 位作者 张进杰 姚燕佳 胡亚芹 《生物技术通讯》 CAS 2011年第1期143-148,共6页
鱼糜凝胶劣化现象发生在鱼糜凝胶化过程中,导致鱼糜制品凝胶弹性下降,品质降低。研究表明,引起鱼糜凝胶劣化现象的原因是鱼糜内含的蛋白水解酶的作用。与该现象相关的蛋白水解酶类有肌浆型和肌原纤维结合型之分。大部分肌浆型蛋白水解... 鱼糜凝胶劣化现象发生在鱼糜凝胶化过程中,导致鱼糜制品凝胶弹性下降,品质降低。研究表明,引起鱼糜凝胶劣化现象的原因是鱼糜内含的蛋白水解酶的作用。与该现象相关的蛋白水解酶类有肌浆型和肌原纤维结合型之分。大部分肌浆型蛋白水解酶为水溶性的,可以在鱼糜制备过程中漂洗去除。肌原纤维结合型蛋白酶不能通过漂洗有效去除,是引发鱼糜凝胶劣化现象的重要相关酶类。已证实的凝胶劣化相关肌原纤维结合型酶类包括丝氨酸型蛋白酶和溶酶体型组织蛋白酶。 展开更多
关键词 鱼糜 凝胶化 凝胶劣化 肌浆蛋白酶 丝氨酸蛋白酶 组织蛋白酶
下载PDF
日本血吸虫组织蛋白酶L2基因扩增及克隆 被引量:2
3
作者 雷智刚 何蔼 +3 位作者 李卓雅 孟锦绣 易冰 詹希美 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第6期32-34,共3页
目的 体外扩增日本血吸虫中国大陆株组织蛋白酶L2 (SjCL2 )的编码区基因序列 ,将其克隆到真核表达质粒pcDNA3中 ,为进一步对其进行功能研究奠定基础。方法 用TRIZOL分离日本血吸虫成虫RNA ,RT -PCR扩增目的基因 ,将扩增产物定向克隆... 目的 体外扩增日本血吸虫中国大陆株组织蛋白酶L2 (SjCL2 )的编码区基因序列 ,将其克隆到真核表达质粒pcDNA3中 ,为进一步对其进行功能研究奠定基础。方法 用TRIZOL分离日本血吸虫成虫RNA ,RT -PCR扩增目的基因 ,将扩增产物定向克隆到真核表达载体 pcDNA3中。 结果 RT -PCR特异性扩增出SjCL2编码区基因序列 ,其片段大小为1kb左右 ,经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pcDNA -SjCL2中含有所扩增的基因序列。 结论 RT -PCR扩增的SjCL2编码区基因序列与预期长度相符合 ,成功构建了含SjCL2编码区基因的真核表达质粒pcDNA -SjCL2。 展开更多
关键词 日本血吸虫 组织蛋白酶L2 基因扩增 基因克隆 基因表达
下载PDF
日本血吸虫组织蛋白酶L2(SjCL2)基因巴氏毕赤酵母表达载体的构建 被引量:2
4
作者 易冰 何蔼 +6 位作者 雷智刚 郑小英 张瑞林 孟锦绣 申川军 李卓雅 詹希美 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期390-393,共4页
目的 扩增SjCL2基因 ,构建巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB -SjCL2 ,为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础。方法 运用RT -PCR技术 ,从日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫总RNA中扩增获得SjCL2基因 ;将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZ... 目的 扩增SjCL2基因 ,构建巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB -SjCL2 ,为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础。方法 运用RT -PCR技术 ,从日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫总RNA中扩增获得SjCL2基因 ;将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB质粒 ;经KpnⅠ、XbaⅠ双酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆 ,测序分析SjCL2基因并确定其读码框的正确插入。结果 利用RT -PCR技术从日本血吸虫成虫总RNA中扩增到约 1Kb大小的SjCL2基因 ,通过双酶切分析、PCR鉴定以及DNA序列分析确定SjCL2基因被克隆到巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB中。 结论 成功构建了含有SjCL2基因编码区序列的巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB 展开更多
关键词 日本血吸虫 组织蛋白酶L2 基因克隆 巴氏毕赤酵母表达载体
下载PDF
内源性蛋白酶对鱼糜凝胶的影响及其抑制方法研究进展 被引量:1
5
作者 陈海强 梁钻好 +3 位作者 周爱梅 冯均元 梁凤雪 余铭 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第7期332-337,344,共7页
鱼肉中的内源性蛋白酶是造成鱼糜凝胶劣化,影响鱼糜质构特性的主要内在原因。添加内源性蛋白酶抑制剂是控制鱼糜凝胶劣化常用的方法。本文综述了鱼肉中三种主要内源性蛋白酶(钙蛋白酶、组织蛋白酶和肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶)的性质... 鱼肉中的内源性蛋白酶是造成鱼糜凝胶劣化,影响鱼糜质构特性的主要内在原因。添加内源性蛋白酶抑制剂是控制鱼糜凝胶劣化常用的方法。本文综述了鱼肉中三种主要内源性蛋白酶(钙蛋白酶、组织蛋白酶和肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶)的性质及其对鱼糜凝胶特性的影响,并总结抑制内源性蛋白酶引起的鱼糜凝胶劣化和其他改善鱼糜凝胶特性的方法,旨在为控制鱼糜凝胶劣化及改善鱼糜凝胶特性提供理论依据。 展开更多
关键词 鱼糜 钙蛋白酶 组织蛋白酶 肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶 抑制方法
下载PDF
用聚焦层析法纯化人巯基蛋白酶抑制肽C-hCRI_c 被引量:1
6
作者 孙诠 汪淑荣 +3 位作者 姜春霞 冯建芳 李平 陈明哲 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第5期593-596,共4页
以肾衰病人尿为材料,通过碱变性、酸变性和热变性除去部分杂质和尿蛋白。然后用羧甲基-木瓜蛋白酶-琼脂糖4B亲和层析,最后用多缓冲剂聚焦层析,把人的巯基蛋白酶抑制肽C(human cysteine proteinase inhibitor C,简称 hCPI_C)和其他的hCP... 以肾衰病人尿为材料,通过碱变性、酸变性和热变性除去部分杂质和尿蛋白。然后用羧甲基-木瓜蛋白酶-琼脂糖4B亲和层析,最后用多缓冲剂聚焦层析,把人的巯基蛋白酶抑制肽C(human cysteine proteinase inhibitor C,简称 hCPI_C)和其他的hCPI_C分开,制备得高纯度、高活性的hCPI_C。在SDS-PAGE中为均一条带,每mg蛋白可抑制50单位木瓜蛋白酶活性的50-63%。 展开更多
关键词 聚焦层析 巯基蛋白酶 抑制肽C
下载PDF
柞蚕卵组织蛋白酶B纯化及性质 被引量:1
7
作者 赵小凡 王金星 《Developmental and Reproductive Biology》 1996年第2期41-50,共10页
昆虫卵内蛋白酶在胚胎发育中水解卵黄蛋白,为胚胎发育提供氨基酸,昆虫中已报道过几类卵蛋白酶,如家蚕中半胱氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶等。但是,目前尚不清楚这些蛋白酶是否存在于其他鳞翅目昆虫。了解这些蛋白酶的作用机理可以为我... 昆虫卵内蛋白酶在胚胎发育中水解卵黄蛋白,为胚胎发育提供氨基酸,昆虫中已报道过几类卵蛋白酶,如家蚕中半胱氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶等。但是,目前尚不清楚这些蛋白酶是否存在于其他鳞翅目昆虫。了解这些蛋白酶的作用机理可以为我们提供害虫防治的新方法。并且,由于蛋白水解在许多生理过程中具有重要作用,如蛋白质的成熟和转运、受精、萌芽、肿瘤转移和其他形态发生等。因此,阐明这些蛋白酶的生物功能具有重要意义。由于(i蚕卵粒大产卵量也很大,因此被选作研究鳞翅目昆虫卵蛋白酶的材料,我们希望通过对数种昆虫卵内蛋白酶的研究、找出卵黄蛋白水解的一般规律。在我们前一篇文章中报道了(i蚕组织蛋白酶B的鉴定,该蛋白酶属于半胱氨酸蛋白酶类的组织蛋或最适pH为3.5,可被E-64抑制。本文报道蛋白酶的纯化和性质。经过5步纯化过程,从(i蚕卵母细胞中纯化出组织蛋白酶B,用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得蛋白酶的亚基分子量在47kDa左右。纯化的蛋白酶活性可被E-64和Leupeptin抑制。因此,该蛋白酶属于半胱氨酸蛋白酶。天冬氨酸蛋白酶特异性抑制剂pepstatin不抑制其活性。其活性可被DFP和PMSF部分抑制。这两种抑制剂通常抑制丝氨酸蛋白酶活性? 展开更多
关键词 柞蚕卵 组织蛋白酶B 纯化 昆虫
下载PDF
镰形扇头蜱两个组织蛋白酶L-样半胱氨酸蛋白酶新基因的克隆与序列分析 被引量:7
8
作者 陈灵芝 周金林 +2 位作者 周勇志 龚海燕 李培英 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期203-208,共6页
蜱是动物常见的外寄生虫 ,并且传播多种人和动物的疾病 ,严重危害畜牧业发展和人类健康。为了寻找基因工程疫苗候选抗原基因 ,根据半胱氨酸蛋白酶的保守性氨基酸序列及镰形扇头蜱氨基酸密码子偏好设计引物 ,PCR扩增、测序并分析得到 2... 蜱是动物常见的外寄生虫 ,并且传播多种人和动物的疾病 ,严重危害畜牧业发展和人类健康。为了寻找基因工程疫苗候选抗原基因 ,根据半胱氨酸蛋白酶的保守性氨基酸序列及镰形扇头蜱氨基酸密码子偏好设计引物 ,PCR扩增、测序并分析得到 2个镰形扇头蜱的半胱氨酸蛋白酶基因片段cysA和cysB ,再通过RACE的方法得到全长基因序列。cysA全长 1168bp ,编码 3 3 2个氨基酸 ;cysB全长 1153bp ,编码 3 3 5个氨基酸。经过分析 ,CysA和CysB均与其他蜱种或物种的组织蛋白酶L 样半胱氨酸蛋白酶有高度同源性 ,两者均含有半胱氨酸蛋白酶活性位点处的保守性氨基酸序列 ,因此cysA ,cysB均为镰形扇头蜱两个新的组织蛋白酶L 样半胱氨酸蛋白酶基因。RT PCR分析表明 。 展开更多
关键词 镰形扇头蜱 组织蛋白酶 半胱氨酸蛋白酶 基因片段 RT-PCR 表达 序列分析
下载PDF
电子束辐照对带鱼鱼糜内源性蛋白酶活性及其构象单元的影响 被引量:10
9
作者 罗华彬 林露 +5 位作者 高星 吕梁玉 李高尚 陈燕婷 张进杰 杨文鸽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第9期23-28,共6页
鱼类内源性蛋白酶是引起鱼糜凝胶劣化的重要因素之一。以不同剂量电子束辐照带鱼鱼糜,测定鱼糜内源性肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)和组织蛋白酶L(cathepsin L,Cat-L)活力及其最适反应温度,结合... 鱼类内源性蛋白酶是引起鱼糜凝胶劣化的重要因素之一。以不同剂量电子束辐照带鱼鱼糜,测定鱼糜内源性肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)和组织蛋白酶L(cathepsin L,Cat-L)活力及其最适反应温度,结合圆二色光谱分析其构象单元变化,探讨电子束辐照对鱼糜内源性MBSP和Cat-L的影响。结果表明:随着辐照剂量的增加,鱼糜MBSP和Cat-L活力降低,当辐照剂量为9 kGy时Cat-L活力下降更为明显;对照组和辐照组鱼糜MBSP的最适温度均为55℃,但3 kGy及9 kGy辐照对Cat-L的最适温度产生影响,使其由55℃降低至45℃;辐照引起鱼糜MBSP和Cat-L分子中的二级结构单元互相转化,导致其构象变化,削弱其降解肌原纤维蛋白的能力。结论:电子束辐照能够影响带鱼鱼糜MBSP和Cat-L的二级结构及活力,减轻二者对肌原纤维蛋白的降解作用,适宜剂量的电子束辐照能有效抑制鱼糜内源性蛋白酶活性,防止凝胶劣化,有利于鱼糜凝胶的形成。 展开更多
关键词 电子束辐照 带鱼鱼糜 肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶 组织蛋白酶L 构象单元
下载PDF
相似穿孔线虫S型半胱氨酸蛋白酶基因克隆与序列分析 被引量:2
10
作者 吕春花 肖罗 +3 位作者 茆振川 陈国华 杨宇红 谢丙炎 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期17-22,共6页
根据不同种类线虫编码半胱氨酸蛋白酶的保守序列及植物寄生性线虫的半胱氨酸蛋白酶氨基酸密码子的偏好设计简并引物,通过RACE技术,首次从相似穿孔线虫(Radopholus similis)中克隆得到一个编码S型半胱氨酸蛋白酶基因的cDNA全长,命名为Rs-... 根据不同种类线虫编码半胱氨酸蛋白酶的保守序列及植物寄生性线虫的半胱氨酸蛋白酶氨基酸密码子的偏好设计简并引物,通过RACE技术,首次从相似穿孔线虫(Radopholus similis)中克隆得到一个编码S型半胱氨酸蛋白酶基因的cDNA全长,命名为Rs-CPS(GenBank登录号EU659125)。Rs-CPS基因全长为1112bp,编码314个氨基酸,分子量为34.69ku。分析结果显示:Rs-CPS氨基酸序列具有半胱氨酸蛋白酶家族典型的Cys-His-Asn三联体酶催化活性中心,而且N端有1个17个氨基酸残基组成的信号肽。 展开更多
关键词 相似穿孔线虫 半胱氨酸蛋白酶 克隆 进化分析
下载PDF
胃癌粘膜内组织蛋白酶B/巯基蛋白酶抑制物比值异常 被引量:2
11
作者 任卫平 董晓旭 +2 位作者 陈向荣 萧树东 江绍基 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1993年第11期633-636,共4页
组织蛋白酶 B 是一种巯基蛋白酶,存在于细胞溶酶体内。本研究发现,胃癌粘膜内组织蛋白酶 B 样活性明显高于邻近正常胃粘膜,而且其活性的显著增高与内源性巯基蛋白酶抑制物的抑制活力相对不足有关。
关键词 蛋白酶B 巯基蛋白酶 胃肿瘤
下载PDF
Impact of proteolytic enzymes in colorectal cancer development and progression 被引量:4
12
作者 László Herszényi Loránd Barabás +2 位作者 István Hritz Gábor István Zsolt Tulassay 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第37期13246-13257,共12页
Tumor invasion and metastasis is a highly complicated, multi-step phenomenon. In the complex event of tumor progression, tumor cells interact with basement membrane and extracellular matrix components. Proteolytic enz... Tumor invasion and metastasis is a highly complicated, multi-step phenomenon. In the complex event of tumor progression, tumor cells interact with basement membrane and extracellular matrix components. Proteolytic enzymes(proteinases) are involved in the degradation of extracellular matrix, but also in cancer invasion and metastasis. The four categories of proteinases(cysteine-, serine-, aspartic-, and metalloproteinases) are named and classified according to the essential catalytic component in their active site. We and others have shown that proteolytic enzymes play a major role not only in colorectal cancer(CRC) invasion and metastasis, but also in malignant transformation of precancerous lesions into cancer. Tissue and serumplasma antigen concentrations of proteinases might be of great value in identifying patients with poor prognosis in CRC. Our results, in concordance with othersindicate the potential tumor marker impact of proteinases for the early diagnosis of CRC. In addition, proteinases may also serve as potential target molecules for therapeutic agents. 展开更多
关键词 proteinase cathepsin PLASMINOGEN ACTIVATOR Matrix
下载PDF
组织蛋白酶E氨基端催化性残基的确定
13
作者 刘剑 《中国现代医生》 2009年第20期1-3,共3页
目的验证组织蛋白酶E保守基序DTG中第98位天门冬氨酸残基为组织蛋白酶E氨基端催化性残基。方法通过基因定点突变技术将第98位天门冬氨酸残基用丙氨酸替代,制成变异体D98A,并将野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E基因在人胚胎肾293T细胞中... 目的验证组织蛋白酶E保守基序DTG中第98位天门冬氨酸残基为组织蛋白酶E氨基端催化性残基。方法通过基因定点突变技术将第98位天门冬氨酸残基用丙氨酸替代,制成变异体D98A,并将野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E基因在人胚胎肾293T细胞中进行异源表达。结果在细胞培养基和细胞提取物中都发现有野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E的酶原蛋白表达。突变体D98A酶原在酸性条件下不能转变为酶,也没有酶活性。结论组织蛋白酶E第98位天门冬氨酸残基是酶的催化性残基,对酶的催化活性非常重要。 展开更多
关键词 活性部位基序 天门冬氨酸蛋白酶 组织蛋白酶E 变异体解析
下载PDF
组织蛋白酶E第284位苏氨酸残基对酶活性的作用
14
作者 刘剑 《中国临床新医学》 2009年第7期661-665,共5页
目的探讨组织蛋白酶E第284位苏氨酸残基在酶活性中的作用。方法通过基因点突变,将大鼠组织蛋白酶E内羧基端的活性部位基序中第284位苏氨酸残基用丝氨酸进行替代,构建变异体T284S。结果当将野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E基因在HEK2... 目的探讨组织蛋白酶E第284位苏氨酸残基在酶活性中的作用。方法通过基因点突变,将大鼠组织蛋白酶E内羧基端的活性部位基序中第284位苏氨酸残基用丝氨酸进行替代,构建变异体T284S。结果当将野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E基因在HEK293T细胞中进行异源表达时,在细胞培养基和细胞提取物中都发现有野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E的酶原蛋白表达。突变体T284S仍具有自我转化为成熟型酶的能力,尽管它们的酶活性只是野生型的40%,变异体的Km值与野生型的相似,但它的Keat值却比野生型显著下降。变异体和野生型酶都被胃酶抑素和蛔虫胃蛋白酶抑制剂所抑制,Ki值几乎相同。变异体在各种酸碱度下的圆二色光谱与野生型基本相同。结论(1)第284位苏氨酸残基对酶的催化活性确实非常重要。变异体T284S酶催化活性的下降是由于多出来的甲基使活性部位氢键的分布发生改变,从而使酶与底物的作用模式发生改变。(2)BACE-1不能被胃酶抑素抑制,可能与羧基端结构域的活性部位基序差异无关,而与BACE1蛋白结构中的其它部分有关。 展开更多
关键词 活性部位基序 天门冬氨酸蛋白酶 组织蛋白酶E 变异体解析
下载PDF
马铃薯腐烂茎线虫L型半胱氨酸蛋白酶新基因(Dd-cpl-1)的克隆与序列分析 被引量:6
15
作者 王高峰 彭德良 +3 位作者 孙建华 黄文坤 彭焕 龙海波 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期60-68,共9页
L型半胱氨酸蛋白酶基因(Cathepsin L-like cysteine proteinase gene)为与植物寄生线虫寄生能力相关的多功能基因。运用RT-PCR和RACE的方法从马铃薯腐烂茎线虫Ditylenchus destructor中克隆出1个L型半胱氨酸蛋白酶新基因Dd-cpl-1(GenBan... L型半胱氨酸蛋白酶基因(Cathepsin L-like cysteine proteinase gene)为与植物寄生线虫寄生能力相关的多功能基因。运用RT-PCR和RACE的方法从马铃薯腐烂茎线虫Ditylenchus destructor中克隆出1个L型半胱氨酸蛋白酶新基因Dd-cpl-1(GenBank登录号为GQ180107)。该基因Dd-cpl-1 cDNA全长序列含有1个1 131 bp的开放性阅读框(ORF),编码376个氨基酸残基,其5′末端及3′末端分别含有29 bp和159 bp的非编码区(UTR)。Dd-cpl-1内含子外显子结构分析结果表明,其基因组序列包含7个内含子,且各内含子两端剪接位点序列遵守GT/AG规则。Dd-cpl-1基因推定的蛋白Dd-CPL-1与松材线虫L型半胱氨酸蛋白酶高度同源,一致性达到77%。以不同物种中L型半胱氨酸蛋白酶氨基酸序列进行比对分析,推测推定的蛋白Dd-CPL-1含有L型半胱氨酸蛋白酶基因家族高度保守的催化三联体(Cys183,His322和Asn343)以及ERFNIN基系和GNFD基系。半胱氨酸蛋白酶系统发育分析表明,Dd-cpl-1属于由L型半胱氨酸蛋白酶组成的进化分支。Dd-cpl-1的这些序列特征进一步表明其为L型半胱氨酸蛋白酶基因。这是首次在马铃薯腐烂茎线虫中克隆到的L型半胱氨酸蛋白酶,为今后在蛋白水平对其进行进一步的功能分析提供基础。 展开更多
关键词 马铃薯腐烂茎线虫 L型半胱氨酸蛋白酶 Dd-cpl-1
原文传递
组织蛋白酶S和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与冠状动脉临界病变形态学和预后的相关性 被引量:1
16
作者 顾菲菲 吕树铮 +7 位作者 陈韵岱 宋现涛 苑飞 周玉杰 李志忠 赵全明 陈方 柳景华 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期577-581,共5页
目的探讨血浆组织蛋白酶S(cathepsins)和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatinc)水平与冠状动脉临界病变形态学及预后的关系。方法人选经冠状动脉造影证实的冠状动脉临界病变(冠状动脉主要分支管腔直径局限狭窄20%~70%)患者668例,... 目的探讨血浆组织蛋白酶S(cathepsins)和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatinc)水平与冠状动脉临界病变形态学及预后的关系。方法人选经冠状动脉造影证实的冠状动脉临界病变(冠状动脉主要分支管腔直径局限狭窄20%~70%)患者668例,其中动脉粥样硬化(AS)组229例,稳定性心绞痛(SA)组192例,不稳定性心绞痛(uA)组247例。对符合条件的冠状动脉进行定量冠状动脉造影(QcA)分析,评价病变狭窄程度和斑块形态学;应用绝对定量蛋白芯片法测定血浆cathepsinS水平,应用增强的免疫比浊法测定血浆cystatinC水平;随访12~36个月,评估血浆cathepsinS、cystatinC对主要不良心脏事件的预测作用。结果UA组、SA组患者血浆cathepsinS、cystatinC水平高于As组,cathepsinS分别为(11654.6±3308.5)、(10433.2±2882.5)及(7580.7±2473.8)ng/L,均P〈0.01;cystatinC分别为(1.01±0.23)、(0.94±0.27)及(0.85±0.25)mg/L,均P〈0.01),且uA组cathepsinS和cystatinC水平高于SA组(均P〈0.01)。QCA分析结果显示,SA组管腔面积狭窄率在最大,AS组最小(P〈o.01);uA组斑块面积高于SA组、As组(P〈o.01)。病变形态学方面,UA组偏心病变、复杂病变的发生率高于AS组、SA组(P〈0.05和P〈0.01)。多因素回归分析结果显示,校正性别、年龄及传统危险因素后,复杂病变[相对危险度(RR)-2.15,95%CI1.03~4.48,P〈0.05]、钙化病变(RR-5.32,95%CI:2.68~10.59,P〈0.01)、cathepsinS(RR-1.34,95%CI:1.14~1.56,P〈0.01)及cystatinC(RR-5.11,95%CI:1.61~16.25,P〈0.01)与发生不良心血管事件相关。结论UA患者血浆cathepsinS和cystatinC水平高于SA和AS患者。血浆cathepsinS水平对心脏事件的预测作用较弱,血浆cystatinC水平是冠状动脉临界病变患者发生心脏事件的较强预测因子。 展开更多
关键词 组织蛋白酶类 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 冠状血管造影术 预后
原文传递
糖尿病对腹主动脉瘤组织蛋白酶S表达的影响 被引量:4
17
作者 焦阳 丛翔 +2 位作者 苏庆波 丁祥就 姜剑军 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期733-736,共4页
目的观察糖尿病(DM)对小鼠腹主动脉瘤(AAA)组织中组织蛋白酶S(Cathepsin S)及其抑制剂胱抑素C(Cystatin C)表达的影响。方法将16只载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)的C57BL/6小鼠随机分为DM+AAA组(n=8)与AAA组(n=8)并构... 目的观察糖尿病(DM)对小鼠腹主动脉瘤(AAA)组织中组织蛋白酶S(Cathepsin S)及其抑制剂胱抑素C(Cystatin C)表达的影响。方法将16只载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)的C57BL/6小鼠随机分为DM+AAA组(n=8)与AAA组(n=8)并构建相应的疾病模型。通过超声观察两组小鼠最大腹主动脉直径的变化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测两组小鼠血浆Cystatin C水平,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、Western blot、免疫组织化学等方法观察两组小鼠AAA病变中Cystatin C及Cathepsin S的表达,通过Weigert弹力纤维染色法观察两组小鼠AAA中弹力纤维的破坏程度。结果与AAA组小鼠比较,DM+AAA组小鼠最大腹主动脉直径较小[(1.13±0.14) mm比(1.35±0.26) mm],血浆Cystatin C水平较高[(1 347.19±340.12) pg/ml比(1 060.17±153.55) pg/ml]、AAA病变中Cystatin C表达增加而Cathepsin S表达降低、弹力纤维破坏程度分级降低(2.00±0.76比2.88±0.64)。结论糖尿病增加Cystatin C在血浆及AAA组织中的含量,并抑制Cathepsin S在AAA组织中的表达,从而降低腹主动脉壁弹力纤维的破坏程度,在AAA的发生和进展中发挥保护作用。 展开更多
关键词 糖尿病 主动脉瘤 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 组织蛋白酶类
原文传递
TRIB3通过抑制CTSZ介导的BCR-ABL降解促进急性淋巴细胞白血病疾病进程 被引量:2
18
作者 再吾力·叶尔江 王凤 +2 位作者 杨兆娜 胡卓伟 李珂 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2628-2635,共8页
费城染色体Ph阳性急性B淋巴细胞白血病(Ph+B-ALL)是最常见的与染色体异常相关的急性淋巴细胞白血病,该疾病常发于儿童和青壮年,其治疗预后效果较差。研究表明,假性激酶TRIB3(tribbles homologue 3)在肿瘤细胞中高表达,高表达TRIB3能够... 费城染色体Ph阳性急性B淋巴细胞白血病(Ph+B-ALL)是最常见的与染色体异常相关的急性淋巴细胞白血病,该疾病常发于儿童和青壮年,其治疗预后效果较差。研究表明,假性激酶TRIB3(tribbles homologue 3)在肿瘤细胞中高表达,高表达TRIB3能够促进多种肿瘤的发生发展,但是TRIB3在Ph+ALL疾病中的作用及分子机制并不清楚。本研究发现TRIB3在Ph+ALL患者样本中表达上调,高表达TRIB3与断裂点簇基区-Abelson酪氨酸激酶(BCR-ABL)蛋白水平呈现正相关。实验结果进一步表明,敲除TRIB3能够降低BCR-ABL的表达并抑制Ph+ALL的疾病进程。机制研究表明,TRIB3通过与溶酶体半胱氨酸组织蛋白酶Z(CTSZ)相互作用,进而抑制CTSZ介导的BCR-ABL降解,维持Ph+ALL细胞的增殖和抵抗凋亡能力。综上,本研究表明抑制TRIB3的表达来调控BCR-ABL蛋白水平可能作为Ph+ALL潜在的治疗策略。本实验所有动物实验均通过中国医学科学院药物研究所伦理审查委员会审查。白血病患者血液样本实验通过中国医学科学院伦理委员会批准(伦理号:KT2019055-EC-1)。 展开更多
关键词 假激酶 急性淋巴细胞白血病 溶酶体半胱氨酸组织蛋白酶Z 蛋白质降解 蛋白质-蛋白质相互作用
原文传递
毛首鞭形线虫丝氨酸蛋白酶抑制剂TtSerpin1对蛋白酶的抑制作用 被引量:8
19
作者 司徒永立 邵正 +5 位作者 邓莉 隋细香 李海舰 许琴英 何庆丰 彭礼飞 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期342-346,共5页
目的原核表达、分离纯化毛首鞭形线虫(Trichuris trichiura)丝氨酸蛋白酶抑制剂1(TtSerpin1),并观察其对蛋白酶的抑制作用。方法从毛首鞭形线虫成虫cDNA中扩增TtSerpin1编码序列(Gen Bank登录号为MF401634),将其连接入原核表达载体,构... 目的原核表达、分离纯化毛首鞭形线虫(Trichuris trichiura)丝氨酸蛋白酶抑制剂1(TtSerpin1),并观察其对蛋白酶的抑制作用。方法从毛首鞭形线虫成虫cDNA中扩增TtSerpin1编码序列(Gen Bank登录号为MF401634),将其连接入原核表达载体,构建重组质粒pET32a-sumo/TtSerpin1。将重组质粒转化入大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导TtSerpin1融合蛋白表达。表达的包涵体蛋白经变性、复性、镍亲和层析纯化、SUMO蛋白酶酶切融合标签后获得rTtSerpin1。用发色底物法检测其对人组织蛋白酶G、中性粒细胞弹性蛋白酶、蛋白酶3、纤溶酶和胰蛋白酶,猪胰蛋白酶、胰弹性蛋白酶及牛α-胰糜蛋白酶的抑制作用。结果成功构建了重组质粒pET32a-sumo/TtSerpin1,并在E.coli中成功表达。表达产物主要为包涵体,复性、纯化后的rTtSerpin1具有较好的蛋白酶抑制活性。1 000 nmol/L的rTtSerpin1对人组织蛋白酶G(100 nmol/L)、中性粒细胞弹性蛋白酶(10 nmol/L)、蛋白酶3(200 nmol/L),猪胰弹性蛋白酶(10 nmol/L),牛α-胰糜蛋白酶(1 nmol/L)的蛋白酶活性抑制率分别为60.89%、82.84%、21.21%、58.32%、96.98%,但对人纤溶酶、胰蛋白酶及猪胰蛋白酶抑制活性较弱。rTtSerpin1对人组织蛋白酶G及中性粒细胞弹性蛋白酶的抑制常数(K_i)分别为(949.80±91.51)、(242.70±53.41)nmol/L。结论 rTtSerpin1对多种丝氨酸蛋白酶具有较强抑制作用。 展开更多
关键词 毛首鞭形线虫 丝氨酸蛋白酶抑制剂 原核表达 组织蛋白酶G 中性粒细胞弹性蛋白酶 蛋白酶3
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部