固本健脑法对Alzheimer病模型大鼠海马区树突棘及P-tau的影响

目的:本课题在成功建立AD大鼠模型基础上,观察固本健脑法治疗AD的作用及机制。方法:12月龄衰老大鼠行脑立体定位手术于双侧海马注射Aβ_(1-42),制备复合AD大鼠模型,并用固本健脑液灌胃干预,以安理中组为对照。4周后,高尔基染色法观察大鼠海马区神经元树突棘形态及密度;Western Blot法检测大鼠海马区Caveolin-1、P-tau(Thr231、Ser396位点)蛋白表达改变。结果:高尔基染色法结果显示:固本健脑液高、低剂量组神经元细胞及树突棘形态明显改善,数目及密度显著增加(P<0.01)。Western Blot法检测结果显示:固本健脑液高、低剂量组可使Caveolin-1的表达不同程度的升高,而tau磷酸化水平下降,差异有显著性(P<0.01)。结论:固本健脑法能显著改善AD大鼠海马神经元树突棘形态及密度,显著提高AD模型大鼠海马区Caveolin-1的表达,抑制tau蛋白过度磷酸化。

喉鳞癌caveolin-1和MVD表达及与颈淋巴结转移的关系

目的:探讨喉鳞状细胞癌组织中caveolin-1 mRNA及蛋白的表达和微血管密度(MVD)与颈淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组化法检测40例喉鳞状细胞癌组织中caveolin-1、CD34表达,并用半定量逆转录聚合酶链式反应(semi-RT-PCR)技术检测以上组织中caveolin-1 mRNA表达水平。结果:不伴颈淋巴结转移的喉癌组(第1组)的caveolin-1 mRNA相对A值为0.450±0.050,伴有颈淋巴结转移的喉癌组(第2组)的caveolin-1 mRNA相对A值为0.701±0.073;caveolin-1蛋白第1组中阳性表达率为25.0%,第2组为65.0%,不论从基因还是蛋白水平,两组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。CD34免疫组织化学染色结果显示第2组的MVD值为30.19±2.60显著高于第1组值21.34±4.62(P<0.05)。喉鳞状细胞癌组织中caveolin-1高表达与MVD升高呈正相关(r=0.875,P<0.05),且二者与颈淋巴结转移相关。结论:caveolin-1在喉鳞状细胞癌中的表达可能在肿瘤转移过程中起了重要作用,与肿瘤血管形成关系密切。

胃癌细胞中Caveolin-1对表皮生长因子受体2活化的影响

目的:检测Caveolin-1蛋白(Cav-1)对胃癌(gastric cancer,GC)细胞株NCI-N87恶性生物学行为的影响及其可能的作用机制。方法:构建Cav-1过表达稳转染细胞系N87/Cav-1,应用MTT、克隆形成、划痕修复实验检测Cav-1对胃癌细胞株NCI-N87恶性生物学行为的影响,应用Western blotting检测在EGF配体诱导下Cav-1蛋白对Her-2活化及ERK、Akt信号通路的影响。结果:Cav-1过表达可明显抑制胃癌细胞NCI-N87的增殖及迁移能力;在配体EGF刺激下,Cav-1过表达明显抑制了Her-2酪氨酸磷酸化水平以及P-ERK/ERK、P-AKT/AKT的比率(P<0.01)。结论:Cav-1过表达可明显抑制EGF诱导的Her-2酪氨酸磷酸化水平,并可能通过下游MAPK及PI3K/Akt信号通路的作用抑制了胃癌细胞株NCI-N87的增殖及迁移能力。

Caveolin-1和黏附分子在LPS诱导的急性肺损伤模型中的变化

通过实时荧光定量PCR(real-time PCR)等方法,研究了脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠模型肺组织中小窝蛋白-1(caveolin-1)、血管细胞粘附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和E-选择素(E-selectin)的m RNA表达变化情况,以初步探索caveolin-1在ALI发病机制中的作用。实验结果表明,与对照组相比较,经腹腔注射LPS(20 mg/kg)的实验组中肺系数、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)m RNA水平明显升高(P<0.05),同时VCAM-1和E-selectin的m RNA表达水平增加(P<0.05),而caveolin-1的m RNA表达减少(P<0.05)。上述研究提示,LPS可能通过抑制caveolin-1的表达,使黏附分子VCAM-1、E-selectin的表达上调,从而使肺组织中性粒细胞大量浸润,MPO增多,加重肺损伤。

肺腺癌组织中基质窖蛋白-1和LDH-B、PKM2的表达及其意义

目的探讨基质窖蛋白1(Cav-1)、乳酸脱氢酶B(LDH-B)和丙酮酸激酶2(PKM2)在人肺腺癌(PAC)组织中的表达并分析3者的相关性及其临床意义。方法采用量子点免疫荧光组织化学(QDs-IHC)技术检测68例PAC组织和16例非癌性肺组织中基质Cav-1、LDH-B和PKM2的表达情况。结果基质Cav-1在PAC组织的阳性率为58.8%,与非癌变肺组织的阳性率100%相比,差异有统计学意义(P<0.05)。肺腺癌组织中LDH-B和PKM2的阳性率分别为76.5%、70.6%,均高于非癌性肺组织(均P<0.05)。PAC中、低分化组PKM2的阳性率均高于高分化组(均P<0.05)。结论基质Cav-1缺失,LDH-B、PKM2的高表达可能促进PAC的恶性进展。

胎膜早破并发羊膜腔感染孕妇Cav-1/NF-κB信号通路及妊娠结局

目的观察胎膜早破(PROM)并发羊膜腔感染孕妇小窝蛋白-1(Cav-1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路变化及其对妊娠结局的影响。方法收集2018年1月-2019年12月武汉市第一医院236例PROM孕妇临床资料,根据并发羊膜腔感染情况分为感染组65例与非感染组171例,检测胎膜组织Cav-1、NF-κB、蛋白激酶B(Akt)、Toll样受体4(TLR-4)相对表达量及血清白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、β2防御素(HBD-2)水平,分析两组孕妇妊娠结局差异。结果感染组胎龄、新生儿出生体质量均低于非感染组(P<0.05),感染组下生殖道感染率、剖宫产率、产褥感染率及新生儿感染率均显著高于非感染组(P<0.05);感染组胎膜组织Cav-1、NF-κB、Akt、TLR-4 mRNA相对表达量及血清IL-6、CRP、MMP-2、HBD-2水平均显著高于非感染组(P<0.05);Cav-1、NF-κB、Akt、TLR-4 mRNA相对表达量及血清IL-6、CRP、MMP-2、HBD-2水平随感染程度加重逐渐升高(P<0.05)。结论PROM并发羊膜腔感染可引起剖宫产、产褥感染及新生儿感染等不良妊娠结局,Cav-1/NF-κB信号通路可能参与羊膜腔感染的发生与发展。

颅内压参数联合血清caveolin-1、AQP-4对高血压脑出血患者术后预后不良的预测价值

目的:探讨颅内压参数联合血清小窝蛋白-1(caveolin-1)、水通道蛋白4(AQP-4)对高血压脑出血(HICH)患者术后预后不良的预测价值。方法:选择2020年1月至2022年1月河北省胸科医院收治的106例HICH患者,术后随访3个月,根据格拉斯哥预后(GOS)评分将患者分为预后良好组(55例),预后不良组(51例)。术后监测颅内压参数[压力反应指数(PRx)、平均颅内压波幅(MWA)、20 mm Hg阈值下颅内压剂量(Dicp20)],检测血清caveolin-1、AQP-4水平。多因素Logistic回归分析HICH患者术后预后不良的因素。受试者工作特征曲线(ROC)分析颅内压参数联合血清caveolin-1、AQP-4预测HICH患者术后预后不良的价值。结果:预后不良组PRx、MWA、Dicp20以及血清caveolin-1、AQP-4水平高于预后良好组(P<0.05)。低术前格拉斯哥昏迷评分(GCS)评分、高PRx、高Dicp20、高caveolin-1、高AQP-4是HICH患者术后预后不良的危险因素(P<0.05)。联合PRx、Dicp20、caveolin-1和AQP-4预测HICH患者术后3个月预后不良的的曲线下面积为0.823,大于PRx、Dicp20、caveolin-1和AQP-4单独预测。结论:高PRx、Dicp20、caveolin-1、AQP4是HICH患者术后预后不良的危险因素,联合颅内压参数PRx、Dicp20及血清caveolin-1、AQP4预测HICH患者术后预后不良具有较高的价值。

CAV-1在结直肠癌患者肠黏膜中的表达及其意义探讨

[目的]研究质膜微囊蛋白1(caveolin-1,CAV-1)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者大肠黏膜中的表达,并初步探讨其临床意义。[方法]在肠镜室募集无器质性肠道疾病患者12例、结直肠癌患者16例,通过结肠镜分别在无器质性肠道疾病患者的乙状结肠处和结直肠癌患者的病变明显处取材,每例取3块。获取的标本经免疫组织化学染色,检测CAV-1在结肠黏膜中的表达。[结果]免疫组织化学法检测CAV-1在无器质性肠道疾病患者和结直肠癌结肠黏膜中的表达发现,CAV-1蛋白阳性染色主要位于胞浆,胞核少见或未见染色;在无器质性肠道疾病患者的结肠黏膜组织胞浆中仅有少量阳性染色点,而CAV-1在结直肠癌组织中的表达明显,染色呈现颗粒状。无器质性肠道疾病患者组CAV-1表达的阳性指数为(12.87±2.76),结直肠癌组的表达明显增强,其阳性指数为(34.42±5.44),较无器质性肠道疾病患者表达明显增强(P<0.01)。[结论]CAV-1在直结肠癌黏膜中高表达,CAV-1是结直肠癌发病的促使因子。

siRNA沉默caveolin-1基因对胰腺癌细胞迁徙和侵袭影响及其机制的探讨

目的:探讨caveolin-1对胰腺癌细胞PANC1在体外迁徙和侵袭的影响并初步探讨其机制。方法:用siRNA技术抑制胰腺癌PANC1细胞中caveolin-1的表达,构建细胞株PANC1/siRNA作为实验组,空载体细胞株PANC1/shuffle作为对照组。蛋白质印迹法检测细胞内caveolin-1和MMP-7的表达。流式细胞仪分析细胞失巢凋亡指数,黏附实验检测细胞黏附定植的能力,侵袭小室实验检测细胞迁徙和侵袭的能力。结果:PANC1/siRNA细胞的caveolin-1表达被抑制,表达量低于PANC1/shuffle和PANC1细胞株(P<0.01);PANC1/siRNA细胞的抗失巢凋亡的能力强于PANC1/shuffle细胞,凋亡指数分别为((9.24±1.61)%vs(17.32±1.79)%,P<0.01),PANC1/siRNA的黏附能力强于PANC1/shuffle(0.867±0.153 vs 0.523±0.072,P<0.01);PANC1/siRNA迁入膜内的细胞数多于PANC1/shuffle(142.6±24.35 vs 106.5±10.81,P<0.05),PANC1/siRNA细胞侵袭破坏基质胶进入膜内的能力强于PANC1/shuffle(88.9±8.07 vs 61.3±7.23,P<0.01);PANC1/siRNA中MMP-7表达量明显高于PANC1/shuffle(P<0.01)。结论:caveolin-1通过对MMP-7的调控抑制PANC1细胞的体外迁徙和侵袭。