Cbl-b基因和血小板参数在免疫性血小板减少症病人中的表达及临床意义

目的:检测Cbl-b基因和血小板参数在原发免疫性血小板减少症(ITP)病人外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达情况,并研究其临床意义。方法:选取68例初诊的ITP病人(ITP组)和同期40名健康的体检者(对照组)为研究对象,检测并比较2组间Cbl-b mRNA的相对表达量和血小板参数血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)和大血小板比率(P-LCR)的差异,分析ITP组病人不同亚组分组间Cbl-b mRNA表达的差异以及其与部分临床指标的相关性,分别采用logistic回归和ROC曲线分析发生ITP的影响因素以及其对ITP的诊断价值。结果:ITP组Cbl-b mRNA的表达和PLT低于对照组,MPV、PDW和P-LCR高于对照组(P<0.01)。Cbl-b mRNA的表达随着血小板分级增高而增高,出血评分<2分组的Cbl-b mRNA的表达量高于出血评分≥2分组(P<0.05~P<0.01)。Cbl-b mRNA的表达与PLT呈正相关关系(P<0.01),与出血评分、MPV和P-LCR均呈负相关关系(P<0.05~P<0.01)。logistic回归分析表明Cbl-b mRNA低表达(OR=17.525,95%CI:2.589~118.637)、MPV升高(OR=2.515,95%CI:1.506~4.200)和P-LCR升高(OR=1.211,95%CI:1.067~1.376)可能是ITP发生的独立危险因素(P<0.01)。ROC曲线分析显示Cbl-b mRNA、MPV、P-LCR及三者联合预测发生ITP的AUC分别是0.920、0.899、0.883和0.972,联合检测的预测AUC均高于单项检测。结论:ITP病人PBMCs中Cbl-b基因表达降低,MPV和P-LCR升高,Cbl-b与出血评分、PLT、MPV和P-LCR有一定的相关性,三者的异常表达是发生ITP的危险因素,联合检测三者对于是否发生ITP具有较高预测价值。

皮肤黑色素瘤组织中Nedd4L与Cbl-b蛋白的表达及对患者预后的评估价值

目的探讨皮肤黑色素瘤(CMM)组织中神经前体细胞表达发育调控样蛋白(Nedd4L)和环指型泛素连接酶(Cbl-b)蛋白的表达及对患者预后的评估价值。方法选取40例CMM患者和50例良性痣患者分别作为CMM组和对照组,收集CMM组患者的年龄、性别及临床特征(发生部位、是否发生转移、临床分期及肿瘤是否有溃疡等)信息;取2组患者手术切除组织存档蜡块制作切片,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)法检测2组患者Nedd4L和Cbl-b的表达;随访CMM组患者的3年生存情况,应用Cox单因素分析模型分析评估影响预后的独立因素,采用受试者工作特征(ROC)分析Nedd4L、Cbl-b单一和联合检测对CMM组患者预后的预测价值。结果Nedd4L和Cbl-b蛋白在CMM组中表达水平高于对照组(P<0.05),患者年龄、肿瘤发生转移、肿瘤溃疡、临床分期、肿瘤厚度、Nedd4L及Cbl-b阳性表达是影响CMM预后的关键因素(P<0.05);联合检测Nedd4L和Cbl-b蛋白对CMM患者预后的预测能力高于单个指标检测(P<0.05)。结论CMM患者病变组织中Nedd4L和Cbl-b蛋白呈高表达,2项指标联合检测可提高预后评价的准确性及灵敏性。

c-Cbl、Cbl-b和EGFR在胃癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的:c-Cbl和Cbl-b是CBL(the Casitas B-cell lymphoma)家族的两个重要成员,具有连接体功能及E3泛素连接酶功能,在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)下调过程中发挥重要作用。本研究旨在探讨c-Cbl、Cbl-b和EGFR在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:将124例胃癌术后标本和16例癌旁正常胃组织制作成组织芯片,应用免疫组化方法检测c-Cbl、Cbl-b和EGFR的表达情况,并分析其与临床及病理因素的关系。结果:124例胃癌中c-Cbl、Cbl-b和EGFR的阳性率分别为71.0%、82.3%和56.5%,均显著高于癌旁正常胃组织(分别为18.0%、25.0%和12.5%,均P<0.01)。c-Cbl表达与浸润深度及病理分期呈正相关(r=0.219,P=0.015和r=0.266,P=0.003);Cbl-b表达与淋巴结转移及病理分期呈正相关(r=0.190,P=0.034和r=0.298,P=0.001);EGFR表达与浸润深度及病理分期呈正相关(r=0.286,P=0.001和r=0.362,P=0.000)。c-Cbl、Cbl-b与EGFR表达强度均呈正相关(r=0.241,P=0.007和r=0.183,P=0.042)。27例胃癌标本同时强阳性表达c-Cbl、Cbl-b和EGFR,多为分化程度差、肿瘤组织浸润程度深、淋巴结转移数目多及分期晚的病例。结论:c-Cbl、Cbl-b和EGFR的高表达与胃癌的侵袭和发展有关,c-Cbl和Cbl-b有可能成为胃癌新的分子标志物。

c-Cbl、Cbl-b和EGFR在非小细胞肺癌中的表达及其预后价值

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)与肺癌的发展密切相关,其功能受泛素连接酶(Casitas B-lineage lymphoma,Cbl)家族调节,本研究旨在探讨c-Cbl、Cbl-b和EGFR在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其在预后判断方面的应用价值。方法采用组织微阵列联合免疫组织化学染色技术检测94例NSCLC组织中c-Cbl、Cbl-b、EGFR的表达,分析其与临床病理因素及预后之间的关系。结果 c-Cbl、Cbl-b和EGFR的阳性表达率分别为30.9%(29/94)、84.0%(79/94)和60.6%(57/94)。c-Cbl、Cbl-b蛋白表达与年龄、病理类型、TNM分期、淋巴结有无转移及吸烟史无关。EGFR、c-Cbl、Cbl-b的表达与患者的总生存无明显相关。亚组分析显示,在EGFR阳性组患者中,c-Cbl阳性组患者的总生存期(overall survival,OS)明显优于c-Cbl阴性组的患者(P=0.014)。结论检测c-Cbl蛋白的表达水平可能有助于预测EGFR阳性NSCLC患者的预后。

泛素连接酶Cbl-b调控p38MAPK在胰岛素与硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的初步探讨胰岛素和硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的机制。方法 SD大鼠50只,随机分为空白对照组(Control组)、糖尿病心肌病模型组(DCM组)、糖尿病心肌病+胰岛素组(DCM+In组)、糖尿病心肌病+硒组(DCM+Se组)、糖尿病心肌病+胰岛素+硒组(DCM+In+Se组)。TUNEL法观察心肌细胞凋亡;Western blot观察凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase-3和PARP剪切片段的变化,同时观察Cbl-b和p38MAPK表达变化;免疫沉淀法检测Cbl-b与p38MAPK、Ku70与Bax之间的相互作用。结果胰岛素与硒协同抑制心肌细胞凋亡(P<0.01);胰岛素联合硒协同,增加Cbl-b的表达,降低p38MAPK表达(P<0.01);两药联合协同增加Cbl-b与p38MAPK、Ku70与Bax之间的相互作用(P<0.01)。结论胰岛素与硒通过调控Cbl-b,抑制p38MAPK而阻止Bax转位来协同抑制心肌细胞凋亡。

ITP中T细胞活化信号分子c-Cbl和Cbl-b的表达变化

目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)中T细胞活化信号通路相关分子Cbl-b和c-Cbl基因的表达情况.方法:利用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测18例ITP患者外周血单个核细胞(PBMC)中Cbl-b和c-Cbl基因的表达水平,20例健康成人作为对照.结果:ITP组Cbl-b的表达水平(中位数为0.091%)与健康成人组Cbl-b的表达水平(中位数为0.366%)相比,明显降低(P<0.001);而c-Cbl基因在ITP组中的表达水平(中位数为0.372%)与健康成人组的表达水平(中位数为0.298%)相比没有统计学差异,但c-Cbl基因在ITP女性患者样本中的表达水平(中位数为0.236%)明显低于男性患者样本c-Cbl的表达水平(中位数为0.479%)(P=0.039).结论:ITP患者外周血中Cbl-b表达下调,可能是其T细胞免疫异常活化的原因之一.

microRNA-1183通过抑制CBL-B的表达促进胃癌细胞的增殖及转移

目的研究micro RNA-1183对胃癌细胞增殖及转移的影响,初步探讨micro RNA-1183和CBL-B信号转导通路在此过程中的作用。方法将人胃癌细胞MGC803瞬时转染micro RNA模拟物micro RNA-1183,采用实时PCR法检测胃癌细胞中micro RNA-1183的表达,MTT法检测细胞增殖的能力,Transwell法检测细胞的转移。双荧光素酶报告基因检测系统检测micro RNA-1183与CBL-B的结合,Western blotting观察蛋白的表达。结果 MTT法显示micro RNA-1183可促进胃癌细胞MGC803的增殖,Transwell法显示micro RNA-118促进了胃癌细胞MGC803的转移。BLAST对比分析结果显示,CBL-B是micro RNA-1183的靶基因之一。Western blotting结果显示,过表达micro RNA-1183后,CBL-B的表达明显下调。双荧光素酶报告基因检测系统证实CBL-B是micro RNA-1183的靶基因。敲除CBL-B后,促进了MGC803的增殖与转移。micro RNA-1183通过抑制CBL-B促进了胃癌细胞MGC803的增殖与转移。结论 micro RNA-1183通过抑制CBL-B的表达,促进胃癌细胞MGC803的增殖及转移。

乳腺癌组织中Cbl-b和Itch蛋白的表达变化及意义

目的观察Cbl-b和Itch蛋白在乳腺癌组织中的表达变化并探讨其意义。方法选择116例乳腺癌患者术后标本和30例乳腺癌患者癌旁正常乳腺组织(距癌组织边缘5 cm),应用免疫组化法检测Cbl-b和Itch蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果 116份乳腺癌组织中Cbl-b和Itch蛋白的阳性表达率分别为78.45%(91/116)、58.62%(68/116),30份癌旁正常乳腺组织中Cbl-b和Itch蛋白的阳性表达率分别为26.67%(8/30)、23.33%(7/30)。乳腺癌组织的表达均高于癌旁正常乳腺组织(P均<0.01)。Cbl-b、Itch蛋白表达与浸润深度、淋巴结转移及病理分期均呈正相关(r分别为0.172、0.119、0.117,0.145、0.134、0.138;P分别为0.014、0.022、0.017,0.028、0.027、0.025);Cbl-b和Itch蛋白阳性表达与患病年龄、病灶大小无相关性(P均>0.05)。结论乳腺癌组织中Cbl-b蛋白、Itch蛋白表达均升高,此二者参与乳腺癌的进展。

Cbl-b在T细胞免疫耐受和肿瘤免疫治疗中的作用

Cbl-b(casitas B-cell lineage lymphoma-b)为一种高度保守的RING家族E3泛素连接酶,是调节T细胞信号的关键因子,对维持外周T细胞免疫耐受至关重要。Cbl-b表达受转录因子、共刺激分子CD28、CTLA4及自身泛素化的调控。Cbl-b通过泛素化激活的受体、受体相关酪氨酸激酶和下游信号分子而参与淋巴细胞信号的负性调控,进而精密调节抗原受体信号和免疫反应。另外,Cbl-b在调控T细胞TGF-β信号转导通路中起着重要作用。Cbl-b的缺失能增强抗肿瘤免疫反应,打破自身免疫耐受。因此,深入研究Cbl-b在T细胞免疫耐受和肿瘤免疫治疗中的作用可为肿瘤免疫治疗提供新的靶点。

miR-940抑制Cbl-b的表达促进胃癌细胞的增殖

目的:研究miR-940对胃癌细胞增殖的影响,探讨miR-940和Cbl-b信号转导通路在此过程中的作用。方法:采用Real-time PCR法检测胃癌细胞中miR-940的表达,MTT法检测胃癌细胞的增殖能力,双荧光素酶报告基因检测系统检测miR-940与Cbl-b的结合,Western blotting实验观察蛋白的表达。结果:MTT法显示miR-940可促进胃癌细胞MGC803的增殖,BLAST对比分析结果显示Cbl-b与miR-940存在结合位点。双荧光素酶报告基因检测系统证实Cbl-b是miR-940的靶基因。Western blotting结果显示过表达miR-940后,Cbl-b的表达明显下调。Cbl-b抑制胃癌细胞MGC803的增殖。miR-940通过负向调节Cbl-b的表达促进胃癌细胞的增殖。结论:miR-940通过抑制Cbl-b的表达,促进胃癌细胞MGC803的增殖。

Cbl-b基因介导T细胞免疫杀伤小鼠LA795肺腺癌细胞的实验研究

目的利用特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默T细胞Cbl-b基因表达,观察转染T细胞对小鼠肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用。方法筛选高效特异性沉默Cbl-b基因的siRNA序列转染T739小鼠脾脏T细胞,转染72h后,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-2、INF-γ等T细胞免疫因子分泌情况,比较单纯T细胞、阴性对照T细胞及转染T细胞与小鼠肺腺癌细胞LA795混合培养肿瘤杀伤率。结果转染72h后,转染组细胞因子IL-2、INF-γ分泌水平较空转组和空白组显著增加。在体外实验中,与单纯T细胞及阴性对照T细胞相比,转染T细胞能更高效杀伤小鼠肺腺癌细胞LA795,最高杀瘤率达到58.38±3.82%。结论利用特异性siRNA技术沉默Cbl-b基因能够促进小鼠T细胞因子IL-2和INF-γ分泌,增强T细胞对肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用。

Cbl-b shRNA稳定转染乳腺癌MDA-MB-231细胞系的构建

目的构建靶向Cbl-b基因的短发夹环RNA(shRNA)真核质粒表达载体,建立Cbl-b shRNA稳定转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞系,为探讨Cbl-b的生物学功能奠定基础。方法设计Cbl-b shRNA序列BLAST进行同源性分析。化学合成法合成shRNA序列,将配对的单链合成双链,以T4连接酶连接于pSilencerTM 4.1-CMV表达载体,加入感受态细胞。将菌液涂布于含有氨苄青霉素的LB平板,筛选阳性菌落,测序确认后进行大量复制、扩增,提取重组质粒。脂质体法将上述质粒转染至MDA-MB-231细胞中,G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。结果 DNA测序证实靶向Cbl-b基因的shRNA真核质粒表达载体构建正确,G418压力筛选出阳性克隆,Western blot检测发现MDA-MB-231/Cbl-b shRNA转染细胞株中Cbl-b蛋白表达水平明显下调。结论成功构建了基因沉默Cbl-b的MDA-MB-231细胞株,为进一步探讨其生物学功能奠定实验基础。

慢性丙型肝炎患者外周血Cbl-b、CD28和CTLA-4的表达及其临床意义

目的探讨慢性丙型肝炎患者外周血E3泛素连接酶Cbl-b及其相关信号分子CD28和CTLA-4的变化规律及其临床意义。方法选择25例慢性丙型肝炎患者和19例健康对照者,分离外周血单个核细胞,应用RT-PCR法检测Cbl-b、CD28和CTLA-4 mRNA相对表达水平;采用荧光定量RT-PCR检测HCV RNA;采用IN-NO-LiPA线性探针杂交法检测HCV基因分型。结果 Cbl-b、CD28和CTLA-4 mRNA在慢性丙型肝炎患者中表达升高,较健康对照分别升高1.38倍、1.90倍和2.68倍,其中CTLA4-4的升高表达具有统计学意义(P<0.05);在HCV1b基因型(n=11)中,Cbl-b和CTLA-4 mRNA水平较HCV 2a基因型(n=14)显著升高,分别升高1.74倍和2.81倍,差异具有统计学意义(P<0.05),而Cbl-b、CD28和CTLA-4水平与HCV RNA和ALT水平均无显著相关性。结论Cbl-b和CTLA-4可能参与了HCV感染所致的机体免疫耐受,在HCV感染慢性化中发挥重要作用。

多发性硬化患者外周血淋巴细胞Cbl-b的表达

目的分析多发性硬化(MS)患者外周血淋巴细胞Cbl-b基因和蛋白的表达变化并探讨其与MS发病的关系。方法采用RT-PCR和Western-blot方法检测31例MS患者(缓解期20例、急性复发期11例)和16名健康对照者外周血淋巴细胞Cbl-b mRNA和蛋白的表达。结果(1)MS患者外周血淋巴细胞Cbl-b mRNA和蛋白表达水平均较健康对照组明显下调;(2)急性复发期和缓解期MS患者外周血淋巴细胞Cbl-b mRNA表达水平差异无统计学意义;(3)急性复发期MS患者外周血淋巴细胞Cbl-b蛋白表达水平较缓解期患者明显下调。结论外周血淋巴细胞Cbl-b mRNA和蛋白表达下调可能参与了MS发病,且蛋白表达的进一步下调可能与MS急性复发相关。

cbl-b基因转导淋巴细胞对人前列腺癌细胞LNCaP杀伤作用的实验研究

目的观察将cbl-b基因导入淋巴细胞能否增强其对人前列腺癌细胞LNCaP的杀伤作用。方法 cbl-b基因淋巴细胞组采用脂质体法将cbl-b基因导入淋巴细胞,在蛋白印记法证实导入基因成功表达后,再用CCK-8法检测其对前列腺癌的杀伤作用,并与正常人外周血中分离淋巴细胞组比较。结果 12h、24h、48h三个时间段,转基因淋巴细胞的杀伤率在10:1、20:1、40:1三种浓度与单纯淋巴细胞比较,杀伤率明显高于单纯淋巴细胞组,差异均有统计学意义(F分别=74.25、1745.90、1637.45,P均<0.05)。其中转cbl-b基因淋巴细胞组在10:1和40:1浓度时24h杀伤率明显高于12h、48h,差异均有统计学意义(t分别=18.37、36.00、17.25、35.21,P均<0.05),但12h、48h的杀伤率比较,差异无统计学意义(t分别=1.26、2.51,P均>0.05)。在20:1时12h杀伤率明显低于24h、48h,差异均有统计学意义(t分别=16.25、19.12,P均<0.05),但24h、48h的杀伤率比较,差异无统计学意义(t=1.06,P>0.05)。且在40:1转染24h杀伤作用最强,可达(44.16±0.67)%。结论转导入cbl-b基因可增强淋巴细胞对人前列腺癌细胞LNCaP的杀伤作用,且杀伤率最强的比例与时间段为40:1、24h。

多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞c-Cbl和Cbl-b基因表达下调

目的 研究多发性骨髓瘤（MM）患者外周血单个核细胞（PBMC）中c-Cbl和Cbl-b基因表达情况。方法 收集23例MM患者和22例健康人PBMC, 利用SYBR-Green 实时荧光定量PCR方法检测MM患者和健康人PBMC中c-Cbl和Cbl-b基因相对表达水平; 利用RT-PCR方法分别扩增MM患者和健康人c-Cbl基因第7-10外显子, 并对PCR产物进行序列分析。结果MM组c-Cbl表达水平（中位数0.798%）, 与健康对照组c-Cbl表达水平（中位数2.443%）相比, 显著降低（P〈0.05）; Cbl-b表达水平（中位数0.714%）与健康对照组Cbl-b表达水平（中位数2.179%）比较, 也显著降低（P〈0.05﹚。在2例MM患者中检测到c-Cbl基因第7-10外显子存在2个大小不同的片段： 483 bp和148 bp, 分别为野生型c-Cbl和删除突变的c-Cbl基因, 所有PCR产物测序后均未发现突变。结论 MM患者PBMC中c-Cbl和Cbl-b基因表达下调。

Cbl-b调控T细胞的免疫耐受

免疫系统是一个复杂的有机整体,作为调控免疫耐受的分子之一,Cbl-b主要通过诱导T细胞无能与调控性T细胞来负调控免疫作用。本综述旨在阐述Cbl-b负调控免疫作用的具体机制,以及其自身的表达调控机制,以此找到一个新颖且重要的疾病治疗方向。

程序性死亡受体配体1和E3泛素连接酶Cbl-b在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)和E3泛素连接酶Cbl-b蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法选取2004年7月至2009年6月河南省肿瘤医院保存的NSCLC组织标本及癌旁组织标本各165例,制作组织切片。采用免疫组织化学方法检测NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b蛋白表达,并分析NSCLC组织中PD-L1与Cbl-b蛋白表达的关系,以及PD-L1、Cbl-b蛋白表达与NSCLC患者预后的关系。结果 NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率分别为72. 73%(120/165)、38. 79%(64/165),癌旁组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率均为7. 88%(13/165); NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率显著高于癌旁组织(χ~2=5. 292、3. 076,P <0. 05)。PD-L1蛋白表达与NSCLC患者的年龄、性别、肿瘤分期、肿瘤直径、阳性淋巴结数、病理类型及病理分级无关(P> 0. 05)。Cbl-b蛋白表达与NSCLC患者的性别及肿瘤病理类型有关(P <0. 05),与患者的年龄、肿瘤分期、肿瘤直径、阳性淋巴结数及病理分级无关(P> 0. 05)。NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b蛋白表达呈直线关系(R2=0. 075,P <0. 01),其模型为y=21. 464 93+0. 532 65x。PD-L1蛋白高表达和低表达NSCLC患者的中位总生存期(OS)分别为45. 0、52. 0个月,PD-L1蛋白高表达与低表达NSCLC患者的中位OS比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。75例鳞状细胞癌患者中,PD-L1蛋白高表达和低表达患者的中位OS分别为45. 0、81. 0个月,PD-L1蛋白高表达的鳞状细胞癌患者的中位OS显著短于低表达患者(P <0. 05)。90例腺癌患者中,PD-L1高表达和低表达患者的中位OS分别为50. 0、39. 0个月,PD-L1高表达与低表达腺癌患者的中位OS比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。Cbl-b蛋白高表达和低表达NSCLC患者的中位OS分别为39. 0、54. 5个月,Cbl-b蛋白高表达患者的中位OS显著短于低表达患者(P <0. 05)。结论 Cbl-b和PD-L1蛋白在NSCLC组织中均呈高表达。PD-L1与Cbl-b蛋白表达呈直线相关。Cbl-b蛋白表达情况与NSCLC患者的性别、病理类型及OS有关。PD-L1蛋白表达与鳞状细胞癌患者的生存期有相关性,但PD-L1蛋白表达与腺癌患者的生存期无相关性。

Cbl-b蛋白的功能及其与结构的关系

cb l-b是一个新基因,它编码的蛋白与信号转导蛋白相互作用,调节它们的作用或受它们的调节。近年来,有关Cbl蛋白的研究,无论结构和功能,还是两者之间的关系,都已引起了人们的关注。本文重点介绍Cbl-b蛋白的功能及其与结构的关系。

LysM Cre Cbl-b/c-Cbl小鼠模型的建立和免疫表型分析

目的:为深入研究Cbl-b/c-Cbl在巨噬细胞分化发育中的作用,拟建立LysM Cre Cbl-b/c-Cbl小鼠模型,并初步分析其免疫表型。方法:将LysMCre小鼠和Cbl-b^(-/-)及c-Cbl^(f/f)小鼠杂交得到LysM Cre^+Cbl-b^(-/-)/cCbl^(f/f)小鼠,从而在巨噬细胞中同时敲除Cbl-b和c-Cbl。并通过PCR和Western-blot鉴定模型建立的成功,通过HE、Giemsa及天狼星红染色和流式细胞仪分析LysM Cre^+Cbl-b^(-/-)/c-Cbl^(f/f)小鼠免疫表型。结果:通过PCR和Western-blot鉴定LysM Cre^+Cbl-b^(-/-)/c-Cbl^(f/f)模型建立成功,表型分析提示Cbl-b和c-Cbl在髓样来源细胞敲除后,导致DC、粒细胞和巨噬细胞比例增多,尤其是肺泡巨噬细胞在肺泡中大量侵润,其绝对数是WT小鼠的几百倍,且最终LysM Cre^+Cbl-b^(-/-)/c-Cbl^(f/f)小鼠因肺纤维化而死亡。结论:Cbl-b和c-Cbl在巨噬细胞的分化发育中发挥极其重要的作用,其同时在巨噬细胞中缺失,可以导致肺巨噬细胞的急剧增多,引起炎症和肺纤维化而导致小鼠死亡。