血液高RDW和高N-MID OC/β-CTX比值在老年女性椎体骨折中的诊断价值

目的 探讨血液红细胞分布宽度(RDW)及骨钙素N段中分子片段(N-MID OC)/Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)比值联合检测对老年女性骨质疏松椎体骨折(OPVF)的诊断价值。方法 纳入2021年1月—2021年12月我院≥60岁女性骨质疏松住院患者786例,分为无骨折组(A组,378例)和OPVF组(B组,388例)。N-MID OC、β-CTX、NMID-OC/β-CTX比值、红细胞计数(RBC)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白(Hb)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、平均血红蛋白量(MCH)、红细胞分布宽度(RDW-CV)、钙(Ca)、磷(P)及镁(Mg)。结果 与A组相比,B组Ca、P、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC含量降低,RDW-CV、N-MID OC/β-CTX含量增加,差异有统计学意义(均P<0.05)。OPVF与β-CTX、Ca、P呈负相关,与RDW-CV、N-MID OC/β-CTX呈正相关(均P<0.05)。骨折患者RDW与N-MID OC、β-CTX、Ca、P、Mg呈负相关(均P<0.05)。RDW、N-MID-OC/β-CTX为OPVF的风险因素(均P<0.05),OR分别为1.38、1.005。二者含量越高,椎体骨折风险越高,最高层是最低层的约3倍和2倍,OR为2.818,1.734。二者联合检测可提高对OPVF的诊断性能,其AUC敏感性、特异性、阳性预示值、阴性预示值分别为0.64、42.78%、82.01%、70.9%、58.3%。结论 血液高RDW和高N-MID OC/β-CTX比值与老年女性骨质疏松性椎体骨折明显相关,是其危险因素,可用于辅助诊断及预测其发生。

β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用

目的探讨β胶原特殊序列(β-crosslaps,β-CTX)、总1型胶原氨基端延长肽(t-P1NP)及N端中段骨钙素(N-MID-OT)在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用价值。方法回顾性分析2020年2月至2022年12月解放军总医院第六医学中心收治的102例绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)患者的临床资料,将其作为研究组,并根据是否发生骨折将其分为PMOP骨折组(39例)与PMOP未骨折组(63例),另选100名健康体检者作为对照组。记录所有研究对象的β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT水平并进行比较,用ROC曲线评价β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用价值。结果研究组的平均体重、体质量指数、股骨颈骨密度(bone mineral density,BMD)、左髋总和BMD及L 1~4总和BMD均明显低于对照组(P<0.05);而两组研究对象的平均年龄、平均身高及绝经年龄等比较差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组的β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT均明显高于对照组(t值依次为12.688、37.430、26.599,P<0.05)。β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测用于预测PMOP的AUC值为0.978,敏感度为98.04%,特异度为97.00%,表明β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT三指标联合检测用于预测PMOP的效能更高。PMOP骨折组的β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT均明显高于PMOP未骨折组(t值依次为6.078、16.363、12.227,P<0.05)。β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测用于评估PMOP骨折风险的AUC值为0.939,敏感度为94.87%,特异度为95.24%,表明β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测用于评估PMOP骨折风险的效能更高。结论PMOP患者β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT水平均明显升高,而PMOP骨折患者β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT水平升高更为明显,且β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测可显著提高对PMOP预测及骨折风险评估效能,值得借鉴。

基于药效团模型筛选CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶抑制剂

【目的】开发针对头孢噻肟-水解酶-14(CTX-M-14)型超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamase,ESBLs)的抑制剂,用以缓解细菌耐药带来的严重危害。【方法】使用DiscoveryStudio Visualizer(DS Visualizer)构建基于受体结构的药效团模型(structure-based pharmacophore,SBP)和基于配体共同特征的定性药效团模型(common feature pharmacophore generation,HIPHOP),并将验证后的模型作为查询条件对ZINC数据库进行以CTX-M-14蛋白为靶标的虚拟筛选,得到拟合分数良好的中药单体成分甘草酸(glycyrrhizic acid,GL),对其进行相关作用力分析、分子动力学模拟和结合自由能计算,分析甘草酸与CTX-M-14蛋白的结合模式、结合能力及稳定性;最后通过联合抑菌试验及酶动力学试验考察甘草酸的抗菌增敏活性、抑酶作用及抑酶方式。【结果】中药单体成分甘草酸主要与CTX-M-14蛋白活性中心多个氨基酸残基形成氢键和范德华作用力,两者的对接分数与结合自由能分别为-10 kcal/mol及-22.06 kcal/mol;甘草酸与头孢噻肟钠联用呈协同作用(FICI≤0.5);甘草酸可竞争性抑制β-内酰胺酶对底物抗生素的水解作用,对头孢噻肟钠的抑酶保护率可达58.53%,与克拉维酸接近(60.98%)。【结论】中药单体甘草酸可与CTX-M-14蛋白稳定结合,通过竞争性抑制β-内酰胺酶对底物抗生素的水解作用,提高多重耐药大肠杆菌E320和重组蛋白阳性菌BL-21对头孢噻肟钠的敏感性,实现抗生素的减量增效。

广东省腹泻仔猪大肠杆菌blaCTX-M-65与mcr-1基因共传播特征

【目的】调查分析广东省某生猪养殖场腹泻仔猪的大肠杆菌耐药情况以及同时携带blaCTX-M-65与mcr-1两种耐药基因的阳性大肠杆菌的分子特征与其共同传播特征,为耐药性监测及风险防控提供科学依据。【方法】从广东省肇庆市某生猪养殖场采集腹泻仔猪直肠棉拭子样品90份,并进行大肠杆菌分离鉴定;采用PCR方法检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与mcr-1基因,通过测序确定CTX-M亚型;采用琼脂二倍稀释法和微量肉汤稀释法测定分离菌对12种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC);使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)及多位点序列分型(MLST)分析菌株间的遗传背景;通过接合转移方法确定质粒水平转移的能力;使用复制子分型、S1-PFGE、Southern blotting方法检测质粒类型、耐药基因的定位及定位质粒的大小;通过三代测序及序列分析确定质粒的重组过程。【结果】共分离鉴定86株大肠杆菌,检测到44株携带CTX-M型ESBLs基因,其中blaCTX-M-55基因最流行(n=16,36.4%),其次是blaCTX-M-65(n=10,22.7%)、blaCTX-M-27(n=8,18.2%)、blaCTX-M-15(n=5,11.4%),还检测出blaCTX-M-79(n=2,4.5%)、blaCTX-M-14(n=2,4.5%)和blaCTX-M-24(n=1,2.3%)。10株blaCTX-M-65基因阳性菌有8株同时携带mcr-1基因。这8株大肠杆菌均表现为多药耐药,包括氨苄西林、阿莫西林、头孢噻呋、头孢喹肟、黏菌素等多种抗生素。8株菌共分为6种ST型、7个PFGE谱型。接合转移试验发现,有6株菌的blaCTX-M-65和mcr-1基因发生了共转移,且blaCTX-M-65与mcr-1基因均位于IncHI2型(253 kb)质粒上。其中1株菌在接合转移的过程中,其所携带的一个253 kb IncHI2质粒与一个69 kb IncFⅡ质粒发生融合,形成一个大小323 kb的融合质粒。对融合质粒进行三代测序解析,结果表明,在接合转移的过程中IS26介导了两个不同大小质粒的重组。【结论】IncHI2质粒是介导blaCTX-M-65和mcr-1基因共同传播的主要媒介,IS26通过与靶位点GTTTCACT的整合导致IncHI2质粒与IncFⅡ质粒融合。质粒重组扩大了大肠杆菌的耐药谱,加速了耐药基因的传播,促使多药耐药现象更严重,对公共卫生安全构成威胁,本研究为阐明多重耐药大肠杆菌的传播机制提供了参考依据。

新疆维吾尔自治区塔额垦区牛源大肠杆菌耐药性、CTX-M基因携带情况与毒力基因检测

[目的]了解新疆维吾尔自治区塔额垦区牛源大肠杆菌耐药性及CTX-M基因和毒力基因携带情况。[方法]从塔额垦区某牛场采集16份牛腹泻粪样,通过选择性培养、革兰染色镜检、16S rDNA PCR扩增及测序进行大肠杆菌分离鉴定。利用PCR法对牛源大肠杆菌分离株进行分子分型(系统发育群和脂多糖核心型)以及耐药基因、CTX-M基因亚型、毒力基因检测;分别使用K-B纸片法、CTX与TCL双纸片法进行药物敏感性试验和产ESBLs大肠杆菌鉴定;采用结晶紫染色法半定量检测菌株的生物被膜形成能力。[结果]根据菌落生长特征、革兰染色特性及16S rDNA测序结果,从16份牛腹泻粪样中分离鉴定出16株大肠杆菌,分离率为100%;系统发育群主要为B1群(14/16,87.50%),脂多糖核心型多为R1型(15/16,93.75%)。分离菌株对青霉素、利福平、复方新诺明表现出较强耐药性,耐药率分别为100%、68.75%、68.75%;对多黏菌素、替加环素、美罗培南敏感,耐药率均为0;有12株(75.00%)具有多重耐药表型;有11株(68.75%)产ESBLs;有15株(93.75%)可形成生物被膜。16株大肠杆菌中共检出17种耐药基因,CTX-M、ant(6′)、sul1等8种耐药基因的检出率为100%;有14株(87.50%)为CTX-M-1G基因亚型;共检出12种毒力基因,iroN、ompA、yijP等5种毒力基因的检出率为100%。[结论]新疆维吾尔自治区塔额垦区牛源大肠杆菌CTX-M基因检出率较高,携带多种耐药基因和毒力基因,耐药性较强,对该地区牛健康养殖存在潜在威胁,应加强该地区CTX-M型大肠杆菌的流行情况监控。

基于血清PINP和β-CTX水平分析唑来膦酸联合阿法骨化醇在绝经后骨质疏松症治疗中的价值

目的基于血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)和β-Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(β-CTX)水平分析唑来膦酸联合阿法骨化醇在绝经后骨质疏松症(PMOP)治疗中的价值。方法选取2023年7月~12月收治的500例PMOP患者作为研究对象,根据随机数字表法分为单一治疗组(使用唑来膦酸治疗)和联合治疗组(唑来膦酸联合阿法骨化醇治疗),每组250例。比较两组治疗效果,腰椎L_(1~4)、股骨颈及股骨转子骨密度(BMD)以及骨代谢指标[PINP、β-CTX、骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)]。结果联合治疗组治疗总有效率高于单一治疗组(98.00%vs.92.40%,P<0.05);治疗后,联合治疗组腰椎L_(1~4)、股骨颈及股骨粗转子BMD均较单一治疗组高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,联合治疗组血清PINP、β-CTX、BGP、ALP水平均低于单一治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);血清PINP、β-CTX、BGP水平与不同部位BMD均呈负相关性(P<0.05)。结论唑来膦酸联合阿法骨化醇治疗PMOP疗效确切,且血清PINP、β-CTX水平与BMD具有显著相关性,有望用于临床评估PMOP治疗效果。

健脾益气活血汤治疗糖尿病并骨质疏松的疗效及对25-(OH)D、β-CTX、Pref-1的影响

目的:探讨健脾益气活血汤治疗糖尿病(diabetes mellitus,DM)并骨质疏松(osteporosis,OP)的疗效及对25羟维生素D[25⁃(OH)D]、β-骨胶原交联(β-CTX)、前脂肪因子-1(Pref-1)的影响。方法:选择2021年6月至2022年6月在河北省沧州中西医结合医院治疗的DM合并OP患者206例,应用随机数表法将其分为对照组(常规治疗)及观察组(联合健脾益气活血汤)各103例,对比2组疗效、治疗前后中医证候积分、骨密度(BMD)、血清25-(OH)D、β-CTX、Pref-1水平及不良反应。结果:观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组腰背疼痛、无力/肌肉关节刺痛、口干舌燥积分、β-CTX、Pref-1水平降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。2组血清25-(OH)D水平,L 2~4、股骨颈、股骨大转子BMD均升高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05)。2组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾益气活血汤治疗DM并OP可有效改善患者症状和血清25-(OH)D、β-CTX、Pref-1水平,调节骨代谢,增加BMD,提高疗效。

鸡猪源大肠杆菌CTX-M型ESBLs的分子检测

为了解河南地区鸡猪源CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况,并进行基因型分析,通过表型确证试验检测产ESBLs大肠杆菌,分别用5组CTX-M型引物对其进行聚合酶链式反应扩增。表型确证试验检测结果显示,鸡、猪源大肠杆菌中产ESBLs菌株检出率分别为62.8%(59/94)和78.3%(36/46)。PCR扩增结果进一步显示,鸡源大肠杆菌中CTX-M型ESBLs阳性率为89.8%(53/59),其中CTX-M-2组型14株,CTX-M-9组型26株,CTX-M-2和CTX-M-9组型13株;猪源大肠杆菌CTX-M型ESBLs的阳性检出率为69.4%(25/36),其中,CTX-M-2组型7株,CTX-M-9组型17株,CTX-M-2和CTX-M-9组型1株。河南地区鸡、猪源大肠杆菌CTX-M型ESBLs的产生率较高,而以CTX-M-2组型和CTX-M-9组型为主。

CTX-M酶在北京协和医院临床分离大肠埃希菌中的流行

目的了解北京协和医院临床分离产ESBLs大肠埃希菌的耐药性及所产ESBLs的等电点和基因型特征。方法对2002年11-12月间北京协和医院临床分离的22株产ESBLS大肠埃希菌采用琼脂平皿对倍稀释法测9种抗菌药的MIC；接合试验研究ESBLs基因是否定位于质粒，并对接合于进行MIC测定和ESBLs确证；等电聚焦电泳检测各菌株及其接合子所产B内酰胺酶的等电点；以PCR通用引物对接合子扩增blaTEM，blaSHV，blaCTX-M基因后测序以确定基因亚型。结果产ESBLs的22株大肠埃希菌仅1株（4．5％）对头孢噻肟敏感，远低于对头孢他啶的敏感率（86．4％，19株），对氨曲南，头孢吡肟，头孢哌酮-舒巴坦，头孢米诺，亚胺培南的敏感率从50％～100％，对环丙沙星和加替沙星的敏感率均较低（9．1％和22．7％）。接合实验获得16株接合子，所有接合子均确证产ESBLs，接合子对上述7种β内酰胺类药物的药敏谱与供体菌相似，而对环丙沙星和加替沙星则全部敏感。接合子和供体菌所产的β内酰胺酶等电点主要为5．4，7．6和8．2，且这些酶均能被克拉维酸抑制。8株接合子扩增出blaTEM基因，将其中1株测序发现其与blaTEM1（GenBank accession no．AY293072）100％同源；3株接合子扩增出blaCTX-M-3组基因，将1株测序发现其与blaCTX-M-3（GenBank accession no．AY485338）100％同源；13株接合子扩增出blaCTX-M-14组基因，将1株测序发现其与blaCTX-M-14（GenBank accession no．AF462398）100％同源。16株接合子均未扩增出blaSHV基因和blaCTX-M-5组基因。结论我院2002年11-12月间产ESBLs的大肠埃希菌中有TEM及CTX-M酶的流行，这些酶特别是CTX—M酶的存在导致大肠埃希菌对大多数口内酰胺类药物耐药，对头孢噻肟高度耐药尤为明显。

1084例女性TRACP、CTX-1、BALP、BGP、钙磷代谢指标与BMD相关性

目的研究女性抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）、I型胶原交联C-末端肽（CTX-1）、骨碱性磷酸酶（BALP）、骨钙素（BGP）、25-羟维生素D3（25（OH）D3）、甲状旁腺素（PTH）、降钙素（CT）与股骨颈BMD的相关性。方法采用DiscoveuWA型骨密度仪检测股骨颈BMD，采用酶标免疫分析仪检测TRACP、CTX-1、BALP、BGP、25（OH）D3、PTH、CT。将1084例受试者检测结果按5岁为年龄段分组，应用SPSS13．0分析软件进行统计分析。结果25（OH）D3、PTH、CT在35-50岁年龄段各组间不存在差异；50岁以后25（OH）D，开始下降，与BMD呈正相关；CT降低出现在65-79岁年龄段，与BMD显著正相关。35-45岁年龄段TRACP、CTX-1与BMD呈负相关，而BALP、BGP与BMD呈正相关；50-60岁年龄段BALP、BGP明显升高，TRACP、CTX-1、BALP、BGP均与BMD呈负相关；65岁以后BALP、BGP开始下降，BALP、BGP与骨密度呈正相关，TRACP、CTX-1与骨密度呈负相关。结论TRACP、CTX-1、BALP、BGP、25（OH）D3、PTH、CT监测骨代谢水平为骨质疏松诊断、鉴别诊断提供了分子生物学依据。

CTX-M型超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的了解湖北地区产CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的流行基因型,为有效预防和控制该类感染提供理论依据。方法临床分离的无重复产ESBLs的肺炎克雷伯菌70株,采用NCCLS表型筛选和确证试验检测ESBLs,采用聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M基因型,并采用PCR-RFLP检测blaCTX-M基因分型,质粒接合试验探讨产CTX-M型ESBLs菌株的传播机制。结果70株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中,产CTX-M基因型的肺炎克雷伯菌有26株(37%),PCR-RFLP及DNA测序证实其均为CTX-M-1亚组,其中CTX-M-3型最常见,质粒接合试验证实CTX-M型ES-BLs介导的耐药可以水平转移。结论湖北地区存在着CTX-M基因的流行,且产CTX-M型ESBLs菌株的传播机制以质粒介导的为主,可以水平传播,应加强湖北地区产CTX-M型ESBLs菌株的分子流行病学检测。

西加毒素(CTX)的电子结构及构效关系研究

应用MNDO方法对CTX衍生物进行了量子化学计算 ,得到了它们的电子结构信息.根据构象分析研究了它们的空间结构.推测出它们的活性部位 ,探讨了与受体结合时的作用方式 ,讨论了结构 -活性关系 ,解释了活性差异的原因.研究结果表明该类化合物的D、E。

合肥市产超广谱β-内酰胺酶菌株CTX-M型耐药基因的初步分布

目的 了解 1999～ 2 0 0 0年合肥市多所医院临床分离的产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL s)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中 CTX- M-型耐药基因的初步分布情况。方法 根据 Gen Bank的基本序列 (CTX- M- 1、CTX- M- 9和CTX- M- 8)而设计 3对引物 ,分别用这些引物对表型确认试验证实产 ESBL s的细菌进行 PCR扩增。结果 98株产 ESBL s细菌中 ,5 6株产 CTX- M-型 β-内酰胺酶 ,其中 CTX- M- 1、CTX- M- 9和 CTX- M- 8来源的分别为 30、2 9和 0株。结论 合肥市有产 CTX- M-型

眼镜蛇毒细胞毒素CTX-d诱导NB4细胞凋亡及其机制研究

目的探讨眼镜蛇毒细胞毒素CTX-d诱导NB细胞凋亡的机制。方法MTT法测定CTX-d体外细胞毒作用,电镜、流式细胞仪观察CTX-d对NB4细胞的诱导凋亡作用,流式细胞仪检测NB4细胞线粒体膜电位的变化,Western-blotting测定胞浆细胞色素C及caspase-9、caspase-3的变化。结果CTX-d作用NB4细胞6、12h的IC50分别为1.8、1.35μg/mL;CTX-d引起NB4细胞线粒体肿胀、核固缩等形态学改变;诱导NB4细胞出现亚G1期的凋亡峰,且有时效及量效关系;CTX-d(1.0μg/mL)作用0.5h,NB4细胞线粒体膜电位已开始下降,同时在胞浆中检测到细胞色素C,显示细胞色素C已由线粒体释放入胞浆;caspase-9酶原的量在CTX-d(1.0μg/mL)作用1h时开始下降,而活化的caspase-3片断在0.5h即检测到,表明除了通过caspase-9,CTX-d还可能通过其他途径激活caspase-3。结论CTX-d可通过降低线粒体膜电位、细胞色素C释放,激活caspase-9和caspase-3,从而诱导NB4细胞凋亡,还可能通过其他途径激活caspase-3,参与凋亡作用。

姜黄素联合环磷酰胺对人淋巴瘤耐药细胞株HT/CTX的增殖抑制作用及其与FA/BRCA途径的关系

本研究探讨姜黄素联合环磷酰胺(CTX)对人淋巴瘤耐药细胞株HT/CTX100增殖抑制作用及其与FA/BRCA途径的关系,进一步探讨其作用机制。用MTT法检测细胞增殖抑制率;用Western blot检测FA/BRCA途径中的关键蛋白FANCD2;用流式细胞术测定细胞周期及细胞凋亡。结果表明:姜黄素可增强CTX对HT/CTX细胞的毒性,通过抑制FA/BRCA途径发挥作用,而姜黄素抑制FA/BRCA途径是通过抑制FANCD2单泛素化来实现的。姜黄素与CTX协同作用时,姜黄素介导的FA/BRCA途径受抑制,姜黄素对耐药细胞株HT/CTX诱导凋亡作用增强,而单药作用则无此效应,也不伴有FA/BRCA途径受抑制。结论:姜黄素通过抑制FA/BRCA途径中的FANCD2单泛素化而逆转细胞对化疗药物的耐药性,姜黄素与小剂量DNA交联剂类化疗药物合用是一种安全有效的逆转耐药治疗方案。

血清P1NP、β-CTX检测在老年乳腺癌骨转移诊断中的价值

目的探讨血清Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP)和β-I型胶原羧基端肽(β-CTX)在乳腺癌骨转移监测中的意义。方法 88例乳腺癌患者分为乳腺癌骨转移组48例,无骨转移组40例,健康体检者40例为正常对照组,用电化学发光免疫分析检测血清P1NP和β-CTX水平。结果乳腺癌骨转移组的血清P1NP明显低于无骨转移组及正常对照组(均P<0.05),而血清β-CTX明显高于无骨转移组及正常对照组(均P<0.05);乳腺癌骨转移患者P1NP与β-CTX呈负相关(r=-0.677,P<0.05)。结论血清P1NP和β-CTX对乳腺癌患者骨转移的早期诊断有一定的价值。

补肾活血中药干预对去卵巢膝骨关节炎大鼠E2及CTX-Ⅱ的影响

目的:研究补肾活血中药干预对去卵巢膝骨关节炎大鼠血清雌二醇(E2)、Ⅱ型胶原羧基端端肽(CTX-Ⅱ)水平的影响。方法:将30只健康雌性SD大鼠按体重均衡原则随机分为对照组、模型组、中药干预组,每组10只。模型组、中药干预组予以切除双侧卵巢、切断右膝交叉韧带,制造绝经后膝骨关节炎模型,中药干预组每天予以补肾活血中药组方的混悬液灌胃;对照组仅予以模拟切口处理。6周后,取大鼠右侧膝关节股骨髁部的软骨行病理检查,采集大鼠血清检测E2、CTX-Ⅱ的水平。结果:中药干预组股骨髁软骨Mankin评分低于模型组(t′=-7.0365,P<0.05);中药干预组血清E2水平高于模型组(t=2.8022,P<0.05);中药干预组血清CTX-Ⅱ水平明显低于模型组(t=5.9204.P<0.01)。结论:补肾活血中药干预可以引起血清雌激素水平的提高和血清CTX-Ⅱ水平的的降低,改善去卵巢膝骨关节炎大鼠软骨代谢,抑制软骨退变。

运用变性高效液相色谱快速检测CTX-M超广谱β内酰胺酶基因型

目的直用变性高效液相色谱(DHPLC)技术对确认产 ESBLs 的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株 CTX-M 型质粒酶进行基因分型,探讨其灵敏度和特异度,以建立快速检测 CTX-M 型 ESBLs 的新方法。方法采用 PCR 技术从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中扩增出 CTX-M 型质粒的编码序列,用 DHPLC 技术对扩增产物进行分析和 DNA 测序,确定其基因突变的类型,通过比对两者结果后确定其基因型。结果从34株产 ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中扩增出35份 CTX-M 型 ESBLs 编码序列(其中1株同时扩增到2份 CTX-M 型编码序列)。11份与标准菌株 CTX-M-3一致:4份与标准菌株 CTX-M-9一致;测序确定分别为 CTX-M-3型和 CTX-M-9型:20份表现为3种形态各异的异常洗脱峰,测序结果表明20份样本与其标准株对比均存在着基因突变,DHPLC 中异常峰一致的样本均为同一基因亚型。结论 DH-PLC 可用于 ESBLs 基因分型的检测,能快速检测 CTX-M 的基因型,具有准确性高、简便快捷、经济等特点,有很大的临床应用价值。

广州地区具有水解头孢他啶活性的CTX-M型ESBLs的调查

目的对广州地区具有水解头孢他啶活性的CTX-M型ESBLs进行调查,了解其种类、比例以及传播机制,为临床抗生素的使用提供指导。方法对广州地区多家医院2007年到2008年临床分离的非重复的确证产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌进行研究,PCR方法确定CTX-M型ESBLs的基因型,MIC检测菌株对抗菌药物的敏感性;接合实验了解CTX-M型的ESBLs编码基因(blaCTX-M)所在质粒的大小。结果检出携带blaCTX-M-15的菌株共86株(23.8%),其中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为39株(21.5%)和47株(26.1%);大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中各检出1株携带blaCTX-M-27的菌株,比率均为0.55%,未发现携带blaCTX-M-16的菌株。接合实验发现,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中携带blaCTX-M-15的质粒分别是65Kb和92Kb大小的可接合性质粒;肺炎克雷伯菌中携带blaCTX-M-27的质粒推测是大小为57Kb的可结合性质粒。结论广州地区具有水解头孢他啶活性的CTX-M型ESBLs的类型为CTX-M-15和CTX-M-27,且以CTX-M-15为主。耐药基因所在的质粒为可接合性质粒,能通过接合水平传播。鉴于CTX-M-15型ESBLs在临床菌株中检出率较高,治疗上应避免单独使用头孢他啶。

蚌埠地区产超广谱β-内酰胺酶菌株CTX-M型耐药基因的分布

目的了解蚌埠市部分医院临床分离产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中CTX-M型ESBLs基因分布情况。方法标本为蚌埠市3所医院2003年4月-2004年4月间,临床分离产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌147株;采用聚合酶链反应(PCR)扩增产CTX-M型ESBLs菌株基因;按Sanger双脱氧末端终止法,用自动测序仪对其进行测序以鉴定基因型。结果147株产ESBLs菌株中有92株携带CTX-M型ESBLs基因,其中CTX-M-14型52株、CTX-M-3型20株、CTX-M-15型20株。结论蚌埠市部分医院产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,主要为CTX-M-14型。