环氧合酶-2及其抑制剂对角膜新生血管作用的研究

目的观察大鼠角膜新生血管(CNV)形成过程中环氧合酶-2(COX-2)的表达,探讨COX-2抑制剂Celecoxib对CNV的作用。方法采用免疫组织化学方法、RT-PCR法检测碱烧伤后COX-2和VEGF蛋白、mRNA在角膜中的分布,比较实验组和对照组COX-2与VEGF蛋白和mRNA的表达量,计算二者的相关性。结果碱烧伤2d,CNV芽形成,4d出现成熟的新生血管腔。活化的COX-2、VEGF蛋白和mRNA的表达在碱烧伤24h开始增加,4d达峰,7d开始回落,14d仍有表达。COX-2主要表达于大鼠角膜损伤上皮及修复的上皮层、基质层中浸润的炎性细胞和新生血管内皮细胞,VEGF与COX-2的表达部位一致。实验Ⅱ组和Ⅲ组COX-2和VEGF蛋白、mRNA表达量与对照组的差异有统计学意义(P<0.05),实验Ⅰ组与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论COX-2在炎性CNV形成过程中表达上调,通过调控VEGF的表达而起重要作用。Celecoxib抑制COX-2的表达,抑制CNV形成。

塞来昔布联合5-Fu对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的探讨选择性环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,Cox-2)抑制剂-塞来昔布(celecoxib)联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对实验性人结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及作用机制。方法建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,模型建立后32只实验裸鼠随机分为四组,分别给予塞来昔布及5-Fu药物干预后观察各组皮下移植瘤体积、瘤重和裸鼠实验前后的体重变化,计算抑瘤率。电镜观察细胞凋亡形态,原位凋亡染色检测凋亡指数(AI),免疫组化及Western blot印迹法检测细胞色素C、caspase-3及caspase-9表达。结果塞来昔布干预组、5-Fu干预组和联合干预组肿瘤生长明显抑制,塞来昔布干预组、5-Fu干预组抑瘤率分别为27.81%和53.02%,联合干预组抑瘤率为78.37%(P<0.01)。干预组较对照组肿瘤细胞凋亡明显增加,干预组各组之间凋亡指数比较差异有统计学意义(P<0.01)。透射电镜下见干预组瘤细胞呈现明显凋亡形态改变,联合干预组凋亡表现尤为典型,对照组无明显凋亡形态改变。免疫组化及Westernblot印迹法显示干预组其细胞色素C、caspase-3及caspase-9的表达明显高于对照组,且干预组各组之间比较其表达差异也有统计学意义(P<0.05)。结论塞来昔布及5-Fu均具有明显的抗肿瘤作用,联合应用时具有协同作用,可显著抑制人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长,其作用机制可能与上调细胞色素C、caspase-3及caspase-9蛋白表达、激活细胞色素C依赖性凋亡信号通路有关。

塞来昔布对脑胶质瘤细胞放射增敏效应的研究

[目的]观察COX-2选择性抑制剂塞来昔布(Celecoxib)对三种脑胶质瘤细胞放射增敏作用。[方法]选择适当浓度的COX-2选择性抑制剂Celecoxib进行放射增敏实验,设置单纯放射(R)组和放射+药物(R+D)组,采用集落形成法分别检测Celecoxib对脑胶质瘤SHG-44细胞株,767细胞以及大鼠脑胶质瘤C6细胞株的放射增敏效应,并绘制细胞存活曲线。[结果]Celecoxib对3种胶质瘤细胞株均显示出放射增敏效应,R+D组与R组相比较,反映放射敏感性指标的SF2、D0.01、D0、Dq均出现下降。其中tSF2=8.315,P=0.014;tD0.01=9.28,P=0.011;tD0=3.985,P=0.058;tDq=3.348,P=0.075。[结论]Celecoxib在体外实验中可以提高脑胶质瘤的放射敏感性。Celecoxib有可能成为治疗胶质瘤的放射增敏剂。

塞来昔布通过ERK1/2信号通路对肝癌细胞株SMMC-7721增殖、凋亡的影响

目的:观察COX-2抑制剂塞来昔布对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖抑制和凋亡诱导作用,并探讨该作用与ERK1/2信号通路之间的关系。方法:用不同浓度的塞来昔布溶液(0、25、50、75和100μmol/L)处理对数生长期的肝癌SMMC-7721细胞,MTT比色法检测不同时间点各药物浓度组细胞增殖情况;流式细胞术分析不同浓度的塞来昔布溶液对SMMC-7721细胞凋亡的影响;RT-PCR检测COX-2、VEGF和ERK1/2mRNA表达的变化;Western blot检测COX-2、VEGF和ERK1/2蛋白表达的变化。结果:塞来昔布对SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用,该作用随着药物浓度的增加和作用时间的延长而增强;流式细胞术检测结果显示出明显的细胞凋亡,且凋亡率随着塞来昔布浓度的增高而升高;随着塞来昔布剂量的增加,COX-2、VEGF和ERK1/2mRNA及蛋白的表达水平逐渐降低。结论:塞来昔布可抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖、促使瘤细胞凋亡,且作用呈时间和剂量依赖性,其机制可能与下调ERK1/2信号通路及抑制新生血管生成有关。

塞来昔布及帕瑞昔布超前镇痛在全髋关节置换术中的应用

目的探讨塞来昔布及帕瑞昔布在全髋关节置换术中的超前镇痛效果。方法将69例行全髋关节置换术的患者随机分为超前镇痛组36例和传统镇痛组33例。超前镇痛组围手术期应用塞来昔布及帕瑞昔布,传统镇痛组术前不给予任何镇痛药物,术后2组患者出现剧烈疼痛时,辅助其他类镇痛药物治疗。分别记录2组患者术后第2、4、8、12、24、48小时VAS评分、辅助其他镇痛药物的例数及不良反应。结果超前镇痛组术后各时点VAS评分小于传统镇痛组,且术后镇痛药物辅用率为5.6%,低于传统镇痛组的30.3%,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组术后均无过敏反应、消化道出血以及心、脑血管等系统并发症发生。结论全髋关节置换围手术期应用塞来昔布及帕瑞昔布超前镇痛,无明显不良反应,临床镇痛效果良好。

塞来昔布对胆管癌细胞株QBC939 VEGF表达的影响

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对胆管癌细胞株QBC939血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法体外培养胆管癌细胞株QBC939，应用酶联免疫吸附试验（ELISA）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测塞来昔布与胆管癌细胞株QBC939VEGF表达间的时-效关系和量-效关系。结果塞来昔布在一定剂量（20-80μmol／L）和时间（12-48h）内显著抑制QBC939细胞VEGFmRNA的表达和培养上清液中VEGF的浓度，与单独培养液对照组比较，差别有统计学意义（P〈0．05）。结论选择性COX-2抑制剂塞来昔布可在一定时间和剂量范围抑制胆管癌细胞株QBC939VEGF的表达。

塞来昔布预防卡培他滨不良反应的临床对照研究

目的研究塞来昔布预防卡培他滨不良反应的疗效和安全性。方法 75例需要口服卡培他滨单药治疗的癌症患者随机分两组:对照组单纯口服卡培他滨,试验组口服卡培他滨期间口服塞来昔布200mg每日2次。观察其手足综合征及腹泻发生情况。结果 68例患者至少口服2个周期卡培他滨,其中对照组32例,试验组36例。全组手足综合征发生率为45.6%(31/68),试验组为36.1%(13/36),对照组为56.3%(18/32),差异接近统计学意义(P=0.096);腹泻发生率为17.6%(12/68),试验组为16.7%(6/36),对照组为18.8%(6/32),差异无统计学意义(P=0.822);两组之间其余毒性发生率亦相似(P>0.05)。结论塞来昔布对于卡培他滨引起的手足综合征有一定预防作用,未影响其他毒性反应的发生率。

选择性COX-2抑制剂Celecoxib诱导胶质瘤细胞凋亡作用机制初探

背景与目的:选择性COX-2抑制剂具有诱导多种肿瘤细胞凋亡的作用,但在胶质瘤方面研究还不多见,本研究目的是探讨选择性COX-2抑制剂塞来昔布(Celecoxib)诱导胶质瘤C6细胞凋亡,及其在诱导胶质瘤细胞凋亡中的作用机制。方法:应用PGE2检测、吖啶橙染色、流式细胞仪(FCM)检测不同浓度的Celecoxib对胶质瘤C6细胞作用,通过放免法检测不同浓度Celecoxib作用于胶质瘤C6细胞后PGE2的含量,通过吖啶橙染色从形态上观察治疗组细胞的形态学变化,流式细胞仪检测各组细胞发生凋亡的情况。结果:随Celecoxib浓度增加而PGE2合成减少(P>0.05),吖啶橙染色荧光染色对照组细胞核DNA为均匀黄色或黄绿色的荧光,治疗组(Celecoxib50μmol/L)凋亡细胞的细胞核或细胞质内可见致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片,Celecoxib浓度为12.5μmol/L和50μmol/L时,FCM法检测凋亡分别为5.83%和15.32%,Celecoxib对C6胶质瘤细胞增殖抑制作用具有浓度依赖性,细胞凋亡随浓度增加而增多。结论:Celecoxib具有诱导胶质瘤C6细胞凋亡的作用并呈剂量依赖性,随PGE2合成下降细胞凋亡增多,PGE2途径是Celecoxib诱导胶质瘤细胞凋亡机制之一,对胶质瘤的治疗有重要意义。

赛莱西布对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡影响

目的探讨选择性环氧合酶-2(cox-2)抑制剂赛莱西布(celecoxib)对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法用不同浓度的赛来西布处理HepG2细胞,分别应用四甲基偶氮噻唑蓝试验、DNA梯度电泳法、放射免疫法检测赛亚西布对HepG2细胞增殖和凋亡及其cox-2活性的影响;应用免疫印迹法和比色法检测赛莱西布对HepG2细胞胱氨酸蛋白酶3(clasepase-3)蛋白质的表达及活性的影响。结果12.5,25,50μmol/L的赛莱西布作用于HepG2细胞后,HepG2细胞增殖受抑制,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);赛莱西布干预组HepG2细胞DNA明显降解,可见细胞凋亡特征性梯状DNA条带;干预组HepG2细胞caspase3蛋白表达及活性均明显升高,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);赛莱西布明显抑制HepG2细胞cox-2活性,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论赛莱西布可通过cox-2通路和caspase3通路抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡。

Celecoxib抑制胃癌发生发展的实验研究

目的:研究胃癌组织与癌旁组织中的环氧化酶-2(COX-2)的表达,COX-2抑制剂Celecoxib对胃癌发展的影响。方法:采用SP免疫组织化学染色检测胃癌组织与癌旁组织中的COX-2表达;细胞计数法检测Celecoxib对胃癌细胞SGC7901和BGC823生长曲线的影响;MTT比色法检测Celecoxib对SGC7901细胞和BGC-823存活率的影响;ELISA法测定Celecoxib对胃癌细胞SGC7901细胞和BGC823分泌释放VEGF蛋白的影响。结果:胃癌组织与癌旁组织中的COX-2表达存在显著差异。Celecoxib对胃癌细胞SGC7901、BGC823均有抑制作用,表现出剂量依赖性和时间依赖性。Celecoxib对胃癌细胞SGC7901、BGC823分泌VEGF均有抑制作用,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,其VEGF分泌量也相应降低。结论:胃癌组织中的COX-2表达高于癌旁组织,Celecoxib可以抑制胃癌组织的发生发展。

塞来昔布对梗阻性肾病大鼠肾脏作用的实验观察

目的观察塞来昔布对单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化大鼠肾脏的保护作用。方法建立单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化大鼠模型,分为塞来昔布治疗组和模型组,设假手术组为对照组。第4周末检测各组大鼠血清肌酐及尿素氮水平,测定大鼠尿液血栓烷素B2浓度,并观察肾组织病理改变。结果塞来昔布治疗组的肌酐、尿素氮水平及尿液血栓烷素B2浓度与模型组比较,有显著性差异(P<0．01),肾间质纤维化程度明显减轻。结论塞来昔布对单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化大鼠肾脏具有保护作用。

塞来昔布联合长效兰瑞肽抑制人胃癌转移体内研究

目的对胃癌患者予以术前口服塞来昔布联合肌注长效兰瑞肽,探讨该方案是否有助于抑制胃癌转移。方法将2011年3月至2012年3月期间在自贡市第四人民医院对经组织学确诊的40例胃癌拟行手术患者,根据患者自己的选择,分为对照组和试验组。对照组20例,术前不使用塞来昔布及长效兰瑞肽,接受胃大部切除术或胃癌D2根治术;试验组20例,术前1周口服塞来昔布200 mg,qd 7 d,长效兰瑞肽40 mg,im,1次,接受胃大部切除术或胃癌D2根治术。通过检测术后肿瘤组织中E-Cad和MMP-2量的变化及病理组织学变化进行分析。结果对照组65%(13/20)的胃癌细胞E-Cad呈异常染色,试验组胃癌细胞E-Cad异常染色率为25%(5/20),两组比较差异具有统计学意义(P=0.025);对照组MMP-2阳性染色率为80%,试验组MMP-2阳性染色率为40%,试验组较对照组明显降低,其差异也具有统计学意义(P=0.022)。结论塞来昔布联合长效兰瑞肽方案可在改善E-Cad表达、降低MMP-2方面具有抑制胃癌转移的效果。

塞来昔布联合氨基葡萄糖对中重度膝骨关节炎疗效分析

目的比较塞来昔布、氨基葡萄糖、塞来昔布联合氨基葡萄糖对中重度膝骨关节炎的疗效。方法将210例中重度膝骨关节患者分为塞来昔布组、氨基葡萄糖组、塞来昔布联合氨基葡萄糖组(联合组),分别单用塞来昔布、单用氨基葡萄糖或联合2种药物治疗12周。比较3组治疗及停药随访期间的西安大略和麦克马斯特大学(WOMAC)骨关节炎指数及疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分。结果在治疗后4周,塞来昔布组的WOMAC骨关节炎指数低于氨基葡萄糖组(P<0.05),但在治疗后8周及停药后4、8、12周,2组的WOMAC骨关节炎指数比较差异均无统计学意义(P均>0.05);在治疗后4、8、12周及停药后4、8、12周,联合组的WOMAC评分均低于塞来昔布组及氨基葡萄糖组(P均<0.05)。治疗后4周,塞来昔布组的VAS评分低于氨基葡萄糖组(P<0.05),但在治疗后8周及停药后4、8、12周,2组的VAS评分比较差异均无统计学意义(P均>0.05);治疗后4、8、12周及停药后4、8、12周,联合组的VAS评分均低于塞来昔布组及氨基葡萄糖组(P均<0.05)。结论塞来昔布联合氨基葡萄糖较单用塞来昔布或氨基葡萄糖治疗中重度膝骨关节炎的效果更佳,单用塞来昔布比单用氨基葡萄糖起效快,但两者停药后的疗效无明显差异。

塞来昔布联合氨基葡萄糖治疗膝骨性关节炎的疗效观察

目的探讨塞来昔布联合氨基葡萄糖治疗膝骨性关节炎的疗效。方法选取门诊膝关节骨关节炎患者180例,随机分为塞来昔布组、氨基葡萄糖组以及塞来昔布与氨基葡萄糖联合组,各60例,单盲给药,塞来昔布200 mg,饭后服用,b id,10周;氨基葡萄糖250 mg,饭后服用,tid,共16周。应用平均W om ac关节炎指数评分和平均骨性关节炎严重程度指数来评定3组治疗前后临床症状改善情况以及关节软骨结构与功能的改变情况,并作统计学分析。结果经过12个月治疗观察,治疗后1个月、3个月中,联合组与塞来昔布组症状改善明显,以联合组最佳,氨基葡萄糖组症状改善缓慢,关节评分较前两组差(P<0.01);治疗后半年,联合组与氨基葡萄糖组评分持续下降,但以联合组为甚,两组与治疗前比较均差异有极显著性(P<0.01),且联合组优于氨基葡萄糖组(P<0.05)。而塞来昔布组变化不明显(P>0.05);关节磁共振成像(MR I)均显示联合组与氨基葡萄糖组治疗6个月后,软骨磨损出现明显好转与减少,且明显优于塞来昔布组(2χ=39.3,P<0.01);到12个月后,联合组的MR I的表现结果明显好于氨基葡萄糖组(2χ=5.88,P<0.01)。结论塞来昔布联合氨基葡萄糖对膝骨性关节炎有很好的疗效,既能早期控制症状、改善关节功能,又能长期维持疗效,还能保护关节软骨磨损和促进软骨的修复。

塞来昔布促进顺铂诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的作用

目的探讨塞来昔布促进顺铂诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的作用。方法将人骨肉瘤细胞分为塞来昔布组、顺铂组和联合组,分别加入不同浓度的塞来昔布、顺铂和塞来昔布+顺铂,采用MTT法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡比例;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染色观察细胞并计算凋亡率。结果塞来昔布单独作用于MG-63细胞后,细胞抑制率随药物浓度的升高而升高;联合组细胞抑制率均较顺铂组明显升高;FCM分析联合组细胞凋亡比例明显上升;AO/EB染色结果显示,联合组的细胞凋亡率明显高于塞来昔布组和顺铂组。结论塞来昔布和顺铂均可引起人骨肉瘤细胞的凋亡,两者联合使用可明显增强对人骨肉瘤细胞的凋亡作用。

推拿、熏洗联合六味地黄丸治疗老年骨性关节炎随机平行对照研究

[目的]观察推拿、熏洗联合六味地黄丸治疗老年骨性关节炎疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将96例住院患者按掷骰子法简单随机分为两组。对照组48例玻璃酸钠,25mg/次,1次/周,肌注;塞来昔布,0.2g/次,1次/d;膝关节短波治疗和蜡疗,1次/d。治疗组48例推拿:拿捏股四头肌,按揉髌骨,牵拉膝关节,30min/次,2次/d;中药熏洗(海桐皮25g,牛膝18g,透骨草25g,乳香18g,伸筋草25g,生草乌、生川乌各12g,没药22g),3L水浸泡30min,煎煮熏蒸关节,控制熏蒸温度;六味地黄丸,3g/次,3次/d。连续治疗7d为1疗程。观测临床症状、关节炎病灶、VAS评分、JOY评分、不良反应。治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组显效40例,有效6例,无效2例,总有效率95.83%。对照组显效32例,有效6例,无效10例,总有效率79.17%。治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。VAS、JOY评分两组均有改善(P<0.05),治疗组改善优于对照组(P<0.05)。[结论]推拿、熏洗联合六味地黄丸治疗老年骨性关节炎效果显著,值得推广。

复方青黛散治疗膝骨关节炎的临床观察

目的观察复方青黛散外用治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法将60例急性膝骨关节炎患者随机分为观察组(30例)和对照组(30例)。比较2组VAS评分、关节肿胀水平及血沉(ESR)、C-反应蛋白(C-RP)等改善情况。结果 2组患者观察期前后组内数据对比差异均有统计学意义(P<0.05),观察期结束后对比对照组与试验组VAS评分差异无显著性(P>0.05);关节肿胀水平差异有显著性(P<0.01);ESR、CRP差异有显著性(P<0.05)。结论复方青黛散治疗急性膝骨关节炎疗效显著,在改善肿胀症状,降低ESR及CRP方面优于消炎止痛膏,值得临床推广应用。

N-三甲基壳聚糖对塞来昔布脂质体体外透皮促进作用考察

目的对季铵化程度为60%的N-三甲基壳聚糖(TMC60)促进塞来昔布脂质体(CLXL)透皮吸收的作用进行体外研究。方法采用薄膜分散-高压均质法制备CLXL,并分别制成TMC60包衣和物理混合物;对TMC60包衣前后脂质体的形态、粒径、Zeta电位及包封率进行了比较;以氮酮为阳性对照,采用Franz扩散池法,对CLXL、TMC60包衣CLXL、TMC60与CLXL物理混合物穿透小鼠离体皮肤的累积量及速率进行考察。结果 TMC60包衣后,形态上呈现明显包衣层,粒径增大,Zeta电位由负转正,而包封率无明显变化;体外透皮试验结果表明,与CLXL相比,TMC60包衣CLXL、TMC60与CLXL物理混合物、氮酮与CLXL物理混合物的透皮渗透量及透皮速率均显著增加(P<0.05),且以TMC60与CLXL物理混合物促进作用较强,与氮酮CXCL物理混合物的促进作用差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TMC60可显著促进CLXL的体外透皮效果,且以TMC60与CLXL物理混合物的促进作用较好。

塞来昔布对不同程度骨关节炎患者TNF-α、IL-1β及PGE-2的影响

目的探讨塞来昔布对不同程度骨关节炎患者肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β)及前列腺素E2(PGE-2)的影响。方法选取自2014-03—2015-03诊治的骨关节炎124例,根据患者的影像学检查结果和临床表现分为轻度组、中度组和重度组。轻度组45例,中度组48例,重度组31例,所有患者口服塞来昔布。比较治疗前、治疗4周后和治疗8周后关节液中TNF-α、IL-1β、PGE-2含量,以及疼痛视觉模拟评分(VAS)。结果 3组治疗前关节液中TNF-α、IL-1β、PGE-2含量及VAS评分差异有统计学意义(P<0.05),且随着骨关节炎程度加重,各炎症因子含量、VAS评分逐渐升高。治疗4、8周后,所有患者关节液中TNF-α、IL-1β、PGE-2含量及VAS评分均下降,差异有统计学意义(P<0.05);且中度组下降程度最大,轻度组次之,重度组最小。结论塞来昔布可以有效抑制炎性因子TNF-α、IL-1β及PGE-2的生成,对抗炎症反应,缓解疼痛,对轻、中度骨关节炎患者效果更佳。

塞来昔布超前镇痛在全膝关节置换手术中的应用

目的2观察塞来昔布超前镇痛对骨科围手术期镇痛的疗效。方法：选择2009年1月～2010年1月在我科住院的全膝关节置换的手术患者132例，采用随机双盲对照的方法分成A、B两组。A组术前2d起给予塞来昔布200mgBid，同时术后第1～4天给予塞来昔布200mgBid＋止痛泵止痛治疗。B组给予止痛泵＋安慰荆止痛治疗。手术患者术中给予常规的全身麻醉或连续硬膜外麻醉。观察超前镇痛对患者疼痛VAS评分、消化道反应、出凝血检验的影响。结果：塞来昔布超前镇痛在手术当天及术后4d明显优于对照组，且不增加胃肠道反应及出血等不良反应的风险。结论：塞来昔布具有超前镇痛的作用，且疗效满意。