冲击波对糖尿病慢性创面微环境下HaCat细胞增殖及迁移的影响

背景体外冲击波疗法可促进糖尿病慢性创面愈合,其机制有待深入研究。目的观察不同剂量冲击波干预对糖尿病慢性创面微环境中HaCat细胞增殖和迁移能力的影响,尝试从细胞水平揭示体外冲击波疗法促进糖尿病慢性创面愈合的作用机制。方法以人表皮角质形成细胞(HaCat细胞)为研究对象,分为对照组、糖尿病慢性创面模型(chronic diabetic wound,CDW)组以及不同剂量冲击波(shock wave,SW)干预组(SW1组:0.05 mJ/mm^(2),500脉冲;SW2组:0.10 mJ/mm^(2),500脉冲;SW3组:0.10 mJ/mm^(2),1000脉冲),通过高糖低氧孵育条件建立糖尿病慢性创面细胞模型,采用倒置显微镜观察细胞形态学改变,CCK-8法检测细胞增殖能力,细胞划痕试验检测细胞迁移能力,观察不同能流密度和脉冲输出的冲击波对糖尿病慢性创面微环境中HaCat细胞增殖和迁移能力的影响。结果与对照组比较,冲击波干预后HaCat细胞形态未见明显改变。CCK-8实验显示,HaCat细胞增殖活性呈现“先增加、后下降”的趋势,其OD450值:Day6>Day4>Day8>Day2>Day1,Day2及其后各时点与Day1比较差异有统计学意义(P均<0.01)。各组HaCat细胞增殖活性:SW2组>SW1组>SW3组>对照组>CDW组(以Day6为例)(P均<0.05)。倒置相差显微镜观察显示,各组HaCat细胞划痕愈合率均随时间延长逐渐增加,划痕愈合率:SW2组>SW1组>SW3组>对照组>CDW组(P均<0.05)。结论离体条件下,冲击波可促进糖尿病慢性创面微环境中功能受损的HaCat细胞的增殖和迁移能力;0.10 mJ/mm^(2)、500脉冲的冲击波干预剂量对HaCat细胞的促增殖效应更为明显。

上调miRNA-100对胃癌SGC-7901细胞侵袭和转移的影响

目的探讨微小核糖核酸(miRNA)-100对人胃癌SGC-7901细胞侵袭、转移能力的影响。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,将细胞分为空白对照组、阴性对照组和miRNA-100转染组。应用脂质体法,miRNA-100转染组、阴性对照组分别用构建的miRNA模拟物、阴性对照转染SGC-7901细胞。采用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)法检测各组细胞中miRNA-100的表达水平,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Tranwell实验检测细胞的侵袭能力。结果 RT-PCR结果显示,miRNA-100转染组miRNA-100的表达量明显高于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05)。细胞划痕实验显示,与空白对照组及阴性对照组比较,24 h和48 h时miRNA-100组周边细胞迁移至中央划痕区的距离明显增大,差异有统计学意义(P均<0.01)。Transwell实验显示,与空白对照组和阴性对照组相比,转染miRNA-100后,穿越小室的SGC-7901细胞数目明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论转染miRNA-100可使SGC-7901细胞的迁移能力明显降低、细胞的侵袭能力被抑制,上调miRNA-100能抑制人胃癌SGC-7901细胞的侵袭、转移能力。