复方阿莫西林乳房注入剂无菌检查方法的优化

将阿莫西林乳房注入剂无菌检查方法由直接接种法优化为薄膜过滤法。采用肉豆蔻酸异丙酯将样品破乳,与pH 6.0磷酸盐缓冲液混合进行萃取,取萃取后的水相薄膜过滤,采用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液进行冲洗,冲洗完毕加入硫乙醇酸盐液体培养基和胰酪大豆胨液体培养基,定量加入青霉素酶破坏残余的阿莫西林,按照规定条件培养。该方法与直接接种法相比,操作简单,可靠性增强,结果判断准确性提高。

八角无性系对炭疽病抗性的快速测定

[目的]建立一种操作简便、准确可靠的八角无性系炭疽病抗性鉴定方法,为其选育及应用提供理论基础。[方法]采用离体叶片接种法和苗期叶片接种法测定23个八角无性系对炭疽病的抗性水平。[结果]23个八角无性系中,有22个无性系采用2种接种法测定的结果一致,一致性高达95.65%;其中,福进14号和黑叶1号为抗病无性系,福进4号、福进5号和福进6号等9个无性系为中抗无性系,福进2号、福进3号和福进7号等6个无性系为中感无性系,福进8号和福进16号为感病无性系,福进1号、福进11号和福进12号为高感无性系。[结论]2种接种方法均可反应八角无性系抗病性的差异。离体叶片接种法具有操作方便、发病速度快、不伤害植株和耗时短等优点,缺点是鉴定结果可能与实际抗病表现不一致,可以作为八角品系对炭疽病抗性鉴定的重要辅助手段;苗期接种法鉴定结果较为可靠,但缺点是接种后植株落叶严重且难以恢复,需要合适的温、湿度等环境条件。

优选本土Hanseniaspora uvarum在干红葡萄酒酿造中的中试应用研究

葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)BF345是一株具有高产β-葡萄糖苷酶活性且能赋予葡萄酒浓郁果香的本土酵母菌株,可作为葡萄酒酿造过程的增香剂。该试验以BF345制备的活性干粉为发酵菌剂,旨在探讨工业化规模下对干红葡萄酒品质的影响。试验以赤霞珠葡萄为原料,在2 t发酵规模下,将BF345菌剂与酿酒酵母菌剂(FX10)间隔36 h,以顺序接种方式进行中试发酵,并以FX10单独接种发酵作为对照。结果表明,两种方式酿造的葡萄酒其残糖、酒精度、总酸和挥发酸均符合GB 15037—2006《葡萄酒、果酒通用分析方法》对干红葡萄酒的要求。与对照相比,H.uvarum BF345处理组酒精发酵结束时和陈酿5个月时的酒样比对照酒样总花色苷含量分别降低42.75%、39.14%,明度L^(*)分别升高88.08%、103.03%,色度C_(ab)^(*)分别提高29.29%、36.38%。H.uvarum BF345参与发酵能明显提升乙酸异戊酯、乙酸苯乙酯、苯乙醇、α-萜品醇、橙花醇和反式橙花醇等香气化合物含量,使葡萄酒中具有浓郁的果香和花香。此外,感官评价表明,使用H.uvarum BF345菌株与S.cerevisiae顺序接种发酵,可以改善葡萄酒的感官特性。综上,在工业化生产中,使用H.uvarum BF345菌株顺序接种在提升葡萄酒香气和改善品质方面具有较好的应用潜力。

大豆根瘤菌剂在辽宁大豆上的应用效果

为验证根瘤菌剂减肥增效技术应用效果,在灯塔和开原2个试验点开展大豆田间对比试验,结果表明:1)大豆施用根瘤菌能促进生长,缩短生育期,提高大豆单株荚数、单株粒数、百粒质量;2)处理2常规施肥基础上施用大豆根瘤菌、处理3减施20%氮肥基础上施用大豆根瘤菌,能促进大豆根瘤形成,提高根瘤菌数,特别是在花荚期,大豆根瘤数目明显增多,增产效果明显。

不同pH值下接种根瘤菌对紫花苜蓿产量和品质的影响(简报)

采用正交试验法研究了2个苜蓿品种在不同环境pH值(pH值4.8,5.2,5.6)下接种6株苜蓿根瘤菌株的效果。结果显示,pH值和接种菌株对苜蓿整株鲜重、有效根瘤数、固氮酶活性和全氮含量的影响均较显著。pH值从5.6降低到4.8,苜蓿整株鲜重、固氮酶活性、全氮含量平均降低约66.64%,39.20%,25.84%,有效根瘤数平均减少约8个。接种菌株4(91512)对整株鲜重(0.517 1 g)和有效根瘤数(19.888 9个)影响最大,菌株5(91522)对整株鲜重(0.554 4 g)、固氮酶活性(C2H416.809 3μg/g.h)和全氮含量(3.307 0%)影响最大。植株品种对有效根瘤数和固氮酶活性的影响均不显著,但整株鲜重和全氮含量均以苜蓿“露”的效果优于保定苜蓿。上述结果说明,在酸性环境中,环境pH值是影响苜蓿产量和品质的主要因子,接种高效耐酸苜蓿根瘤菌、选择优良的苜蓿植株品种可以在一定程度上降低环境pH值对苜蓿生长的负效应。

两个桉树无性系接种固氮菌造林试验效果初探

运用随机区组设计试验方法,连续观察育苗期和造林初期林木的生长情况,探讨了两个桉树无性系(巨尾桉无性系广林9号、尾巨桉无性系DH32-29以下简称无性系广9、无性系29)接种固氮菌的效应,结果表明:两种桉树无性系接种固氮菌增长效果显著。苗期试验,无性系广9及29接种后,地径分别比对照增长7.72%、20.18%,苗高增长量分别达5.02%、16.40%;造林7月龄时,接种固氮菌的的广9无性系及29无性系的地径生长量相对于对照组增长分别达35.93%、56.20%,树高增长量分别达35.74%、72.22%。统计分析结果表明:广9及29无性系接种固氮菌增长量均达显著水平,增长效果明显;其中以29无性系接种固氮菌效果较优。此外,接种固氮菌的林木还表现出一定的环境抗逆性,在遭受桉树枝瘿姬小蜂严重危害后能较快恢复生长。

在我国新发现的一种牛的泰勒虫（Theileria）未定种

对分离自我国西北某地自然感染牛体的一株泰勒虫（Ｔｈｅｉｌｅｒｉａ）未定种，进行了接种试验、形态学观察和部分传播试验。结果表明，该种可在除脾牛体内大量繁殖，寄生物血症达５２．６９％。虫体形态具多形性：有梨子形、圆环形、椭圆形、杆状、三叶形、边虫样、十字架形，还有许多难以形容的不规则形虫体；在同一红细胞内不同数目的边虫样虫体可发育变大，生成的原生质伸延，而后互相连接或交融，重新构成各种不同形态的虫体；有些虫体具有出芽生殖的特性。虫体形态以梨子形和圆环形为主，占所见虫体总数的５１．５％。不能通过长角血蜱和残缘璃眼蜱传播，其病原性、媒介蜱、传播方式、宿主特异性、发育史等尚不清楚。

一种测定杀菌剂对灰霉病菌(Botrytis cinerea)毒力方法的改进

为探索一种灵敏度高、准确性高的筛选灰霉病防治药剂的试验方法,笔者通过在灰霉病菌(Botrytis cinerea)分生孢子悬浮液中加入1%酵母浸膏、2.5%葡萄糖和10%胡萝卜汁,接种离体黄瓜子叶,病叶率达100%,发病均匀度达98%以上,确立了一种重复性好、操作简便的测定杀菌剂对灰霉病菌毒力的新方法--黄瓜子叶喷雾法。以该方法、菌丝生长速率法和孢子萌发法分别测定比较了戊唑醇、代森锰锌和异菌脲对灰霉病菌的毒力,发现药剂浓度的对数值与其抑制率的几率值之间有很高的相关性,相关系数均大于0.95。该方法可用于灰霉病菌抗药性监测和杀菌剂敏感性测定。

稻曲病菌田间接种方法研究

根据水稻不同生长期的特征,在水稻箭叶与倒二叶叶舌齐平时套袋处理。用正交试验对影响人工接种稻曲病发病率的条件进行优化以获得最佳接种时期、接种病原菌体和接种方法。试验表明,在水稻破口前4 d注射接种菌丝-分生孢子的混合菌体为最佳组合方法,此时病粒率最高,达13.75%;始穗期和齐穗期发病率均为0。为稻曲病的侵染时期、侵染路径研究提供应用基础。

生化需氧量(BOD)测定方法进展

生化需氧量(BOD)是水质监测中最重要的指标之一。分析论述了BOD的传统测定方法、快速测定方法及在线分析检测仪器的发展,论述了各类方法的工作原理及各自的适用范围和局限性。

新杀菌剂对番茄灰霉病菌的室内毒力及田间防效

室内采用菌丝生长速率法、孢子萌发法和黄瓜子叶法测定了咯菌腈、抑霉唑、福美双、吡唑醚菌酯和嘧霉胺对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)的抑制作用。结果表明,菌丝生长速率法和孢子萌发法的测定均以咯菌腈毒力最高,EC50分别为0.005 2μg/mL和0.087 6μg/mL;黄瓜子叶法测定以抑霉唑毒力最高,其EC50为0.675 3μg/mL。田间药效试验结果表明:50%咯菌腈可湿性粉剂90 g/hm2对番茄灰霉病的田间防效达到90%以上,显著高于对照药剂50%啶酰菌胺水分散粒剂300 g/hm2和40%嘧霉胺悬浮剂480 g/hm2的防效。

接菌发酵泡菜品质分析

乳酸菌菌株Mao24.1,Mao5.1和Tang3.2分离自传统发酵蔬菜中,具有强降解亚硝酸盐的作用,分别接种该3株菌发酵制作泡菜,与自然发酵泡菜比较分析乳酸菌数量、乳酸含量、pH、亚硝酸盐和感官评价。结果表明,接种发酵泡菜1d时乳酸菌数量最多,分别为5.5×106,1.4×107,2.8×107 CFU/mL;接入Mao5.1和Tang3.2的发酵泡菜在发酵2d时乳酸含量分别为0.41%和0.53%,pH为3.23和3.22;接菌发酵的泡菜亚硝酸盐含量一直在0.40μg/mL以下;Mao5.1和Tang3.2发酵泡菜产品色泽和脆度好,Mao24.1发酵泡菜产品香气浓郁,各指标均优于自然发酵泡菜。拮抗试验结果表明该3株菌间无拮抗作用可共生发酵泡菜。

中药注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

为了研究中药与西药奥司他韦(达菲)抗鸡新城疫病毒效果的差异,用珍珠草、华荠苧2味中药制成注射液,采用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,检测中药与西药注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。结果表明,中药注射液对鸡胚无毒性作用,并且从鸡胚死亡数、活胚数和HA滴度等方面比较,中药与西药抗病毒效果无差异。表明二者抗病毒效果相似,均能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中增殖。

杨树人工接虫方法的研究

１９９５～１９９６年，对美洲黑杨树上套笼接虫、室内离体接虫和网室接虫三种人工接光肩星天牛成虫的方法进行了研究，利用天牛刻槽数对这三种方法进行了比较和评价。结果表明，天牛刻槽产卵与杨树的抗虫性无关，可用来进行人工接虫方法的比较，孵化幼虫数和越冬后存活幼虫数是评价杨树抗虫性大小的标准。树上套笼接虫不受树木的胸径大小影响，成本较低，能够早期鉴定林木的抗虫性，是一套经济、有效、科学的杨树人工接虫方法。

豆科树种根瘤菌与四种豆科植物的接种试验

从５１种豆科树种（含羞草亚科５属，蝶形花亚科１８属）根瘤中分离获得的６６个菌株与４种豆科植物（刺槐、合欢、大豆、豌豆）进行接种试验，幼苗经５０ｄ培养，刺槐、合欢、大豆、豌豆的结瘤率分别为１００％、８７．９％，６９．７％、２５．８％。其中有１２个菌株可同时在这４种豆科植物上结瘤，２９个菌株可同时在刺槐、合欢和大豆上结瘤，４个可同时在刺槐、合欢和豌豆上结瘤，说明豆科树种根瘤菌具有较广泛的共生寄主范围。各菌株与不同豆科植物的亲合力、结瘤特性和固氮能力有较明显差异。观察还进一步证实根瘤的形状和颜色是由寄主植物决定的。

浙江省板栗疫病调查研究

数年的广泛调查结果表明 ,板栗疫病在浙江发生普遍 ,但危害轻度的地方多 ,严重的地方少。危害稍重和严重的地方 ,多半是由于管理差 ,其他病虫弱枝多 ,特别是板栗吉丁虫危害重等原因诱发的。接种观察的结果是无伤接菌的发病率为 0 ,轻伤接种 (削皮接 )的发病率为 2 0 %,重伤接种 (撬皮接 )的发病率 1 0 0 %,1a之后 ,发病株死亡率为 33%和 80 %,表明栗疫菌对无伤或轻伤的板栗枝干难以侵染 ,对有较重伤口的板栗枝干则能造成较大危害。在浙江杭州地区 ,板栗疫病的过冬病斑 ,2月下旬即开始扩展 ,4～ 6月扩展较快 ,7月以后扩展缓慢。表 2参

番茄细菌性溃疡病苗期接种新方法的研究

在剪叶、浸根和针刺等细菌病害传统接种方法基础上设计了打顶接种新方法;以番茄细菌性溃疡病菌中国菌株和美国菌株借助打顶法接种佳粉10、合作908和华南红宝石3个国内主栽番茄品种2～3片真叶期幼苗,在昼夜最低、最高温度15～18℃、32～35℃和相对湿度为30%～60%的温室条件下,打顶法接种番茄幼苗后溃疡病发病率为87.5%～100.0%,病情指数随接种菌悬液浓度提高而增大,达到23.96～82.29,3个供试品种之间表现稳定一致;剪叶、浸根和针刺接种方法的发病率普遍在40%以下,病情指数在20以下,3个供试品种之间未表现明显差异;进一步研究显示,使用选择性培养基mSCM能够从打顶法接种后的发病植株上获得培养性状与原接种体一致的分离物,专化性免疫凝聚试剂盒检测到特定的测试线,PCR扩增到614 bp的特异性条带,证实该分离物为番茄细菌性溃疡病菌,发病植株为接种体侵染所致.该研究结果表明,打顶接种方法比剪叶法、针刺法和浸根法更适合用于番茄溃疡病菌的致病性测定和评价不同番茄品种苗期的抗病性,具有应用价值.

碱性成纤维细胞生长因子凝胶的无菌检查

目的建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)凝胶剂的无菌检查方法。方法依据《中国药典》2010年版三部要求,采用直接接种法进行bFGF凝胶剂无菌检查并进行方法学验证。结果与结论通过方法学验证说明建立的无菌检查法适用于bFGF凝胶剂的无菌检查。

我国绿豆根瘤菌多样性的研究进展

生物固氮是全球长期倡导的一项应用技术,根瘤菌与绿豆植株形成的共生固氮体系,对改善土壤肥力、减少化肥污染,增加生物有效氮源,提高产量和品质等方面发挥着重要作用。针对我国绿豆根瘤菌的多样性、研究技术手段、生物地理分布、接种技术等方面的研究进展进行综述,同时对该研究方向提出了自己的认识和观点,旨在增加人们对绿豆根瘤菌的了解,拓展对绿豆根瘤菌研究与应用的视野。

绿盲蝽对不同生长期棉花的刺吸危害特性

【目的】近年绿盲蝽Apolygus lucorum （Meyer-Dur）对棉花的危害成为农业中热议的话题和重点研究的课题。为更加深入了解此种害虫对棉花各组织的危害特性及量化危害，为早期预测预报提供依据，我们研究了绿盲蝽对棉花不同生长阶段（各组织）早期危害表征与后期成铃情况的关系。【方法】通过大田接虫法研究了绿盲蝽对苗期、蕾期、花期和铃期棉花植株的危害特性。【结果】绿盲蝽危害24h会造成棉花子叶期和2叶期产生无头苗，2叶期后受绿盲蝽危害不会形成无头苗。建立了无头苗率和生长点被害级别的关系模型y=0．1906x-0．0439（1≤x≤5）和棉花苗期（不同叶期）被害10d后的叶片被害指数与刺吸点数和生长点被害级别回归模型：4叶期：y=0．532＋0．202x1＋0．005x2；6叶期：y=-0．063＋0．339x1＋0．002x2；8叶期：y=-0．150＋0．087x1＋0．001x2（0≤x1≤5，1≤x2≤5）。绿盲蝽对蕾和花的刺吸危害没有对后期棉铃的脱落率和大小产生显著影响。10mm和15mm直径棉铃被害后的校正脱落率分别为55．0％和26．60％，而直径大于15mm的棉铃校正脱落率均为0；绿盲蝽的刺吸危害对棉铃的成铃大小无显著影响；建立了幼铃（10mm、10-15mm直径棉铃）刺吸点数和脱落率的回归模型[10mm：y=0．1857x-0．081；10—15mm：y=0．0522x-0．0068（1≤x≤5）]。【结论】结果表明，幼苗阶段，棉花的子叶期和2叶期是受绿盲蝽危害的敏感时期；成株阶段，棉花嫩铃期是受绿盲蝽危害的敏感时期；建立的绿盲蝽刺吸危害的回归模型可用于绿盲蝽危害损失短期预测。因此，应在棉花受害敏感时期对绿盲蝽重点防治，提高防治效率。