CellSearch系统检测循环肿瘤细胞及其分子标记的研究进展

从肿瘤原发部位脱落并进入血液循环系统的细胞称为循环肿瘤细胞(CTCs),该细胞被认为是导致肿瘤远处转移发生的必要前提,其精确计数以及分子标记对于肿瘤患者的预后判断、疗效评价以及个体化治疗均有重要的指导作用。CellSearch系统是目前唯一通过美国FDA认证的CTCs检测技术,较少受到人为影响因素干扰,能够实现CTCs的半自动化检测并且具有较高的准确性和可重复性。本文拟综述CellSearch系统及其用于CTCs检测和分子标记方面的研究进展。

循环肿瘤细胞在肝细胞癌中的临床应用研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是常见的消化系统恶性肿瘤之一,具有起病隐匿、恶性程度高、临床预后差的特点。对HCC的早期诊断及准确评估可以有效指导临床实施针对性的干预措施,从而最大限度地改善患者的临床总体预后。循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)检测属于新型液体活检技术的重要组成,其检测方法简便,结果准确可靠,在一定程度上可以替代活组织检查作为HCC诊断的指标。同时,通过CTC检测在HCC患者临床预后评估,尤其是手术患者术后复发评估方面也显示出了重要的应用价值。随着CTC检测技术的不断发展,其用于HCC临床诊治方面的价值也将得到进一步的拓展,从而使更多的HCC患者从中获益。

CellSearch系统检测胃癌患者循环肿瘤细胞及临床意义

循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells,CTC）是指在肿瘤患者外周血中检测到来源于实体肿瘤、逃离宿主免疫杀伤后存活的异质性肿瘤细胞。19世纪许多学者发现,肿瘤细胞能通过血流传播到远处器官[1]。1869年,Cristofanilli等[2]在恶性肿瘤患者外周血中发现了与原发灶肿瘤性质相似的细胞,首次提出循环肿瘤细胞的概念。

基于CELLSEARCH^(TM)系统的乳腺癌循环肿瘤细胞临床研究概览

乳腺癌是女性人群常见的恶性肿瘤,检测循环肿瘤细胞(CTCs)在乳腺癌患者中的临床价值已成为近年的研究热点之一。当前CTCs的检测方法种类繁多,但方法学差异带来的异质性问题却制约了研究数据的对比与分析。较早上市的CELLSEARCHTM系统仍是目前检测CTCs的"金标准"方法,多数CTCs相关临床研究正是基于这一检测方法。因此,本文仅对基于CELLSEARCHTM系统的乳腺癌CTCs临床研究进行复习、分类与综述,以获得具有可比性的乳腺癌CTCs临床研究概览。

基于CellSearch系统检测CTC预测胃癌或食管胃结合部腺癌患者预后价值的Meta分析

目的系统分析基于CellSearch系统检测的循环肿瘤细胞(CTC)预测胃癌或食管胃结合部腺癌患者预后的价值。方法利用计算机检索外文数据库(如PubMed、OVID、Web of Science、Embase、Cochrane Library)、中文数据库(中国生物医学文献数据库、中国知网、维普数据库、万方数据库),收集通过CellSearch系统检测的CTC预测胃癌或食管胃结合部腺癌患者预后相关文献。检索时间为自建库至2018年10月。根据纳入标准和排除标准筛选文献并提取相应资料,采用纽卡斯尔-渥太华量表评分系统评估文献质量,采用Stata12.0统计软件对患者无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)进行Meta分析。结果共纳入来自5个不同国家的8篇英文文献(9组独立研究数据),共821例Ⅰ~Ⅳ期胃癌和食管胃结合部腺癌患者。Meta分析结果显示,外周血CTC阳性患者OS低于CTC阴性患者(HR=2.08,95%CI:1.73~2.51,P<0.01);外周血CTC阳性患者PFS低于CTC阴性患者(HR=2.05,95%CI:1.33~3.15,P<0.01)。亚组分析显示,CTC阳性对患者OS的影响仅与文献质量有关(P<0.01),而与文献国别、发表年份、采样时间、CTC阳性截断值和CTC阳性均无关(P均>0.05);CTC阳性对患者PFS的影响与文献国别、发表年份、文献质量有关(P均<0.05),而与采样时间、CTC阳性截断值和CTC阳性无关(P均>0.05)。敏感性分析显示,任意剔除一个研究均不会影响OS、PFS的最终合并结果。Meta回归分析显示,文献国家、发表年份、CTC阳性截断值和文献质量均不是各研究间异质性的来源(P均>0.05);进一步采用加布雷斯图法进行分析显示,各研究间患者PFS的异质性来源于Uenosono等研究的训练集组数据,剔除这组数据后,并未明显影响最终研究结果,但各研究间的异质性却明显降低。Egger's检验结果显示,纳入研究患者的OS、PFS大体呈对称性均匀分布。结论基于CellSearch系统检测的CTC对胃癌或食管胃结合部腺癌患者预后评估具有重要价值,无论是基线还是治疗过程中检出CTC阳性均预示患者预后不良。

qRT-PCR平台和CellSearch系统检测肝细胞肝癌患者循环肿瘤细胞性能比较

目的探讨CellSearch系统与单标志物[上皮细胞黏附分子(EpCAM)]实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)平台、多标志物[EpCAM、CD133、CD90、细胞角蛋白(CK19)]qRT-PCR平台检测肝细胞肝癌(HCC)患者外周血循环肿瘤细胞(CTC)的阳性率与相关性。方法 分别采用CellSearch系统、单标志物qRT-PCR平台和多标志物qRT-PCR平台检测32例HCC患者外周血CTC并计算阳性率。采用Spearman相关分析评估各方法间的相关性。结果 单标志物(EpCAM)qRT-PCR平台检测CTC的阳性率为46.9%(15/32),多标志物(EpCAM、CD133、CD90、CK19)qRT-PCR平台检测CTC的阳性率为65.6%(21/32);CellSearch系统检测CTC的阳性率为28.1%(9/32)。单标志物qRT-PCR平台与CellSearch系统的阳性符合率为75.0%(24/32,P=0.002),多标志物qRT-PCR平台与CellSearch系统的阳性符合率为56.3%(18/32,P=0.034),单标志物qRT-PCR平台与多标志物qRT-PCR平台的阳性符合率为81.3%(26/32,P=0.000)。采用多标志物qRT-PCR平台检测CTC时,不同患者4项标志物所占百分比各不相同,有明显异质性。结论多标志物qRT-PCR平台能明显提高HCC患者外周血CTC的阳性检出率,可更直观地反映肿瘤的异质性,适用于多样化的检测需求。

CellSearch系统检测循环肿瘤细胞预测转移性结直肠癌预后价值的meta分析

目的采用meta分析方法研究CellSearch系统检测循环肿瘤细胞(CTC)与转移性结直肠癌(mCRC)预后之间的关系。方法检索PubMed、Embase、Cochrane图书馆、Elsevier Science Direct、中国生物文献数据库、重庆维普数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库中的相关文献。观察指标为总生存期(OS)和无进展生存期(PFS),效应指标为风险比(HR)与其95%置信区间(95%CI)。按照纳入标准,选择相关的文献,提取数据后,采用RevMan 5.3及R软件计算合并的HR值及其95%CI,并对其发表偏倚进行评价。结果共纳入8篇文献,共纳入患者1556例。在mCRC中,CTC阳性与较差的OS(HR=2.07,95%CI:1.79~2.39,P<0.001)和PFS(HR=1.47,95%CI:1.30~1.65,P<0.001)相关。结论CellSearch系统检测CTC可预测mCRC患者的预后,且CTC阳性与较差的预后相关。

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌疗效评价和预后判断中的研究进展

肿瘤细胞自原发灶脱落,直接或经淋巴系统间接进入血循环系统进而在远处组织、器官增殖,最终形成转移灶,这部分脱落进入循环系统的肿瘤细胞即被称之为循环肿瘤细胞(CTC)。近年来乳腺癌中CTC检测受到越来越多关注,其被认为在治疗方案的选择、评估对治疗的反应及预后上有很大前景。CTC检测可发现有高危复发风险和转移的早期乳腺癌患者。

非小细胞肺癌患者外周血循环肿瘤细胞的检测及与病理分期关系

目的探讨非小细胞肺癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)检测的临床意义。方法采用CellSearch系统检测30例非小细胞肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞数,并与15例肺良性疾病患者、30例健康志愿者(对照组)进行比较。结果CTCs>0的非小细胞肺癌患者为20例(66.7%),肺良性疾病患者为4例(26%),健康志愿者为0例;CTCs>5的分别为:9(30%)、0、0例;CTCs>10的分别为:4(13%)、0、0例,均有统计学差异(P<0.05)。不同临床分期患者比较,Ⅰ、Ⅱ期患者外周血中的CTCs的阳性百分率(29.6%)显著低于Ⅲ、Ⅳ期患者(58.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用CellSearch系统,可以早期检测非小细胞肺癌患者外周血CTCs,有望成为一种实用的循环肿瘤细胞检测技术。

循环肿瘤细胞在可手术乳腺癌患者中的检出率及特征分析

目的 探讨循环肿瘤细胞（CTCs）在可手术乳腺癌患者外周血中的水平及与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法 收集T2-4N0-3M0可手术乳腺癌患者126例。抽取入组患者7.5 m L外周血,使用Cell Search系统检测CTCs。分析CTCs与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果 在126例患者中,有9例患者检测到CTCs,检出率为7.1%。CTCs阳性组的Ki67为（51±20）%,CTCs阴性组的Ki67为（33±23）%（P=0.04）。可手术乳腺癌患者外周血检出CTCs与患者年龄、月经状态、肿块大小、淋巴结状态、AJCC分期、病理类型、病理学分级、ER、PR、HER2状态以及分子分型无关。结论 7.1%的可手术乳腺癌患者检测到CTCs,CTCs与Ki67相关。

循环肿瘤细胞检测在不同阶段不同类型乳腺癌中的应用

循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)检测在乳腺癌预后方面的应用受到了越来越多的关注。目前国内外众多大型临床研究将其贯穿于乳腺癌诊疗的各个阶段。对于不同治疗阶段的乳腺癌,CTC检测的应用价值不同,但与传统影像学相比,其在实时动态监测疾病变化、疗效评价等方面具有优势。在乳腺癌分类治疗、个体化治疗时代,CTC检测可为患者提供最及时、最优化的治疗方案。

一种提高脑膜转移癌诊断率的新技术

目的使用CellSearch系统和循环肿瘤细胞检测试剂盒（上皮来源）检测并计数疑似肺癌脑膜转移患者脑脊液中的恶性肿瘤细胞，探讨该技术检测脑脊液中恶性肿瘤细胞的可行性。方法研究对象为20例症状明显的疑似肺癌脑膜转移患者和1例无脑膜转移的肺癌患者。每例患者收集首次经腰椎穿刺脑脊液10～15mL，其中5～7．5mL应用CellSearch系统检测脑脊液中的恶性肿瘤细胞数量，5～7．5mL进行脑脊液液基细胞学检查，2mL进行脑脊液生物化学检查。结果使用CellSearch系统检测20例疑似肺癌脑膜患者的脑脊液，全部（100％）找到恶性肿瘤细胞；脑脊液液基细胞学法有12例（60％）找到肿瘤细胞。1例阴性对照未找到恶性肿瘤细胞。CellSearch方法与脑脊液液基细胞学比较差异有统计学意义（P=O．008）。结论CellSearch技术用于检测脑膜转移癌患者脑脊液里的恶性肿瘤细胞对比传统技术更有优势，可作为一种新的可靠的辅助诊断脑膜转移癌方法。

外周血循环肿瘤细胞检测在胃癌患者中的临床价值研究

目的探讨循环肿瘤细胞(CTCs)的检测在胃癌患者中的临床价值。方法选取2016年12月至2017年12月该院收治的178例胃癌患者为研究对象,并按照胃癌分期进行分组,其中Ⅰ期34例,Ⅱ期44例,Ⅲ期48例,Ⅳ期52例。选择同期40例健康体检者为对照组。使用CellSearch系统对各期患者、对照组及患者治疗前后外周血中CTCs计数进行检测。结果与对照组比较,胃癌患者CTCs计数升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,Ⅲ~Ⅳ期患者CTCs计数[(20.24±6.38)/7.5mL]高于Ⅰ~Ⅱ期患者[(13.56±3.28)/7.5mL],差异有统计学意义(P<0.05);与手术前比较,手术后8h的CTCs计数降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ~Ⅲ期患者术后8h的CTCs计数与术后24h比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与化疗前相比,化疗1个疗程后胃癌患者CTCs计数显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);对于更换化疗方案的患者,其CTCs计数与更换方案前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CTCs检测不仅能早期提示癌灶的转移,也为实时评估疗效及预后提供参考。

481例恶性肿瘤患者循环肿瘤细胞(CTC)检测的回顾性分析

目的基于CellSearch平台,回顾性分析肝癌、胃癌、结直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、肺癌、前列腺癌7类肿瘤患者循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)数量及形态特征,探讨其临床价值。方法回顾分析复旦大学附属中山医院检验科2014年12月至2016年4月7类肿瘤患者共481例CTC检测结果,有CTC检出者回顾原始荧光检测图像,随访时间更新至2018年4月。比较7类肿瘤患者术前、术后CTC数量变化及形态特征。分析肝癌患者不同治疗阶段的CTC形态变化及其临床价值。结果术前组CTC检出率为53%～100%,术后组为0～37%,7类肿瘤术后组均有显著下降,其中乳腺癌和胃癌下降最为显著(χ2=9.12,P=0.003;χ2=5.76,P=0.016)。不同肿瘤CTC形态存在较大异质性,以肝癌和肺癌为甚。肝癌患者连续监测结果显示,不同治疗阶段的CTC数量及形态均有变化且与临床预后相关。结论 7类肿瘤术后组CTC7.5检出率显著低于术前组。在肝癌治疗监测过程中,CTC形态变化对于治疗反应及临床预后可能有一定的提示作用。

胃癌循环肿瘤细胞两种技术检测的比较研究

比较分析CellSearch系统和 CTC-Biopsy系统对胃癌循环肿瘤细胞(CTC)检测效果。方法 采集胃癌患者外周血用CellSearch系统和CTC-Biopsy 系统检测CTC,从胃癌病理分期、病理类型和临床进展等分析。结果 胃癌患者84例为试验组,同期60例健康志愿者对照组。对照组两种技术均未检测到CTC,实验组用CellSearch 系统CTC检出率为 28.57%,用CTC-Biopsy系统CTC检出率为 60.71%,两种技术检出率的总体差异有统计学意义(P<0.05)。不同分期胃癌患者用CellSearch 系统CTC检出率分别为I期7.14%、II期11.76%、III期26.47%、IV期63.16%,用CTC-Biopsy系统CTC检出率分别 I期35.71%、II期47.06%、III期64.71%、IV期84.21%,各分期两种技术检出率的差异均有统计学意义(P<0.05)。不同病理类型胃癌患者用CellSearch 系统CTC 检出率分别为乳头状腺癌25.92%、管状腺癌26.32%、低分化腺癌33.33%、黏液腺癌28.57%、印戒细胞癌33.33%,不同病理类型胃癌患者用CTC-Biopsy系统CTC 检出率分别为乳头状腺癌62.96%、管状腺癌57.89%、低分化腺癌60.00%、黏液腺癌57.14%、印戒细胞癌66.67%,各病理类型两种技术检出率的差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组外周血 CTC 两种技术检测检出率与胃癌瘤块大小、淋巴结转移、血管侵犯和是否有远处转移灶,两种技术检出率总体差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CellSearch系统和CTC-Biopsy系统对CTC的总检出率以及对不同病理分期、病理类型和临床进展检出率有总体差异,CTC-Biopsy系统对CTC检出率高于CellSearch系统。

CellSearch技术检测非小细胞肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞数并分析其与预后的相关性

目的:通过CellSearch技术检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的数目,并探讨其与NSCLC患者预后的相关性。方法:回顾分析2013年6月—2017年6月在吉林省肿瘤医院接受治疗的68例NSCLC患者的资料。所有患者采集外周静脉血10 mL,经CellTracks Autoprep System进行磁珠法富集CTCs,采用CellTracks AnalyzerⅡ系统扫描分析CTCs的个数,将EpCAM+CK+DAPI+CD45-且细胞膜及细胞核染色完整的细胞定义为CTCs,CTCs数目≥1定义为CTCs阳性。采用χ^2检验分析CTC数目与NSCLC患者病理参数的相关性;采用Kaplan-Meier法进行生存分析,COX风险回归模型计算危险比(hazard ratio,HR)和95%可信区间(con dence interval,CI)分析CTCs对NSCLC患者总生存期的影响。结果:68例NSCLC患者中18例有CTCs,CTCs阳性率为26.5%(18/68)。Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期患者的CTCs阳性率分别为23.1%(3/13)、25.0%(4/16)和28.2%(11/39);肺腺癌与肺鳞癌患者CTCs阳性率分别为30.4%(14/46)和18.2%(4/22)。多因素回归分析结果显示,病理类型、病理分期和治疗方式均不是CTCs影响预后生存的因素(P值均>0.05)。CTCs数目≥1患者总生存时间明显短于CTCs数目<1患者(HR=0.381,95%CI:0.151~0.963,P=0.041),但CTCs的存在与病理类型、年龄及吸烟无关(P=0.383,P=1.000和P=1.000)。结论:在Ⅰ~Ⅳ期NSCLC患者外周血中均可检测到CTCs,以Ⅳ期患者中检出率最高;CTCs数目≥1患者的生存时间明显短于CTCs数目<1者。CTCs可能是一种有一定临床应用价值的检测指标。

CellSearch和CTC-Biopsy系统检测肾细胞癌患者外周血CTCs价值探讨

目的探讨CellSearch和CTC-Biopsy系统检测肾细胞癌(又称肾癌)患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的价值及临床意义。方法应用CellSearch和CTC-Biopsy系统同时检测山东省肿瘤医院收治的37例肾癌患者外周血CTCs,分析CTCs检测结果与患者临床病理特征和预后之间的关联性。2种检测方法结果比较采用χ^(2)检验及一致性检验。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log-rank检验对生存数据进行分析,Cox比例风险回归模型分析评估影响预后的因素。结果CellSearch系统在7例患者中检测到外周血CTCs,总检出率为18.92%(7/37),无循环肿瘤细胞团(CTM)检出;CTC-Biopsy系统在13例患者外周血中检测到CTCs/CTM,CTCs/CTM总检出率为35.14%(13/37)。CellSearch检测结果与肾癌患者的各项病理因素均无关联性(均P>0.05);CTC-Biopsy检测结果与患者的TNM分期(χ^(2)=8.877,P=0.005)、肿瘤大小(χ^(2)=7.758,P=0.019)和肾癌危险度(χ^(2)=5.106,P=0.042)评分有关联。2种检测方法CTCs检测结果与肾癌患者5年无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)无相关性(均P>0.05)。结论在肾癌患者中,CTC-Biopsy系统CTCs检出率高于CellSearch系统;CTC-Biopsy系统CTCs检测结果可以作为肾癌临床病理分期的有益补充。