鹿茸治疗精神及神经性疾病疗效及机制研究进展

鹿茸因具有抗氧化、抗炎、抗骨损伤、抗神经疾病和免疫调节等各种生物学特性而受到了广泛的关注,在精神及神经性疾病治疗中发挥重要作用,包括对如轻度认知障碍、缺血性脑病、阿尔茨海默病、帕金森病、抑郁症及神经损伤等相关疾病的预防和治疗。该文综述了鹿茸及鹿茸多肽治疗精神及神经性疾病的研究进展,重点介绍了其干预作用及调控机制。研究发现鹿茸及其成分可以有效改善轻度认知障碍、抑制神经损伤、减轻缺血性脑病、缓解阿尔茨海默病、改善帕金森病,并显著减少抑郁样行为和保护神经元,其调控机制可能涉及抗炎、抗氧化、细胞焦亡、Rho/ROCK通路、Akt/mTOR信号、Nrf-2/HO-1/NF-κB通路等多种途径。该文的整理分析为拓宽鹿茸的应用和发掘神经系统疾病的治疗方法提供理论依据和新思路,并揭示一种潜在的治疗药物。

鹿角胶体内分布及入血入骨成分的示踪动力学分析

背景:课题组前期研究发现鹿角胶小分子肽能够促进骨生长,对于治疗骨类疾病具有良好的应用前景。然而鹿角胶如何在体内发挥作用以及原理尚未明确。目的:荧光标记及活体示踪技术研究鹿角胶体内靶器官分布动向。方法:使用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)对鹿角胶进行荧光标记,通过荧光成像、紫外光谱扫描检测标记结果。将标记成功的鹿角胶,通过灌胃注入小鼠体内,通过激光共聚焦显微镜检测鹿角胶吸收入血情况,应用小动物活体成像仪检测鹿角胶在小鼠体内的分布情况。在血清及骨内荧光最强时间点取材,对血清及骨组织蛋白液进行凝胶电泳,通过二级质谱检测确定吸收入靶器官的鹿角胶成分。结果与结论:①葡聚糖凝胶色谱成功分离荧光标志物,荧光成像及紫外光谱扫描证明标记成功,并测得FITC-鹿角胶的荧光取代度为0.953%;②入血成分荧光强度检测结果显示口服2 h后鹿角胶在血清中分布最多;③不同时间小鼠的双侧股骨与胫骨荧光成像显示相同,证明鹿角胶可通过入骨发挥作用;④二级质谱检测对比UniProt数据库发现该肽段为核心蛋白聚糖的特征片段,证明鹿角胶中的核心蛋白聚糖可进入骨内发挥疗效。

周青教授从“虚、滞、瘀”辨治精索静脉曲张性不育经验

精索静脉曲张性不育即精索静脉曲张(varicocele,VC)所导致的男性不育,为男科常见疾病。周青教授提出从虚、实两端来认识本病的发生:“虚”为先天肾水与后天脾土出现虚损后,其所生之精不能濡养精索静脉、所化之气不能升发精索静脉内血液;“实”则包括“滞”“瘀”两方面,肝气郁滞不能疏通血脉,即为“滞”,而“虚”“滞”可导致精索静脉内血行迟缓,凝而为“瘀”,局部血管因此出现扩张,影响睾丸正常功能,最终导致不育发生。“虚、滞、瘀”相互影响,合而为病。治疗上,周青教授倡导虚、实同调,主张益肾生精、健脾升阳疗其虚,行气活血、化瘀通滞治其实。针对临床常见的肾虚血瘀型精索静脉曲张性不育,自拟益肾填精、活血化瘀之龟鹿桃红方施治,疗效明显。

鹿茸肽的酶解工艺优化及其体外抗蓝光活性评价

目的:为了更好的开发鹿茸的高价值产品,本研究确定了碱性蛋白酶酶解鹿茸肽的最佳工艺条件,并对其体外抗蓝光活性进行评价。方法:选择酶解温度、酶底比、酶解时间、pH四个因素,每个因素三个水平,在单因素实验的基础上进行正交实验优化,以鹿茸肽酶解收率为指标,获得酶解鹿茸肽的最佳工艺,测定鹿茸肽的含量;利用CCK-8法检测不同浓度鹿茸肽培养下的人类永生化表皮细胞(Human immortal keratinocyte line,HaCat)在蓝光照射后的存活率;ELISA法分析超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、还原型谷胱甘肽(Glutathione-reduced,GSH)的分泌水平以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;紫外法计算鹿茸肽对DPPH自由基、OH自由基清除的能力。结果:最佳鹿茸肽酶解工艺条件为温度45℃,酶解时长5 h,pH8.5,酶底比6%,此时的鹿茸肽酶解收率为52.7%;设置不同浓度鹿茸肽给药组(12.5、25、50、75、100μg/mL),与蓝光照射模型组相比,给药组能够减轻蓝光照射对HaCat细胞增殖活力的抑制作用,提高细胞存活率,具有显著性差异(P<0.01),同时给药组SOD、GSH分泌水平升高,MDA含量下降(P<0.05);另外,鹿茸肽对DPPH自由基、OH自由基的清除能力较强,其IC50分别是0.98和0.63 mg/mL。结论:鹿茸肽具有较好的抗蓝光活性,对皮肤美白、抗衰老和损伤修复具有一定的作用,这为鹿茸的精深加工和开发利用提供了理论依据。

中药鹿茸的本草考证

鹿茸是一种珍贵的中药,在历代医书上均有详细的记录。鹿茸的药用历史已经有数千年之久,但因朝代更迭、地域差异、古分类方法不够完备等原因,历代文献中关于其药用价值的描述也不尽相同。为明晰古代和现代有关鹿茸的各种记录。文章从性味归经、功效主治、采集炮制、性状等方面对其进行了系统的探讨,为其临床和科研工作的开展奠定了基础。

基于UPLC-MS/MS法的定坤丹中鹿茸的专属性鉴别及驯鹿茸筛查

本文建立了基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的定坤丹中鹿茸的专属性鉴别及驯鹿茸投料的筛查方法。采用胰蛋白酶对定坤丹样品进行酶解处理,使用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm×1.7μm)分离,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min,进样体积5μL。电喷雾离子源(ESI)正离子模式,多反应监测(MRM)模式。结果表明,鹿茸专属性鉴别及驯鹿茸的各监测离子对专属性良好,30批实际样品均检出鹿源性成分;其中,8批检出鹿茸,其余22批均检出驯鹿茸,表明目前市场上定坤丹样品中鹿茸多来源于驯鹿。该方法的专属性好、操作简便快捷,进一步完善了定坤丹质量标准,为含鹿茸中药制剂中鹿茸的鉴别及驯鹿茸筛查提供参考。

鹿茸抗骨质疏松症研究进展

中药鹿茸对骨质疏松症的预防和治疗有突出优势。文中对近年来鹿茸治疗骨质疏松症的研究进行简要总结,从单方鹿茸和复方鹿茸两个方面阐述鹿茸治疗骨质疏松症的试验研究及临床研究,为进一步揭示鹿茸作用机制及抗骨质疏松药物的研发提供参考。

梅花鹿茸生物碱类成分及其对小鼠脾细胞增殖的影响

目的：研究梅花鹿茸生物碱类成分及其对小鼠脾细胞体外增殖的影响。方法：综合利用Sephadex LH-20和MCI（CHP20P）等柱色谱方法分离梅花鹿茸中的化学成分,运用多种波谱技术（UV、1H-NMR、13C-NMR和MS）鉴定化合物结构,应用MTT法考察梅花鹿茸总碱和8个生物碱成分对小鼠脾细胞体外增殖的影响。结果：从梅花鹿茸中分离得到11个化合物,分别鉴定为：尿嘧啶（1）、次黄嘌呤（2）、尿苷（3）、肌苷（4）、鸟苷（5）、2＇-脱氧鸟苷（6）、鸟嘌呤（7）、胸苷（8）、胸腺嘧啶（9）、胞苷（10）和腺苷（11）。小鼠脾细胞体外增殖活性研究发现梅花鹿茸总碱、尿嘧啶、腺苷具有明显的促进小鼠脾细胞增殖的活性。结论：其中,化合物4~11为首次从梅花鹿茸中分离得到,梅花鹿茸总碱是鹿茸免疫调节作用的物质基础之一,其中以尿嘧啶和腺苷活性最强。

马鹿角及梅花鹿角脱盘中无机元素分析与评价

目的分析鹿角中的无机元素,为鹿角药材质量控制提供参考。方法采用微波消解样品,电感耦合等离子体-原子发射光谱法(ICP-AES)分析不同产地马鹿角及不同年龄梅花鹿角脱盘中共计29种无机元素。结果在所有样品中均检测到了21种元素,包括Ca、P、K、Na、Mg等5种人体必需宏量元素,Fe、Cu、Zn、Mn、Cr、Se、Ni、Mo、Si、Sr等10种人体必需微量元素;未检测到Sn、As、Co、B、Hg、V、Ti、Zr等8种元素。相关性分析显示有多种元素间呈显著或极显著正相关。马鹿角不同部位无机元素组成相似,2个不同产地马鹿角中同种元素的平均含有量差异较大。除部分元素外,不同年龄梅花鹿角脱盘样品中各元素的量差异不大。结论研究结果为鹿角药材的质量控制及其资源综合开发与利用提供了科学依据。

鹿鞭的微量DNA提取及序列鉴定

采用微量ＤＮＡ提取技术，从梅花鹿血、毛、鹿鞭、鹿茸、牛鞭、驴鞭中提取ＤＮＡ，以线粒体ＤＮＡ细胞色素ｂ通用引物Ｌ１４８４１和Ｈ１５１４９扩增约３０７ｂｐＤＮＡ片段，扩增产物纯化后采用双脱氧链终止法测定其序列。结果证明：梅花鹿毛、血和鹿鞭的ＤＮＡ序列完全一致；而所谓的“鹿茸”则与其有较大的差异。用所测序列以简约法ＰＡＵＰ３１１程序构建的分子系统树与传统分类系统相吻合。说明此方法鉴定鹿鞭是科学而准确的。

鹿茸提取物体外抗氧化作用

目的 :研究鹿茸提取物的体外抗氧化作用。方法 :测定鹿茸提取物对NADPH 维生素C和Fe2 + 半胱氨酸系统诱发的微粒体脂质过氧化反应 (MDA形成 )的影响 ,及对黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶系统超氧阴离子自由基(O2 ·)产生 (还原型细胞色素C形成 )的影响。结果 :鹿茸提取物在体外能明显抑制NADPH 维生素C和Fe2 + 半胱氨酸系统诱发的大鼠脑、肝、肾微粒体脂质过氧化反应 (MDA形成 ) ,及黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶系统O2 ·的产生 (还原型细胞色素C形成 )。结论

鹿茸醇提物对心肌梗死模型大鼠心肌损伤的保护作用及对血浆内皮素含量的影响

目的观察鹿茸醇提物对心肌梗死模型大鼠心肌损伤的保护作用。方法采用结扎冠脉造成大鼠急性心肌缺血的损伤模型,观察鹿茸醇提物对心肌梗死模型心肌损伤急性期后大鼠心电图(ECG)、心肌梗死面积(MIS)、内皮素(ET)等指标的影响。结果鹿茸醇提物对大鼠心肌缺血程度(Σ-ST)有明显的改善作用,能减小MIS,降低ET水平。结论鹿茸醇提物对心肌梗死模型大鼠心肌损伤有一定的保护作用,可能与降低心肌损伤时ET含量有关。

5种鹿茸营养成分的主成分分析

对梅花鹿茸、马鹿茸、花马杂交鹿茸、麋鹿茸及驯鹿茸等五种鹿茸的常规成分、无机元素和氨基酸含量进行了测定。采用原子吸收光谱法测定了15种无机元素的含量;使用氨基酸分析仪结合分光光度法测定了五种鹿茸不同部位的17种氨基酸的含量。采用主成分分析法对鹿茸的营养成分进行分析,探讨了不同品种鹿茸的差异及特征成分。结果表明,粗蛋白、Ca、P、Na、Fe、Ba、Sr、谷氨酸及甘氨酸是鹿茸的特征成分,与鹿茸品质特征密切相关。根据无机元素含量的主成分分析得分图,可将梅花鹿茸、麋鹿茸与其他3种鹿茸区分,而常规成分和氨基酸的主成分得分图不能明显表征五种鹿茸的差异。主成分分析揭示了不同鹿茸在营养成分上的相似性和差异性。本研究为鹿茸的进一步开发利用提供了重要依据。

鹿角灵芝胶囊的抗肿瘤活性及对顺铂所致肾损伤的保护作用

目的研究鹿角灵芝胶囊的抗肿瘤活性及对顺铂所致肾损伤的保护作用。方法建立小鼠Lewis肺癌模型,评价鹿角灵芝胶囊内容物的抗肿瘤和抗氧化作用及对顺铂肾毒性的影响,并用MTT法比较鹿角灵芝胶囊内容物在体外对10种不同类型人肿瘤细胞株的细胞毒活性。结果鹿角灵芝胶囊能明显抑制Lewis荷瘤小鼠的肿瘤生长,并显著逆转顺铂造成的荷瘤小鼠血清Scr与BUN的升高、肾皮质组织MDA含量的升高,以及SOD与GSH-Px活性的降低;鹿角灵芝胶囊对不同类型人肿瘤细胞的细胞毒活性有较大差异,其IC50排序为:HT-29<MCF-7<A549<Hela<Caco-2<SK-OV-3<Eca-109<HL-60<SGC-7901<HePG2。结论鹿角灵芝胶囊具有体内外的抗肿瘤活性,并对顺铂造成的肾损伤有保护作用。

中药材鹿茸的分子分类学鉴定研究

目的 建立中药材鹿茸的分子分类学鉴定试剂盒。方法 根据对不同产地的梅花鹿、马鹿线粒体DNA进行PCR扩增和序列测定 ,并与亲缘关系较近的伪充药材来源动物线粒体DNA同位置序列比较 ,找到鹿的特征片段 ,经过实际检验 ,筛选出合适片段作为鹿的种属特异性PCR引物。结果 该引物与相关试剂组成试剂盒后 ,可用于中药材鹿茸与伪充药材的鉴别。结论 用分子分类学方法鉴别中药材鹿茸 ,具有科学、稳定、准确、简便等特点 。

鹿角与鹿茸蛋白质鉴定

目的 鉴定鹿角与鹿茸蛋白质。方法 通过SDS-PAGE、2-DE分析鹿角与鹿茸蛋白质组成,比较两者电泳图谱,找出各自稳定的蛋白质条带或斑点及其差异。将两者SDS-PAGE蛋白质条带以胰蛋白酶进行胶内消化后,采用MALDI-TOF/TOF质谱分析,通过MASCOT检索匹配以鉴定蛋白质。结果 在SDS-PAGE图谱中,鹿角在约75、66.2 kD处呈现出2个清晰的蛋白质条带,而鹿茸则在约75、61、45、20 kD处呈出现4个蛋白质条带;2-DE分析显示,鹿角蛋白质斑点集中于Ⅰ区(pH5~7,M_(w) 45 kD)以及Ⅱ区(pH10,M_(w) 66.2 kD);鹿茸蛋白质斑点则主要分布在Ⅲ区(pH5~7,M_(w) 45 kD),另外,在pH5~6和M_(w) 20 kD的区域内存在3个稳定出现的蛋白质斑点。通过生物质谱分析,分别从鹿角与鹿茸中鉴定出2、4个蛋白质,评分高于100。结论 鹿角与鹿茸蛋白质电泳图谱存在明显差异,可为两者鉴别提供科学依据。

微量热法研究鹿茸4个活性部位对肠道特征菌群生长代谢的影响

建立灵敏表征鹿茸中具有补益活性的4个部位对两种肠道特征菌群生长代谢影响的评价方法.采用微量热法,在不同给药条件作用下,以产热功率-时间曲线(热谱曲线)的特征参数(生长速率常数(k)、最大产热功率(Pmax)、达峰时间(tp)及有效率(E)等)为指标,对肠道主要有益菌(青春双歧杆菌)生长代谢程度进行客观地量化评价.挑选鹿茸促菌最强的活性部位,进一步考察该部位对病原微生物(金黄色葡萄球菌)生长抑制的作用规律.结果表明,鹿茸不同活性部位促进青春双歧杆菌生长代谢强弱顺序为:正丁醇>乙醚>氯仿>乙酸乙酯.活性最强的正丁醇萃取液对病原微生物(金黄色葡萄球菌)抑制影响的研究表明,正丁醇萃取液在浓度大于200μg·mL-1时,对金葡菌生长具有抑制作用.且tp随药液浓度的增加而相应地延长;k,Pmax均随浓度的增加而相应地减小.微量热法具有灵敏准确、实时在线、重现性好等特点,可用于名贵药材——鹿茸的活性部位的筛选,也为药效物质的研究提供了一个新的研究思路和方法.

马鹿茸的X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定

目的:建立中药材马鹿茸的鉴定分析新方法。方法:采用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法。结果:通过应用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法对3个马鹿茸和1个花鹿茸中药材进行分析鉴定,获得了马鹿茸的对照X射线衍射Fourier指纹图谱及特征标记峰值。结论:表明X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法可用于中药材马鹿茸的鉴定。

鹿茸岭南特色饮片HPLC指纹图谱及薄层色谱的研究分析

目的:建立鹿茸岭南特色饮片HPLC指纹图谱,并结合利用薄层色谱分析法,为鉴别鹿茸饮片真伪,科学综合的评价及控制其内在质量提供有效可靠的方法。方法:应用HPLC测定10批鹿茸岭南特色饮片的指纹图谱,应用薄层色谱法对所含的氨基酸类成分进行定性及半定量研究。结果:建立了鹿茸岭南特色饮片HPLC指纹图谱共有模式,并分析比较了不同炮制方法的鹿茸饮片的指纹图谱相似度及薄层色谱。结论:该方法稳定可靠,重复性好,为评价鹿茸饮片的内在质量提供了参考依据。

商品鹿茸药材中总磷脂含量测定

目的:建立鹿茸药材中总磷脂含量测定方法,以评价不同商品地鹿茸药材的质量。方法:采用Folch试剂超声提取,钼蓝试剂显色,分光光度法测定。结果:样品中总磷脂含量以磷计的回归方程y=0.0205x+0.0032(r=0.9997),线性范围在2.3～80.5μg,平均回收率为93.01%,RSD=2.2%(n=5)。结论:该方法操作简便,方法学考察结果理想,可作为鹿茸药材质量控制的方法。