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对虾鳗弧菌卵黄抗体(IgY)的制备及其对人工感染的保护研究 被引量:8
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作者 朱香萍 张再生 刘宗柱 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期25-28,共4页
以纯培养的鳗弧菌作为抗原,探讨对虾鳗弧菌(Vibrio anguillarum)卵黄抗体(IgY)的制备技术,以及IgY在对虾体内的代谢及对人工感染和自然感染弧菌病的保护作用。结果表明:鳗弧菌对蛋鸡有较好的免疫原性,产蛋鸡经免疫后,血清与卵... 以纯培养的鳗弧菌作为抗原,探讨对虾鳗弧菌(Vibrio anguillarum)卵黄抗体(IgY)的制备技术,以及IgY在对虾体内的代谢及对人工感染和自然感染弧菌病的保护作用。结果表明:鳗弧菌对蛋鸡有较好的免疫原性,产蛋鸡经免疫后,血清与卵黄中很快出现抗体,而且卵黄中的抗体水平要高于血清中的抗体水平。IgY对鳗弧菌的感染有可靠的保护作用,IgY经口服后很快到达直肠,继而血淋巴、肝胰脏中也出现抗体,并可持续 12-24h;投喂IgY的试验组对虾在7d内的死亡率为15%,极显著地低于对照组对虾的同期死亡率(为60%)。 展开更多
关键词 对虾 弧菌病 被动免疫 卵黄抗体(igy)
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IgY抗体用于弓形虫感染小鼠病原学检测的研究 被引量:5
2
作者 施强 杨婷婷 《海峡预防医学杂志》 CAS 2002年第1期12-13,共2页
[目的 ]将抗弓形虫鸡卵黄抗体 (Ig Y)应用于免疫酶染色 ,探索弓形虫感染的病原学诊断途径。 [方法 ]取急性感染弓形虫小鼠的肝、脾和肾组织切片 ,用 Ig Y作为第 1抗体 ,间接酶免疫染色 ,检查细胞内弓形虫速殖子。 [结果 ]在细胞内可见... [目的 ]将抗弓形虫鸡卵黄抗体 (Ig Y)应用于免疫酶染色 ,探索弓形虫感染的病原学诊断途径。 [方法 ]取急性感染弓形虫小鼠的肝、脾和肾组织切片 ,用 Ig Y作为第 1抗体 ,间接酶免疫染色 ,检查细胞内弓形虫速殖子。 [结果 ]在细胞内可见呈弧形、半月形紫红色半透明的弓形虫速殖子 ,虫体完整 ,一般 1~ 4个虫体 /细胞 ,以 2~ 3个多见。 [结论 ]Ig Y抗体的间接酶免疫染色试验用于诊断急性感染弓形虫的小鼠 。 展开更多
关键词 间接酶免疫染色 病原学检测 鸡卵黄色免疫球蛋白 igy 弓形虫 组织切片
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抗日本血吸虫SEA特异性IgY应用于循环抗原检测的研究
3
作者 楼涤 陆绍红 +3 位作者 陈睿 童群波 丁建祖 卓敏敏 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2011年第4期193-197,共5页
本研究应用抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)建立敏感、特异的检测循环抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。用SEA皮下多点注射法免疫海蓝鸡,水稀释法制备IgY抗体,以辣根过氧化物酶标记纯化的IgY... 本研究应用抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)建立敏感、特异的检测循环抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。用SEA皮下多点注射法免疫海蓝鸡,水稀释法制备IgY抗体,以辣根过氧化物酶标记纯化的IgY抗体(IgY·E)和兔抗IgG抗体(IgG—E)分别作为检测抗体,IgY抗体和兔抗IgG抗体分别作为捕捉抗体,组合建立4种双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测循环抗原,分析各种方法检测SEA的灵敏度,并平行检测急性日本血吸虫病人血清6份、慢性日本血吸虫病人血清29份、华支睾阳性者血清9份、卫氏并殖吸虫阳性者血清15份、弓形虫阳性病人血清7份、正常体检者血清118份。结果显示,以IgY为捕捉抗体或检测抗体,可检测到浓度为7.5ng/mL的SEA,灵敏度是基于IgG的夹心ELISA的4倍。4种夹心ELISA法检测急血病人血清阳性率均为100%,检测正常人血清的特异性为99.1%;与弓形虫、华支睾吸虫阳性者血清无交叉反应;-而检测慢血病人血清和并殖吸虫阳性者血清时,以IgY为捕捉抗体的2种ELISA(IgY+IgY—E、IgY+IgG—E)阳性率均分别为79.3%、6.7%;而IgG为捕捉抗体时,以IgY为检测抗体(IgG+IgY—E)时的阳性率分别为75.8%、6.7%,以IgG为检测抗体(IgG+IgG-E)时的阳性率分别为72.4%、13.3%,以IgY作为捕捉抗体的检测效果优于IgG。基于IgY抗体的双抗体夹心ELISA检测循环抗原具有良好的敏感性和特异性,可用于日本血吸虫病的免疫诊断。 展开更多
关键词 igy 日本血吸虫 循环抗原 双抗体夹心ELISA
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抗蝰蛇毒IgY灌胃对蝰蛇伤小鼠保护作用的研究 被引量:1
4
作者 祁俊华 孔天翰 《蛇志》 2008年第3期172-176,共5页
目的探讨抗蝰蛇蛇毒鸡卵黄抗体(immunoglobulin yolk,IgY)经腹腔注射或灌胃对蝰蛇伤小鼠保护作用,为其口服制剂的应用奠定理论基础。方法用蝰蛇原毒单一抗原免疫母鸡,收集第12天以后的鸡蛋,用水稀释法提取抗蝰蛇毒IgY;间接法ELISA检测Ig... 目的探讨抗蝰蛇蛇毒鸡卵黄抗体(immunoglobulin yolk,IgY)经腹腔注射或灌胃对蝰蛇伤小鼠保护作用,为其口服制剂的应用奠定理论基础。方法用蝰蛇原毒单一抗原免疫母鸡,收集第12天以后的鸡蛋,用水稀释法提取抗蝰蛇毒IgY;间接法ELISA检测IgY的效价和灌胃小鼠体内IgY的吸收时间;以胃排空率实验确定蛇伤前灌胃IgY的最佳时间,以腹腔注射和不同浓度IgY灌胃实验分别检验IgY对蝰蛇伤小鼠的保护作用。结果初次免疫后第12天开始收集抗体,水稀释法提取的IgY效价为1∶6400;不同浓度IgY灌胃后,2.5~3.5h胃排空率均达61.8%以上,血浆中抗体效价亦相应达高峰;腹腔注射和IgY灌胃实验对蛇伤小鼠的保护作用明显,小鼠的存活时间与阴性IgY组小鼠相比差异显著(P<0.05);同等效应下,灌胃IgY的有效剂量大约为腹腔注射的10~15倍。结论抗蝰蛇蛇毒IgY经腹腔注射和灌胃实验均能有效保护蝰蛇伤小鼠。 展开更多
关键词 蛇毒 鸡卵黄抗体 抗蛇毒抗体 灌胃实验
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基于IgY的ELISA用于囊尾蚴循环抗原的检测
5
作者 刘玉 王元伦 唐雨德 《东南国防医药》 2013年第2期135-137,共3页
目的建立基于IgY的双抗体夹心ELISA用于囊尾蚴病的诊断。方法制备并纯化抗囊尾蚴循环抗原(CA)卵黄抗体(IgY),建立以抗CA的IgY为捕获抗体,酶标记抗CA的单克隆抗体1A5为检测抗体的双抗体夹心ELISA法,共检测样品450份,并与捕获抗体和检测... 目的建立基于IgY的双抗体夹心ELISA用于囊尾蚴病的诊断。方法制备并纯化抗囊尾蚴循环抗原(CA)卵黄抗体(IgY),建立以抗CA的IgY为捕获抗体,酶标记抗CA的单克隆抗体1A5为检测抗体的双抗体夹心ELISA法,共检测样品450份,并与捕获抗体和检测抗体均为单克隆抗体的ELISA法比较,验证方法的敏感性、特异性与实用性。结果成功制备并鉴定了特异性IgY抗体,建立了基于IgY的双抗体夹心ELISA检测体系。IgY-ELISA和双单抗-ELISA检测囊尾蚴CA的灵敏度分别为8.3μg/L和13.9μg/L。IgY-ELISA检测囊尾蚴病患者血清与脑脊液的CA阳性率分别为100%(139/139)与89.5%(17/19),囊尾蚴病猪血清的阳性率100%(222/222),健康人与健康猪血清的阴性率为100%。结论建立的基于lgY的双抗体夹心ELISA检测囊尾蚴CA用于囊尾蚴病诊断,具有较高的特异性和敏感性,可用于囊尾蚴病的辅助诊断。 展开更多
关键词 囊尾蚴病 igy 循环抗原 双抗体夹心酶联免疫吸附实验
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基于表面等离子体共振技术用鸡蛋黄抗体IgY测定人血清中转铁蛋白 被引量:9
6
作者 王春宇 冯锋 +4 位作者 白云峰 陈泽忠 田茂忠 邱建丁 倪永年 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1177-1181,共5页
采用表面等离子体共振(SPR)方法,用鸡蛋黄抗体(IgY)取代传统免疫检测中哺乳动物抗体IgG作为识别分子偶联于CM5传感芯片上,对人血清中的转铁蛋白进行了检测.考察了IgY在传感芯片上的偶联条件及芯片的再生条件.结果表明,在pH=4.0,IgY浓度... 采用表面等离子体共振(SPR)方法,用鸡蛋黄抗体(IgY)取代传统免疫检测中哺乳动物抗体IgG作为识别分子偶联于CM5传感芯片上,对人血清中的转铁蛋白进行了检测.考察了IgY在传感芯片上的偶联条件及芯片的再生条件.结果表明,在pH=4.0,IgY浓度为100μg/mL,流速为5μL/min的最佳偶联条件下,SPR响应信号和转铁蛋白浓度在50~500 ng/mL范围内具有良好的线性关系,检出限为39.56 ng/mL,对人血清样品检测的日间变异系数<8%,日内变异系数<5%,平均回收率为86.22%~94.51%. 展开更多
关键词 表面等离子体共振 鸡蛋黄抗体 人血清 转铁蛋白
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抗鸡蛋黄IgY单克隆抗体的制备和初步鉴定 被引量:2
7
作者 殷志新 黄树其 +3 位作者 陈淞祥 方向东 张亚莉 王小宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期42-45,共4页
以纯化的鸡蛋黄IgG(IgY)为免疫原,免疫BALB/c小鼠。取其脾细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,3次克隆化后,获得2株能稳定分泌抗IgY单克隆抗体的杂交瘤细胞IG11和3A6。用琼脂双扩... 以纯化的鸡蛋黄IgG(IgY)为免疫原,免疫BALB/c小鼠。取其脾细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,3次克隆化后,获得2株能稳定分泌抗IgY单克隆抗体的杂交瘤细胞IG11和3A6。用琼脂双扩散法鉴定,两者均为IgG1亚类。特异性鉴定表明,1G11和3A6。两株单克隆抗体均与鸡血清IgG和鸡蛋黄IgG起强反应,而不与鸭蛋黄、鹌鹑蛋黄、小鼠血清、大鼠血清、兔血清、羊血清、马血清,以及人血清的IgG起反应。1G11与3A6的腹水效价分别为3.1×10-6和6.4×10-6。 展开更多
关键词 鸡蛋黄igy 单克隆抗体 制备
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抗咽喉细菌复合抗原的IgY抗体活性研究 被引量:1
8
作者 蒙永祥 张玲 +1 位作者 黄春龙 林学颜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期393-395,共3页
目的 :应用咽喉分离的细菌混合抗原免疫母鸡 ,提取鸡蛋黄中IgY ,通过ELISA方法证实IgY抗体的特异活性。方法 :采取咽喉炎相关的多种细菌作抗原免疫产蛋母鸡 ,收集鸡蛋 ,从蛋黄中提取IgY ,经纯化后进行SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和抗体活性... 目的 :应用咽喉分离的细菌混合抗原免疫母鸡 ,提取鸡蛋黄中IgY ,通过ELISA方法证实IgY抗体的特异活性。方法 :采取咽喉炎相关的多种细菌作抗原免疫产蛋母鸡 ,收集鸡蛋 ,从蛋黄中提取IgY ,经纯化后进行SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和抗体活性的ELIAS测定。结果 :电泳呈现 1 2条带 ,证明IgY抗体中至少有 1 2种抗体成分 ,ELISA结果表明IgY抗体效价为1∶5 1 2。热稳定性试验结果显示 ,在 37℃温度下 ,IgY抗体活性无改变。结论 :应用多种混合的细菌抗原免疫母鸡 ,其鸡蛋黄中含有相应的IgY抗体成分 。 展开更多
关键词 鸡蛋黄 免疫球蛋白igy 细菌复合抗原 抗体
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抗PRRSV和PCV-2-Cap蛋白特异性IgY抗体对保育猪生长和免疫的影响 被引量:1
9
作者 鲍伟华 周雪荣 +4 位作者 卢黎明 孙鹏烈 樊莉 方维焕 李肖梁 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期74-79,共6页
应用特异性抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白卵黄免疫球蛋白(IgY)饲喂保育猪,观察其对保育猪生长和免疫性能的影响。经抗体检测表明,53日龄时,PRRSV和PCV-2抗体阴性率0.5%,试验组比对照组分别高15%... 应用特异性抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白卵黄免疫球蛋白(IgY)饲喂保育猪,观察其对保育猪生长和免疫性能的影响。经抗体检测表明,53日龄时,PRRSV和PCV-2抗体阴性率0.5%,试验组比对照组分别高15%和5%。在53日龄和60日龄时,保育猪PRRSV阳性抗体S/P均值,试验组比对照组分别低15.59%和24.53%。保育猪46日龄-60日龄之间,阳性PCV-2抗体S/P均值试验组比对照组分别低15.42%、19.66%和12.70%。保育猪转栏时,试验组比对照组平均末重高12.74%(P〈0.01),平均日增重提高16.90%(P〈0.01),成活率高1.67%。免疫组化结果显示,相对于空白组,添加组空肠和小肠组织中的PRRSV抗原的阳性表达几乎为0。试验结果为特异性抗体用于PRRSV和PCV-2的防控提供了参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪园环病毒2型Cap蛋白 卵黄免疫球蛋白 保育猪
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免疫球蛋白IgY对牙龈卟啉单胞菌诱导的牙周炎大鼠模型的影响
10
作者 王芳 许啸晨 吴文惠 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期131-137,共7页
研究了免疫球蛋白(IgY)通过抑制P.gingivalis的生长繁殖治疗实验性大鼠牙周炎的可行性.用医用丝线结扎上颌第二磨牙,并涂抹P.gingivalis的方法建立大鼠牙周炎模型.建模成功的大鼠随机分成对照组、高剂量IgY组和低剂量IgY组,每组8只.给药... 研究了免疫球蛋白(IgY)通过抑制P.gingivalis的生长繁殖治疗实验性大鼠牙周炎的可行性.用医用丝线结扎上颌第二磨牙,并涂抹P.gingivalis的方法建立大鼠牙周炎模型.建模成功的大鼠随机分成对照组、高剂量IgY组和低剂量IgY组,每组8只.给药28 d后,测量各组大鼠的牙龈指数(GI),菌斑指数(PI)和探诊出血指数(BOP),以及血液中IL-6和TNF-α含量,并进行X-射线影像和组织学观察.与对照组相比,IgY治疗组GI、PI和BOP指标明显好转,IL-6和TNF-α含量显著降低,X-射线影像可见牙间隙明显缩小,组织学观察牙周纤维排列整齐,极少量炎细胞浸润,牙槽嵴无吸收,牙槽骨骨质增加.特异性IgY能够治疗P.gingivalis诱导的大鼠牙周炎. 展开更多
关键词 免疫球蛋白 igy 牙周炎动物模型 牙周指数 IL-6 TNF-α X射线影像 病理组织切片
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Immunoglobulin: A Natural Way to Suppress <i>Helicobacter pylori</i>in Humans 被引量:1
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作者 Adham M. Abdou Manal M. E. Ahmed +1 位作者 Yusuke Yamashita Mujo Kim 《Health》 2014年第8期781-791,共11页
The use of immunoglobulin is successfully applied in different areas of research, diagnostics, medical application and biotechnology. Egg yolk immunoglobulin (IgY) can successfully compete with immunoglobulin (IgG) pr... The use of immunoglobulin is successfully applied in different areas of research, diagnostics, medical application and biotechnology. Egg yolk immunoglobulin (IgY) can successfully compete with immunoglobulin (IgG) produced in the blood of mammals. Recently, successful progresses have been achieved in Japan through industrialization of IgY technology. Using IgY has been shown to provide a safer, more efficient and less expensive method for managing disease-causing pathogens. Helicobacter pylori (H. pylori), a spiral Gram-negative microaerophilic pathogen, it infects over 50% of the population worldwide, and is recognized as the etiologic agent of gastritis, peptic ulcer, and has been linked to the development of gastric adenocarcinoma and mucosa associated lymphoid tissue lymphoma. It is found that urease is the most abundant protein of H. pylori. Urease is recognized as an essential factor in the organism colonization of the gastric mucosa. The eradication of H. pylori by administration of oral antimicrobials is not always successful and may be associated with adverse effects. Therefore, several treatment regimens have emerged to cure H. pylori infection. Accordingly, a novel approach in prevention and reduction of H. pylori infection has been reported based on production of urease-specific immunoglobulin that can suppress the bacterial colonization through urease-binding by anti-H. pylori urease IgY (IgY-urease). The use of IgY against a pathogenic factor of H. pylori will be a prudent way to suppress the infection. 展开更多
关键词 immunoglobulin egg yolk immunoglobulin (igy) Helicobacter pylori UREASE Food INGREDIENT
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抗杂交鳢(Channa argus×C.maculate)弹状病毒卵黄抗体制备及ELISA检测方法的建立
12
作者 刘田 李硕 +4 位作者 汪铭书 赵立宁 黄锦炉 吴艺琳 贾爱卿 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1756-1765,共10页
为确定杂交鳢(Channa argus×C.maculate)弹状病毒卵黄抗体效价水平消减规律并验证抗体对病毒的中和能力,采用杂交鳢弹状病毒灭活疫苗免疫蛋鸡,使用醋酸-醋酸钠-辛酸法制备卵黄抗体,建立间接ELISA检测方法以监测卵黄抗体产生过程抗... 为确定杂交鳢(Channa argus×C.maculate)弹状病毒卵黄抗体效价水平消减规律并验证抗体对病毒的中和能力,采用杂交鳢弹状病毒灭活疫苗免疫蛋鸡,使用醋酸-醋酸钠-辛酸法制备卵黄抗体,建立间接ELISA检测方法以监测卵黄抗体产生过程抗体水平消减情况,以中和试验评估卵黄抗体中和杂交鳢弹状病毒效果。结果显示,ELISA检测方法最佳条件为抗原包被浓度0.5×105.8TCID_(50)/0.1 mL,37℃包被2 h,37℃封闭2 h。与大口黑鲈蛙虹彩病毒卵黄抗体、SPF蛋黄提取物、免疫前蛋黄提取物以及MBC空细胞均无交叉反应。以S/N(sample/negative)>2.1且敏感性最高为标准确定阳性、阴性样品。卵黄抗体于首免后28 d产生效价,四免后达到最高水平,效价为1︰25600,平台期可持续40~60 d,通过中和抗体检测结果证明平台期内抗体中和效价在免疫周期内最高,约为46.3。通过ELISA检测方法对卵黄抗体产生规律进行监测,通过中和检测方法评估卵黄抗体中和病毒效果。高滴度卵黄抗体具有被开发为新型抗杂交鳢弹状病毒生物制品的潜力,杂交鳢弹状病毒卵黄抗体的制备及快速检测方法的构建为该病的防治提供了理论基础和技术手段。 展开更多
关键词 杂交鳢弹状病毒 卵黄抗体 间接ELISA 中和抗体
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鸡卵黄免疫球蛋白Y的性质 被引量:13
13
作者 那红 杨曜中 +2 位作者 欧伶 袁勤生 朱威 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期172-175,180,共5页
用ELISA技术研究了鸡卵黄免疫球蛋白Y(IgY)对温度、酸碱度、胃蛋白酶、胰蛋白酶及反复冻融的稳定性。结果表明:IgY具有良好的热稳定性,对酸碱具有一定的耐受力,对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力(pH>4)。对胰蛋白酶... 用ELISA技术研究了鸡卵黄免疫球蛋白Y(IgY)对温度、酸碱度、胃蛋白酶、胰蛋白酶及反复冻融的稳定性。结果表明:IgY具有良好的热稳定性,对酸碱具有一定的耐受力,对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力(pH>4)。对胰蛋白酶非常敏感,经1h酶解处理,IgY的结合活性完全丧失。IgY具有很好的耐反复冻融的特性,即使经过5次反复冻融,其抗原结合活性也几乎未受损失。 展开更多
关键词 igy ELISA技术 胃蛋白酶 胰蛋白酶 鸡卵黄
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特异性卵黄抗体添加剂对中华鳖摄食和生长的影响 被引量:15
14
作者 李肖梁 马有智 方维焕 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期425-428,共4页
中华鳖(Trionyx sinensis)是我国和东南亚地区的主要特种水产养殖品种之一。浙江省是开展中华鳖工厂化养殖较早的地区。目前约占全国产量的60%以上。但随着集约化程度的提高,水质恶化等因素,导致其免疫机能衰退,疾病发生日趋严重... 中华鳖(Trionyx sinensis)是我国和东南亚地区的主要特种水产养殖品种之一。浙江省是开展中华鳖工厂化养殖较早的地区。目前约占全国产量的60%以上。但随着集约化程度的提高,水质恶化等因素,导致其免疫机能衰退,疾病发生日趋严重,阻碍了养鳖业的进一步发展。其中以嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)引起的中华鳖出血性败血症尤为严重。传统上主要依靠抗生素、含氯剂等药物防治该病,虽能在一定程度上起到防治作用,但是随着药物大量、长期的使用会造成环境污染、细菌耐药性和药物残留的产生。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 卵黄免疫球蛋白 死亡率 效价 摄食 生长性能 中华鳖
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离子交换色谱法分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白 被引量:7
15
作者 王丽英 马美湖 +2 位作者 蔡朝霞 金永国 黄茜 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期80-85,共6页
建立了高效、经济、大规模获得鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的生产方法。在对传统的水稀释法改良的基础上,结合聚乙二醇沉淀与离子交换色谱进行IgY的分离纯化。结果显示,用8倍无菌水稀释蛋黄液,用0.1 mol/L HCl调节pH为5.2,在4℃下静置8 h,于5... 建立了高效、经济、大规模获得鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的生产方法。在对传统的水稀释法改良的基础上,结合聚乙二醇沉淀与离子交换色谱进行IgY的分离纯化。结果显示,用8倍无菌水稀释蛋黄液,用0.1 mol/L HCl调节pH为5.2,在4℃下静置8 h,于5 000×g力离心可得上清粗IgY液,经测定回收率可达93.47%。然后用6%聚乙二醇沉淀后经DEAE-Toyopearl 650 M离子交换纯化,最佳的纯化条件:0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7)平衡上样,0.075 mol/L PBS(pH 7)洗脱。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果显示所得的IgY的纯度为95.02%,活性保持率高达73.77%。本研究弥补了传统分离方法不能同时达到高纯度和高回收率的缺点,且可用于大规模生产。 展开更多
关键词 离子交换色谱 水稀释法 改良 鸡卵黄免疫球蛋白 纯化
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鸡卵黄免疫球蛋白的mPEG修饰及其稳定性研究 被引量:3
16
作者 王丽英 马美湖 +1 位作者 黄群 史晓霞 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第9期2501-2507,共7页
研究了单甲氧基聚乙二醇(mPEG)对鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的化学修饰,并通过傅里叶变换红外光谱、圆二色光谱和荧光光谱分析比较了修饰前后IgY的稳定性。首先用N-羟基琥珀酰亚胺活化的单甲氧基聚乙二醇(NHS-mPEG)对IgY进行化学修饰,确定了... 研究了单甲氧基聚乙二醇(mPEG)对鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的化学修饰,并通过傅里叶变换红外光谱、圆二色光谱和荧光光谱分析比较了修饰前后IgY的稳定性。首先用N-羟基琥珀酰亚胺活化的单甲氧基聚乙二醇(NHS-mPEG)对IgY进行化学修饰,确定了mPEG的最佳修饰条件,即IgY与mPEG摩尔比为1∶10、pH值为7、反应时间为1h,所得产物mPEG-IgY修饰率为20.56%,活性保持率为87.62%。其次通过光谱分析法对IgY以及mPEG-IgY的热稳定性和酸碱稳定性进行了研究。结果表明,70℃温育120min后,IgY的α-Helix,β-sheet,β-Turn,Random各二级结构含量由14.5%,42.1%,6.2%,37.2%变为1.6%,55.25%,5.8%,37.5%;mPEG-IgY的各二级结构含量由12.9%,42.7%,6.3%,38.1%变为3.1%,50.5%,7.2%,39.2%。同样酸碱处理后,mPEG-IgY比修饰前IgY所引起的二级结构变化更小。因此可以推断出IgY经过mPEG修饰后对温度、酸碱处理所引起的变性有着更强的稳定性。 展开更多
关键词 单甲氧基聚乙二醇 卵黄免疫球蛋白 化学修饰 光谱分析 稳定性
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鸡卵黄抗体的制备及其不均一性 被引量:6
17
作者 杨曜中 宋聿文 +2 位作者 欧伶 范龙彬 袁勤生 《华东理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第1期53-56,共4页
介绍了免疫期卵黄液中白蛋白(牛)抗体效价和亲合力的变化。研究了pH对稀释卵黄液去脂效果,以及硫酸铵浓度对IgY浓缩、纯化效果的影响。探讨了抗白蛋白IgY 的异质性。实验表明稀释卵黄液酸化处理和IgY盐析的最适合条件分... 介绍了免疫期卵黄液中白蛋白(牛)抗体效价和亲合力的变化。研究了pH对稀释卵黄液去脂效果,以及硫酸铵浓度对IgY浓缩、纯化效果的影响。探讨了抗白蛋白IgY 的异质性。实验表明稀释卵黄液酸化处理和IgY盐析的最适合条件分别是pH5.1 和2.2m ol/L。经免疫亲和柱层析或金属(Fe3+ )螯合亲和柱层析后,白蛋白抗体样品均出现多个不同层析行为的抗体峰。实验提示免疫卵黄液中不仅可能存在不同亲合力、特异性的白蛋白抗体,还可能存在反映基本结构、理化性质差异的白蛋白抗体。 展开更多
关键词 白蛋白抗体 鸡卵黄液 免疫亲和柱层析
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鸡卵黄免疫球蛋白在医学领域中的应用 被引量:6
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作者 蔡玉春 陈家旭 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期527-530,共4页
卵黄免疫球蛋白(eggyolk immunoglobulin,IgY)是鸟类、两栖类和爬行类动物的主要免疫球蛋白。IgY稳定性好,具有不激活补体系统、不与类风湿因子和蛋白A、G结合等免疫学特性,且产量高、易提取纯化。该蛋白已广泛应用于兽医学、功能食品... 卵黄免疫球蛋白(eggyolk immunoglobulin,IgY)是鸟类、两栖类和爬行类动物的主要免疫球蛋白。IgY稳定性好,具有不激活补体系统、不与类风湿因子和蛋白A、G结合等免疫学特性,且产量高、易提取纯化。该蛋白已广泛应用于兽医学、功能食品和生物制品等方面,且在疾病预防控制和治疗方面开发潜力广阔。本文就从IgY在生物学特性、提取、纯化,以及其在免疫诊断和免疫治疗方面的应用作一综述。 展开更多
关键词 卵黄免疫球蛋白 免疫 制备 诊断 治疗
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鸡PLA2基因的克隆与原核表达及PLA2蛋白卵黄抗体的制备 被引量:2
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作者 杨涵江 辛颖 +1 位作者 麻丽霞 张智英 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2011年第11期48-52,共5页
【目的】克隆并原核表达鸡PLA2基因,小量制备鸡PLA2卵黄抗体,为大规模制备PLA2卵黄抗体作为饲料添加剂提供参考。【方法】提取鸡胰脏总RNA,利用RT-PCR方法获得鸡PLA2基因,将其克隆至pGEX-4T-1原核表达载体中,构建表达载体pGEX-4T-1-PLA2... 【目的】克隆并原核表达鸡PLA2基因,小量制备鸡PLA2卵黄抗体,为大规模制备PLA2卵黄抗体作为饲料添加剂提供参考。【方法】提取鸡胰脏总RNA,利用RT-PCR方法获得鸡PLA2基因,将其克隆至pGEX-4T-1原核表达载体中,构建表达载体pGEX-4T-1-PLA2,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达GST-PLA2融合蛋白。将GST-PLA2融合蛋白免疫青年蛋鸡,每次0.3mg/只,共免疫4次,收集鸡蛋,提取卵黄抗体,采用West-ern Blotting检测抗体的特异性。【结果】成功克隆出了鸡PLA2基因,构建了pGEX-4T-1-PLA2原核表达载体,并诱导表达了分子质量为44.59ku的GST-PLA2融合蛋白。GST-PLA2融合蛋白免疫蛋鸡后获得了卵黄抗体,经West-ern Blotting检查,制备的卵黄抗体具有很好的特异性。【结论】构建了表达鸡PLA2基因的表达系统,并成功的制备了抗鸡PLA2的卵黄抗体。 展开更多
关键词 PLA2基因 原核表达 卵黄抗体
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抗嗜水气单胞菌卵黄抗体的制备及保护效果 被引量:2
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作者 曹军 常燕 +3 位作者 徐晓梅 于海燕 庄晓亮 刘冬琴 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第6期1443-1446,共4页
从发病的暗纹东方鲀体内分离、鉴定了一株致病性嗜水气单胞菌,测定其毒力,命名为NT-1。以NT-1为抗原,免疫28周龄的罗曼蛋鸡,用水稀释脱脂处理,聚乙二醇(PEG)一步法制备高效价的卵黄抗体,微量凝集试验、ELISA检测其效价及特异性;不同浓... 从发病的暗纹东方鲀体内分离、鉴定了一株致病性嗜水气单胞菌,测定其毒力,命名为NT-1。以NT-1为抗原,免疫28周龄的罗曼蛋鸡,用水稀释脱脂处理,聚乙二醇(PEG)一步法制备高效价的卵黄抗体,微量凝集试验、ELISA检测其效价及特异性;不同浓度卵黄抗体的粗提液与NT-1菌液混合注射ICR小鼠,检测特异性卵黄抗体的抑菌效果。结果表明,微量凝集试验测得的特异性抗体效价达1∶16以上,ELISA效价达1∶12 800以上;高效价、特异性的卵黄抗体可维持90 d,特异性卵黄抗体ELISA效价达1∶640时对感染NT-1的ICR小鼠的保护率达到了100%。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 卵黄抗体 保护率
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