知母宁对豚鼠哮喘的预防作用及对体内一氧化氮和内皮素的影响

目的：观察知母宁对豚鼠哮喘发作的预防作用并探讨部分机制。方法：将６７只豚鼠随机分为：正常对照组；哮喘组；知母宁组；地塞米松组及知母宁＋地塞米松组。观察肺／体重比值；诱喘时间；哮喘持续时间；血清及肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中一氧化氮（ＮＯ）和内皮素１（ＥＴ１）水平的变化。结果：①知母宁组豚鼠诱喘时间及哮喘持续时间均较哮喘组明显延长；抽搐发生率明显低于哮喘组；肺组织炎性反应明显减轻，与地塞米松组接近。②知母宁组血清ＮＯ及ＢＡＬＦ中ＥＴ１水平均较哮喘组显著下降，也与地塞米松组相似。结论：知母宁有与肾上腺糖皮质激素相似的预防哮喘发作的作用。

知母宁对老化红细胞CR_1活性及脂质过氧化物水平的影响

观察不同浓度的知母宁（Ｃｈｉｍｏｎｉｎ）温育后的老化红细胞免疫指标和过氧化脂质（ＬＰＯ）水平的改变，发现５、１５μｇ知母宁时，ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ、ＲＢＣ－ＩＣＲ、ＲＢＣ－ＣａＲ有上升的趋势但和对照组相比无明显的差异（Ｐ＞０．０５），而５０、１００μｇ浓度时ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ、ＲＢＣ－ＩＣＲ、ＲＢＣ－ＣａＲ和对照组相比有明显的升高（Ｐ＜０．０１）。知母宁５、１５、５０、１００μｇ温育后的老化红细胞ＬＰＯ含量的改变，以知母宁５０、１００μｇ浓度时ＬＰＯ水平明显降低，和对照组相比差异有显著意义（Ｐ＜０．０５）。提示一定剂量知母宁提高红细胞ＣＲ１活性，可能与抑制脂质过氧化反应有关。

知母宁对慢性低O_2高CO_2大鼠肺动脉高压的影响及其机制研究

目的 :研究知母宁对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压的抑制作用及其作用机制。方法 :将SD大鼠分为正常对照组 ,4周低O2 高CO2 组 ,4周低O2 高CO2+知母宁组 (知母宁组 )。用透射电镜、图像分析、免疫组化、组织原位杂交技术等方法 ,观察各组大鼠肺动脉平均压 (mPAP)、颈动脉平均压 (mCAP)、肺细小动脉显微和超微结构、血CO浓度、血红素氧合酶 1(HO 1)及其基因表达的变化。结果 :①低O2 高CO2 组mPAP比正常组显著增高 ,知母宁组mPAP比低O2 高CO2 组显著降低 ;3组间mCAP比较差异无显著性。②全血CO浓度低O2 高CO2 组比正常组显著增高 ,知母宁组比低O2 高CO2 组增高。③光镜下低O2 高CO2 组与正常组相比 ,肺细小动脉管壁面积 管总面积、肺细小动脉中膜平滑肌细胞核密度、肺细小动脉中膜厚度均显著升高 ,知母宁组与低O2 高CO2 组相比以上指标显著降低。④电镜下知母宁组肺细小动脉中膜平滑肌细胞增生、面积增大、染色质增多、外膜胶原纤维增生均较低O2高CO2 组明显减轻。⑤免疫组化、原位杂交发现低O2 高CO2 组大鼠肺细小动脉HO 1及mRNA与正常组比较均明显增加 ,知母宁组大鼠肺细小动脉HO 1及mRNA表达均较低O2 高CO2 组为高。结论 :知母宁有抑制慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压和肺血管结构重建的作用 ,上?

知母宁对慢性低氧高二氧化碳大鼠肺小动脉胶原代谢的影响

目的:研究知母宁对慢性低O2高CO2大鼠肺小动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原代谢的影响,并探讨其可能机制。方法:将SD大鼠36只随机分为正常对照组,4周低O2高CO2组,4周低O2高CO2+知母宁组。采用图像分析、氯胺T法、免疫组化、组织原位杂交技术等方法,监测各组大鼠肺动脉平均压(mPAP)、颈动脉平均压(mCAP)、肺细小动脉显微和超微结构、血CO浓度,血清及肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)活性,肺组织羟脯氨酸含量,肺小动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原及其基因表达的变化。结果:低O2高CO2组mPAP升高,肺细小动脉管壁增厚,管腔变小,中膜平滑肌细胞和外膜胶原纤维增生,肺血管重建形成,肺匀浆羟脯氨酸含量升高,肺小动脉Ⅰ型胶原及其mRNA表达增加;知母宁组上述变化均明显减轻(P均<0.01)。此外,低O2高CO2组全血CO含量、血浆及肺组织匀浆HO-1活性升高,知母宁组上述指标较低O2高CO2组进一步升高(P均<0.01)。三组间mCAP,Ⅲ型胶原及其mRNA表达无显著差异(P>0.05)。结论:知母宁降低慢性低O2高CO2性肺动脉高压,减轻肺血管结构重建与其抑制肺动脉Ⅰ型胶原增殖有关,上调内源性CO/HO体系的表达为其可能重要机制。

知母宁对低氧高二氧化碳大鼠TXA_2,PGI_2及肺动脉高压的影响

目的：研究知母宁对慢性低氧高二氧化碳大鼠血栓素A2（TXA2）、前列环素（PGI2）、肺动脉压力及肺血管结构重建的影响。方法：36只SD大鼠随机分为正常对照组，肺动脉高压模型组和知母宁组，每组12只。后2组大鼠每天在低氧（8．5％～11％）高CO2（5．5％～6．5％）环境中放置8h，每周6d，连续4周。知母宁组大鼠每次缺O2前0．5h腹腔内注射知母宁3．3mg·kg^-1末次给药后次日，测定血浆TXA，和PGl2的稳定的代谢产物TXB2和6-keto—PGF1α的浓度，测定肺动脉平均压（mPAP），并观察肺细小动脉显微结构。结果：知母宁组mPAP显著低于模型组（P〈0．01），肺细小动脉显微结构改变较模型组也显著降低（P〈0．01）.知母宁组血浆TXB2和TXB2／6-keto—PGF1α比值均显著低于模型组（P〈0．01），但6-ket0-PGF1α含量则无显著改变（P〉0．05）。结论：知母宁对低氧高二氧化碳致肺动脉高压大鼠具有明显的保护作用，其作用机制可能与抑制TXA2合成、减轻TXA2／PGI2的平衡失调有关。

知母宁对慢性低O_2高CO_2大鼠肺小动脉结构型和诱导型NOS基因表达的影响

目的：研究知母宁对慢性低O_2高CO_2大鼠肺小动脉结构型一氧化氮合酶(cNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达的影响，进而了解其对肺动脉高压的防治机制。方法：将SD大鼠分为正常对照组、低O_2高CO_2组、知母宁组。采用图像分析、免疫组化、组织原位杂交、酶动力学等方法，测定各组大鼠动脉血、肺组织NO含量、NOS活性、肺细小动脉iNOS、cNOS及其基因表达的变化。结果：(1)低O_2高CO_2组mPAP、RV／(LV+S)显著高于其他组(P＜0．01)，3组间mCAP比较差异无显著性；(2)血、肺组织匀浆NO含量低O_2高CO_2组显著低于正常对照组，知母宁组显著高于低O_2高CO_2组(P＜0．01)；(3)低O_2高CO_2组血浆及肺组织匀浆cNOS活性显著低于正常对照组(P＜0．01)，iNOS活性均显著高于正常对照组(P＜0．01)；知母宁组大鼠血浆及肺组织匀浆cNOS活性均显著高于低O_2高CO_2组(P＜0．01)，血浆iNOS活性无明显差异，肺组织匀浆iNOS活性略高于低O_2高CO_2组(P＜0．05)；(4)低O_2高CO_2组肺细小动脉iNOS及其mRNA表达显著高于正常对照组(P＜0．01)，cNOS及其mRNA表达显著低于正常对照组(P＜0．01)，知母宁组大鼠肺细小动脉iNOS、cNOS及其mRNA表达均显著高于低O_2高CO_2组(P＜0．01)。(5)光、电镜下低O_2高CO_2组肺血管结构重建，知母宁组肺血管结构重建明显减轻。结论：知母宁能促进低O_2高CO_2大鼠肺小动脉iNOS及cNOS基因表达，上调NO／NOS 体系，使N0合成增多可能为其抑制慢性低O_2高CO_2肺动脉高压和肺血管结构重建的作用的重要作用机制之一。

知母宁对低密度脂蛋白氧化修饰的影响

以体外无细胞修饰系统 Cu^(2+)诱导的低密度脂蛋白(LDL)氧化修饰为模型,探讨了不同浓度知母宁对 Cu^(2+)诱导的 LDL 氧化修饰的影响。在 Cu^(2+)与 LDL 温育前加入知母宁能使 LDL 中硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)生成减少,荧光强度受到抑制,LDL 中维生素 E含量消失明显减缓,显示一定浓度的知母宁在24h 内对 LDL 的氧化修饰具有抑制作用,并呈现量效关系。与已知抗氧化剂维生素 E、维生素 C 比较,其抑制作用强度依次为维生素 E>知母宁>维生素 C,提示知母宁作为一种抗氧化剂,可抑制 LDL 的氧化修饰,可能对动脉粥样硬化的防治具有意义。

RP-HPLC法测定抗病毒口服液中芒果苷和连翘苷的含量

目的建立抗病毒口服液中芒果苷和连翘苷的含量测定方法,为抗病毒口服液质量标准的再提高提供依据。方法采用RP-HPLC法同时测定抗病毒口服液中芒果苷和连翘苷的含量。色谱柱:Kromasil RP-C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%醋酸(15∶85);流速0.80mL·min-1;检测波长:时间-波长程序(0→25min:258nm,25→30min:277nm);理论塔板数按芒果苷计算应不低于6000,按连翘苷计算应不低于5000。结果芒果苷线性范围48.8ng～1525ng,r=0.9994;连翘苷线性范围56ng～1750ng,r=0.9995。芒果苷、连翘苷的平均回收率分别为97.65%、99.21%。10批次样品中芒果苷的含量范围在14.40～20.41μg·mL-1,连翘苷的含量范围在28.70～36.01μg·mL-1。结论该测定方法具有操作简便、稳定、专属性强、可重复的特点,可用于抗病毒口服液的质量控制。

知母药材中芒果苷提取工艺研究

目的研究知母药材生产提取工艺,为生产中知母药材的提取提供参考依据。方法以水为提取溶剂,以知母药材长(厚)度、水用量、浸泡时间、回流时间等影响因素,以芒果苷提取率为指标进行正交试验。结果正交结果和方差分析表明用水加热回流提取芒果苷的最佳工艺条件为:知母药材切片厚度为0.5 cm,水用量为12倍,浸泡时间24 h,加热回流时间3 h。结论用优选的工艺进行3批放大生产的平均提取率为88.7%,说明此条件下提取工艺完全可行,可作为生产中知母药材提取的参考依据。

HPLC法同时测定利胆片中6个成分的含量

目的建立HPLC法同时测定利胆片中绿原酸、芒果苷、芍药苷、黄芩苷、木香烃内酯、去氢木香内酯6个成分的含量。方法选用Thermo C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1 mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长315 nm(绿原酸、芒果苷、黄芩苷)、230 nm(芍药苷、木香烃内酯、去氢木香内酯)。结果6个成分分离度良好,绿原酸、芒果苷、芍药苷、黄芩苷、木香烃内酯、去氢木香内酯进样量分别在0.0154~1.5446μg(r=1.000);0.0032~0.3176μg(r=0.9999);0.0258~1.8753μg(r=0.9991);0.0065~0.6517μg(r=0.9996);0.0180~4.4929μg(r=0.9999);0.0188~4.70μg(r=0.9995)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率(n=9)为96.47%~102.17%,RSD为1.01~1.93%。结论经方法学验证,本法可用于利胆片中的绿原酸、芒果苷、芍药苷、黄芩苷、木香烃内酯、去氢木香内酯含量测定。

HPLC波长切换技术同时测定知柏地黄丸(浓缩丸)中莫诺苷、芒果苷、马钱苷和丹皮酚的含量

目的：建立HPLC法同时测定知柏地黄丸（浓缩丸）中莫诺苷、芒果苷、马钱苷、丹皮酚的含量。方法：采用Phenomenex C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈（A）-0.3%磷酸溶液（B）为流动相,梯度洗脱（0-5 min,5%A→7%A;5-26min,7%A;26-45 min,7%A→20%A;45-55 min,20%A→60%A;55-65 min,60%A）,流速1 m L·min^-1,柱温40℃,波长切换（0-45 min,在240 nm波长下检测莫诺苷、芒果苷和马钱苷;46-65 min,在274 nm波长下检测丹皮酚）。结果：莫诺苷、芒果苷、马钱苷和丹皮酚的线性范围分别为0.055 5-1.11μg（r=0.999 9）、0.040 2-0.804μg（r=0.999 9）、0.076 4-1.528μg（r=0.999 9）、0.098 2-1.964μg（r=0.999 9）;平均回收率（n=6）分别为103.9%、102.0%、101.5%、102.2%,RSD分别为1.3%、1.3%、1.6%、0.82%。含量测定结果分别为1.117-1.501、0.375-0.447、1.083-1.562、2.306-2.857 mg·g^-1。结论：该方法操作稳定准确,重复性好,可用于知柏地黄丸（浓缩丸）的质量控制。

知母宁对低氧高二氧化碳肺心病大鼠心肌、肝组织丙二醛和SOD含量的影响

目的:观察知母宁对慢性低O2高CO2肺心病大鼠心肌及肝脏组织超氧化物歧化酶(superox-ide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的影响。方法:将SD大鼠分为正常对照组、4周低O2高CO2组(模型组)、4周低O2高CO2+知母宁组(知母宁组);制备慢性低O2高CO2肺心病大鼠模型,观察各组心肌、肝组织病理学改变;测定心肌、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果:光镜下模型组大鼠心肌损伤、肝组织脂肪变性明显,知母宁组上述改变不明显;模型组大鼠肝组织MDA较正常组显著升高,而SOD显著下降,知母宁组大鼠肝组织MDA较模型组显著降低,而SOD显著升高;模型组大鼠心肌组织MDA较正常组显著升高,而SOD显著下降,知母宁组大鼠心肌组织MDA较模型组显著降低,而SOD显著升高。结论:慢性低O2高CO2肺动脉高压状态下大鼠心肌、肝脏组织脂质过氧化增加,知母宁能减轻慢性低O2高CO2大鼠心肌、肝脏组织脂质过氧化作用。