司氟沙星CHL细胞体外染色体畸变试验

目的:检测司氟沙星对CHL细胞染色体致畸变作用。方法:用体外方法检测司氟沙星在23.63～189.00μg·mL^(-1)浓度范围内,代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)CHL 细胞的染色体畸变率。结果:司氟沙星的代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)的染色体畸变率均低干5%。结论:司氟沙星对CHL 细胞染色体畸变实验结果为阴性。

SO_2致CHL细胞氧化损伤及VC保护作用

目的探讨二氧化硫(SO2)对哺乳类细胞的毒性作用及其防护。方法以SO2体内衍生物-亚硫酸盐和亚硫酸氢盐(分子比为3∶1)及抗坏血酸(维生素C,VC)单独或同时处理中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL),并分别测定过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及脂质过氧化(LPO)水平。结果(1)SO2体内衍生物单独处理后,CAT活性在12,24 h时显著降低;36 h时,除5 mmol/L组外,其余各组均极显著降低;48 h时15,20 mmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。除12 h时的5 mmol/L组外,其余各组LPO水平在处理12,24 h时均明显升高。(2)VC单独处理后,各组CAT活性只在12 h时显著升高,同时LPO水平降低,但是只有0.10,0.25 mmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)0.1 mmol/L VC和不同剂量SO2衍生物共同处理后,CAT活性仍然呈下降趋势,但加添VC的组CAT活性普遍高于相应的未加VC组,且培养12 h的5,10 mmol/L组及24 h的10,15mmol/L组与未添加VC组比较,差异有统计学意义(P<0.05);VC也降低了SO2衍生物引起的LPO水平。(4)在CHL细胞中未检测到SOD。结论SO2体内衍生物可以使CHL细胞中CAT活性降低、LPO水平增高,且VC可起到一定防护作用。

采用体外微核试验检测某电子烟液的遗传毒性

目的:根据《OECD 487化学品测试方法 体外哺乳动物细胞微核试验》进行试验,检测某电子烟液诱发体外培养的哺乳动物细胞微核形成的能力,以评价其是否属于致突变物。方法:本研究的受试物终浓度分别为1.25、2.50和5.00μL/mL。同时设立溶剂对照组和阳性对照组。试验组和对照组均设2个平行样。在有代谢活化系统(+S9)和无代谢活化系统(-S9)条件下,使培养的中国仓鼠肺细胞(CHL)暴露于电子烟液中,分别染毒4和24 h,收获细胞,低渗固定,经吖啶橙染色后,于荧光显微镜下观察。每个剂量组选2 000个双核细胞进行分析,统计各组细胞微核率。结果:电子烟液在1.25、2.50和5.00μL/mL剂量下,无代谢活化系统短时处理组(4 h,-S9)细胞微核率分别为2.50‰、1.50‰及1.50‰,有代谢活化系统短时处理组(4 h,+S9)细胞微核率分别为1.50‰、2.00‰及1.00‰,无代谢活化系统连续处理组(24 h,-S9)细胞微核率分别为1.50‰、1.00‰及1.00‰,与溶剂对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在本实验条件下,该电子烟液在1.25~5μL/mL浓度范围内,对CHL细胞无致突变作用。

八氯二丙醚对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

目的 研究八氯二丙醚 (S2 )对中国仓鼠肺细胞 (CHL)染色体畸变作用。方法 测定S2 对CHL细胞的半数抑制浓度 (IC50 ) ,根据IC50 设立不同剂量组 ,进行正式试验 ,分别观察 2 4h ,4 8h及加S9后的染色体畸变情况 ,根据标准进行结果判定。结果 染毒 2 4h为可疑阳性反应 ,染毒 4 8h以及加入活化系统染毒 6h为阳性反应。结论 S2 可引起CHL细胞染色体产生畸变作用。

甲醛、三氯乙烯、三氯化铝的细胞联合毒作用

目的 研究甲醛、三氯乙烯和三氯化铝的联合毒作用类型。方法 噻唑蓝法 (MTT)测定 3种物质各自的半数生长抑制浓度 (IC50 )及混合物 (甲醛、三氯化铝、三氯乙烯 )的IC50 ,根据Finney数学模型和Logistic回归方法判断联合作用类型。结果 甲醛、三氯乙烯、三氯化铝及其混合物质的IC50 分别为 0 . 0 2 2 6 ,0 . 36 8,0 . 5 89和0 . 12 4mg/ml,据Finney法求得Q值为 1 .0 8,Logisitc回归模型参数 β4差异无统计学意义。结论 甲醛、三氯化铝、三氯乙烯 (6∶11∶33)混合染毒 ,对中国仓鼠肺细胞的联合毒性表现为相加作用。

二氧化硫体内衍生物诱发中国仓鼠肺细胞微核的效应

目的 为了解二氧化硫 (SO2 )对哺乳类细胞的遗传毒理效应。方法 以 SO2 在体内的衍生物——亚硫酸氢钠和亚硫酸钠处理培养的中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL) ,并对其诱发微核 (MN)形成的作用进行了分析。结果 对照盐水组和 1、2、5、10 mmol/ L 的 SO2 衍生物处理组 CHL的 MN率 (‰ )分别为 8.17、9.83、10 .33、12 .83、13.33及 14.17,从2 mmol/ L的 SO2 衍生物处理组开始与对照组差异有显著性 ,且呈剂量依赖关系。无论是否有 S9混合物存在 ,SO2 衍生物均可诱发 CHL 的 MN率显著增高 ,且 SO2 衍生物处理细胞时间愈长 ,引起细胞遗传损伤所需的最低浓度就愈低。结论 SO2 是不需要体内酶促转化的直接的细胞染色体断裂剂和基因毒性因子。同时也启示 ,长期接触环境低浓度 SO2 污染 ,有引起人体细胞遗传物质损伤的潜在危险。

纳米银对中国仓鼠肺成纤维细胞的细胞毒性和遗传毒性

目的:研究纳米银对中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)的细胞毒性和遗传毒性并探讨其作用机制。方法:以梯度浓度(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0μg/m L)纳米银染毒CHL细胞,MTT比色法计算IC5 0以评估纳米银的细胞毒性水平。利用PI染色分析细胞周期变化并计算细胞增殖指数;Annexin V-FITC和PI双染检测细胞凋亡和坏死发生率,同时观察细胞染毒后的形态变化,记录前向角散射(FSC)和侧向角散射(SSC)信号;Giemsa染色中期分裂相涂片分析染色体畸变发生率。结果:纳米银毒性水平与纳米银浓度呈正相关(r=0.804,P<0.05),IC 50为21.68μg/m L。22.0μg/m L纳米银与CHL细胞接触24 h后,细胞形态发生明显改变;细胞群SSC信号显著增强,为细胞摄入纳米银提供间接证据;细胞周期在G2/M期被捕获,对G0/G1期、S期以及细胞增殖指数变化情况影响显著(P<0.01);22.0μg/m L纳米银染毒CHL 24 h后凋亡发生率与对照组差异明显(P<0.01);各浓度纳米银诱导染色体结构畸变率均大于5%(P<0.01),中高浓度四倍体发生率达到溶剂对照组的10倍以上(P<0.01)。结论:纳米银对CHL细胞有显著的细胞毒性和遗传毒性,线粒体功能受损、细胞凋亡在纳米银的细胞毒性和遗传毒性中起到重要作用。

葛根对中国仓鼠肺细胞的毒性作用

目的:观察葛根对中国仓鼠肺细胞(CHL)形态学、细胞增殖活性及细胞相对存活率的影响。方法:以葛根为受试物,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的葛根在不同作用时间对CHL相对存活率的影响。结果:不同浓度的葛根(12.50、50.00、100.00、200.00和400.00 mg.L-1)作用一定时间后,CHL存活率下降,细胞增殖明显受到抑制并出现细胞脱落,呈现出时间-剂量效应关系。接触受试物48 h后,细胞生长半数抑制浓度(IC50)为282.00 mg.L-1。结论:葛根可以抑制CHL生长,降低线粒体代谢活性。

亚硝酸钠对中国仓鼠肺细胞染色体畸变率的影响

[目的]研究亚硝酸钠(NaNO2)致中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变的作用。[方法]测定NaNO2对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式实验,分别观察不加及加S9后的染色体畸变情况,根据标准进行结果判定。[结果]NaNO2染毒在不加S9时,128、12.8和1.28μg/ml3个剂量组的染色体畸变率均﹥5%而≤10%,为可疑阳性,而高剂量组(1.28mg/ml)畸变率﹥10%而﹤20%,为阳性反应。NaNO2染毒在加入活化系统S9后,各剂量组引起CHL细胞染色体畸变率在12.8和1.28μg/ml2个剂量组的染色体畸变率均﹥5%而≤10%,为可疑阳性,而中(128μg/ml)和高(1.28mg/ml)剂量组畸变率均﹥10%而﹤20%,为阳性反应。[结论]NaNO2在1.28mg/ml剂量下可引起CHL细胞染色体畸变率增高。

高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

目的研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定。结果染毒6 h,24 h及加S9后染毒6h染色体畸变为阴性。结论高纯度大豆卵磷脂不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用。

彗星试验检测雄黄对中国仓鼠肺细胞DNA的损伤作用

目的检测含砷中药雄黄对中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)DNA的损伤作用。方法测定雄黄对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行彗星试验,观察并比较不同组别不同损伤等级细胞数的差异。结果给药干预后,各剂量组及阳性对照组DNA损伤细胞数明显增加,且各剂量组随着给药浓度的增加,Ⅲ、Ⅳ级(中、重度)损伤细胞数增多。结论中药雄黄可引起CHL细胞DNA损伤。

纤蛇纹石石棉及代用纤维粉尘的光谱研究与噻唑蓝(MTT)比色法分析

以纤蛇纹石石棉、陶瓷纤维、玻璃纤维、岩棉、硅灰石为受试物,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测染毒72h后V79细胞的存活率,并通过吉姆萨染色观察细胞形态学上的变化。不同浓度ρ/(μg.ml-1)的矿物粉尘(100,200,400,600,800,1000)作用72h后,V79存活率下降,细胞增殖明显受到抑制并出现大量细胞衰亡,呈现出剂量效应关系,且细胞毒性大小为玻璃纤维>纤蛇纹石石棉>陶瓷纤维>硅灰石>岩棉;形态学观察发现染毒细胞出现空泡、肿胀、裸核、黑褐色颗粒以及胞浆胞核模糊、形态变化等现象,且不同的粉尘对V79细胞的影响不同。总体而言,岩棉是五种粉尘中毒性最低的石棉代用纤维。

白芍总甙致突变研究

以鼠伤寒沙门氏菌Ames试验,中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变试验和ICR小鼠骨髓微核试临,检验白芍总甙的遗传毒性。药物浓度为每皿1～10000μg时Ames试验无论代谢活化与否结果均为阴性。药物在12.3～111.1μg/ml时对CHL细胞呈现可疑染色体畸变;加入代谢活化系统,高至333.3μg/mlCHL细胞的染色体畸变率仍在正常范围内。微核试验结果阴性。

镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞毒性作用的实验研究

目的 观察镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞 (CHL)的毒性作用。方法 以我国某镍冶炼厂电炉烟道尘为受试物 ,采用噻唑蓝 (MTT)比色法检测CHL细胞活性。结果 不同浓度下的镍冶炼烟尘 ( 6 2 5、 12 5 0、 2 5 0 0、 5 0 0 0、10 0 0 0 μg/ml)作用一定时间后 ,CHL细胞存活率下降 ,呈现出时间 剂量 反应关系。接触受试物 3 6h ,细胞生长半数抑制浓度IC50 为 2 1 3 6μg/ml。同时镜下观察细胞形态也发生改变。 结论 镍冶炼烟尘可以抑制CHL细胞生长 。

甲基丙烯酸环氧丙酯的遗传毒性评价

目的:观察甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱发体外培养的中国仓鼠肺细胞(V79)微核发生变化情况,对其遗传毒性进行评价。方法:分别采用不同浓度(2.25、4.5、9.0、18.0、36.0μg/mL)的GMA染毒V79细胞,设置空白对照组和DMSO溶剂对照组,其中染毒3 h处理组分别在加和不加体外活化系统(S9)条件下进行,染毒24 h处理组在不加S9条件下进行。分别计算细胞复制指数和微核细胞率。结果:GMA的浓度在2.25~36.0μg/mL范围内,无S9的条件下,与空白对照组和DMSO溶剂对照组相比,GMA染毒3和24 h组的V79细胞复制指数均无明显变化,但微核细胞率明显升高,并呈浓度-效应关系;在有S9的条件下染毒3 h,各剂量组的GMA诱发微核细胞率的差异均无统计学意义。结论:在2.25~36.0μg/mL浓度范围,GMA可致V79细胞的微核率升高,表明GMA可诱发遗传物质损伤,具有遗传毒性。

利用中国仓鼠肺细胞体外微核试验评价三七提取液的遗传毒性

目的:评价传统中药三七提取液的遗传毒性.方法:采用体外胞质分裂阻断微核法检测三七提取液在加与不加代谢活化系统S9的两种条件下对中国仓鼠肺细胞微核率的影响,三七提取液的制备采用乙醇反复浸提法.根据中性红摄取法细胞毒性测定试验的结果,微核试验设3个三七染毒浓度组(0.625、1.250、2.500 mg/mL)、阳性对照组(+S9条件下为20μg/mL环磷酰胺,-S9条件下为1μg/mL丝裂霉素C)和阴性对照组(MEM培养基).结果:三七提取液2.500 mg/mL浓度组,中性红摄取法细胞毒性测定试验中,吸光度值较阴性对照组显著降低(P<0.05),细胞存活率为80.3%;三七提取液0.625、1.250、2.500 mg/mL浓度组CHL细胞的微核率,在+S9条件下分别为17‰、16‰、16‰,在-S9条件下分别为17‰、15‰、16‰.与阴性对照组(+S916‰、-S915‰)比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:在本研究条件下,体外微核试验结果表明,三七提取液不具有遗传毒性.

地红霉素对中国仓鼠肺细胞体外染色体畸变的影响

目的:检测地红霉素对中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)染色体致畸变的影响。方法:用体外方法检测地红霉素在12.50～50.0μg·mL^(-1)浓度范围内,代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)CHL细胞的染色体畸变率。结果:地红霉素的代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)的染色体畸变率均低于3%。结论:地红霉素对CHL细胞染色体畸变实验结果为阴性。

苯并芘体外诱发中国仓鼠肺细胞（V＿（79））转化的研究

本文用苯并芘［Ｂ（ａ）Ｐ］在体外转化中国仓鼠肺细胞（Ｖ７９）在一定剂量范围内，转化灶数与苯并芘剂量呈正相关，在苯并芘０．５μｇ／ｍｌ时，达最高值２５．６７±４．５１灶／１０４细胞。在细胞发生形态转化的同时，细胞性质发生恶性变，能在软琼脂中生长。本模型方法简便、快速、条件易于控制，可作为体外肺癌研究的一个较理想模型。

灭螺增效剂B002致突变的实验研究

本文进行了灭螺增效剂B002的Ames试验、微核试验、染色体畸变试验。实验结果表明，对TA97、TA98、TA100和TA102无诱变作用，微核试验及中国仓鼠肺细胞（CHL）染色体畸变试验均为阴性。

邻氨基苯甲醚对中国仓鼠肺细胞毒性作用的实验研究

目的 观察邻氨基苯甲醚对中国仓鼠肺细胞 (Chinesehamsterlungcells ,CHL)的毒性作用。方法 噻唑蓝 (MTT)比色法。结果 不同浓度的邻氨基苯甲醚 (6 86 ,13 71,2 7 4 3,5 4 85 ,10 9 70 μg/ml 培养液 )处理一定时间后 ,细胞存活率均下降 ,呈现出时间 -剂量 -反应关系 ,同时显微镜观察 ,细胞形态发生改变。结论 邻氨基苯甲醚可以抑制CHL细胞生长 ,降低线粒体代谢活性。