赤芍配方颗粒与饮片对急性血瘀大鼠抗凝功能药理等效性研究

目的 探讨赤芍配方颗粒与赤芍饮片对急性血瘀大鼠抗凝功能的药理等效性。方法 大鼠灌胃给药不同剂量赤芍配方颗粒及同批次饮片煎液,复制急性血瘀模型后检测APTT、PT、TT,计算其抑制率并进行主成分分析。根据抑制率主成分建立曲线回归模型,确定合适的量效回归方程。比较两药等效应剂量及等剂量效应,分析两药的药理等效性。结果 模型组大鼠APTT、PT及TT均较空白组显著下降(P<0.01或P<0.05)。赤芍配方颗粒各剂量组APTT均较模型组显著升高(P<0.01或P<0.05);赤芍饮片2~8倍剂量组APTT较模型组显著升高(P<0.01或P<0.05)。赤芍配方颗粒及饮片8倍剂量组PT较模型组显著升高(P<0.05)。赤芍配方颗粒8倍剂量组TT较模型组显著升高(P<0.01)。根据剂量-效应进行曲线拟合后选择最合适的量效曲线方程,根据方程计算等效应剂量及等剂量效应,回归方程分别为:赤芍配方颗粒(g生药·kg^(-1))=0.382 1×DEE赤芍饮片(g生药·kg^(-1))+0.160 1及EED赤芍配方颗粒(%)=-0.029 8×EED赤芍饮片2(%)+3.894 5×EED赤芍饮片(%)-52.38。结论 在对应的效应范围内,1 g生药·kg^(-1)赤芍饮片对急性血瘀大鼠抗凝主成分抑制率效价约相当于0.382 1 g生药·kg^(-1)的赤芍配方颗粒,同剂量赤芍配方颗粒对急性血瘀大鼠抗凝主成分抑制率大于赤芍饮片。

基于网络药理学和分子对接研究桃仁-红花-赤芍治疗中风后失眠的作用机制

目的:研究“桃仁-红花-赤芍”治疗中风后失眠的作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选桃仁-红花-赤芍的有效活性成分,使用PubChem数据库查询各成分的SMILE结构,通过SwissTargetPrediction进行靶点预测,利用GeneCards数据库收集中风后失眠相关靶点基因,使用Venny 2.1软件预测桃仁-红花-赤芍和中风后失眠的交集靶点。采用Cytoscape 3.9.1软件和STRING数据库进行“药物-活性成分-靶点”网络和蛋白质-蛋白质相互作用网络的构建与分析。利用Metascape在线分析工具对交集靶点进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,并借助微生信作图网站展现分析结果。借助AutoDock软件将药物中的关键成分与核心靶点进行对接,并将结果通过PyMOL软件进行可视化。结果:获得桃仁-红花-赤芍靶点585个、中风后失眠靶点2204个,交集靶点有221个;主要活性成分为黄芩素、β-谷甾醇、木脂素等;核心靶点为Src蛋白(Src protein,SRC)、丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)1、MAPK3等。GO分析条目共2832个,KEGG富集到202条通路。根据KEGG分析,预测药物主要通过癌症、癌症中蛋白多糖、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(Phosphatidylinositol 3 Kinase-Protein Kinase B,PI3K-Akt)、MAPK等信号通路发挥治疗作用。分子对接结果显示药物主要活性成分与核心靶点都有较好的结合亲和力。结论:桃仁-红花-赤芍可通过多成分、多靶点、多通路治疗中风后失眠,为治疗中风后失眠的作用机制提供了参考依据。

基于网络药理学研究川芎-赤芍治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病心绞痛的作用机制

目的:通过网络药理学理念和技术研究川芎-赤芍药对治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)心绞痛的主要活性成分、靶点及生物学过程和通路。方法:通过TCMSP数据库检索出川芎和赤芍的主要活性成分、靶点信息,再通过GeneCards、OMIM、TTD数据库获取冠心病心绞痛的相关靶点信息,继而得到川芎-赤芍与冠心病心绞痛的交集靶点,采用Cytoscape 3.10.0软件构建中药-成分-靶点-疾病靶点网络,将获取的交集靶点信息通过STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,筛选出核心靶点。利用David数据库对交集靶点进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:从川芎和赤芍中共筛选得到36个主要活性成分,其中川芎7个、赤芍29个,相关作用靶点共166个,筛选去重后得到76个,冠心病心绞痛的相关作用靶点共1213个,川芎和赤芍与冠心病心绞痛交集靶点共35个,核心靶点18个。GO功能富集分析结果显示主要涉及对外源刺激的反应、凋亡过程的负调控、细胞外区域、质膜、酶绑定、相同蛋白结合等生物过程,KEGG通路富集分析结果显示主要涉及癌症通路、流体剪切力与动脉粥样硬化、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、癌症中的蛋白聚糖类、化学致癌作用-受体活化、血脂与动脉粥样硬化等信号通路。结论:本研究初步揭示了川芎-赤芍药对治疗冠心病心绞痛疾病的主要活性成分、靶点、生物学过程和通路,为进一步研究其药理学作用及临床应用提供参考依据。

Effect of Chishao Chengqi Decoction (赤芍承气汤) on Endotoxin and TNF-α in Patients with Severe Hepatic Diseases

Objective: To observe the effect of Chishao Chengqi decoction (CCD ) in treating severe hepatopathy and its influence on serum endotoxin(ET) and tu mor necrosis factor α (TNF-α), in order to explore the possible mechanism o f CCD in protecting liver cells and in preventing liver failure.Methods: Sixty patients suffering from hepatopathy were divided into the treated group and control group randomly, 30 in each group. They were treated with comprehensive treatment, including hepatocyte growth-promoting factors, thymosin, Transmetil and albumin. CCD was given to the treated group ad ditionally. The therapeutic effects were observed and the changes of some bioch emical criteria, including alanine transaminase (ALT), aspartate aminotransferas e (AST), total bilirubin (TB), albumin (ALB) as well as such parameters as proth rombin activity (PTA), serum levels of ET and TNF-α were all detected respec tively before treatment and after treatment.Results: In the treated group, 8 patients was clinically cured af ter treatment, 11 were markedly alleviated, 7 improved and 4 remained unchanged, while in the control group, the respective numbers were 5, 8, 8 and 9. The tota l effective rate of the treated group was significantly better than that of the control group by( P <0.05). ET and TNF-α levels in patients were signific antly higher than the normal range before treatment, and they were lowered after treatment. Comparison of the effect between the two groups showed significant d ifference ( P <0.05 ) , with that in the treated group better than that in t he control group.Conclusion: CCD decoction could reduce the production and releasi ng of ET and TNF-α in severe hepatopathy patients, which might be one of its therapeutic mechanisms.

基于网络药理学及分子对接技术探寻“延胡索-赤芍”治疗盆腔炎的作用机理研究

目的:采用网络药理学及分子对接的方法,研究延胡索-赤芍治疗盆腔炎的潜在性靶点及数据信号通路。方法:依靠TCMSP平台查找延胡索-赤芍口服OB≥30%和DL≥0.18的活性成分及作用靶点。根据OMIM、GeneCards等数据库检索盆腔炎有关病症靶点,获得延胡索-赤芍中相关成分的靶点和盆腔炎靶基因。选用cytoscape3.7.1软件构建数据可视化的“药品-活性成份-靶点-疾病”关联网络结构图,然后进行GO和KEGG通路富集通路分析,进一步对筛选得到靶点较多的活性成分和靶点进行分子对接。结果:挑选获得70种潜在的药效成分,219个化学物质靶点,3954个盆腔炎有关靶基因。二者取交集后得到疾病和药物活性成份100个相同靶点。GO作用富集分析获得74个GO内容;KEGG通路富集分析挑选出140条数据信号通路。分子对接显示β-谷甾醇、豆固醇、狮足草碱和PTGS2、PTGS1、RXRA等靶点有较强亲和能力。结论:延胡索-赤芍可能是通过PTGS2、PTGS1、RXRA、OPRM等关键靶点发挥多成分-多靶点-多通路盆腔炎的治疗作用。

Mechanism of total glucosides from Chishao(Radix Paeoniae Rubra)on proliferation and apoptosis of hepatocellular carcinoma cells via phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten/phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B signaling pathway

OBJECTIVE:To investigate the possible molecular mechanism of total glycosides of Chishao(Radix Paeoniae Rubra)(TG-RPR)on proliferation and apoptosis of hepatocellular carcinoma cells.METHODS:The proliferation of TG-RPR on Hep G2 cells was detected using the 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT)assay.The apoptosis of Hep G2 cells was measured by annexin V-FITC/double staining.The phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten(PTEN)/phosphatidylinositol 3-kinase(PI3 K)/protein kinase B(Akt)signaling pathway was evaluated by Western Blot and reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR).RESULTS:TG-RPR can up-regulation the expression of pro-apoptotic factors such as PTEN and BCL2-Associated X(Bax),down-regulation the expression of anti-apoptotic factors including B-cell lymphoma-2(Bcl-2),PI3 K,and Akt.CONCLUSION:TG-RPR significantly inhibits the proliferation of Hep G2 cells in a dose-dependent manner and promotes apoptosis.These results demonstrated TG-RPR has significant inhibitory effect on Hep G2 cells.These results identify a critical role of TG-RPR in proliferation and apoptosis of Hep G2 cells via modulating PTEN/PI3 K/Akt signaling pathway.TG-RPR may offer a promise as a potential pharmaceutical therapy for hepatocellular carcinoma.

赤芍-附片对慢加急性肝衰竭大鼠PI3K/AKT信号通路及相关炎症因子表达的影响

目的:探讨赤芍-附片对慢加急性肝衰竭(ACLF)大鼠的保护作用及其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法:48只SD大鼠随机分为空白组(6只)和ACLF造模组(42只)。ACLF造模组大鼠用牛血清白蛋白皮下及尾静脉注射联合腹腔注射D-氨基半乳糖+脂多糖制备ACLF大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组、阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组,各组大鼠予相应药物干预1周。检测肝功能、凝血酶原时间(PT),ELISA法检测肝组织白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),HE染色观察大鼠肝组织病理改变,Western blotting法检测肝组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT(Ser473)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR技术检测PI3K mRNA、AKT mRNA表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠肝组织出现肝细胞形态变化,呈融合性坏死、点状或灶状坏死,纤维组织增生,汇管区见大量炎症细胞浸润;与模型组比较,阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组大鼠肝组织肝细胞排列相对整齐,坏死程度改善,纤维组织减少,炎症细胞浸润减少。模型组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA、PT水平及肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于空白组(P<0.05),肝组织中p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量及PI3K mRNA、AKT mRNA相对表达量均低于空白组(P<0.05)。阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA、PT水平及肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于模型组(P<0.05),肝组织p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量及PI3K mRNA、AKT mRNA相对表达量均高于模型组(P<0.05);且赤芍-附片组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA、PT水平及肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于阳性组、赤芍组、附片组(P<0.05),肝组织p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量及PI3K mRNA、AKT mRNA相对表达量均高于阳性组、赤芍组、附片组(P<0.05);各组大鼠PI3K、AKT蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:赤芍-附片可能通过调节PI3K/AKT信号通路,下调相关炎症因子的表达,以减轻ACLF大鼠免疫炎症反应,从而发挥对肝脏的保护作用。

基于角药理论探讨补肺活血胶囊的组方特点

补肺活血胶囊由黄芪、赤芍和补骨脂3味中药组成,具有益气活血、补肺固肾等功效。角药作为中医一种特殊的方药模式,蕴含着多种配伍形式。通过角药理论分析补肺活血胶囊的方药结构,发现该方具有气血同调、升降相因、金水相生、攻补皆施、寒温并行和减毒配伍的组方特点,为研究该方的制方理论提供了新的思路。

红外光谱和聚类分析法无损快速鉴别赤芍

以赤芍的红外指纹图谱作为聚类分析的对象 ,在建立主成分模型的基础上 ,采用SIMCA聚类分析法对赤芍进行了快速的分类研究。结果表明 :由于野生与栽培赤芍的红外指纹图谱变异度较大 ,其光谱聚类的结果较理想 ,盲样检测的正确率可达 90 % ;由于不同产地的赤芍的红外指纹图谱变异度较小 ,进行聚类分析后用盲样检测 ,正确率为 75 % ,对于变异度较小的样品 ,若要提高识别的置信度 ,需增加样品的数目和采样的代表性。总之 ,红外指纹图谱与聚类分析法相结合可以快速鉴别药材的道地性。

HPLC测定复方赤芍颗粒中芍药苷含量

目的建立测定复方赤芍颗粒中芍药苷含量的高效液相色谱方法。方法采用WatersSymmetryShield—C-s色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以甲醇-水（30：70）为流动相，流速1．0mL／min，检测波长230nm，柱温为室温。结果芍药苷在0．266-5．32μg范围内线性关系良好，r=O．9999，平均回收率为98．00％，RSD=2．22％。结论该方法操作简便，快速易行，重复性好，结果准确可靠，可用于测定复方赤芍颗粒中芍药苷含量，以控制该制剂的质量。

赤芍承气汤治疗慢性重型肝炎近期疗效观察

目的 :观察赤芍承气汤对慢性重型肝炎的临床疗效 ,并探讨其疗效机制。方法 :70例慢性重型肝炎患者 ,随机分成治疗组及对照组。对照组给予常规西药综合治疗 ;治疗组在常规西药综合治疗的基础上 ,给予中药赤芍承气汤水煎剂 ,1剂 /d ,分 2次口服 ,疗程两周。治疗 4周后比较两组患者肝功能、凝血酶原时间 (PT)及凝血酶原活动度 (PTA)、肿瘤坏死因子 α (TNF α)、内毒素 (ET)和死亡率。结果 :赤芍承气汤可改善慢性重型肝炎患者肝功能 ,降低PT ,升高PTA (P均 <0 0 1) ;显著降低患者血清内毒素和TNF α水平 (P均 <0 0 1) ;降低死亡率 ,提高生存率 (P <0 0 5 )。结论 :赤芍承气汤可改善慢性重型肝炎患者的肝功能等生化指标 ,降低死亡率。其疗效机制可能是通过有效减少血清内毒素和TNF α等炎性细胞因子 ,减轻了“继发性肝损伤”的发生。

赤芍承气汤高位保留灌肠对肝衰竭患者肠道微生态失衡的影响

目的:观察赤芍承气汤高位保留灌肠对肝衰竭患者肠道菌群、血清内毒素水平的影响。方法:60例患者,随机分为2组,各30例。两组患者均采用保肝退黄支持等常规综合治疗,治疗组患者加用承气汤150ml高位保留灌肠,对照组患者采用乳果糖100ml保留灌肠。均2次/wk,连续治疗8周。观察两组患者治疗前后肝功能、凝血指标变化、肠道优势菌群定量、真菌感染及体力、食欲、腹胀、皮肤瘙痒等情况。结果:治疗后治疗组患者肝功能、凝血功能较对照组明显改善,其肠道有益菌亦较对照组明显增加,真菌感染明显减少。结论:赤芍承气汤高位保留灌肠可改善肝衰竭患者肝功能、凝血功能,增加肠道有益菌的生长,减少真菌感染。

多伦野生芍药中芍药苷含量动态变化

目的：探讨多伦野生芍药芍药苷含量动态变化。方法：定株、定时原产地多样本采样，用HPLC测定芍药苷含量，数据经统计分析。结果：5月（苗期）采集的多伦野生芍药芍药苷质量分数平均值最低（3．05％），8，9月（幼果期和果期）采集的含量较高（4．72％，4．58％）；6—10月平均含量之间没有显著差别。野生芍药个体差异很大，当根直径范围〈1mm（0．51—0．60cm）时，芍药苷含量变异系数可达47．17％。结论：野生芍药显蕾以后至枯萎前均可采挖，农闲采挖的现实情况是可行的。首次报告和提出野生芍药株间芍药苷含量差异很大，取样不当，植株个体差异可能影响芍药苷动态变化测定结果。

通里攻下法治疗重型肝炎的临床研究

目的观察中医通里攻下法治疗重型肝炎的临床疗效。方法将188例重型肝炎患者随机分为治疗组98例和对照组90例,对照组予常规西药综合治疗,治疗组在常规西药综合治疗的基础上,加服通里攻下中药赤芍承气汤,2次/d,200 m l/次,疗程为2周。结果两组患者临床疗效、病死率、肝功能、并发症间差别均有显著性意义(P<0.05)。结论中医通里攻下法治疗重型肝炎疗效确切,值得临床推广应用。

赤芍抗凝血作用的实验研究

赤芍注射液在体外能使兔血浆KPTT、PT和TT延长,作用随赤芍浓度的增加而增强,其抗凝血酶的活性约相当于2.0×10^(-3)单位肝素活性/mg赤芍。家兔静注赤芍3g/kg后,KPTT、PT和TT也显著延长,其维持最大药效一半的时间约为51分钟。赤芍的抗凝作用不依赖于ATⅢ,可能是对凝血酶发挥即时的直接抑制作用。

赤芍和川芎及其配伍对血淤模型大鼠血液流变学影响

为探讨赤芍和川芎及其配伍对血淤模型大鼠血液流变学的影响,试验选取大鼠50只,随机分为空白组、模型组、赤芍组、川芎组和川芎赤芍组,每组10只。除空白组外,其余4组给药结束后,均用盐酸肾上腺素制作大鼠血淤模型。随后检测了所有样品的全血黏度、血浆黏度和红细胞压积值等血液流变学指标。结果表明,同空白组比较,模型组各血液流变学指标明显升高;同模型组比较,赤芍、川芎单味药及1∶1赤芍川芎药均明显降低全血黏度、全血还原黏度、全血相对黏度、红细胞变形指数红和细胞聚集指数。赤芍、川芎和赤芍川芎配伍均对血淤模型大鼠具有明显活血化淤作用,川芎的作用略大于赤芍,赤芍川芎1∶1配伍没有表现出明显的协同作用。

中西医结合结肠透析治疗慢性重型肝炎的临床研究

目的:观察中西医结合结肠透析疗法对慢性重型肝炎的临床疗效。方法:78例重型肝炎患者随机分为治疗组36例与对照组42例;对照组给予常规护肝、对症和支持治疗,治疗组在给予对照组治疗的基础上加用结肠透析治疗,每3天1次,疗程为15天。结果:治疗组临床有效率63·88%,对照组47·73%;观察组疗效明显优于对照组(P<0·05)。结论:中西医结合结肠透析配合内科综合治疗重型肝炎疗效显著。

赤芍对兔颈动脉球囊损伤后血管紧张素Ⅱ激活的影响

目的 :观察赤芍对高脂喂养兔颈动脉球囊损伤后内膜增殖及血管紧张素Ⅱ (AgⅡ )激活的影响。方法 :家兔饲喂高脂饲料 ,赤芍组服用赤芍提取物 ,相当于生药 3 g/kg、2 g/kg或 1g/kg。于 6周末球囊损伤颈总动脉内膜建立再狭窄 (RS)模型 ,于 8周末取血放射免疫测定血浆AgⅡ ,取血管作血管张力测试 ,血管切片后形态学测定增生内膜面积 ,免疫组组织化学染色计算增殖细胞核指数。结果 :赤芍组血浆AgⅡ水平降低 ,血管对AgⅡ的收缩反应减弱 ,增生内膜面积、增生内膜面积 /中膜面积显著减少。 结论 :赤芍降低内膜增殖程度与抑制肾素 血管紧张素系统 (RAS)激活有关。

赤芍对球囊损伤术后血管内膜单核细胞趋化蛋白-1基因表达的影响

目的观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在高脂喂养兔颈动脉球囊损伤术后内膜增生中的机制,以及赤芍的干预作用。方法将40只新西兰大白兔随机分为对照组、模型组及赤芍高、中、低剂量组。对照组兔喂饲普通饲料;其余各组喂饲高脂饲料(93%普通饲料+2%胆固醇+5%猪油);赤芍组按赤芍提取物不同剂量给药:高剂量组相当于生药3g·kg-1·d-1,中剂量组相当于生药2g·kg-1·d-1,低剂量组相当于生药1g·kg-1·d-1。各组动物喂饲8周后行颈动脉球囊损伤术制备颈总动脉内膜再狭窄模型。于10周末取各组兔耳静脉血,测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白B(Apo-B)水平;取血后活杀动物,取损伤血管做冰冻切片,观察血管内膜增生情况,用原位杂交、免疫组化分析及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCP-1 mRNA表达。结果与模型组比较,赤芍各剂量组TC、TG、LDL-C、Apo-B均明显降低,HDL-C则明显升高(P<0.05或P<0.01);内膜增生面积、内膜增生/中膜面积比值显著减小,MCP-1mRNA表达均减少,其中以赤芍高、中剂量组最为显著(P<0.05或P<0.01)。结论赤芍可减轻兔颈动脉球囊损伤术后内膜增生程度,抑制血管壁MCP-1 mRNA表达。

大黄赤芍注射液对急性肝衰竭大鼠治疗作用及机制探讨

目的观察大黄赤芍注射液对肝衰竭大鼠炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]及抑制肝细胞凋亡因子[C-X3-C趋化因子配体1(CX3CL1)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(BCL-2)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)]表达变化的影响。方法将2月龄大鼠随机分为空白组,造模阳性对照组,大黄赤芍注射液低、中、高剂量组及促肝细胞生长素组。除空白组外,其余各组采用D-氨基半乳糖(D-Gal)800 mg/kg,脂多糖(LPS)8μg/kg腹腔注射,制造急性肝衰竭模型。造模前3 d至实验结束大黄赤芍注射液低、中、高剂量组分别以大黄赤芍注射液低、中、高剂量[0.25、0.5、0.75 mL/(100 g·d)]尾静脉注射给药(1次/d);空白组及造模阳性对照组均予0.9%氯化钠注射液1 mL/(100 g·d);促肝细胞生长素组参照文献给予促肝细胞生长素10 mL/(kg·d)。造模48 h后处死大鼠取肝组织病理标本,HE染色后在光镜下观察肝组织的病理改变,采用qPCR、Western Blot技术验证不同组间的TNF-α、IL-6、CX3CL1、BCL-2、CyclinD1是否存在表达差异。结果药物干预组可缓解肝组织病理损伤,同时降低了TNF-α、IL-6表达量,提高了CX3CL1、BCL-2、CyclinD1表达量,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论大黄赤芍注射液对肝衰竭的疗效作用机制可能与减轻炎性反应、抗肝细胞凋亡、促进肝细胞再生相关。