八肽胆囊收缩素对TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364 IL-6的作用及其可能的分子机制(英文)

目的:观察硫酸化八肽胆囊收缩素(sCCK -8)对TNF-α诱导大鼠滑膜细胞株RSC -364 IL-6mRNA表达及核因子NF-κB的影响及其可能的受体机制。方法:大鼠滑膜细胞株RSC -364经TNF-α(10μg/L)、sCCK-8(10-8-10-6mol/L)、CCK受体拮抗剂丙谷胺(2 mg/L)及溶剂单独或联合孵育3 h,用RT-PCR检测细胞IL-6、CCK-AR及CCK-BR mRNA的表达,孵育1 h,用电泳迁移率检测NF-κB活性,孵育30min,用Western blot-ting检测胞浆IκB蛋白表达。结果:RSC -364细胞固有表达CCK-A/B受体,sCCK-8(10-8-10-6mol/L)使IL-6、CCK-AR和CCK-BR mRNA表达进一步增高,明显增加TNF-α诱导的NF-κB活性,降低胞浆中IκB蛋白水平,并可被丙谷胺所拮抗。结论:sCCK-8通过NF-κB途径上调TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞IL-6 mRNA表达,此作用可能通过滑膜细胞上的CCK受体实现,提示CCK-8在类风湿性关节炎(RA)发病过程中可能具有调控作用。

神经肽和血管性痴呆

血管性痴呆患者的血浆及脑脊液中含有多种与认知功能密切相关的神经肽类物质,如生长抑素、精氨酸加压素、β-内啡肽、胆囊收缩素,这些神经肽类物质与血管性痴呆的产生和发展过程密切相关。现对这些神经肽类物质的作用及其与血管性痴呆的相互关系简要综述。

八肽胆囊收缩素对体外胰岛素β细胞增殖及胰岛素分泌的影响

目的研究八肽胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK-8)对小鼠胰岛β细胞(NIT-1细胞)增殖及胰岛素分泌的影响.方法体外培养NIT-1细胞,分别加入10-8～10-10mmol/L浓度CCK-8处理24和48 h,MTT法检测NIT-1细胞增殖情况;放免法检测用药后NIT-1细胞胰岛素分泌量.结果与对照组比较,经不同CCK-8处理24及48 h后均可显著提高NIT-1细胞的增殖及胰岛素分泌量,且具有剂量及时间依赖性.10-8 mmol/L CCK-8组与对照组相比,可提高增殖率分别为24 h 48%,48 h 77%;与对照组比较,10-8 mmol/L CCK-8组可增加胰岛素释放量分别为24 h 181%,48 h 151%.结论 CCK-8具有显著增强NIT-1胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌的作用.

CCK8对高脂血症大鼠胰岛细胞生长及胰岛素分泌的影响

目的：观察八肽胆囊收缩素（octa—peptide cholecystokinin，CCK8）对高脂血症模型大鼠体外培养的胰岛细胞的生长及胰岛素分泌的影响。方法：SD大鼠饲以高甘油三脂、高胆固醇膳食，建造成实验性高脂血症模型，采用酶消化、密度离心等方法分离、培养胰岛细胞，并随机分为对照组和实验组，实验组分别加入终浓度为10^-7～10^-9mmol／L的CCK8处理细胞24、48h，对照组加入等量培养基。MTT法检测胰岛细胞增殖情况；放射免疫测定法检测不同条件下胰岛细胞的胰岛素分泌量。结果：与对照组比较，经不同浓度CCK8处理24、48h后，胰岛细胞的增殖及胰岛素分泌量均显著提高（差异具有显著性），且具有剂量及时间依赖性。结论：CCK-8能显著增强高脂血症模型大鼠胰岛细胞增殖及胰岛素的分泌，提示CCK8对于脂毒性影响下的胰岛细胞具有保护作用。

大鼠海马CCK阳性、阴性神经元电生理特性对比观察

目的观察大鼠海马胆囊收缩素(CCK)阳性(CCK+)、阴性(CCK-)神经元电生理学特性的差异。方法用CCK启动子—绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒标记CCK+神经元与未被标记的CCK-神经元(分别为CCK+组及CCK-组),观察细胞形态,检测静息状态下的静息电位(Vm)、膜阻抗(Rm)、膜电容(Cm)、时间常数(Tau);用100 pA(500 ms)去极化电流诱发CCK+神经元和CCK-神经元的动作电位,记录动作电位的频率、时间间隔(ISI)、幅值(Amp)、动作电位达幅值中点的时间(HW)、动作电位上升(10%～90%)的时间(RT)、动作电位下降(90%～10%)的时间(DT)和发放频率;在灌流外液中加入50μM AP-5和5μM NBQX,记录细胞自发抑制性突触后电流(sIPSC)的频率。结果 CCK+组细胞长径、短径、胞体面积均大于CCK-组(P均<0.05)。CCK+组细胞静息状态下Rm大于CCK-组,Tau小于CCK-组,P均<0.05。两组Vm、Cm比较无统计学差异。CCK+组动作电位频率、HW大于CCK-组,ISI、RT小于CCK-组,P均<0.05。两组Amp比较无统计学差异。CCK+组神经元sIPSC的发生频率高于CCK-组,P<0.05。结论 CCK+神经元的传递速度快于CCK-神经元。

外源性八肽胆囊收缩素对吗啡所致SH-SY5Y和PC12细胞毒的保护作用

目的观察外源性八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)对吗啡处理SH-SY5Y及PC12细胞毒性作用的影响。方法应用二甲基噻唑二苯基四噻唑盐[3-(4,5)-dimethylthiazo(-2-yl)-3,5-diphenytetrazoliumromide,MTT]法观察吗啡对SH-SY5Y及PC12细胞毒性作用的剂量和时间依赖关系,并且观测外源性CCK-8对吗啡细胞毒性作用的影响。结果①吗啡在100～10 000μmol/L浓度范围内显著降低SH-SY5Y和PC12细胞的生存率,半数抑制率分别为2 520μmol/L和680μmol/L;上述作用在孵育48h明显,随时间延长逐渐增强;CCK-8(10^(-6)和10^(-8)mol/L)可明显抑制3 000μmol/L吗啡作用48h后SH-SY5Y细胞生存率的下降,CCK-8(10^(-6)、10^(-8)和10^(-10)mol/L)可明显抑制1 000μmol/L吗啡作用48h后PC12细胞生存率的下降;②3 000μmol/L和1000μmol/L吗啡分别处理SH-SY5Y细胞和PC12细胞48h后,可见细胞胞体变圆,突触变短或消失,失去原有的细胞形态。CCK-8(10^(-6)和10^(-8)mol/L)可明显改善吗啡作用后SH-SY5Y和PC12细胞的形态改变。结论外源性CCK-8可浓度依赖地对抗吗啡产生的细胞毒性作用。

猫脊髓胆囊收缩素可塑性终末在腰骶背根节全切后板层Ⅱ的变化

目的：探讨猫单侧腰骶背根节全切后胆囊收缩素（CCK）可塑性终末的改变。方法：成年雄性猫，分为急性组和慢性组，动物深麻，经灌注固定后取脊髓腰6节段做CCK光镜和电镜免疫组织化学分析。结果：CCK在对照侧主要分布于背角Ⅱ板层，急性组与慢性组手术侧背角CCK免疫反应均明显弱于对照侧，其中以Ⅱ板层最为突出；慢性组手术侧CCK免疫反应强度下降的幅度小于急性组。结论：电镜下观察到的CCK终末可能是光镜下CCK在慢性组回升的结构基础。

胃促生长素对大鼠胃排空及胃动素、胆囊收缩素的影响

目的观察胃促生长素（Ghrelin）对大鼠胃排空的影响，同时测定血浆中胃动素（Moti—lin）和胆囊收缩素（CCK）水平的变化，探讨Ghrelih对胃排空影响及其机制。方法Wistar大鼠60只，随机分为对照组和实验组，分别接受生理盐水和不同剂量Ghrelin（0．5、1．0、1．5、2．0、2．5nmol／kg）腹腔注射，45min后所有大鼠半固体糊1．0ml／只灌胃，30min后处死大鼠，测定胃排空率，同时采用放射免疫法测定血浆胃动素及胆囊收缩素浓度。结果腹腔注射Ghrelin后大鼠胃排空率（38．24±7．15）％与对照组（27．18±2．37）％比较（P〈0．01）有明显加快，同时该效应与腹腔注射Ghrelin呈量效关系，小剂量Ghrelin（0．5nmol／kg）腹腔注射对胃排空无明显影响，但中、高剂量Ghrelin腹腔注射能明显加速大鼠胃排空效应。此外，腹腔注射Ghrelin能使大鼠血浆胃动素及胆囊收缩素浓度明显升高，大鼠胃排空率与血浆胃动素及CCK浓度均呈明显相关。结论中、高剂量Ghrelin腹腔注射，能明显加快健康大鼠的胃排空效应，胃动素和胆囊收缩素可能参与Ghrelin对大鼠胃排空的调节。

胆固醇对豚鼠离体胆囊肌收缩的急慢性效应

目的:探讨胆固醇(cholesterol)对豚鼠离体胆囊肌条收缩的影响及其机制。方法:采用张力换能器记录豚鼠离体胆囊肌条的收缩活动;观察胆固醇对胆囊肌条收缩的影响;观察胆固醇对胆固醇孵育胆囊肌条作用;并初步研究胆固醇对胆囊肌条的作用机制。结果:胆固醇对豚鼠离体胆囊肌条收缩有抑制作用;胆固醇孵育后,1×10-9mol/L,1×10-8mol/L,1×10-7mol/L各浓度胆囊收缩素(CCK)作用于胆囊肌条其张力效应值分别为(1.304±0.231)g、(1.748±0.287)g、(2.127±0.326)g,与正常胆囊肌条相比,效应值有显著性差异(P<0.05);CCK对胆囊离体肌条的作用可以部分被胆固醇抑制(变化为69.2%,P<0.05),胆固醇的影响可以部分被阿托品、尼莫地平抑制(变化分别为64.2%、62.1%,P<0.05);破坏胆囊Cajal间质细胞(ICC),收缩幅度与正常胆囊收缩幅度和频率有显著性差异(P<0.01),加入胆固醇无显著性差异(P>0.05)。结论:胆固醇孵育后,胆囊肌条对CCK的敏感性下降;胆固醇对离体胆囊平滑肌的收缩活动有抑制作用,其抑制效应是通过胆碱能受体、CCK受体及Ca2+介导。ICC是胆固醇对胆囊平滑肌作用途径中可能的中间环节。

癫痫易感大鼠脑内CCK-8肽含量、CCK基因结构及CCK-mRNA表达初探

对听源性癫痫易感大鼠P_(77)PMC及对照Wistar大鼠发育中脑内基础CCK-8肽含量、mRNA表达水平及胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)基因结构进行初探。提示:(1)P_(77)PMC在发育中,成年脑内基础CCK-8肽显著高于对照;(2)Northern印迹杂交示P_(77)PMC组脑CCK-mRNA与对照无显著差异;(3)CCK DNA结构在两组大鼠未发现RFLPs不同。证实两系大鼠脑内CCK系统存在差异,其与癫痫易感性的关系尚待进一步研究。

胆管结石患者Oddi括约肌中胆囊收缩素受体和一氧化氮合酶及其血中胆囊收缩素和一氧化氮水平的意义

目的探讨胆管结石患者Oddi括约肌中胆囊收缩素（CCK）受体和一氧化氮合酶（NOS）及其血清中CCK和NO含量的改变及意义。方法测定41例胆管结石患者和6例对照组血中的CCK和NO水平及Oddi括约肌中CCK受体和NOS含量。结果胆管结石组血中CCK含量[（38．91±4．85）pmol／L]、NO含量[（40．84±4．74）pmol／L]较对照组[（30．67±1．81）pmol／L]和[（32．81±1．11）pmol／L]明显升高；Oddi括约肌中CCK受体[（67．59±5．87）ng／L]及NOS含量[（457．52±45．40）ng／L]明显低于对照组[（78．99±1．71）ng／L]与[（519．61±11．38）ng／L]；血中CCK、NO水平及Oddi括约肌中CCK受体、NOS含量在原发性肝内胆管结石组、胆囊结石伴胆管结石组、原发性胆总管结石组中有所不同。结论胆管结石患者Oddi括约肌中CCK受体及NOS含量下降导致Oddi括约肌功能下降，进而胆汁淤积，促进胆管结石的形成。