乳腺癌17号染色体多体对HER2检测的影响及其临床病理学意义

目的:探讨乳腺癌17号染色体多体对人类表皮生长因子受体2(epidermal growth factor receptor 2,HER2)检测结果的影响及其临床病理学意义。方法:采用荧光原位杂交(fluorescencein situhybridization,FISH)双色法检测71例原发性浸润性乳腺癌中HER2基因和17号染色体拷贝数目情况。采用HER2绝对拷贝数标准和HER2/chromosome 17比值标准,判定HER2的FISH检测结果;基于FISH检测结果,结合免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测的HER2蛋白表达情况及相关临床病理参数进行分组对比分析。结果:无论按照HER2绝对拷贝数标准(14/71,19.7%)或HER2/chromosome17比值标准(2/71,2.8%),所有FISH检测结果示HER2基因扩展可疑的病例都为17号染色体多体;与HER2基因扩增阴性者相比,单纯17号染色体多体组在肿瘤分级、淋巴结转移以及激素受体表达上差异无统计学意义(P均>0.05);而与HER2基因扩增阳性组相比,单纯17号染色体多体组表现出更低的肿瘤分级(50.0%vs81.5%,P=0.025)、更高的淋巴结阴性率(55.6%vs25.9%,P=0.045)以及更高的雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性率(83.3%vs41.7%,P=0.005)和孕激素受体(progestogen receptor,PR)阳性率(87.5%vs44.4%,P=0.003)。结论:相比于HER2基因扩增组,单纯17号染色体多体组更倾向于HER2基因扩增阴性;17号染色体多体会影响HER2检测结果,是FISH检测中导致可疑结果产生的主要原因。

乳腺癌中17号染色体倍体性分析

目的探讨乳腺癌中17号染色体倍体性及其与临床病理参数的关系。方法采用荧光原位杂交(FISH)及免疫组化(IHC),检测300例浸润性乳腺癌中人类表皮生长因子受体2(Her-2)表达和17号染色体倍体情况及ER、PR蛋白表达情况。结果 300例浸润性乳腺癌中,Her-2扩增者中17号染色体多体占55.44%,Her-2无扩增中共占25.13%(P<0.01);Her-2蛋白表达++/+++及Her-2蛋白表达-/+中17号染色体多体分别占59.12%、15.34%(P<0.01),17号染色体多体与ER、PR表达相关,与淋巴结转移及TNM分期无相关性。结论 17号染色体多体是乳腺癌常见遗传学改变,其多体性与乳腺癌病情发展无关。

17号染色体短臂LOH是晚期大肠癌的基因标记

目的：探讨１７ｐＬＯＨ与晚期大肠癌的关系。方法：运用ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ和ＲＦＬＰ（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒ－ｐｈｉｓｍａｎａｌｙｓｉｓ）法进行分析。结果：１０９例大肠癌的ＲＦＬＰ分析显示，１７ｐＬＯＨ的频率在ＤｕｋｅｓＤ期（９５％）高于ＤｕｋｅｓＡ、Ｂ、Ｃ各期（５４％～６８％），Ｐ＝０．００６；１７ｐＬＯＨ频率在大肠癌远处器官转移组（９５％）高于大肠癌不伴远处器官转移组（Ｐ＝０．００１）；在大肠癌淋巴结转移组中１７ｐＬＯＨ的频率（７１％），与无淋巴结转移组（６４％）相比，两者无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论：１７ｐＬＯＨ是晚期大肠癌的重要基因标记，并提示临床预后不佳。

原发性肝癌p53基因高频缺失的双色荧光原位杂交证据

目的 :探讨原发性肝癌 (HCC)中p5 3基因的缺失频率、方式、特点及其临床意义。方法 :以p5 3基因及 17号染色体着丝粒DNA为探针 ,应用间期双色荧光原位杂交 (interphasedual,FISH)技术。结果 :肝癌中p5 3基因的缺失频率为 68 0 % (68/ 10 0 ) ,而配对正常肝组织中则未见有p5 3缺失 ;p5 3缺失方式多样且往往伴随 17号染色体多倍体 (r=0 5 94,P <0 0 1) ;p5 3缺失与肝癌病人的性别、年龄、HBV感染及临床分期无显著相关 (P >0 0 5 ) ,但与血清甲胎蛋白 (AFP)水平、肿瘤大小则显著相关 (P <0 0 5 ) ;有无p5 3缺失病人之间 2年存活率差异非常显著 (χ2 =11 463 ,P <0 0 1)。结论 :p5 3基因在原发性肝癌中存在高频缺失并往往伴随 17号染色体的多倍体 ;双色FISH技术为评估基因的缺失提供了特异、敏感、直观的分子细胞遗传学证据。

荧光原位杂交技术检测胃肠道外间质瘤p16基因改变的意义

目的探讨应用荧光原位杂交(FISH)技术检测胃肠道外间质瘤(EGIST)中p16基因缺失及17号染色体非整倍性的发生情况及其临床病理学意义。方法收集18例EGIST病例,采用p16/CSP17双色探针在石蜡切片上与瘤细胞杂交,所有病例同时用免疫组织化学技术检测P16蛋白的表达。结果FISH结果显示,p16基因缺失病例11例(61%),免疫组织化学检测到P16蛋白缺失病例13例(72%),基因缺失与蛋白表达差异具有统计学意义(P<0.05);共检出17号染色体非整倍体EGIST病例5例(28%)。EGIST病例中p16基因缺失、17号染色体倍体改变与各临床病理学因素间差异无统计学意义(P>0.05)。结论EGIST中存在p16基因缺失和(或)17号染色体非整倍体改变。应用FISH技术检测二者改变对于EGIST生物学行为预测具有指导意义。

胃癌组织中人类表皮生长因子受体2的表达及与临床病理特征的相关性分析

目的检测胃癌组织中的人类表皮生长因子受体(HER)-2蛋白和HER-2基因的表达,探讨其与胃癌患者临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学法(IHC)检测115例胃癌活检标本中的HER-2蛋白表达,对HER-2蛋白过表达(IHC评分为++和+++)的标本采用荧光原位杂交技术(FISH)检测其HER-2基因水平和17号染色体倍体分析。结果①115例胃癌标本中,HER-2蛋白过表达率为40.0%(46/115)。HER-2蛋白的过表达与胃癌的Lauren分型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位等因素无关(P>0.05)。②HER-2基因的扩增率在HER-2蛋白(+++)组为90.5%(19/21),明显高于HER-2蛋白(++)组28.0%(7/25),差异有统计学意义(P<0.05)。③17号染色体多体在HER-2蛋白(++)组和(+++)组中的发生率分别为36.0%(9/25)和47.6%(10/21),差异无统计学意义(P>0.05)。结论①HER-2蛋白过表达的肿瘤细胞存在17号染色体多倍体现象,提示17号染色体多倍体可能引起HER-2蛋白过表达。②HER-2蛋白的过表达和HER-2基因的扩增与胃癌发生发展密切相关,这将为临床预测胃癌的预后及选择性靶向治疗提供理论依据。

超声发现胎儿肾脏异常的17q12染色体微缺失综合征三例产前诊断分析

目的通过分析17q12染色体微缺失综合征胎儿的临床资料，探讨该综合征的产前临床表型及产前诊断方法。方法2013年1月至2017年7月于中国医学科学院北京协和医院就诊行产前超声检查发现胎儿结构异常的孕妇7516例，其中超声发现胎儿单侧或双侧肾脏结构异常者655例（8．71％，655／7516）。7516例孕妇中行染色体微阵列分析（CMA）技术产前诊断者共1370例，其中3例0．40％（3／7516）孕妇的胎儿诊断为17q12染色体微缺失综合征。3例孕妇及其胎儿均行产前诊断及核型分析，并通过亲代荧光原位杂交技术或CMA进行亲代验证。结果3例孕妇的胎儿均于孕中期超声检查提示“双侧肾脏结构的异常”，异常包括肾脏回声增强、多发囊肿及肾盂增宽，其中1例“双侧多发肾囊肿”、2例“双侧肾回声增强”。3例胎儿的染色体核型分析均正常，CMA检测提示均存在17q12染色体区域1．4～1．6Mb的缺失。亲代验证结果显示，3例发生17q12染色体微缺失的胎儿中，2例为新发突变，1例遗传于母亲。经遗传咨询，3例孕妇均选择终止妊娠。结论根据产前胎儿肾脏超声检查的特异性表现，通过产前诊断、染色体核型分析及CMA检测，可在产前诊断超声发现胎儿肾脏异常的17q12染色体微缺失综合征。少部分17q12染色体微缺失综合征患儿甚至遗传于表型正常的亲代，产前遗传咨询往往会相对困难。

伴17号染色体多体的乳腺癌患者人表皮生长因子受体2状态的评估及意义

目的探讨乳腺癌17号染色体多体（多体17）对人表皮生长因子受体2（HER2）状态评估的影响及意义。方法收集338例行HER2免疫组织化学（IHC）及荧光原位杂交（FISH）检测的乳腺癌患者临床病理资料，根据2013年美国临床肿瘤学会／美国病理医师学院（ASCO／CAP）乳腺癌HER2检测指南标准，分析17号染色体中间着丝粒区（CEP17）拷贝数及多体17对HER2评估的影响，并分析多体17与乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果338例乳腺癌患者中，HER2IHC阴性9例（2．7％），不确定309例（91．4％），阳性20例（5．9％）。HER2FISH阴性226例（66．9％），不确定13例（3．8％），阳性99例（29．3％）。338例乳腺癌患者中，42例（12．4％）为多体17，291例（86．1％）为17号染色体双体，5例（1．5％）为17号染色体单体。多体17与HER2蛋白表达有关（P=0．046）。多体17患者的HER2FISH结果和HER2拷贝数与非多体17患者比较，差异有统计学意义（P〈0．001）。多体17患者的HER2／CEP17比值与非多体17患者比较，差异无统计学意义（P=0．930）。多体17的存在与乳腺癌病理学分级和Ki-67指数有关（均P〈0．05），而与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、雌激素受体（ER）状态、孕激素受体（PR）状态和新辅助疗效评估无关（均P〉0．05）。结论在多体17的乳腺癌中评估HER2信号的绝对拷贝数尤为重要，并应结合HER2／CEP17比值及HER2蛋白表达水平进行综合评估。

乳腺癌17号染色体多体的临床病理意义

目的探讨乳腺癌17号染色体多体异常的临床病理学意义。方法回顾性分析200例乳腺癌荧光原位杂交结果，并分析17号染色体多体与年龄、核异型性、淋巴结转移以及HER2基因扩增、HER2蛋白表达的关系。结果200例乳腺癌患者中表现为17号染色体多体异常的52例（26．0％），均为浸润性导管癌；占180例浸润性导管癌的52．8％。17号染色体多体与HER2基因扩增和HER2蛋白表达有关（均P=0．000），并且多体伴HER2基因扩增时也与HER2蛋白表达有关（P=0．001）。多体和（或）多体伴HER2基因扩增都与乳腺癌癌细胞的高度异型性（P=0．010或P=0．012）及淋巴结转移有关（P=0．009或P=0．002）。17号染色体多体或多体伴HER2基因扩增与乳腺癌患者的年龄无关（P=0．415或P=1．000）。结论17号染色体多体可能与乳腺癌患者的预后不良有关。

双探针显色和荧光原位杂交法检测乳腺癌HER2基因状态和17号染色体的分析

目的通过与荧光原位杂交（FISH）比较，评估双探针显色原位杂交（双探针CISH）法在诊断女性乳腺浸润性导管癌HER2基因状态中应用的可靠性，同时探讨17号染色体多倍体对原位杂交诊断HER2基因状态时可能产生的影响。方法收集146例乳腺癌组织的常规石蜡包埋标本，分别用欧盟（CE）认证的FISH（146例）及CISH（73例）HER2／17号染色体着丝粒（CEN17）双探针试剂盒技术，对肿瘤标本的HER2基因状态进行检测，并按照2007年美国临床肿瘤协会及美国病理家协会（ASCO／CAP）标准分别用计算HER2基因拷贝数和（或）计算HER2／CEN17比值的方法对结果进行分析。结果在同时进行FISH和双探针CISH检测的73例标本中发现，两种技术对HER2阴性和阳性的诊断符合率分别为91．7％（33／36）和97．4％（37／38），两者的总体符合率为95．9％（70／73）；在对146例FISH结果的计数分析中，计数HER2基因拷贝数得出不确定诊断的病例量是计数HER2／CEN17得出不确定诊断病例量的1．6倍（13／8）；此外，在FISH和CISH结果中按拷贝数计数为阳性的病例与在按比值计数时却为阴性病例的不吻合率分别为4．8％（3／63）和3．0％（1／33）；同时在FISHHER2阳性病例（HER2／CEN17）中多倍体发生率为63．5％（40／63，P=0．002），高于阴性者中多倍体的发生率（37．3％，28／75）。结论双探针CISH技术检测乳腺癌HER2基因状态的结果和FISH技术检测的结果非常一致，提示两种技术临床诊断价值相近，并且同步检测并计数HER2和17号染色体有助于明确HER2基因状态。

乳腺癌17号染色体多体对HER-2基因和蛋白表达的影响及其临床病理意义

目的评价17号染色体多体对人表皮生长因子受体（HER）2检测结果的影响以及它的临床病理特征。方法回顾了2009年11月至2011年7月，中国医学科学院肿瘤医院619例浸润性乳腺癌患者的HER-2免疫组织化学（IHC）及荧光原位杂交（FISH）的结果，并对17号染色体多体和各项临床病理特征之间的关系进行了分析。结果全组17号染色体多体比例为31．8％。IHC（3＋）组17号染色体多体比例明显高于IHC（2＋）组（41．9％比27．7％，P：0．001）和IHC（0／1＋）组（41．9％比11．1％，P=0．001）。在各个IHC亚组中，17号染色体多体比例和HER-2基因状态无关（P〉0．05）。IHC（3＋）且HER-2未扩增的患者中17号染色体多体的比例为9／15。与HER-2扩增患者相比，17号染色体多体不伴HER-2扩增的患者具有更高的激素受体阳性率（P〈0．001）和更低的Ki-67指数（P=0．003）。这和既无17号染色体多体也无HER-2扩增的患者相似。结论17号染色体多体发生率和HER-2蛋白表达水平相关，与HER-2基因扩增无关。17号染色体多体是造成HER-2未扩增患者HER-2蛋白过表达的主要原因。17号染色体多体不伴HER-2扩增患者的临床病理特征更接近于HER-2阴性者。

产前诊断胎儿肾脏结构异常的染色体17q12缺失综合征两例

目的分析2例以胎儿期肾脏结构异常为主要表现的染色体17q12缺失综合征病例的产前超声特点和遗传学诊断方法。方法分析2017年在北京大学第一医院就诊的2例因孕中期B超提示胎儿肾脏结构异常孕妇的病历资料。收集胎儿染色体核型分析和基于微阵列比较基因组杂交(array-based comparative genomic hybridization, aCGH)检测,以及夫妻外周血DNA的aCGH检测等结果。结果(1)病例1中第1和第2次妊娠以及病例2的胎儿染色体核型均未见异常;病例2胎儿染色体荧光原位杂交技术检测结果未见异常。(2)病例1:第1次妊娠时,脐血DNA在染色体17q12区(34 817 422-36 168 104)存在1.351 Mb单拷贝缺失和3p26.3区(838 934-2 026 269)存在1.187 Mb单拷贝重复;孕妇外周血DNA 3p26.3区(726 645-2 026 269)存在1.299 Mb单拷贝重复。(3)病例2:脐血DNA在17q12区存在1.351 Mb单拷贝缺失,夫妻外周血DNA未检出基因拷贝数异常。结论根据孕期胎儿肾脏超声表现,通过有创性产前诊断进行基因组拷贝数变异的检测可以明确诊断并指导遗传咨询。

寻常型银屑病患者17号染色体上两个等位基因频率的检测

目的初步探讨 2个微卫星标记 D17S784及 D17S928与寻常型银屑病的相关性。方法 用多重 PCR和微卫星荧光标记－半自动基因扫描法以及 GenotypeTM软件进行基因分型。结 果银屑病患者与 D17S784、 D17S928具有显著相关性 (P< 0.001)，这两个微卫星位点的等 位基因片段频率分布在银屑病组与健康对照组中差异具有显著性。结论 D17S784与 D17S928 这 2个连续标记可能是寻常型银屑病易感性的候选区域之一。

乳腺癌HER2蛋白表达阳性者的基因状态分析

目的探索中国大陆女性乳腺癌 HER2蛋白过表达人群中 HER2基因状态、蛋白表达与基因扩增的一致性、17号染色体非整体性的发生情况及其意义。方法采用 PathVysion^(TM)探针试剂盒,以荧光原位杂交(FISH)方法,分析经免疫组织化学(IHC)方法(HercepTest^(TM)试剂盒)确认的120例 HER2蛋白表达阳性(IHC 2+者42例,IHC 3+者78例)的乳腺癌石蜡切片标本的 HER2基因状态和17号染色体非整体性的发生率。结果 HER2表达 IHC 2+的标本中,基因扩增率76.19%(32/42),其中低度扩增(比值2～4)26.19%(11/42),中度扩增(比值4～10)41.62%(20/42),高度扩增(比值>10)2.38%(1/42);IHC 3+的标本中,基因扩增率91.03%(71/78),其中低度扩增11.54%(9/78),中度扩增61.54%(48/78),高度扩增17.95%(14/78)。全部病例中具有17号染色体非整体性者69.17%(83/120),包括亚二体性(17号染色体平均数≤1.75)11.67%(14/120)、低多体性(17号染色体平均数2.26～3.75)43.33%(52/120)和高多体性(17号染色体平均数≥3.76)14.17%(17/120)。IHC 2+病例中17号染色体非整体性59.52%(25/42),包括亚二体性7.14%(3/42)、低多体性42.86%(18/42)和高多体性9.52%(4/42);IHC 3+病例中17号染色体非整体性74.36%(58/78),包括亚二体性14.10%(11/78)、低多体性43.59%(34/78)和高多体性16.67%(13/78)。IHC 2+者 FISH 阳性以 HER2基因中、低度扩增为主,而 IHC 3+者则呈中、高度基因扩增的趋势,两者差异有统计学意义(P=0.0003)。IHC 3+中,7例 FISH 阴性中6例有17号染色体非整体性;IHC 2+中,10例 FISH 阴性中5例有17号染色体非整体性。结论在本组中国大陆女性乳腺癌人群中,IHC 3+与 FISH 阳性的一致性较高;IHC 2+者 FISH 阳性率高于国外研究者的数据;HER2蛋白阳性乳腺癌中17号染色体非整体性发生比例较高;IHC 2+和3+者都具亚二体性、低多体性和高多体性特征,且两者均以低多体性为常见;IHC 2+者的 HER2基因扩增多为中、低度扩增,而 IHC3+中 FISH 阳性者则以高比值者居多。IHC 3+而 FISH 阴性的主要原因为17号染色体非整体性。

常染色体显性遗传性先天性白内障一家系致病基因的初步定位

目的 初步定位常染色体显性遗传性先天性白内障 (ADCC)一家系的致病基因。方法 收集ADCC一家系资料 ,在已知先天性白内障致病基因和位点附近 ,选择合适的短串联重复序列多态性标记 (STRP) ,对ADCC一家系进行连锁分析 ,使用Mlink软件采用对数优势记分法 (LOD)计算LOD值。结果 在STRP中 ,D17S80 5、D17S12 94及D17S12 93与致病基因位点连锁的最大LOD值分别为2 0 3、2 4 9及 2 2 2 (重组率θ =0 )。结论 该ADCC家系的致病基因初步定位在第 17对染色体上 ;CRYBA1基因为候选基因。

肝细胞癌中p53基因的缺失与HER-2基因的扩增及其意义

目的 检测原发性肝细胞癌中 17号染色体上p5 3基因的缺失与HER 2基因的扩增并探讨其临床意义。方法 分别以不同颜色荧光标记的p5 3基因、HER 2基因和 17号染色体着丝粒为双色探针组 ,应用间期双色荧光原位杂交 (FISH)技术检测 42例肝细胞癌间期细胞核中p5 3基因、HER 2基因和 17号染色体的拷贝数及其相对比例 ,以确定其缺失或扩增 ,结合临床分期、血清甲胎蛋白 (AFP)、肿瘤大小等资料进行统计分析其临床意义。结果 42例肝细胞癌中p5 3基因缺失 2 7例( 64 3 % ) ;HER 2基因扩增 9例 ( 2 1 4% ) ,其中高拷贝扩增 (HC) 4例 ( 9 5 % ) ,低拷贝扩增 (LC) 5例( 11 9% ) ,同时具有缺失与扩增的 6例 ( 14 3 % ) ;另外 ,17号染色体多倍体有 2 6例 ( 61 9% )。p5 3基因缺失与 17号染色体多倍性呈正相关 ( χ2 =12 2 86,P <0 0 0 1) ,但与HER 2基因的扩增无关 ( χ2 =0 0 0 ,P =1 0 0 )。p5 3基因缺失与肝细胞癌患者AFP水平、肿瘤大小有关 (P <0 0 5 ) ;术后 2年存活率p5 3基因缺失患者 ( 18 5 % )显著低于无缺失患者 ( 60 0 % ,χ2 =7 467,P =0 0 0 6)。结论 原发性肝细胞癌的17号染色体上存在p5 3基因高频缺失和HER 2基因的扩增 。

不同类型射线对人淋巴细胞染色体畸变影响

目的比较铁-56(^(56)Fe^(17+))、碳-12(^(12)C^(6+))重离子束与钴-60(^(60)Co)γ射线对人淋巴细胞染色体畸变的影响。方法将人淋巴细胞按照射剂量分为0.1、0.3、0.5、0.7、1.0、2.0 Gy照射组和0.0 Gy对照组,分别采用^(56)Fe^(17+)(传能线密度为400.0 ke V/μm)、^(12)C^(6+)(传能线密度为26.0 ke V/μm)重离子束和^(60)Coγ射线进行照射,照后48 h收获细胞,采用光学显微镜人工计数法检测人淋巴细胞染色体双着丝粒体加着丝粒环(以下简称"双+环")畸变率和畸变细胞率。结果人淋巴细胞经^(56)Fe^(17+)、^(12)C^(6+)重离子束和^(60)Co γ射线照射后,0.3~2.0 Gy照射组^(12)C^(6+)重离子束诱导的"双+环"畸变率均高于相同剂量组的^(56)Fe^(17+)重离子束和^(60)Co γ射线(P<0.05),0.1~2.0 Gy照射组^(12)C^(6+)重离子束诱导的畸变细胞率均高于相同剂量组的^(56)Fe^(17+)重离子束和^(60)Coγ射线(P<0.05)。3种射线诱导的人淋巴细胞畸变效应在0.0~2.0 Gy内均呈随剂量增加而升高的趋势(P<0.01)。^(56)Fe^(17+)重离子束的相对生物效应值低于相同剂量的^(12)C^(6+)重离子束。结论^(12)C^(6+)重离子束导致的人淋巴细胞染色体畸变较^(60)Coγ射线和^(56)Fe^(17+)重离子束严重。

PCR检测原发肝癌YNZ22位点VNTR的杂合性丢失

目的探讨ＹＮＺ２２位点串联重复序列（ＶＮＴＲ）的杂合性丢失在原发肝癌发生发展中的作用．方法应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增３５例原发肝癌和正常肝组织ＹＮＺ２２位点的ＶＮＴＲ区，对原发肝癌的杂合缺失进行分析．结果原发肝癌３５例，属信息个体２５例，占７１４％．信息个体中２５例检出ＹＮＺ２２位点杂合缺失（ＬＯＨ）１２例，杂合缺失率为４８０％．分析ＬＯＨ与临床病理参数间的关系发现，原发肝癌ＹＮＺ２２位点杂合缺失与血清ＨＢｓＡｇ和ＡＦＰ水平、组织学分级、肿瘤大小及远处转移无关．结论ＹＮＺ２２位点杂合缺失是原发肝癌的常见改变，可能参与了原发肝癌的发生与发展．