慢性低氧对HPH大鼠RAS经典轴和反向调节轴的影响

目的探讨慢性低氧对HPH大鼠RAS经典轴和反向调节轴的影响。方法选取8周龄SD大鼠20只,随机分为对照组与低氧组,对照组大鼠在西宁地区喂养,低氧组在低压氧舱(模拟海拔4500 m)喂养,各组大鼠分别给予充足的食物和活动空间,28 d后采用右心导管术测定平均肺动脉压(mPAP);取腹主动脉血检测血常规;取各组大鼠肺组织用苏木精-伊红(HE)染色,应用图像采集系统及图像分析软件观察并计算肺血管管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)、管壁厚度占血管直径的百分比(WT%)以及管腔面积与血管总面积的百分比(LA%);用免疫组化法检测肺动脉内皮标志物CD31抗原的表达;用蛋白免疫印迹法检测ACE、AngⅡ、AT1R、ACE2和Mas蛋白的表达。结果与对照组相比,低氧组大鼠的mPAP显著升高(P<0.05)。血常规结果显示,低氧组大鼠白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)水平较对照组显著升高;而血小板(PLT)数量较对照组显著降低(P<0.05)。形态学结果显示,低氧组大鼠肺血管管壁厚度显著增加,管腔狭窄,WA%与WT%较对照组显著升高(P<0.05),LA%较对照组显著降低(P<0.05)。免疫组化结果显示,低氧组大鼠肺动脉内皮标志物CD31抗原的表达较对照组显著降低。蛋白免疫印迹结果显示,与对照组相比,ACE、AngⅡ、AT1R蛋白的表达量在低氧刺激下显著升高(P<0.05),而ACE2、Mas蛋白表达量在低氧损伤后明显降低(P<0.05)。结论低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的RAS经典轴ACE/AngⅡ/AT1R上调,反向调节轴ACE2/Ang(1-7)/Mas下调。

The inhibitory effects of Radix Astragali on hypoxic pulmonary hypertension of rats

Objective To observe the inhibitory effects of Radix Astragali (RA) on hypoxic structural remodeling of intraacinar pulmonary arteries (IAPA) and pulmonary hypertension (PHT). Methods Sixty rats were divided into three groups: hypoxia group, hypoxia + RA group and normal control group. The rats of hypoxia group and hypoxia+RA group were fed in hypoxic environment under normal atmospheric pressure (10% O 2, 10 h/day). On the 15 th and 30 th day of hypoxia, right ventricular systolic pressure (RVSP) and right ventricle hypertrophy index (RVHI) were measured and pulmonary vessel changes were studied under light and electron microscope and with morphometric analysis. Results Compared with the result of hypoxia+RA group, RA could relieve IAPA wall cell injuries and dilate the constricted IAPA induced by hypoxia . RA could also inhibit hypertrophic changes in the tunica media and proliferation of adventitial cells of the IAPA and muscularization of nonmuscular arteries. Conclusion By preserving the IAPA wall cells and dilating IAPA, RA may play an important role in inhibiting the remodeling of IAPA and preventing PHT.

脱离低压低氧环境对高原肺动脉高压大鼠肺血管重建和TNF-α表达的影响

目的 探究脱离低压低氧环境对高原肺动脉高压大鼠肺血管重建和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法 取120只Wistar大鼠随机分为对照组、高海拔组(10、20、30天)、低海拔组(10、20、30、90天)。测定各组肺动脉压力和右心室肥厚指标,采用HE染色观察大鼠肺组织病理变化,评估肺血管重建程度[肺小动脉管壁厚度/外径百分比(WT%)和管壁面积/总面积百分比(WA%)],免疫组化法检测肺组织切片中TNF-α的表达。结果 与对照组比较,高海拔组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI)、WT%、WA%、肺组织TNF-α表达均升高;与高海拔30天组比较,低海拔组大鼠mPAP、RVHI、WT%、WA%、肺组织TNF-α表达均降低;且随时间延长,变化更为显著(P<0.05)。随造模时间延长,肺血管管壁厚度呈逐步增厚,管腔逐步变小;以高海拔地区造模30天为低海拔组参考,随着返低海拔地区时间延长,肺血管管壁厚度呈逐步变薄,管腔逐步变大。结论 脱离低压低氧环境后,高原肺动脉高压大鼠右心室肥厚和肺血管重建改善,肺组织TNF-α表达降低。

7.0 T MRI评估青藏高原环境下亚硒酸钠改善大鼠肺动脉高压后左心室功能的初步研究

目的利用心脏磁共振(cardiac magnetic resonance,CMR)组织追踪技术评估高原低氧环境下亚硒酸钠(sodium selenite,SE)对肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)后左心室功能的改善作用并初步探索SE提升PAH后左心室功能的潜在机制。材料与方法46只雄性SD大鼠于购置第二日从成都(海拔500 m)陆运至青海省玉树藏族自治州高原动物实验室(海拔4250 m),随机分为对照组(n=10)、模型组[野百合碱(monocrotaline,MCT)组,n=20]和治疗组(SE组,n=16)。高原低氧环境下饲养28周后,MCT组和SE组大鼠均接受一次性腹腔注射60 mg/kg的MCT以建立PAH模型,而对照组则接受等量的生理盐水注射。一周后,SE组大鼠通过灌胃方式给予0.7 mg/kg的SE持续治疗一个月,对照组和MCT组进行常规饲养。干预完成后将大鼠运回成都。随机从三组中各选取8只大鼠进行CMR成像,以评估左心室功能、应变和T2弛豫时间。CMR扫描结束后取材大鼠心脏组织和血液分别进行病理、血生化检测。结果相较于对照组,MCT组的左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)(61.36%±4.50%)和左心室整体周向应变(left ventricular global circumferential strain,LVGCS)(−19.81%±0.84%)显著降低(P值均<0.05)。然而,与MCT组相比,SE组的LVEF(75.29%±5.67%)、左心室整体径向应变(left ventricular global radial strain,LVGRS)(42.90%±5.94%)和LVGCS(−21.43%±1.33%)明显提高(P值均<0.05),表明SE治疗提高了PAH后左心室功能。对照组和MCT组血清中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的含量差异具有统计学意义[对照组vs.MCT组:(16544.38±3734.02)U/mL vs.(9974.00±900.80)U/mL,P<0.05],MCT组血清中丙二醛(malondialdehyde,MDA)相较于对照组有所增加[MCT组vs.对照组:9.00(7.60,13.20)μmol/L vs.3.86(3.60,6.20)μmol/L,P<0.01],提示MCT组大鼠抗氧化能力下降。经SE干预后,SE组的大鼠表现出血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)(292.60±44.38)U/mL和GSH-Px(17843.26±3585.44)U/mL水平的升高以及MDA[5.37(5.10,6.20)μmol/L]水平的降低(P值均<0.05)。凋亡染色表明,与对照组相比,MCT组左心室的相对荧光强度显著增高(P<0.001),而治疗后SE组的相对荧光强度较MCT组明显降低(P<0.001)。结论CMR组织追踪技术能够定量评估肺动脉高压后左心室功能的异常;SE在高原低氧环境下能改善PAH后左心室功能,其机制可能与其提高大鼠抗氧化能力、减轻心肌细胞凋亡有关。

基于靶向代谢组学技术对新疆高原肺动脉高压人群特征的初步研究

目的通过代谢组学技术筛选出与低氧肺动脉高压(Hypoxic pulmonary hypertension,HPH)相关的潜在生物标志物和代谢通路。方法采用液相色谱-串联质谱联用技术(LCMS/MS)对新疆帕米尔高原20例HPH患者及14例健康对照者的血清样本进行分析。结果共鉴定出325种代谢物,其中78种存在显著差异。这些差异代谢物包括5-羟基色胺、尿囊素和二甲基鸟苷等,它们可能作为潜在的生物标志物。并通过京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析,筛选出4条与HPH发病机制相关的关键代谢通路,包括丁酸代谢(Butanoate metabolism)、咖啡因代谢(Caffeine metabolism)、胰高血糖素信号通路(Glucagon signaling pathway)和柠檬酸循环(Citrate cycle/TCA cycle)。这些通路主要涉及生物合成、能量代谢、氧化应激和炎症,可能在HPH的发生和发展中发挥重要作用。结论本研究揭示了HPH的代谢特征,发现了一系列潜在的生物标志物和代谢通路,这些发现为进一步研究HPH的发病机制提供了重要线索,并为HPH的诊断和治疗提供了新的靶点和思路.

2-甲氧基雌二醇对新生大鼠缺氧性肺动脉高压的保护作用

目的探讨2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2ME)在新生大鼠缺氧性肺动脉高压中的保护作用。方法96只Wistar新生大鼠随机分为常氧组、缺氧组和缺氧+2ME组,每组随机分为3 d、7 d、14 d、21 d亚组,每个亚组8只。缺氧组和缺氧+2ME组分别予以每日皮下注射生理盐水和2ME(剂量240μg/kg),常氧组在常氧环境下饲养,每日皮下注射生理盐水。直接测压法测量右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP);苏木精-伊红染色观察肺血管形态,计算肺血管重塑指标肺小动脉中层血管壁厚度占血管外径的百分比(MT%)和肺小动脉中层截面积占血管总截面积的百分比(MA%);免疫组化法检测肺组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应检测HIF-1α、PCNA mRNA表达水平。结果与常氧组比较,缺氧3、7、14、21 d时缺氧组、缺氧+2ME组RVSP升高,HIF-1α、PCNA蛋白和mRNA表达水平上调(P<0.05),缺氧7、14、21 d时缺氧组MT%、MA%增加(P<0.05);与缺氧组比较,缺氧3、7、14、21 d时缺氧+2ME组RVSP降低,HIF-1α、PCNA蛋白和PCNA mRNA表达水平下调(P<0.05),缺氧7、14、21 d时缺氧+2ME组MT%、MA%减少(P<0.05)。结论2ME可能通过抑制HIF-1α、PCNA表达,减轻肺血管重塑,对新生大鼠缺氧性肺动脉高压发挥保护作用。

葛根素对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的 观察葛根素对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压力和肺血管重构的调节作用。方法 SD大鼠 3 0只随机分为 :正常对照组 (NC)、低氧组 (HH)、低氧加葛根素组(HP)。分别测定平均肺动脉压 (mPAP) ;肺组织匀浆超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA )含量 ;血浆内皮素 1(ET 1)、一氧化氮代谢产物 (NO-x )含量 ;弹力纤维染色法测定肌型动脉百分比 ,肺中、小动脉相对中膜面积 (RMP)、厚度 (RMT) ;采用免疫组织化学法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达 ;核酸原位杂交法检测肺动脉Ⅰ型前胶原mRNA表达。结果 HP组与HH组相比 :①mPAP降低 (P <0 0 1) ;平均颈动脉压 (mCAP)差异无显著性 (P >0 0 5) ;②肺组织匀浆SOD活性升高 (P <0 0 1) ,MDA含量降低 (P <0 0 1) ;③血浆ET 1浓度降低 (P <0 0 1) ,NO-x 含量升高 (P <0 0 1) ,ET 1/NO-x 比值降低 (P <0 0 1) ;④肌型动脉百分比和肺中、小动脉RMP及RMT降低 (P <0 0 1) ;⑤肺细小动脉Ⅰ型胶原蛋白及Ⅰ型前胶原mRNA表达降低 (P <0 0 1) ,而Ⅲ胶原蛋白平均吸光度值差异无显著性 (P >0 0 5)。结论 葛根素注射液可预防慢性低氧性肺动脉高压大鼠的形成 ,减轻肺血管重构。其机制可能与抗氧化作用 ,调节肺动脉胶原蛋白合成以及恢复ET

慢性低O_2高CO_2对大鼠空间学习记忆及脑内NMDA R1亚基表达的影响

目的:探讨慢性低O2高CO2诱导大鼠空间学习记忆改变及其可能机制。方法:将清洁级雄性SD大鼠58只,随机分为三组:正常对照组(NC组,n=18),低O2高CO22周组(2HH组,n=20),低O2高CO24周组(4HH组,n=20)。Morris水迷宫观察动物空间学习记忆的变化,采用原位杂交法观察大鼠海马及皮层区N-甲基-D-门冬氨酸受体R1亚单位(NMDAR1mRNA)的表达情况。结果:与NC组比较,模型组大鼠寻找障台的平均逃避潜伏期延长:2HH组(38.59±8.35)s,4HH组(60.59±17.28)s;游泳总距离增加:2HH组(9893.45±1958.16)mm,4HH组(18077.57±6878.85)mm。模型组大鼠海马皮层区NMDAR1mRNA表达的平均光密度较NC组相比均有减少,其中4HH组海马CA1区减少了21.4%(P<0.01)。结论:慢性低O2高CO2可导致大鼠空间学习记忆能力下降,可能与海马CA1区的NMDAR1mRNA表达下调有关。

羟胺对慢性低氧高二氧化碳大鼠肺动脉高压的影响

目的:探讨羟胺(HA)对慢性低氧(O2)高二氧化碳(CO2)大鼠肺动脉压的影响。方法:24只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组(每组8只):正常对照组(NC)、低O2高CO2+生理盐水组(NS)和低O2高CO2+HA组(HA),NS组和HA组置于常压低O2高CO2舱内(舱内O2浓度维持在9%-11%,CO2浓度为5%-6%),每天8h,每周6d,共4周。入舱前,HA组腹腔注射HA溶液(12.5mg/kg)1mL,NS组腹腔注射1mL生理盐水。4周后,戊巴比妥钠(35mg/kg)腹腔注射麻醉,以右心导管测定大鼠肺动脉平均压(mPAP),分离右心室(RV)和左心室加室间隔(LV+S),计算右心室重量与左心室加室间隔重量的比值[RV/(LV+S)],以光学显微镜观测肺血管结构变化,用分光光度计测定血浆中硫化氢(H2S)的水平,用免疫组织化学方法及RT-PCR技术观察肺小动脉及支气管胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的表达。结果:(1)与NC组相比:NS组和HA组的mPAP、RV/(LV+S)、肺细小动脉管壁面积/管总面积比值(WA/TA)和肺细小动脉中膜厚度(PAMT)明显升高(P<0.05);NS组的血浆中H2S水平、肺小动脉及支气管CSE的含量和CSEmRNA的表达显著降低(P<0.05)。(2)与NS组相比:HA组的mPAP、RV/(LV+S)、肺小动脉管壁面积/管总面积比值(WA/TA)和肺小动脉中膜厚度(PAMT)明显降低(P<0.05);血浆中H2S水平、肺小动脉及支气管CSE的含量和CSE mRNA的表达显著升高(P<0.05)。结论:羟胺通过提高血浆中H2S的水平、肺小动脉及支气管CSE的含量和CSE mRNA的表达和改善肺部血管重构,降低慢性低O2和高CO2所致的大鼠肺动脉高压。

低氧性肺动脉高压和慢性支气管炎、肺气肿并肺动脉高压动物模型的异同

目的比较低氧性肺动脉高压与慢性支气管炎、肺气肿并肺动脉高压动物模型的异同,为研究慢性阻塞性肺疾病中肺动脉高压形成机制提供良好的实验模型。方法 24只雄性SD大鼠随机纳入10%低氧组(A组)、慢性支气管炎、肺气肿并肺动脉高压组(B组)及正常对照组(C组),8只/组。吸入10%氧2周制作A组,气管内注入脂多糖和每天烟熏混合刺激加18%低氧制作B组模型。各组测定血气分析、肺血流动力学并对肺泡灌洗液行白细胞计数、分类。肺组织HE染色或三联染色后观测气道炎症和肺血管重构的病理形态学改变。结果 (1)与C组比较,A、B组右心室收缩压、平均肺动脉压、右心室与左心室+室间隔重量比升高,腺泡内肌化型动脉增多、管壁增厚(P<0.05)。(2)BALF分析A组白细胞总数与C组差异无显著性(P>0.05);B组白细胞总数及中性粒细胞增多(P<0.05)。(3)A组气道炎症以上皮细胞变性坏死、黏液杯状细胞增生为主,炎细胞浸润不明显。B组气道炎症符合慢性支气管炎、肺气肿改变,管壁呈现以淋巴细胞为主的多种炎细胞浸润。结论 B组同时体现了慢性气道炎症、肺气肿改变和肺血管重构的特征,更适合用于慢性阻塞性肺疾病中肺动脉高压形成机制的研究。

通腑法治疗慢性阻塞性肺疾病继发缺氧性肺动脉高压疗效观察

目的观察中药通腑煎剂对缺氧性肺动脉高压的影响。方法将患者60例随机分为两组,在西医常规治疗的基础上,治疗组30例服用通腑煎剂,对照组30例服用合心爽。结果治疗组在咳嗽、咯痰、紫绀、大便困难、缺氧及血流变指标改善方面优于对照组;两组治疗后PAPs均显著下降。结论通腑煎剂能够降低缺氧性肺动脉高压,纠正缺氧,改善症状和血液流变学状态。

二氧化硫对低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉内皮细胞炎性反应的影响

目的探讨外源性及内源性二氧化硫(SO2)对低氧性肺动脉高压(HPH)模型中炎性反应的影响。方法将Wistar大鼠随机分为4组:对照组(n=8)、低氧组(n=8)、低氧加SO2组(n=10,予外源性SO2供体Na2SO3/NaHSO3)和低氧加天冬氨酸异羟肟酸(HDX)组(n=10,予内源性SO2生成酶抑制剂HDX)。对低氧组、低氧加SO2组和低氧加HDX组大鼠予低氧处理21d,对照组大鼠置常氧环境。检测各组大鼠肺动脉平均压、肺组织匀浆中SO2水平,免疫组织化学法检测其肺小动脉内皮细胞核转录因子(NF)-κB和细胞间黏附因子-1(ICAM-1)表达情况。结果与对照组比较,低氧组大鼠肺动脉平均压升高127.13%(P<0.01),其肺组织匀浆中SO2水平降低42.64%(P<0.01),肺小动脉内皮细胞NF-κB表达阳性百分比升高303.47%(P<0.01),ICAM-1表达升高119.25%(P<0.01);与低氧组比较,低氧加SO2组大鼠肺动脉平均压降低15.09%(P<0.05),肺组织匀浆中SO2水平升高40.54%(P<0.01),内皮细胞NF-κB表达阳性百分比降低37.71%(P<0.01),ICAM-1表达降低13.65%(P<0.01);与低氧组比较,低氧加HDX组大鼠肺动脉平均压升高13.58%(P<0.01),肺组织匀浆中SO2水平降低40.54%(P<0.01),内皮细胞NF-κB表达阳性百分比升高22.18%(P<0.01),ICAM-1表达升高11.92%(P<0.01)。结论SO2在HPH炎性反应形成过程中发挥重要的保护性调节作用。

Rho激酶在缺氧性肺动脉高压大鼠不同阶段肺组织中的激活及意义

目的探讨缺氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺组织小G蛋白Rho相关激酶(Rho激酶)的表达及其抑制剂法舒地尔对HPH的影响。方法72只雄性SD大鼠。随机均分为对照组、缺氧模型组和法舒地尔干预组。测各组大鼠平均肺动脉压力(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI);采用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法,从基因、蛋白质水平观察肺组织Rho激酶表达规律;免疫印迹法检测其底物肌球蛋白磷酸酶的磷酸化状态,作为该激酶功能活化的标志。结果Rho激酶mRNA和蛋白在HPH大鼠发生早期即明显上调,至模型后期仍维持较高水平;肌球蛋白磷酸酶磷酸化水平也较对照组显著增高(Pa<0.01),并与mPAP及RVHI均呈明显正相关(Pa<0.01);法舒地尔干预后mPAP、Rho激酶mRNA和蛋白、肌球蛋白磷酸酶磷酸化水平均明显降低。结论HPH大鼠肺组织中存在Rho激酶的表达上调与功能活化,提示Rho/Rho激酶信号通路在HPH发病机制中具起重要作用,其抑制剂法舒地尔有望用于肺动脉高压的治疗。

尼可地尔对大鼠低氧性肺高压的影响

目的:探讨线粒体ATP敏感性钾通道开放剂(mitoKATPCO)尼可地尔(nicorandil)对大鼠低氧性肺动脉高压的影响。方法:将40只大鼠随机分成对照组(C组)、低氧组(H组)、低氧+尼可地尔组(N组)与低氧+尼可地尔+5-羟基葵酸盐组(HD组),后3组置于常压低氧仓内,每周6 d,每天8 h,持续4周后测定各组大鼠平均肺动脉压(mPAP),右心肥厚指数RV/(V+S),HE染色观察肺小动脉血管壁的病理变化并检测增殖相关抗原(PCNA)。结果:慢性缺氧可诱导大鼠mPAP及RV/(LV+S)升高,大鼠肺小血管增厚重构,PCNA表达增加,尼可地尔可显著抑制上述变化,且该效应可被线粒体KATP(mitoKATP)通道特异性阻断剂5-羟基葵酸盐阻断。结论:尼可地尔通过开放mitoKATP通道降低肺动脉压,拮抗右心肥厚,并抑制肺血管增殖重构,治疗低氧性肺高压。

肺压宁胶囊治疗慢性阻塞性肺病73例疗效观察

目的:观察纯中药复方制剂———肺压宁胶囊(CapFYN)对慢性阻塞性肺病(COPD)的长期疗效。方法:选取确诊的COPD患者73例,分为治疗组42例,对照组31例。两组基础治疗相同(均不使用氨茶碱),治疗组用肺压宁胶囊每次4粒,每天3次;对照组用硝苯吡定片剂10mg每天3次,对比观察治疗20周前后患者的咳嗽、咳痰、神疲、乏力等症状,舌腹静脉瘀血征,肺功能(1s用力呼气容积/用力肺活量即FEV1/FVC)以及平均肺动脉压的组内和组间变化,并计算它们的危险度(Risk)、相对危险度(RR)、相对危险度减少(RRR)和绝对危险度减少(ARR)值,以评价治疗效果。结果:随访率分别为98%和99%;神疲、乏力症状、瘀血征、肺功能、肺高压4项结果的RR值均>1,症状的RRR为-0 476,余3项的RRR值均<-0 5,4项的ARR值依次为26 11%、43 80%、24 29%、22 39%;两组患者肝肾功能及血、尿常规均无明确改变。结论:肺压宁胶囊是一种长期服用方便、安全,能改善病人症状、瘀血征和气道气流阻塞及降低肺动脉高压的纯中药复方制剂,可作为COPD患者综合治疗的一种辅助方药。

葛根素对缺氧性大鼠肺组织骨桥蛋白及其整合素β3受体基因表达的影响

目的观察葛根素对低O2高CO2肺动脉高压大鼠肺组织骨桥蛋白及其整合素β3受体基因表达的影响。方法♂SD大鼠36只,随机分为3组,每组12只:①对照组(A组);②低O2高CO24wk组(B组);③低O2高CO24wk+葛根素组(C组)。采用右心导管法分别检测肺动脉平均压(mPAP)及颈动脉压(mCAP)。光镜观察并测量肺小动脉管壁厚度、肺细小动脉中膜平滑肌细胞核密度及中膜厚度等;采用RT-PCR检测肺组织骨桥蛋白和整合素β3mRNA表达水平。结果①B组mPAP和RV/(LV+S)均高于A组(P<0.01),而C组mPAP、RV/LV+S明显低于B组(P<0.01);②与A组大鼠相比较,B组大鼠的肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA),肺细小动脉中膜平滑肌细胞核密度(SMC),肺细小动脉中膜厚度(PAMT)均明显增高(P<均0.01);C组大鼠的WA/TA、SMC和PAMT指标均明显低于B组(P<0.01);③与A组比较B组大鼠肺组织OPN与整合素β3表达水平均明显增高(P<0.01);C组大鼠肺组织OPN表达水平明显低于B组(P<0.01),而整合素β3表达水平则与B组比较差异无显著性(P>0.05)。结论慢性低O2高CO2诱导肺动脉高压形成及血管重建过程中可能与肺组织高表达OPN及其整合素β3受体有关;而葛根素减低慢性肺动脉高压可能主要通过抑制OPN的表达而发挥作用,与整合素β3受体表达水平无关。

胸交感神经阻滞对低氧性肺动脉高压大鼠的影响

目的研究胸交感神经阻滞（TSB）对低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠平均肺动脉压（mPAP）及病理形态学的影响。方法选择健康雄性Wistar大鼠48只，随机分为正常对照组、模型组、罗哌卡因组及生理盐水组，每组各12只。正常对照组在常氧常压下饲养3周，其余三组大鼠在自制常压低氧（10．0±0．5）％舱内饲养3周，同时罗哌卡因组和生理盐水组给与胸段硬膜外腔置管分别注入0．2％罗哌卡因和0．9％生理盐水各50止行胸段（胸1—5）交感神经阻滞术（TSB）。分别测定各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、右心室肥厚指数（RV／LV＋S）；观察HE染色的肺组织小动脉变化，利用图像分析技术测定大鼠肺小动脉管壁厚度指标[管壁厚度与血管外周径的百分比（WT％）和管壁面积与血管总面积的百分比（WA％）]。结果①模型组大鼠mPAP、RV／LV＋S、WA％和WT％明显高于正常对照组，肺组织切片HE染色显示，肺小动脉管壁明显增厚，管腔明显狭窄；②罗哌卡因组mPAP明显降低，Rv／LV＋S比值减小，肺小动脉管壁厚度降低。结论TSB能够降低HPH大鼠的mPAP，改善肺血管和右心室的重构。

烟熏联合脂多糖气管内滴注建立原发性高血压大鼠慢性肺阻塞模型

目的通过单纯烟熏法和烟熏联合气管内滴入脂多糖法建立符合慢性肺阻塞(COPD)病人病理生理特点的原发性高血压大鼠COPD模型,比较两种方法复制COPD模型的效果。方法将15只原发性高血压雄性大鼠随机分为3组,每组5只。其中一组为正常对照组,其他两组分别为单纯烟熏(CS)组和脂多糖联合烟熏(LPS+CS)组建立COPD模型组。八周后观察动物一般情况,测量大鼠肺功能,肺组织病理学;Western blot检测各组肺组织中肺泡表面活性物质结合蛋白A(SP-A)、核蛋白NF-κB、Histone、胞浆蛋白p-Iκ-Kα/β、Iκ-Kα/β、IκB-α蛋白表达;qRT-PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA表达的变化。结果两个模型组大鼠消瘦,伴有间歇咳嗽和气促。有创肺功能检测CS组气道阻力(RI)较对照组增高,但差异无统计学意义;气峰流速(PEF)较对照组明显降低。LPS+CS组PEF明显低于对照组和CS组,而RI较对照组和CS组明显增高(P<0.05)。肺组织HE染色显示两个模型组大鼠均具有慢性支气管炎和肺气肿的典型病变,CS组和CS+LPS组平均肺泡数(MAN)明显低于对照组,而肺组织平均内衬间隔(ML I)和肺泡破坏指数(DI)明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CS+LPS组ML I和DI值较CS组明显升高,MAN值较CS组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠肺组织中,SP-A和IκB-α表达水平在CS+LPS组和CS组中表达较对照组明显减少(P<0.05),CS+LPS组较CS组明显减少(P<0.05);而NF-κB表达水平及Iκ-Kα/β的磷酸化水平表达在CS+LPS组和CS组中表达较Control组明显增加(P<0.05),CS+LPS组较CS组明显增加(P<0.05)。CS和CS+LPS组大鼠肺组织中TNF-α组和IL-6 mRNA表达水平较正常组明显增加(P<0.05),且CS+LPS组TNF-α和IL-6 mRNA表达水平较CS组明显增加(P<0.05)。结论烟熏加气管注内毒素及单纯熏香烟,在原发性高血压大鼠上可复制较理想的COPD模型,但烟熏加气管注内毒素较单纯熏香烟建立的COPD大鼠模型更为理想。

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织肾上腺髓质素-2的变化

目的:研究新的小分子生物活性肽肾上腺髓质素-2(ADM2/IMD)及其受体在慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的变化和可能的作用。方法:SD大鼠随机分成2组(n=10):正常对照(NC)组和低氧四周(4H)组;放射免疫法测定血浆和肺组织ADM2/IMD和肾上腺素髓质素(ADM)蛋白水平;逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法测定肺组织ADM2/IMD、ADM及其受体(CRLR,RAMP1、2、3)mRNA表达;免疫组化法测定ADM2/IMD在肺细小动脉的定位表达。结果:①4H组平均肺动脉压(mPAP)、右心室与左心室加室间隔重量比[RV/(LV+S)]高于NC组(P均<0.01)。②4H组血浆和肺组织匀浆ADM水平分别为NC组的2.3倍和3.2倍(P均<0.01),ADM2/IMD水平分别比NC组高89.6%和45.0%(P分别<0.01、<0.05)。③4H组肺组织ADM2/IMD与ADM mRNA表达高于NC组(P分别<0.01、<0.05),CRLR和RAMP1mRNA表达显著低于NC组(P均<0.01),而RAMP2和RAMP3mRNA表达水平两组间差异无显著性。④ADM2/IMD主要在大鼠肺细小动脉内皮细胞及血管外膜表达。结论:ADM2/IMD与ADM相似,与大鼠慢性低氧性肺动脉高压病理过程密切相关;ADM2/IMD及其受体CRLR/RAMP1基因表达和/或蛋白合成、代谢的改变可能参与了大鼠慢性低氧性肺动脉高压的发生发展。

IL-33通过活化巨噬细胞NF-κB信号通路参与低氧性肺动脉高压的发生发展

目的探讨IL-33/ST2应答轴是否通过激活巨噬细胞NF-κB通路促进低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)的发生、发展。方法采用野生型(WT)、IL-33转基因(Il33 Tg)小鼠和St2基因敲除(St2-/-)小鼠制备HPH小鼠模型,采集小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和肺组织标本;进行小鼠BALF总细胞和分类计数;用免疫荧光和免疫组化法检测IL-33、ST2在小鼠肺组织的表达水平和MAC-2+巨噬细胞聚集;用ELISA检测肺组织匀浆中的细胞因子含量;用免疫印迹(Western blot)检测转录因子NF-κB在模型鼠肺组织及体外IL-33刺激的小鼠巨噬细胞系RAW264.7的表达水平。结果 IL-33、ST2在HPH模型小鼠肺组织中表达上调并伴有MAC-2+巨噬细胞增加;Il33 Tg模型鼠肺部以巨噬细胞为主的炎性细胞浸润;低氧可诱导WT小鼠肺组织表达促炎因子IL-1β和巨噬细胞趋化蛋白(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1),而St2基因缺失则下调上述细胞因子表达;低氧亦可诱导上调NF-κB在WT小鼠肺组织表达,而St2基因缺失则可抑制低氧诱导NF-κB的表达。体外实验显示IL-33能上调巨噬细胞NF-κB的表达。结论低氧可促进IL-33/ST2表达增强,进而诱导巨噬细胞内NF-κB通路的激活,导致促炎细胞因子MCP-1、IL-1β的产生,加重炎症反应并间接引起肺动脉血管重塑参与HPH的发生、发展。