Fingerprint analysis of Cirsium japonicum DC.using high performance liquid chromatography

In many areas of China Cirsium setosum is used as Cirsiumjaponicum DC. Although the two herbs have similar appearance and many similar compounds, they are totally different medicinal material, and have different pharmacodynamic actions. The fingerprint spectrum can be a good tool to distinguish the two herbs and control the quality of Cirsium japonicum DC. In this paper, the chemical fingerprint of Cirsiumjaponicum DC was established using raw materials from 15 origins in China. The chromatographic separations were obtained by a SHIM-PACK VP-ODS column （150 mm ~ 4.6 mm i.d., 5 ~tm） using gradient elution, and run time of 80 min. The peak of linarin was considered as the control peak. The experimental data were analyzed with the software of Similarity Evaluation System for Chromatographic Fingerprint of Traditional Chinese Medicine （Version 2004A） and the quality control system of both the overall qualitative similari- ties and the overall quantitative similarities of traditional Chinese medicine chromatographic fingerprints.

大孔树脂纯化大蓟总黄酮工艺优化及其纯化前后抗氧化活性比较

目的 研究大孔树脂纯化大蓟总黄酮的最佳工艺条件并比较提取物与纯化物的体外抗氧化活性。方法 通过静态吸附-解吸实验选择适宜型号的大孔树脂后,采取动态吸附-解吸实验探讨大蓟黄酮提取物的最佳纯化条件,同时测定不同产物对羟自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH·)自由基的清除率。结果 AB-8大孔树脂动态吸附-解吸大蓟黄酮提取物的工艺条件为:上样液浓度为2mg·mL^(-1)、上样流速为1mL·min^(-1)、上样液体积为60mL、乙醇体积分数为75%、洗脱流速为1mL·min^(-1)和洗脱液体积为80mL。纯化后大蓟黄酮的含量由17.6%提高至61.2%。体外实验结果表明,当大蓟黄酮纯化物浓度为1.0mg·mL^(-1)时,对DPPH·和·OH的清除率分别为88.9%、95.1%,较提取物均有提高。结论 采用最佳工艺条件纯化大蓟黄酮粗提物简便可行,且能进一步增强大蓟总黄酮的抗氧化活性。

中药大蓟的化学及药理研究进展

对中药大蓟的复杂化学成分进行了整理 ,发现主要是三萜和甾体类、挥发油类、长链炔醇类、黄酮和黄酮苷类化合物等。并综述了其抗菌、抑制心脏、降压、升压、降低脂质过氧化物形成、止血、抗肿瘤、杀线虫等药理作用。

大蓟化学成分的研究

目的 研究中药大蓟CirsiumjaponicumDC .的化学成分。方法 应用多种色谱技术进行分离纯化 ,根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果 共分得 1 2个化合物 ,分别鉴定为cis 8,9 epoxy heptadeca 1 ene 1 1 ,1 3 diyne 1 0 ol(1 ) ,ciryneolA (2 ) ,8,9,1 0 triacetoxy heptadeca 1 ene 1 1 ,1 3 diyne (3) ,ciryneoneF (4) ,cireneolG (5) ,ciryneolH (6) ,ciryneolC (7) ,对 香豆酸 (8) ,丁香苷 (9) ,蒙花苷 (1 0 ) ,β 谷甾醇 (1 1 )和胡萝卜苷 (1 2 )。 结论 4 ,5 ,6为新化合物 ,3为新天然产物 。

中药大蓟化学成分的研究

从大蓟的50%乙醇提取物中分离得到2个木脂素:(-)2-(3′-甲氧基-4′-羟基-苯基)-3,4-二羟基-4-(3″-甲氧基-4″-羟基-苄基)-3-四氢呋喃甲醇(1)和络石苷(2),以及另外6个化合物:蒙花苷(3)、柳穿鱼叶苷(4)、粗毛豚草素(5)、芹菜素(6)、咖啡酸(7)和对-香豆酸(8)。本文首次在蓟属植物中发现木脂素类成分,化合物7也为首次从本植物中分离得到,通过体外玻片法对化合物1～8进行凝血活性测定,发现化合物3、4具有一定的促凝血作用。

大蓟提取物对植物病原真菌的抑制活性

为了鉴定大蓟中所含成分对植物病原真菌的抑制活性;本研究通过溶剂提取法进行提取,并用生长速率法测定提取物的抑菌活性。结果表明,大蓟提取物对供试的植物病原菌具有一定的抑菌活性,其中50 mg/mL浓度石油醚提取物对石榴枯萎病菌的抑菌活性最高,抑制率达100%,毒力测定EC50为5.1017 mg/mL。

大蓟的止血活性药效初步研究

目的:确定中药大蓟止血有效部位。方法:采用毛细玻管法测定大蓟提取物的止血时间。结果:大蓟药材醇提浸膏的水悬浮正丁醇萃取物可以明显缩短小鼠的止血时间,与蒸馏水组比较有显著性差异。结论:大蓟药材醇提浸膏的正丁醇部位萃取物具有止血功效。

大蓟对5种癌细胞抑制作用的研究

目的:研究大蓟对癌细胞生长的抑制作用。方法:细胞形态观察、活细胞计数法和克隆形成率法研究大蓟对人白血病细胞K562、肝癌细胞HepG2、宫颈癌细胞Hela、胃癌细胞BGC823、结肠癌细胞HT-29生长的抑制作用。结果:大蓟可使五种癌细胞形态上发生皱缩、变圆、脱壁、裂碎等变化,生长受到明显抑制,抑制率最高可达81.73%。结论:大蓟有确切的抑癌作用。

超声提取-反相高效液相色谱法测定新疆大蓟中绿原酸和芦丁的含量

以黄酮提取量为指标,选用正交实验对新疆大蓟总黄酮的超声提取工艺进行优化,结果表明最佳提取条件为:超声电流250mA,料液比1∶30(g/mL),时间40min,总黄酮提取量为2.89mg/g。同时建立了高效液相色谱法测定新疆大蓟中绿原酸及芦丁含量的方法。采用SinoChrom ODS-BP色谱柱,甲醇-1%冰乙酸为流动相,检测波长为340nm,流速为0.9mL.min-1。方法测定绿原酸的线性范围为1.675～16.75μg/mL,相关系数R=0.99995;测定芦丁的线性范围为2～20μg/mL,相关系数R=0.9999,回收率分别为99.45%、99.65%。该法简单准确,适用于新疆大蓟中绿原酸及芦丁的定量分析。

不同地区大蓟炭止血药效与成分差异的初步研究

目的:研究不同地区大蓟炒炭后止血药效和成分的差异。方法:昆明小鼠随机分成阳性对照组、空白组、樟树大蓟炭组、安徽大蓟炭组、湖南大蓟炭组、河北大蓟炭组。连续给药3天后,采用小鼠断尾法和玻片法分别测量各组小鼠尾部出血时间及凝血时间,并用HPLC法初步比较不同地区大蓟炭的成分差异。结果:樟树、湖南地区大蓟止血效果要优于河北地区产大蓟,安徽地区大蓟没有止血效果,且呈现一定的促进出血效果。HPLC图谱显示不同地区产大蓟虽经鉴定均为正品大蓟,但成分差异较大。结论:不同产地大蓟止血效果、成分均存在显著差异,为进一步揭示大蓟炒炭止血增效提供了科学依据。

大蓟提取液对4种癌细胞生长抑制作用的研究

目的研究大蓟提取液对癌细胞生长的抑制作用。方法细胞形态观察和活细胞计数法研究大蓟提取液对人白血病细胞K562,肝癌细胞HepG2,宫颈癌细胞Hela,胃癌细胞BGC823生长的抑制作用。结果大蓟提取液可使4种癌细胞形态上发生皱缩、变圆、脱壁、碎裂等变化,生长受到明显抑制,抑制率最高可达92.34%。结论大蓟有确切的抑癌作用,并与中医的气血理论、药物归经理论和肝肾同源理论相一致,在体外细胞水平上也有良好体现,对实验室手段研究中医药同样有着重要指导意义。

大蓟多糖提取分离及含量测定

用水提-醇沉法从大蓟中提取多糖,脱脂、去蛋白,经冷冻干燥后得到粗多糖。通过苯酚-硫酸法测定糖的含量,粗多糖得率为6.5%。再采用DEAE-纤维素离子交换柱层析进一步分离纯化,得到5个次级组分DJ1,DJ2,DJ3,DJ4和DJ5。其中得率最高的是DJ2组分,为8.06‰。

大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白细胞介素-1和白细胞介素-2的影响

目的在分子水平上探讨大蓟总黄酮的抗肿瘤机制,主要研究大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白介素-1(IL-1)和白介素-2(IL-2)的影响。方法通过RT-PCR方法半定量检测肿瘤小鼠细胞产生IL-1 mRNA和IL-2 mRNA的量来研究大蓟总黄酮能否促进肿瘤小鼠细胞产生IL-1 mRNA和IL-2 mRNA。结果大蓟总黄酮能够极为显著地提高肿瘤小鼠细胞产生IL-1和IL-2的转录水平(P<0.01)。结论大蓟总黄酮能明显地促进肿瘤小鼠IL-1和IL-2 mRNA的表达。

大蓟总黄酮超声提取工艺研究

[目的]研究大蓟中总黄酮的超声提取技术,并优选其提取工艺。[方法]用超声提取技术,研究乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比4个单因素对大蓟总黄酮提取的影响,并在单因素研究的基础上进行正交试验,确立最佳的提取条件。[结果]大蓟中总黄酮的最佳提取条件为以70%乙醇作为提取剂,在40℃条件下以料液比1:20,超声提取30min。优化条件下提取的大蓟总黄酮总得率为8.82mg/g。[结论]超声波提取法是一种理想的提取大蓟总黄酮的方法。

柳穿鱼叶苷和柳穿鱼黄素的大鼠肠外翻吸收研究

目的:研究生大蓟、大蓟炭主要活性成分柳穿鱼叶苷、柳穿鱼黄素在大鼠肠道内的吸收情况。方法:以吸收率和吸收速率常数为指标,通过大鼠外翻肠囊法对柳穿鱼叶苷和柳穿鱼黄素在大鼠小肠各肠段的吸收情况进行对比研究。结果:柳穿鱼叶苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠段的吸收速度常数分别为0.505 1±0.192 7、0.936 0±0.187 2、0.732 0±0.133 5、0.251 3±0.027 6(μg·h-1·cm-2);柳穿鱼黄素在十二指肠、空肠、回肠、结肠段的吸收速度常数分别为0.059 1±0.008 3、0.093 3±0.029 2、0.112 3±0.035 6、0.029 4±0.009 1(μg·h-1·cm-2)。柳穿鱼叶苷在整个小肠段累积吸收率明显大于柳穿鱼黄素。结论:二药的吸收均随时间延长而增多,且在空肠与回肠段吸收情况均好于其它肠段。柳穿鱼叶苷在整个小肠段的吸收情况明显优于柳穿鱼黄素。

响应面法优化大蓟根总黄酮纯化工艺及其纯化前、后的抑菌活性比较

在单因素实验的基础上,利用响应面试验优化大孔树脂纯化大蓟根黄酮提取物工艺,并比较纯化前、后的抑菌活性。通过静态吸附-洗脱实验,考察不同类型大孔树脂对大蓟根黄酮化合物的吸附与解吸性能,选择最佳吸附树脂型号后,采用动态吸附-洗脱实验确定最佳纯化工艺条件,另通过“滤纸片法”考察纯化前、后的黄酮化合物对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果表明,大蓟根黄酮提取物的最佳纯化工艺条件为:质量浓度为2.96 mg/mL、pH4.97的黄酮提取液70 mL,以1.0 mL/min流速上样至D101型树脂后,经180 mL体积分数70.2%乙醇溶液,以1.0 mL/min流速洗脱,在该条件下总黄酮的回收率为69.8%,纯度为67.4%。体外抑菌试验结果表明,与提取物相比,纯化后的黄酮化合物对三种受试菌的抑制圈直径均有显著性增大(P<0.05),抑菌活性更好。

大蓟莲子复合饮料研制及对运动耐力的影响

以大蓟和莲子为原料,研制大蓟莲子复合饮料,并考察其对小鼠的运动耐力影响。以饮料的感官得分为评价指标,基于单因素试验结果,采取响应面法优化确定大蓟莲子复合饮料的最佳配方后,通过小鼠的力竭游泳时间与体内生化指标结果评价其对运动耐力的影响。结果表明,大蓟莲子复合饮料最佳配方为:大蓟提取液与莲子浆液的体积比为1.1∶1,蔗糖量3.8%,柠檬酸量0.3%,黄原胶量0.05%,羧甲基纤维素钠量0.15%,所得复合饮料呈米色,酸甜适中,莲子与大蓟气味协调,且静置未有明显沉淀。动物试验结果表明,中、高剂量的大蓟莲子复合饮料有助于延长小鼠的力竭游泳时间,加快运动时体内生成的乳酸代谢,并显著减少蛋白质分解,因此有助于增强机体的运动耐力,具有良好的抗运动疲劳效果。

大蓟中芸香苷超声提取工艺的优化

目的优化大蓟中总黄酮的提取工艺;考察药材粉碎度、提取时间、料液比的最佳条件。方法采用超声提取法、正交实验法,以分光光度法测定提取物中总黄酮的含量。结果确定了最佳工艺条件,40℃下采用80%甲醇超声提取,料液比1∶10,粉碎度60目,超声提取时间3h。结论用上述方法可优化提取工艺。

大蓟提取物联合抗生素对分枝杆菌的协同抗菌作用

本文探索了大蓟提取物联合抗生素对分枝杆菌属模式菌株耻垢分枝杆菌的协同抗菌作用,以期从药用植物中鉴定新型抗分枝杆菌活性天然产物或新型抗菌增效剂。通过水煮法、索氏提取法、超声波法获取大蓟粗提物,采用管碟法、96微孔板二倍稀释法对三种粗提物进行体外分枝杆菌药敏试验,观察大蓟粗提物的抗分枝杆菌活性及与抗生素的协同抗菌活性。结果显示大蓟粗提物单独作用时,饱和浓度的大蓟水提物未表现出抗菌活性;索氏提取物和超声波提取物表现出一定的抗菌活性(MIC值均为8 mg/mL)。大蓟超声波提取物与抗生素联合作用时,与氯霉素、卡那霉素、庆大霉素和红霉素均表现出协同作用,其中与氯霉素、红霉素表现为明显协同。本文首次发现大蓟中存在与抗生素有协同作用的抗菌增效剂,为从药用植物中鉴定天然抗菌产物及抗菌增效剂奠定了一定基础。

不同产地大蓟炭中柳穿鱼黄素含量测定

目的研究不同产地大蓟炭中柳穿鱼黄素的含量。方法利用高效液相色谱法测定不同产地的大蓟药材炒炭后所含柳穿鱼黄素含量。结果浙江、樟树产地的大蓟炒炭后柳穿鱼黄素含量比较高,而高安产地的大蓟炒炭后柳穿鱼黄素含量比较低,安徽、河北产地的大蓟炒炭后甚至检测不到柳穿鱼黄素。结论不同产地的大蓟炒炭后柳穿鱼黄素含量差异比较大,采用高效液相色谱法测定柳穿鱼黄素含量的方法简单、快速,结果准确、可靠。