Taraxastane-type triterpenoids from the medicinal and edible plant Cirsium setosum

Guided by TNF-α secretion inhibitory activity assay, four taraxastane-type triterpenoids, including two new ones, 22-oxo-20-taraxasten-3β, 30-diol(1) and 22α-hydroxy-20-taraxasten-30β, 30-triol(2), have been obtained from an active fraction of the petroleum ether-soluble extract of the the medicinal and edible plant Cirsium setosum. Their structures were elucidated by spectroscopic data and CD data analysis. In the TNF-α secretion inhibitory activity assay, compounds 1 and 2 were active with the IC50 of 2.6 and 3.8 μmol·L-1, respectively. In addition, compounds 1 and 2 showed moderately selective cytotoxicity against the human ovarian cancer(A2780) and colon cancer(HCT-8) cell lines.

双水相提取小蓟多酚工艺优化及其生物活性研究

以信阳小蓟为试材,采用乙醇-(NH_(4))_(2)SO_(4)双水相法(ATPE)提取多酚,研究了多酚的提取工艺及其对淀粉消化酶的抑制作用和对亚硝酸盐的清除能力,以期为小蓟多酚作为降血糖药品或食品添加剂的开发利用提供参考依据。结果表明:最佳提取工艺条件为(NH_(4))_(2)SO_(4)质量分数23%,乙醇质量分数26%,提取时间60 min,液料比30∶1 mL·g^(-1),提取温度81℃。在此条件下,多酚得率为(9.36±0.51)mg·g^(-1),对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制率的IC_(50)值分别为0.014 mg·mL^(-1)和0.061 mg·mL^(-1),明显优于阿卡波糖,且对亚硝酸盐的清除率高达82.05%,表现出良好的降血糖活性和清除亚硝酸盐的能力。

改善小蓟水提液风味的发酵工艺优化及机制研究

为优化改善小蓟水提液风味的发酵工艺,分析发酵改善其口感的分子机制。该试验通过单菌及混菌发酵、响应面优化法确定最佳发酵工艺,利用代谢组学技术阐释发酵改善小蓟水提液风味的分子机制。结果表明,嗜酸乳杆菌∶嗜热链球菌=3∶1(体积比)为最佳混菌发酵组合,最佳发酵工艺条件为接菌量1.46%、发酵温度23.65℃、蔗糖含量4.35%。发酵后,小蓟水提液总黄酮含量未发生明显变化。代谢组学分析结果显示,小蓟水提液发酵后,6'-唾液乳糖、α-乳糖等甜味成分和2-羟基肉桂酸、双香豆素芳香味成分均显著上调,苦毒宁、番泻苷C等苦涩味物质显著下调,与风味改善有关的代谢主要被富集在糖、氨基酸、核苷酸相关的代谢通路。

一测多评法同时测定小蓟配方颗粒中5种成分

建立一测多评(QAMS)法同时测定小蓟配方颗粒中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、芦丁5种成分的含量。采用高效液相色谱法测定小蓟配方颗粒中5种成分,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流量为0.8 mL/min,柱温为25℃,检测波长为340 nm,进样体积为10μL。5种成分的质量浓度与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均为0.999 9,加标平均回收率分别为94.22%、98.58%、100.98%、99.96%、95.23%,测定结果的相对标准偏差均小于1.00%(n=6)。以绿原酸为内参物,建立其与新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和芦丁的相对校正因子,相对校正因子分别为1.153、1.014、0.783、1.516。将一测多评法计算结果与外标法测定结果进行对比,两种方法对10批小蓟配方颗粒的测定结果均无明显差异,新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸和芦丁测定结果的相对偏差均小于2%。建立的一测多评法测定结果准确可靠,可用于小蓟配方颗粒5种成分的同时测定及质量控制。

小蓟水提液对4种癌细胞生长抑制作用的研究

目的:研究小蓟水提液对癌细胞生长的抑制作用。方法:细胞形态观察、活细胞计数法和克隆形成率法研究小蓟水提液对人白血病细胞K562、肝癌细胞HepG2、宫颈癌细胞Hela、胃癌细胞BGC823生长的抑制作用。结果:小蓟水提液可使4种癌细胞形态上发生皱缩、变圆、脱壁、裂碎等变化,生长受到明显抑制,抑制率最高可达86.03%。结论:小蓟有确切的抑癌作用。

小蓟化学成分的分离与鉴定

目的对传统中药小蓟的化学成分进行分离与鉴定,为进一步开发利用小蓟提供科学依据。方法采用反复硅胶柱色谱法进行分离纯化,通过理化常数测定和波谱分析鉴定其化学结构。结果从小蓟提取物的氯仿层和乙酸乙酯层中分离得到9个化合物,即苜蓿素(tricin,1)、蒙花苷(linarin,2)、咖啡酸(caffeic acid,3)、香豆酸(courmaric acid,4)、丁二酸(succinic acid,5)、芹菜素(apigenin,6)、苜蓿素-7-O-β-D-葡萄糖(tricin-7-O-β-D-glucopyranoside,7)、β-谷甾醇(β-sitosterol,8)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol,9)。结论化合物5、7为首次从蓟属植物中分离得到,化合物1、4为首次从小蓟中分离得到。

ITS2序列鉴定大蓟、小蓟药材及其近缘混伪品

目的:应用ITS2序列鉴别大蓟、小蓟药材及其近缘混伪品,以保障临床用药准确。方法:收集大蓟、小蓟药材的基原物种蓟和刺儿菜及其近缘混伪品,经DNA提取、PCR扩增、测序和序列拼接等步骤,获得ITS2序列,结合Gen Bank载序列共14个物种54条序列,用MEGA6.0对序列进行比对分析,计算种内种间K2P(Kimura 2-Parameter)遗传距离,构建系统邻接(NJ)树。结果:ITS2序列分析表明,蓟和刺儿菜种内变异位点数均远小于其与混伪品种间变异位点,以上2个物种种内最大(平均)K2P距离均小于其与混伪品种间最小(平均)K2P距离;基于ITS2序列的系统NJ树可以将蓟和刺儿菜及其近缘混伪品很好地区分开,且各物种均单独成支。结论:ITS2序列可以很好地鉴定大蓟、小蓟药材及其近缘混伪品。

大孔吸附树脂分离纯化小蓟多糖的工艺研究

试验以吸附率与解析率为考察指标,比较4种大孔吸附树脂D101、D4020、AB-8、X-5对小蓟(Cirsium setosum)多糖的纯化效果。采用分光光度法测定小蓟多糖的含量,用静态与动态吸附-解析方法从4种树脂中筛选出最适树脂,采用单因素试验和正交试验优化其纯化工艺。结果表明,AB-8型大孔树脂为纯化小蓟多糖的最佳树脂;其纯化最佳工艺条件为:上样液浓度2.0 mg/m L,上样量30 m L,流速1.0 m L/min,洗脱剂p H 7.0。在此工艺条件下,AB-8对小蓟多糖的解析率可达77.93%。

小蓟化学成分的研究

目的:对小蓟的化学成分进行研究。方法:运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析等手段进行分离,运用UV、1HNMR、13CNMR、MS等波谱方法进行结构鉴定。结果:共分离鉴定了6个化合物,分别为乙酸橙酰胺(auran-tiam ide acetate,1),loliolide(2),刺槐素(acacetin,3),蒙花苷(linarin,4),洋芹素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(ap igen in-7-O-β-D-butylglucuron ide,5),β-胡萝卜苷(β-daucosterol,6)。结论:化合物1为首次从蓟属植物中分离得到,化合物2、5、6首次从小蓟中分离得到。

不同除草剂对恶性杂草刺儿菜的田间药效试验研究

为明确麦草畏、苯磺隆、滴·氨氯等不同作用机理的除草剂对恶性杂草刺儿菜的防除效果。采用田间小区试验、茎叶喷雾法测定了18种除草剂对刺儿菜的田间防效。结果表明:施药后30天,26%滴·氨氯水剂和48%麦草畏水剂对刺儿菜的株数和鲜重防效最高,分别为71.19%、70.69%和91.63%、88.67%;其次为10%乙羧氟草醚乳油和41%草甘膦水剂,株数防效分别为64.88%和63.15%,鲜重防效均为84.69%。其余药剂对刺儿菜的株数和鲜重防效差,防效在60%以下。20%百草枯水剂、25%辛酰溴苯氰乳油和24%乳氟禾草灵乳油处理区药后15天防除刺儿菜效果较好,但药后30天刺儿菜复生现象明显,防除效果明显降低。

基于DNA条形码技术的中药小蓟基原植物的分子鉴定

目的:对中药小蓟的基原植物进行分子鉴定,以确保药材质量及其临床疗效。方法:以核基因ITS2片段及叶绿体基因片段psbA-trnH作为DNA条形码,对研究材料进行PCR扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA4.0进行相关数据分析,并构建NJ(邻接)树。结果:所研究的刺儿菜复合体样本的ITS2序列间存在明显差异,psbA-trnH序列间也存在稳定差异,基于ITS2序列及psbA-trnH序列构建的邻接(NJ)树可以看出大刺儿菜与小刺儿菜不同样本均能聚为独立一支,表明中药小蓟的基原植物刺儿菜复合体确为两个独立的物种。结论:ITS2和psbA-trnH序列作为DNA条形码可以有效地区分和鉴别物种,在中药原植物物种分类与中药鉴定方面具有广阔的应用前景。

大孔吸附树脂富集小蓟中咖啡酸酯类成分的研究

目的通过对23种大孔吸附树脂筛选,寻找适用于纯化小蓟中咖啡酸酯类成分的大孔吸附树脂,为从小蓟中工业化生产咖啡酸酯类成分提供依据。方法采用23种大孔吸附树脂对小蓟提取物进行吸附纯化,以总咖啡酸酯收率和纯度作为指标综合评价。结果23种吸附树脂中,以树脂HPD-100吸附洗脱的总咖啡酸酯的收率最高为87.6%、纯度为52.2%。结论HPD-100树脂综合性能良好,适用于小蓟中咖啡酸酯类成分的纯化。

正交实验法优选小蓟中总黄酮的提取工艺

优选小蓟中总黄酮的最佳提取工艺。以总黄酮提取率作为考察的指标,运用超声法提取小蓟中的总黄酮,将乙醇体积分数(A)、超声提取时间(B)和料液比(C)3个因素作为单因素实验对象,在单因素实验的基础上设计正交实验,从而确定最佳工艺为乙醇体积分数80%,超声提取时间45 min,料液比1∶20 (g·mL^(-1))时提取率最高。该方法操作简便、准确、提取率高,并且此实验结果为小蓟的进一步研究奠定了基础。

小蓟中蒙花苷的制备工艺研究

目的:筛选大孔树脂吸附法制备小蓟中蒙花苷的最优条件。方法:采用大孔吸附树脂富集小蓟中的蒙花苷,用高效液相色谱法测定样品中蒙花苷的含量,评价6种大孔吸附树脂对蒙花苷的静态吸附/解吸和动态吸附/解吸程度,筛选出对小蓟中蒙花苷富集纯化能力最佳的大孔吸附树脂。结果:经实验,确定6种树脂中的HPD450型大孔吸附树脂对小蓟中蒙花苷的富集纯化能力最佳。其最佳工艺条件为:以3 BV的小蓟供试品溶液(生药浓度为0.5 g.mL-1)为上样量,吸附速率为1 BV.h-1,吸附2 h后,洗脱流速为4 BV.h-1,收集5 BV的水洗脱液,4 BV的30%乙醇洗脱液,3 BV的50%乙醇洗脱液,减压浓缩,即得。结论:用HPD450型大孔吸附树脂从小蓟中纯化得到的蒙花苷含量达75%以上。

刺儿菜复合体的形态学研究

刺儿菜复合体—大刺儿菜（Ｇｉｒｓｉｕｍｓｅｔｏｓｕｍ（Ｗｉｌｄ．）ＭＢ．）与小刺儿菜（Ｇ．ｓｅｇｅｔｕｍＢｇｅ．）的分合问题在植物分类界一直存有争议。本文对不同产地、不同居群的全国２００份刺儿菜复合体标本的若干性状选用Ｅ．Ａｎｄｅｒｓｏｎ的形象化散点图和柱状图方法进行研究分析，认为将大刺儿菜与小刺儿菜分为独立的种是合理的。

小蓟提取液对四种癌细胞生长抑制作用的研究

目的:研究小蓟提取液对癌细胞生长的抑制作用。方法:细胞形态观察和活细胞计数法研究小蓟提取液对人白血病细胞K562、肝癌细胞HepG2、宫颈癌细胞Hela、胃癌细胞BGC823生长的抑制作用。结果:小蓟提取液可使四种癌细胞发生皱缩、变圆、脱壁、碎裂等形态变化,生长受到明显抑制,抑制率最高可达88.27%。结论:小蓟有确切的抑癌作用,并与中医的气血理论、药物归经理论和肝肾同源理论相一致,再次说明了中医基本理论在体外细胞水平上也有良好体现,对实验室手段研究中医药同样有着重要指导意义。

野生刺儿菜和刻叶刺儿菜中氨基酸与微量元素含量的比较分析

[目的]为科学地开发利用刻叶刺儿菜的食用及药用价值奠定基础。[方法]采用氨基酸自动分析仪和原子吸收分光光度计测定分析野生刺儿菜和刻叶刺儿菜中氨基酸与微量元素的含量。[结果]天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸和脯氨酸在刺儿菜中的含量分别为0.17%、0.09%、0.08%、0.19%、0.10%、0.10%、0.09%、0.01%、0.16%、0.07%、0.06%、0.10%、0.13%、0.04%、0.09%和0.07%,在刻叶刺儿菜中的含量分别为0.17%、0.08%、0.08%、0.18%、0.09%、0.10%、0.09%、0.01%、0.15%、0.07%、0.06%、0.10%、0.13%、0.04%、0.09%和0.06%。钾、钠、钙、镁、铜、锌、铁和锰在刺儿菜中的含量分别为15.376、0.509、142.265、10.701、0.016、0.071、0.271和0.045mg/g,在刻叶刺儿菜中的含量分别为16.110、1.141、144.834、9.305、0.020、0.053、0.294和0.050mg/g。[结论]刺儿菜和刻叶刺儿菜都含有丰富的氨基酸和人体所需的多种微量元素。

高效液相色谱法测定小蓟中芦丁含量

目的采用高效液相色谱法对小蓟中芦丁成分进行定量。方法采用Lichrospher C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),柱温30℃,甲醇-0.5%醋酸(体积比为35∶65)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长254nm。结果小蓟中芦丁的含量为0.5808mg/g。结论经过系统的方法学考察,该方法具有简便、专属、稳定、可重复的特点,可用于小蓟中芦丁的含量测定。

小蓟胶囊制备工艺及抗氧化活性研究

优选小蓟抗氧化胶囊的最佳辅料与制剂工艺并验证制备的胶囊的质量和抗氧化活性。通过测定不同比例辅料的吸湿率、堆密度等,筛选出最佳辅料,并确定胶囊壳的型号和装量。对蒙花苷的含量、薄层色谱、水分、装量差异进行小蓟胶囊的质量评价实验研究,以此考察制备的小蓟胶囊是否符合“中国药典2020版”的相关要求。以Vc作为对照,考察胶囊内容物对DPPH自由基的清除能力,以自由基清除率为指标,计算清除率和半数有效浓度的IC50值。小蓟胶囊浸膏粉与微晶纤维素的最佳比例为1∶1,休止角为33.69°,堆密度为0.5208 g·mL^(-1),选用0号胶囊壳,胶囊的装量为0.3489 g。质量评价实验结果显示,薄层色谱检测发现供试品与对照品色谱在相应位置显相同颜色荧光斑点,表明小蓟胶囊内容物中含有蒙花苷。含量测定得出,每粒小蓟胶囊中蒙花苷的质量应不低于115 mg。装量差异检测得到,小蓟胶囊3批次的装量差异均在±7.5%内,符合“中国药典2020版”的要求。通过抗氧化活性实验发现,小蓟胶囊和Vc对DPPH自由基的清除能力均表现为随着浓度的升高而提升,代入回归方程得出小蓟胶囊的半数有效浓度IC_(50)值为0.06 mg·mL^(-1),Vc的半数有效浓度IC_(50)值为0.13 mg·mL^(-1)。

小蓟活性成分及作用研究进展

小蓟是一种分布广泛的可食用野菜,同时具有很高的药用价值,近年来受到研究人员的广泛关注。本文对近年来所发现的小蓟的活性成分进行了总结归纳,概述了小蓟在凝血、心血管系统、抗菌消炎等方面的作用,期望能为以后的研究提供一定的参考,为开发小蓟的功能性食品提供依据。