小蓟水提液对4种癌细胞生长抑制作用的研究

目的:研究小蓟水提液对癌细胞生长的抑制作用。方法:细胞形态观察、活细胞计数法和克隆形成率法研究小蓟水提液对人白血病细胞K562、肝癌细胞HepG2、宫颈癌细胞Hela、胃癌细胞BGC823生长的抑制作用。结果:小蓟水提液可使4种癌细胞形态上发生皱缩、变圆、脱壁、裂碎等变化,生长受到明显抑制,抑制率最高可达86.03%。结论:小蓟有确切的抑癌作用。

小蓟化学成分的分离与鉴定

目的对传统中药小蓟的化学成分进行分离与鉴定,为进一步开发利用小蓟提供科学依据。方法采用反复硅胶柱色谱法进行分离纯化,通过理化常数测定和波谱分析鉴定其化学结构。结果从小蓟提取物的氯仿层和乙酸乙酯层中分离得到9个化合物,即苜蓿素(tricin,1)、蒙花苷(linarin,2)、咖啡酸(caffeic acid,3)、香豆酸(courmaric acid,4)、丁二酸(succinic acid,5)、芹菜素(apigenin,6)、苜蓿素-7-O-β-D-葡萄糖(tricin-7-O-β-D-glucopyranoside,7)、β-谷甾醇(β-sitosterol,8)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol,9)。结论化合物5、7为首次从蓟属植物中分离得到,化合物1、4为首次从小蓟中分离得到。

小蓟化学成分的研究

目的:对小蓟的化学成分进行研究。方法:运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析等手段进行分离,运用UV、1HNMR、13CNMR、MS等波谱方法进行结构鉴定。结果:共分离鉴定了6个化合物,分别为乙酸橙酰胺(auran-tiam ide acetate,1),loliolide(2),刺槐素(acacetin,3),蒙花苷(linarin,4),洋芹素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(ap igen in-7-O-β-D-butylglucuron ide,5),β-胡萝卜苷(β-daucosterol,6)。结论:化合物1为首次从蓟属植物中分离得到,化合物2、5、6首次从小蓟中分离得到。

基于DNA条形码技术的中药小蓟基原植物的分子鉴定

目的:对中药小蓟的基原植物进行分子鉴定,以确保药材质量及其临床疗效。方法:以核基因ITS2片段及叶绿体基因片段psbA-trnH作为DNA条形码,对研究材料进行PCR扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA4.0进行相关数据分析,并构建NJ(邻接)树。结果:所研究的刺儿菜复合体样本的ITS2序列间存在明显差异,psbA-trnH序列间也存在稳定差异,基于ITS2序列及psbA-trnH序列构建的邻接(NJ)树可以看出大刺儿菜与小刺儿菜不同样本均能聚为独立一支,表明中药小蓟的基原植物刺儿菜复合体确为两个独立的物种。结论:ITS2和psbA-trnH序列作为DNA条形码可以有效地区分和鉴别物种,在中药原植物物种分类与中药鉴定方面具有广阔的应用前景。

大孔吸附树脂富集小蓟中咖啡酸酯类成分的研究

目的通过对23种大孔吸附树脂筛选,寻找适用于纯化小蓟中咖啡酸酯类成分的大孔吸附树脂,为从小蓟中工业化生产咖啡酸酯类成分提供依据。方法采用23种大孔吸附树脂对小蓟提取物进行吸附纯化,以总咖啡酸酯收率和纯度作为指标综合评价。结果23种吸附树脂中,以树脂HPD-100吸附洗脱的总咖啡酸酯的收率最高为87.6%、纯度为52.2%。结论HPD-100树脂综合性能良好,适用于小蓟中咖啡酸酯类成分的纯化。

小蓟提取液对四种癌细胞生长抑制作用的研究

目的:研究小蓟提取液对癌细胞生长的抑制作用。方法:细胞形态观察和活细胞计数法研究小蓟提取液对人白血病细胞K562、肝癌细胞HepG2、宫颈癌细胞Hela、胃癌细胞BGC823生长的抑制作用。结果:小蓟提取液可使四种癌细胞发生皱缩、变圆、脱壁、碎裂等形态变化,生长受到明显抑制,抑制率最高可达88.27%。结论:小蓟有确切的抑癌作用,并与中医的气血理论、药物归经理论和肝肾同源理论相一致,再次说明了中医基本理论在体外细胞水平上也有良好体现,对实验室手段研究中医药同样有着重要指导意义。

高效液相色谱法测定小蓟中芦丁含量

目的采用高效液相色谱法对小蓟中芦丁成分进行定量。方法采用Lichrospher C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),柱温30℃,甲醇-0.5%醋酸(体积比为35∶65)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长254nm。结果小蓟中芦丁的含量为0.5808mg/g。结论经过系统的方法学考察,该方法具有简便、专属、稳定、可重复的特点,可用于小蓟中芦丁的含量测定。

小蓟化学成分的分离与鉴定

目的研究小蓟的化学成分。方法采用硅胶、凝胶、ODS柱色谱以及HPLC制备法对小蓟的乙醇提取物进行分离纯化,利用理化性质和波谱学手段鉴定其结构。结果从小蓟乙醇提取物中分离得到14个化合物,经鉴定分别为邻二苯酚（1,2-benzenediol,1）、反式对香豆酸葵酯（decyl transp-coumarate,2）、原儿茶醛（protocatechualdehye,3）、对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid,4）、香草酸（vanillic acid,5）、刺槐素（ermanine,6）、岳桦素（acacetin,7）、马齿苋酰胺（oleracein E,8）、芹菜素（apigenin,9）、木犀草素（luteolin,10）、槲皮素（quercetin,11）、异山柰素-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（isokaempferide-7-O-β-D-glucopyranoside,12）、高车前苷（homoplantaginin,13）和蒙花苷（linarin,14）。结论化合物1-4、7、8和13为首次从小蓟中分离得到。

中药小蓟不同药用部位体外抗炎、促凝血的作用研究

目的:研究小蓟不同部位化学成分的差异与抗炎、促凝血病症疗效关系,研究生药不同部位的精准应用。方法:使用HPLC色谱法建立不同部位的指纹图谱,MTT法测定不同部位提取物对炎症细胞RAW264.7增值的抑制作用,ELISA法测定不同部位提取物对小鼠凝血酶原(PT)指标的影响,并使用灰色关联软件,将色谱峰的峰面积与抗炎、凝血酶原指标相关联,得到各个成分的贡献率。结果:小蓟根、茎、叶、花中的成分种类与含量均有不同。在体外抗炎药效研究中,小蓟花的效果最好,对炎症细胞RAW264.7的抑制率达到63.25%。小蓟根次之,小蓟叶与茎对炎症细胞的抑制作用不大。用ELISA法测定小鼠血浆中凝血酶原指标,小蓟花对指标影响最大,叶次之,茎与根对指标变化影响不大。灰色关联度计算软件结果显示,绿原酸、橙皮苷、咖啡酸、蒙花苷对抑制炎症细胞增值(抗炎)的相关程度分别为0.7250,0.5249,0.5105,0.5096。与升高凝血酶原指标(止血)的相关程度分别为0.5982,0.5088,0.5037,0.5034。其关联程度与其他成分相比,差距较大。结论:小蓟不同部位和抗炎、促凝血病症的药效存在差异,明确了生药小蓟不同部位的精准应用。

小蓟饮片标准煎液中蒙花苷的TLC鉴别及HPLC含量测定

目的建立小蓟标准煎液中蒙花苷的TLC鉴别及HPLC含量测定的方法。方法采用TLC法对小蓟标准煎液进行定性鉴别,以乙酰丙酮-丁酮-乙醇-水(体积比1∶3∶3∶13)为展开剂,AlCl_3试液为显色剂;采用HPLC法测定不同厂家不同批次小蓟中蒙花苷的含量,Kromasil 100-5C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-体积分数0.5%醋酸(体积比55∶45)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为326 nm,柱温30℃;并对标准煎液中蒙花苷转移率进行研究。结果 TLC法能鉴别出蒙花苷,且特征斑点清晰,专属性强;HPLC含量测定方法中,蒙花苷在0.11~2.2μg之间与峰面积线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为99.55%(n=6),RSD值为1.9%。15批次小蓟饮片制成的标准煎液中蒙花苷质量浓度为1.03~1.31mg/mL,转移率为76.34%~88.29%。结论所建立的TLC和HPLC法操作简便、准确、重复性好,可以用于小蓟标准煎液的质量控制。

宁南山区林业苗圃刺儿菜化学防治研究

选用多种除草剂及组合对宁夏南部山区林业苗圃中的恶性杂草刺儿菜进行化学防除试验研究,结果表明:防除刺儿菜最好的药剂组合是力虎+速展,助剂为斩草除根。刺儿菜平均高度<10 cm时,用药量以力虎750 m L/hm^2+速展300 m L/hm^2为宜;平均高度为10~20 cm时,用药量以力虎1 125 m L/hm^2+速展450 m L/hm^2为宜;平均高度为20~50cm时,用药量以力虎1 500 m L/hm^2+速展600 m L/hm^2为宜;高度>50 cm时,用药量继续增加即可。然而,在刺槐苗圃喷施力虎会对刺槐产生毁灭性的药害,应禁止在刺槐苗圃使用力虎。

中药大蓟及其2种伪品的微性状鉴别

目的鉴别市场上大蓟及其2种伪品。方法通过微性状鉴定法对大蓟及其伪品进行观察研究。结果蓟的茎、叶均被蛛丝毛及多细胞长节毛,苞片两面及边缘均被毛,花丝亦被毛,花药顶端呈长三角形,冠毛顶端呈纺锤形扩大或渐细;刺儿菜茎、叶仅被蛛丝毛,苞片内面无毛,花药顶端呈削尖状,冠毛顶端渐细;花叶滇苦菜茎、叶以及苞片均无毛,花丝光滑,花药顶端呈黑色,花冠被长毛,果实边缘具齿。结论微性状鉴定法可准确、快速地鉴别大蓟及其伪品。

小蓟的研究进展

小蓟作为药食两用的植物资源,已有数千年的悠久历史。目前研究发现,小蓟主要含黄酮类、萜类、苯丙素类、苯乙醇苷类、生物碱类、植物甾醇类等多种化学成分,具有止血、凝血、对心血管系统的作用、抗菌、抗炎等多种药理活性。查阅近30年国内外文献,对小蓟的化学成分和药理作用等方面进行综述,以期为小蓟的深入研究和开发利用提供参考。

HPLC同时测定小蓟中蒙花苷和绿原酸的含量

目的:建立同时测定小蓟中绿原酸和蒙花苷含量的测定方法,并用此方法测定不同产地小蓟药材的含量。方法:HPLC法,采用Diamonsil C18(4.6 mm×200 mm,5μm)为色谱柱;以甲醇为流动相A,以水(含1%冰乙酸)为流动相B,梯度洗脱;流速1.0 mL·min-1;柱温35℃;进样量20μL;检测波长为327 nm。结果:蒙花苷、绿原酸的浓度与峰面积成良好的线性关系,蒙花苷、绿原酸线性范围分别为0.018～0.18 g·L-1(r=1)和0.005～0.05 g·L-1(r=0.9996);加样回收率分别为99.6%和99.3%,RSD分别为0.5%和1.1%。结论:该法简便,快捷,结果准确、重复性好,可用于小蓟药材中蒙花苷和绿原酸的质量控制。

小蓟中蒙花苷对照品的制备和鉴定

目的研究从小蓟药材中制备蒙花苷对照品的制备方法和鉴定技术。方法采用石油醚脱脂、碱溶解酸沉淀法对70%乙醇小蓟药材提取物进行分离纯化,通过UV、1H-NMR和13C-NMR进行结构鉴定,TLC和HPLC法对产品进行纯度检测。结果从小蓟中分离、纯化得到蒙花苷对照品。经TLC法检查无杂质斑点,HPLC法检测质量分数达97%。结论该方法制备的蒙花苷对照品符合中药化学对照品的相关要求,可作为小蓟药材及其制剂质量控制以及中药药效物质基础研究用的化学对照品。

小蓟中挥发油成分的分析及其抑菌与止血作用的研究

目的分析小蓟的花、叶和茎中挥发油的化学成分及其抑菌、止血作用。方法采用超临界二氧化碳萃取,应用GCMS法鉴定挥发油的化学成分,考察其体外抗菌、止血的活性。结果共鉴定166个化合物,花的挥发油中主要有2-乙氧基-3-氯丁烷(16.68%)、二十八烷(12.96%)、甲苯(7.71%)等;叶的挥发油中主要有1,1-二乙氧基乙烷(18.90%)、二十八烷(13.13%)、2,3-丁二醇(13.00%)、二十五烷(10.00%)等;茎的挥发油中主要有甲氧基苯基肟(27.05%)、十六烷酸(14.48%)、3-癸炔-2-醇(12.84%)、仲丁基醚(11.05%)、十四烷酸(10.12%)等。花、叶和茎中不同萃取挥发油对特定病原菌有特殊抑菌效果,其MIC=0.031 mg·m L-1。茎的高剂量挥发油可明显缩短出血和凝血的时间。结论花、叶和茎中挥发油的差异较大,含抑菌和止血成分。