铁线莲组(铁线莲属)植物染色体核型分析

采用常规压片法对铁线莲属(Clematis Linn.)铁线莲组(Sect.Viticella DC.)10种植物根尖进行制片,并进行染色体核型分析,同时基于核型似近系数对供试植物进行UPGMA聚类分析。结果表明:这些植物均为二倍体(2n=2x=16),并且,多数染色体为中部(m)着丝点染色体,部分染色体为近端部(st)着丝点染色体,少数染色体为近中部(sm)或端部(t)着丝点染色体;核型公式有10m+6st、10m+2sm+4st和10m+4st+2t 3种;吴兴铁线莲(C.huchouensis Tamura)的染色体相对长度范围(8.34~17.87)、最长染色体与最短染色体相对长度的比值(2.14)、平均臂比(3.15)均最大;吴兴铁线莲和意大利铁线莲(C.viticella Linn.)的核型为“2B”,其余种类的核型为“2A”;短柱铁线莲(C.cadmia Buch.-Ham.ex Wall.)的核型不对称系数最大(65.78%)、着丝点指数(31.88%)最小,而天台铁线莲〔C.patens ssp.tientaiensis(M.Y.Fang)W.T.Wang〕的核型不对称系数最小(61.28%)、着丝点指数(35.27%)最大。供试植物第1至第5对染色体均为中部着丝点染色体,第6至第8对染色体则为近中部、近端部或端部着丝点染色体。核型不对称性散布图显示:重瓣铁线莲(C.florida var.plena D.Don)、天台铁线莲、铁线莲(C.florida Thunb.)和转子莲(C.patens C.Morr.et Decne.)均位于左下角,说明这些植物的核型不对称性较低。在核型似近系数为0.948处,供试的10种植物分成2组。研究结果显示:供试铁线莲组10种植物中,重瓣铁线莲等4种植物处于相对原始的地位。

圆锥铁线莲化学成分的研究

目的对圆锥铁线莲全草的乙醇提取物进行分离和结构鉴定。方法通过硅胶和凝胶柱色谱分离；利用多种波谱技术并结合酸水解方法鉴定其化学结构。结果分离鉴定了7个化合物，分别为正二十三醇（Ⅰ）、正二十七烷酸（Ⅱ）、3，5，7，3＇-四羟基黄酮（Ⅲ）、5，7,3’，5＇-四羟基二氢黄酮（Ⅳ）、芹菜素（Ⅴ）、木犀草素（Ⅵ）和豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷（Ⅶ）。结论化合物Ⅰ～Ⅳ为首次从铁线莲属中分离得到。

圆锥铁线莲对慢性非细菌性前列腺炎的治疗作用及机制研究

本文研究圆锥铁线莲水提取物对实验性慢性非细菌性前列腺炎的治疗作用,并对其抗炎的作用机制进行初步探讨。采用苯甲酸雌二醇致去势大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型,研究圆锥铁线莲对慢性非细菌性前列腺炎的治疗作用。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,Western Blot和免疫组化法检测前列腺组织环氧酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的变化,探讨圆锥铁线莲发挥抗炎作用的可能机制。研究发现苯甲酸雌二醇致去势大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型中,圆锥铁线莲2 g/kg组可见前列腺液中白细胞数明显降低,卵磷脂小体数量明显增加;病理切片可见炎症细胞浸润和成纤维细胞增生的情况有所改善。圆锥铁线莲能明显降低苯甲酸雌二醇致去势大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型血清中IL-1β及TNF-α的含量,减少前列腺组织中COX-2和i NOS的表达。表明圆锥铁线莲水提取物对慢性非细菌性前列腺炎具有良好的抑制作用,其作用机制可能是通过调节炎症细胞因子水平、抑制COX-2以及i NOS的表达,从而避免局部产生过量的前列腺素(PG)和一氧化氮(NO),减轻局部炎性损伤实现的。

藏药短尾铁线莲化学成分研究

目的:对藏药短尾铁线莲的化学成分进行系统研究。方法:利用硅胶柱色谱和制备薄层色谱等方法进行分离、纯化,并经核磁共振、质谱等现代波谱技术确定其结构。结果:从短尾铁线莲的95%乙醇室温提取物中获得了15个化合物,利用波谱技术鉴定了其中8个化合物的结构,分别为:棕榈酸(1)、二十二烷醇(2)、二十五烷酸-α-单甘油酯(3)、β-谷甾醇(4)、胡萝卜苷(5)、对羟基反式肉桂酸直链烷基酯类混合物(6)、3,4-二羟基反式肉桂酸乙酯(7)、丁香树脂单-β-D-葡萄糖苷(8)。结论:这些化合均为首次从该植物中获得。

威灵仙、秦艽、桑寄生醇提物体外对淋巴细胞和环氧酶的影响

目的 :探讨威灵仙、秦艽和桑寄生提取物对淋巴细胞和环氧酶的影响。方法 :测定小鼠胸腺淋巴细胞和脾脏淋巴细胞增殖的变化 ,新生小公牛颈动脉内皮细胞的 6 keto PGF1α和小鼠腹腔巨噬细胞的PGE2 含量。结果 :威灵仙、秦艽和桑寄生对小鼠胸腺淋巴细胞和脾脏淋巴细胞的增殖有抑制作用 ,三种药物对环氧酶 1(COX 1)和氧化酶 2 (COX 2 )有不同程度的抑制。结论 :三种药物的祛风湿的部分机理可能是由于抑制淋巴细胞增殖和环氧酶而介导的。

女萎挥发油成分分析

目的:分析女萎挥发油化学成分。方法:采用气相色谱-质谱联用技术对浙江产女萎的挥发油成分进行了研究。结果:鉴定出26个组分,其中棕榈酸、植醇、9(Z),12(Z)-十八碳二烯酸、亚麻酸为主要成分,尤其是棕榈酸,其含量占挥发油成分总量的54.80%。结论:本方法为合理开发、利用女萎提供了一定的科学依据。

大叶铁线莲(Clematis heracleifolia DC.)多态性SSR引物开发

大叶铁线莲具有较高的观赏价值和药用价值,利用SSR分子标记技术挑选出一套多态性好、稳定性强的SSR引物对合理开发和利用大叶铁线莲有着重要的意义。本试验筛选出了18对多态性较好的引物,并对这些引物的多态性进行分析。结果显示,18对引物在20个大叶铁线莲个体中一共获得了122个等位基因(Na),平均等位基因为6.8,观测杂合度(Ho)介于0.278~1.000之间,期望杂合度(He)介于0.465~0.917之间,多态位点信息含量(PIC)介于0.398~0.885之间,平均值为0.669。此外,利用NTSYS version2.10e软件绘制出大叶铁线莲个体的聚类分析树状图,结果表明,这18对SSR引物能够将基于不同居群的大叶铁线莲较好的分为两组,不同居群的大叶铁线莲之间也表现出了高度的遗传分化。本研究所开发的多态性SSR引物为大叶铁线莲以及铁线莲属植物的群体遗传学研究提供了研究工具。

高效液相色谱法测定短尾铁线莲中槲皮素的含量

目的:测定短尾铁线莲中槲皮素的含量。方法:采用高效液相色谱法,Kromasil(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,甲醇:0.4%磷酸(62:38)为流动相,流速为1.0ml/min;检测波长360nm。结果:槲皮素浓度在21.55μg/ml～63.12μg/ml范围之间与峰面积线性关系良好,r=0.9996。槲皮素平均回收率为101.7%,RSD=1.73%。结论:采用高效液相色谱法测定短尾铁线莲中槲皮素的含量具有分离效果好、简便、结果准确的优点。

3种铁线莲挥发性成分的GC-MS分析

目的研究3种铁线莲的化学成分,为进一步开发利用3种铁线莲提供依据。方法采用气相色谱-质谱进行分析。结果对石油醚提取物进行了气相色谱-质谱分析,共鉴定出115个化合物。疏金毛铁线莲的主要成分是二十烷(8.45%),二十八烷(7.16%),角鲨烯(6.81%),二十七烷(5.78%),二十三烷(3.3%),二十四烷(2.38%)和BHT(1.11%);毛茛铁线莲的主要成分是二十八烷(30.37%),二十烷(18.45%),角鲨烯(3.06%),二十七烷(1.6%)和BHT(0.39%);合柄铁线莲的主要成分是二十烷(5.51%),十六酸(3.82%),亚油酸(3.44%),9,12-亚油酸甲酯(2.47%),亚油酸乙酯(1.56%),亚麻酸甲酯(1.32%),2-十二烷基醚乙醇(1.32%)和(Z)-9-烯十八酰胺(1.01%)。结论首次系统分析了3种铁线莲中挥发成分的组分和相对含量,为其进一步开发利用提供理论依据。其中角鲨烯是具有多种生物活性的长链多烯化合物,疏金毛铁线莲可作为富含角鲨烯的植物新资源。

大叶铁线莲ISSR反应体系的建立与优化

以秦岭野生大叶铁线莲为试验材料,在单因素试验的基础上进行L9(34)正交试验,从而优化大叶铁线莲ISSR-PCR反应体系。结果显示,在25μL反应体系中,最佳体系为1.0μL模板DNA、2.0μL Mg^2+、2.0μL dNTPs、1.0μL引物以及0.2μL Taq DNA聚合酶和18.8μL ddH2O。最佳扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性50 s,47℃退火1 min,72℃延伸1 min,35个循环;72℃延伸10 min,最后4℃保存。

藏药叶蒙(短尾铁线莲)有效部位的研究

目的:研究、确定短尾铁线莲抗炎的有效部位。方法在SD大鼠体内致成炎性病症,用短尾铁线莲提取物、齐墩果酸粗提物对抗实验性足踝肿胀。结果对三组实验组、对照组的数据进行分析,结果具有统计学差异(P<0.01)。结论短尾铁线莲具有明显的抗炎镇痛作用,其有效部位是齐墩果酸。

圆锥铁线莲醇提物治疗大鼠非细菌性前列腺炎的实验研究

目的评价圆锥铁线莲醇提物对实验性大鼠急、慢性非细菌性前列腺炎的药效。方法分别采用前列腺腹叶注入角叉菜胶溶液和侧叶注入消痔灵注射液,建立大鼠急、慢性非细菌性前列腺炎模型,并以前列腺液中白细胞总数和卵磷脂小体密度,前列腺指数,前列腺组织病理变化作为圆锥铁线莲醇提物的药效评价指标。结果圆锥铁线莲醇提物呈剂量依赖性的升高治疗组前列腺液中卵磷脂小体密度,降低前列腺指数和前列腺液中白细胞数,同时减轻病理切片中前列腺组织炎症细胞浸润与损伤程度。结论圆锥铁线莲对大鼠急、慢性非细菌性前列腺炎均有较好疗效。

合柄铁线莲中黄酮苷类化学成分研究

目的研究合柄铁线莲中黄酮苷类化学成分。方法采用多种分离材料和方法,结合半制备液相分离合柄铁线莲中的黄酮苷类成分。运用波谱技术鉴定化合物的结构。结果分离得到11个黄酮苷类化合物,分别鉴定为山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯（1）、异牡荆素（2）、过山蕨素（山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖基-7-α-L-鼠李糖苷）（3）、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷（4）、山柰酚-3-O-α-L-（4-O-乙酰基）鼠李糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷（5）、山柰酚-3-O-（2-β-D-葡萄糖基）-α-L-鼠李糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷（6）、染料木素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-（1→6）-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、澳白檀苷（8）、槲皮素-3-O-β-D-（6″-n-丁基）葡萄糖醛酸酯（9）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯（10）和异荭草素（11）。结论化合物1～11均为首次从该植物中分离得到。

女萎化学成分研究

目的对毛茛科铁线莲属植物女萎Clematis apiifolia的化学成分进行研究。方法通过硅胶、ODS、凝胶Sephadex LH-20、HW-40C等多种色谱分离技术分离和纯化,利用核磁共振(NMR)及质谱等现代波谱学技术鉴定化合物结构。结果从女萎乙醇提取物中分离得到20个化合物,分别鉴定为常春藤皂苷元(1)、α-hederin(2)、sapindosideB(3)、豆甾-22-烯-3β,6β,9β-三醇(4)、pleuchiol(5)、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(6)、豆甾醇(7)、毒马草素(8)、莽草酸(9)、乙基-α-D-葡萄糖苷(10)、乙基-β-D-葡萄糖苷(11)、D-葡萄糖醛酸(12)、3,5-二羟基-4-戊内酯(13)、2-醛基-5-羟甲基呋喃(14)、尿嘧啶(15)、尿嘧啶核苷(16)、正二十三烷醇(17)、正三十烷醇(18)、正二十六烷酸(19)、棕榈酸-1-甘油酯(20)。结论所有化合物均为首次从女萎中分离鉴定,其中化合物3为首次从铁线莲属植物中分离得到,化合物4、5、9～12为首次从毛茛科植物中分离得到。

两种野生铁线莲多倍体诱导与鉴定

以河北省野生黄花铁线莲和大叶铁线莲的萌动种子为试材,采用秋水仙素多倍体诱导的方法,研究了不同处理组合对2种铁线莲的诱变效果,获得铁线莲多倍体材料,以期为铁线莲多倍体育种提供参考依据,创制的铁线莲多倍体材料经进一步培育有望作为新品种进行推广应用。结果表明:秋水仙素处理对植株形态和成苗情况的影响显著,0.1%浓度的秋水仙素处理对植株生长具有促进作用,0.3%浓度的秋水仙素表现出较强的抑制作用。采用染色体计数鉴定、流式细胞仪鉴定等方式确定变异株的染色体加倍情况,结合植株生长状态发现秋水仙素浓度为0.2%、处理时间为48 h的诱变效果最佳。变异株的叶绿素含量增加、胞间二氧化碳浓度降低,气孔导度、净光合速率、蒸腾速率升高,证明变异株光合作用增强。

大叶铁线莲乙醇提取物正丁醇部位的化学成分研究

目的研究大叶铁线莲Clematis heracleifolia全草的化学成分。方法利用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、ODS反相柱色谱和半制备高效液相色谱等分离方法进行分离纯化,结合核磁共振、质谱等波谱学技术鉴定其化学结构。结果从大叶铁线莲全草75%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分离鉴定了10个化合物,包括三萜皂苷6个、黄酮苷1个、木栓烷型三萜2个和植物甾醇1个,分别为3,23-二羟基-齐墩果-18-烯-28-酸-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、刺楸皂苷B(2)、粗齿铁线莲皂苷B(3)、刺五加苷A1(4)、皂苷PJ3(5)、异株五加苷B(6)、金丝桃苷(7)、木栓酮(8)、表木栓醇(9)和β-谷甾醇(10)。结论化合物1是新化合物,命名为大叶铁线莲皂苷D;化合物2~9均为首次从大叶铁线莲中分离得到。