君子兰(Clivia miniata Regel)花粉贮藏寿命和受精过程的研究

利用花粉低温冷藏技术与常规石蜡制片技术研究了大花君子兰的花粉贮藏寿命以及受精过程,为其杂交育种提供基础资料。结果如下:新鲜花粉结籽率为35%;-21℃贮藏70d的花粉结籽率为22%;贮藏140d的花粉结籽率为4%;贮藏180d的花粉结籽率为0。两个精细胞具有二型性。成熟胚囊里次生核位于反足细胞端。胚珠发育不同步,胚珠没有受精与胚珠败育成为结籽率低的内部原因。君子兰受精过程经历时间为:人工异花授粉2h左右花粉萌发;花粉管在花柱中生长26h左右;花粉管在子房腔内生长12h左右;授粉后42～50h雌雄性细胞融合;授粉后44～46h初生胚乳核分裂;授粉后的第6～7天,合子进行分裂,合子休眠期为4～5d。

君子兰属植物种及品种分类研究

君子兰是石蒜科(Amaryllidaceae)君子兰属(Clivia)植物,原产南非,是世界著名常绿观赏植物。近些年来,君子兰属植物几个新种被陆续发现,另外还新发现了自然杂种雾居君子兰(Clivia×nimbicola),雾居君子兰的中文名称为首次赋予。目前君子兰属植物已公认有6个种和3个变种。我国是世界上最大的君子兰生产基地之一,但我国对君子兰属植物资源和育种的研究起步较晚、研究较少,对君子兰种和品种的分类混乱,甚至出现错误,有些品种类型已经在生产上大量出现,但还未见相关文献报道,仅在君子兰种植者和爱好者间私下流传。本文全面系统介绍了君子兰属植物的种、变种、品种及一些近些年新出现的品种类型,编制了君子兰属植物的分种检索表,介绍了君子兰相近种如何区分,结合我国生产和科研实际将君子兰商业化品种分为10个系列,并对我国君子兰种质资源创新、花艺育种、离体快繁、分子育种等方面进行了展望,为我国君子兰产业发展和科学研究提供可靠依据。

君子兰二倍体与四倍体叶片性状的比较研究

[目的]观察秋水仙素离体诱导后的四倍体君子兰形态性状是否发生改变,为其多倍体诱导及鉴定提供更多依据。[方法]以移栽后的2年生君子兰二倍体和秋水仙素诱导获得的四倍体株系为材料,对不同倍性君子兰的叶片厚度、长度、宽度以及叶片下表皮气孔密度、大小、叶绿体数进行观察比较。[结果]君子兰加倍植株的性状稳定,四倍体君子兰叶片变厚、变短、变宽,且表面粗糙,生长缓慢;二倍体君子兰叶面光滑,叶薄,生长较快。此外,四倍体君子兰的气孔(40.5μm×12.3μm)和保卫细胞(59.9μm×21.9μm)明显变大,气孔密度(14.3个/mm^(2))变小。[结论]秋水仙素离体诱导君子兰所获得的四倍体植株性状稳定,叶片和气孔性状可以作为判断君子兰是否加倍的辅助指标。

^(60)Co-γ射线辐照大花君子兰种子对其萌发特性及其开花性状的影响

采用60Co-γ射线对6个大花君子兰品种种子进行0、2、4、6、8Gy剂量辐照处理,研究辐照对其萌发特性及其实生苗开花性状的影响。结果表明:大花君子兰种子对60Co-γ射线辐照较为敏感,低剂量即可影响其萌发特性,60Co-γ射线对隔覆兰和佛光2个品种的半致死剂量为2～4Gy,对其余4个品种的半致死剂量为4～6Gy。6Gy内,剂量越高,变异率越高;各剂量辐照处理对延迟实生苗始花期,降低花葶高度,减小花序直径都有显著影响,但对影响小花数目无明显效果。60Co-γ射线对大花君子兰种子适宜的辐照剂量为4Gy,即能保证种子较高的萌发率,又具有较高的变异率,便于筛选新种质。

君子兰种间杂交及自交亲和性

【目的】以君子兰属(Clivia Lindl.)大花君子兰(C.miniata)、黄花君子兰(C.miniata var.citrina)、垂笑君子兰(C.nobilis)为试材,进行种或变种间正反交及自交,研究不同种或变种间杂交组合的亲和性。【方法】采用离体培养法对杂交亲本花粉生活力进行观察,利用荧光显微镜观察授粉后花粉萌发及花粉管伸长,并调查种间杂交坐果率及单果种子数。【结果】大花君子兰和黄花君子兰花粉生活力较高,均达80%以上,而垂笑君子兰的花粉生活力最低,为42.6%。垂笑君子兰为母本分别与大花君子兰和黄花君子兰杂交时,坐果率较低,分别为15.9%和19.1%,单果种子数分别为1.2个和1.4个,而其反交的坐果率和单果种子数均高于正交。大花君子兰与变种黄花君子兰正反交坐果率均达50%以上,单果种子数达5个以上,说明其亲和性强。荧光观察发现,垂笑君子兰作父本种间杂交时比自交花粉萌发明显滞后,花粉管伸长较慢,在96 h内极少有花粉管到达子房。垂笑君子兰作母本时,发现柱头中胼胝质阻碍了花粉萌发。【结论】君子兰种间正反交亲和性有一定差异,垂笑君子兰作父本时坐果率高于其反交组合,且种间正反交的坐果率和单果种子数明显低于自交,但大花君子兰和变种黄花君子兰正反交组合的坐果率均较高。不同种间杂交的花粉管和柱头中均出现大量胼胝质。

君子兰叶片电信号的初步研究

首次采用铂电极测定了君子兰叶片的微弱电信号,在增益设置为200倍,时间常数为5s,滤波设置为30Hz时,测得在起始阶段植物信号渐增后趋于平稳,之后此条件下不再有任何变化,且一天内植物信号波形在同一测点的峰峰值在几个到十几个mV间变化;当将增益设置增大到80000倍时,可以看到植物信号微弱部分的变化,可看出此信号为叠加有噪声的随机信号,经过初步统计峰峰值在10～150μV.

君子兰花粉生活力测定及贮藏方法筛选

以大花君子兰品种胜利为试材,利用单因子试验比较了固体培养基中蔗糖、硼、钙、镁、钾及琼脂质量浓度对花粉萌发的影响,在此基础上进行正交试验。结果表明,适宜的花粉培养基为蔗糖100 g/L+H3BO3150 mg/L+CaCl2100 mg/L+琼脂4 g/L,新鲜花粉萌发率最高达91.4%。用醋酸洋红染色法和I-KI染色法测定君子兰花粉生活力分别为88.1%和89.4%,比培养基法(78.7%)略高。不同贮藏方法对君子兰花粉生活力影响差异较大,最佳贮藏方法为-20℃冷冻干燥贮藏,贮藏120 d后花粉生活力为24.4%。

大花君子兰新品种扬君1号选育与栽培技术

大花君子兰新品种选育工作在我国进展较为缓慢,有效育种途径较为单一,效率较低。扬君1号是江苏里下河地区农业科学研究所利用60Co-γ射线辐射诱变技术选育的大花君子兰新品种,该品种株型紧凑,叶片齐整对称,叶肉厚实,脉纹清晰,叶片长宽比协调,花期早,花棕黄色,观赏性佳,适应性好,抗病性中等,具有很好的应用前景。本文介绍了该品种的选育过程、品种比较试验结果、形态特征、生物学特性以及配套栽培技术,为大花君子兰新品种选育提供了新的途径,并为提高其品种更新效率奠定了基础。

君子兰花器官离体培养

以君子兰品种‘油匠’的花瓣、花丝、胚珠等花器官为外植体进行离体培养,结果表明:采用0.1%升汞消毒10min,花器官外植体污染率较低,仅为9.9%;不同花器官外植体愈伤组织诱导与分化能力不同,花瓣的愈伤组织诱导率和分化率最高,分别达到15.6%和57.1%;花瓣外植体诱导愈伤组织和分化成苗的能力与花蕾大小、植物生长调节剂及蔗糖浓度等因素有关,最适培养基为MS+2,4-D2.0mg·L-1+BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖3.0%,适宜的花蕾长度为0.6～1.0cm。蔗糖浓度为3%时,花器官外植体愈伤组织诱导率与分化成苗率较高。

ISSR和RAPD分子标记技术在不同君子兰品种遗传多样性上的应用

采用ISSR标记和RAPD标记技术研究了15个君子兰品种的遗传多样性。结果表明：从55条寡聚核苷酸引物中筛选出10条简单重复序列引物，共扩增出65条带，平均每条引物扩增出6．5条带，其中5．4条多态性带，多态性比率为81．95％；从55条寡聚核苷酸引物中筛选出11条多态性引物，共扩增出47条带，平均每条引物扩增出4．27条带，其中32条多态性带，多态性比率为67．88％。POPGEN软件计算出君子兰品种间遗传距离为0．1123-0．6330，平均值为0．3263。基于遗传相似系数的UPGMA聚类分析将15个品种明显聚为二组，国兰系列品种为一组，日本兰系列品种组成另一组。

君子兰转化酶基因片段(CMCW1)的克隆和序列分析

分析植物酸性转化酶基因的保守区序列,设计一对PCR引物,以君子兰基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出长约500 bp的DNA片段,克隆入pGEM-T Easy载体,测序结果表明获得君子兰酸性转化酶基因家族的一个成员CMCW1,该基因片段长518 bp,不含内含子,编码172个氨基酸。其序列已在GenBank中登记(登记号为AY151269)。在GenBank中进行同源性检索的结果表明,该成员编码的氨基酸与其它植物细胞壁酸性转化酶编码的氨基酸同源性较高。

大花君子兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以大花君子兰为材料研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对君子兰ISSR扩增结果的影响,并对影响PCR反应体系的主要成分及退火温度进行筛选和优化,确立了适合君子兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系：在20μL的反应体系中,Mg^2＋为2.0 mmol/L,模板DNA用量为50 ng/μL,Taq酶0.4 U,dNTPs浓度为0.15 mmol/L,引物浓度为0.4 mmol/L。筛选出了13个适宜君子兰遗传分析的ISSR引物,确定最适宜退火温度为52-56℃。

赤霉素对君子兰开花及可溶性糖和蛋白质含量的影响

[目的]研究不同月份、不同浓度的赤霉素(GA3)对君子兰的开花及其生理指标的影响,为君子兰花期调控提供理论依据。[方法]分别在8、9、10月的15日进行叶面喷施不同浓度GA3,以清水作对照,定期测定君子兰叶片可溶性蛋白质和糖等生理指标。[结果]8月15日和10月15日喷施50～100mg/LGA3对君子兰提早开花有促进效果,而9月15日喷施100～200mg/LGA3对君子兰开花时间有延迟作用。GA3处理可使君子兰叶片可溶性蛋白质和全氮含量降低、可溶性糖含量和碳氮比值与开花时间的关系无明显的规律。[结论]GA3对君子兰提早开花有促进作用,喷施时期8月或10月中旬,喷施50～100mg/L。

君子兰不同物候期植物体营养含量及营养液吸收试验

20 0 2～ 2 0 0 3年 ,根据生长季节分四次测定了君子兰年周期内植物体营养元素含量 ,并开展君子兰各物候期的肥水吸收对比试验 ,结果显示 :开花君子兰对水分及营养元素N、P、K、S的吸收大于不开花的君子兰 ;君子兰在夏季 (6～ 9月 )营养需求降低 ,而且其植物体内各元素含量因物候期而异 。

君子兰及其研究进展

君子兰原产南非共和国,观花、观叶、观果俱佳,是著名的温室观赏花卉植物,在世界各地广泛栽培,已有近200a的历史。君子兰在20世纪30年代传入我国,1945年后开始广泛的栽培观赏。该文简要介绍了君子兰在形态解剖、细胞学、栽培繁殖、新品种培育、植物化学及药理药效等方面的研究进展。

君子兰花丝离体培养影响因素研究

以君子兰（Clivia miniata Regel.）品种油匠的花丝为外植体进行离体培养,结果表明：君子兰花丝离体培养能通过愈伤组织和直接再生不定芽两条途径成苗。适宜花丝愈伤组织诱导与分化的花蕾长度为0.6~1.0 cm;培养基中加入活性炭加速了外植体的褐化,对花丝诱导和分化不利;暗培养和接种前4℃低温预处理明显降低了外植体的诱导率和分化率,在花丝离体培养中不宜采用;花丝诱导和分化的最佳培养基为MS＋BA2.0mg·L-1＋NAA3.0mg·L-1＋IBA1.0mg·L-1,诱导率与分化率分别为16.3%和50.0%。

君子兰快速离体繁殖研究

试验表明,君子兰叶片组织无菌条件接种于添加1.2 mg/L BA+2.0 mg/L NAA+0.8 mg/L 2,4-D的基础培养基(细胞诱导分生培养基)中,培养28 d,叶片细胞逐渐增殖培养生成芽苗;将芽苗切割分离接种于0.9 mg/L BA和0.5 mg/L NAA的芽苗增殖培养基中,无菌培养12 d后,君子兰芽苗诱导生成幼苗;将君子兰幼苗转接入含激素0.1 mg/L NAA的生根培养基中,培养20 d后,幼苗诱导生根形成完整的君子兰小植株。

君子兰属植物花粉形态观察

应用扫描电子显微镜对君子兰属9种植物花粉的形态、萌发沟、表面纹饰等性状和特征进行了观察。结果表明:君子兰属植物花粉形状皆为长球形,具单沟,远极沟,属于N1P3C3型花粉,具网状雕纹。花粉两端网眼急剧变小、变密,而花粉大小、网脊宽度、网眼直径等性状存在差异。聚类分析将供试试材分为3组,即大花君子兰组、垂笑君子兰组和窄叶君子兰组。

柞枝废菌棒有机肥及在君子兰栽培上的应用

以柞枝食用菌废料和鸡粪为试材,采用条垛式高温好氧堆肥方法,研究了柞枝废菌棒有机肥对盆栽君子兰的各项生长指标的影响。结果表明：所得堆肥产品的有机质达到50.7%,全氮、全磷和全钾含量分别为2.11%、4.90%和1.42%,完全符合国家有机肥料行业技术标准。在只添加16.67%～50.00%堆肥范围内,不添加其它辅料的情况下,堆肥在盆栽基质中比例越高,君子兰生长越好。其中各项指标最大增长率：株高（根以上冠高）为32.5%,叶片数为45.1%,最长叶长为5.3%,最宽叶宽为18.8%,根须数为145.1%,最长根长为29.2%,最粗根直径为41.3%。

君子兰叶片光合特性的研究——叶绿素和酸含量变化

君子兰植株不同层次叶片的叶绿素(a+b)总量,叶绿素a/b值是不同的。上层叶片的叶绿素总量8mg/dm^2,叶绿素a/b值是1.8;中层叶片叶绿素总量12,a/b值是1.9;底层叶片叶绿素总量9.5mg/dm^2,a/b值1.8。具有阴生植物特性。鲜叶中的总有机酸含量(W/W)是0.44～0.69％。有机酸含量日变化白天高,夜间低。可滴定酸度夜间最高值是35μea·g^(-1),白天是23μea·g^(-1)。昼夜酸度差△E12μea·g^(-1),比值小于2。