君子兰(Clivia miniata Regel)花粉贮藏寿命和受精过程的研究

利用花粉低温冷藏技术与常规石蜡制片技术研究了大花君子兰的花粉贮藏寿命以及受精过程,为其杂交育种提供基础资料。结果如下:新鲜花粉结籽率为35%;-21℃贮藏70d的花粉结籽率为22%;贮藏140d的花粉结籽率为4%;贮藏180d的花粉结籽率为0。两个精细胞具有二型性。成熟胚囊里次生核位于反足细胞端。胚珠发育不同步,胚珠没有受精与胚珠败育成为结籽率低的内部原因。君子兰受精过程经历时间为:人工异花授粉2h左右花粉萌发;花粉管在花柱中生长26h左右;花粉管在子房腔内生长12h左右;授粉后42～50h雌雄性细胞融合;授粉后44～46h初生胚乳核分裂;授粉后的第6～7天,合子进行分裂,合子休眠期为4～5d。

君子兰二倍体与四倍体叶片性状的比较研究

[目的]观察秋水仙素离体诱导后的四倍体君子兰形态性状是否发生改变,为其多倍体诱导及鉴定提供更多依据。[方法]以移栽后的2年生君子兰二倍体和秋水仙素诱导获得的四倍体株系为材料,对不同倍性君子兰的叶片厚度、长度、宽度以及叶片下表皮气孔密度、大小、叶绿体数进行观察比较。[结果]君子兰加倍植株的性状稳定,四倍体君子兰叶片变厚、变短、变宽,且表面粗糙,生长缓慢;二倍体君子兰叶面光滑,叶薄,生长较快。此外,四倍体君子兰的气孔(40.5μm×12.3μm)和保卫细胞(59.9μm×21.9μm)明显变大,气孔密度(14.3个/mm^(2))变小。[结论]秋水仙素离体诱导君子兰所获得的四倍体植株性状稳定,叶片和气孔性状可以作为判断君子兰是否加倍的辅助指标。

^(60)Co-γ射线辐照大花君子兰种子对其萌发特性及其开花性状的影响

采用60Co-γ射线对6个大花君子兰品种种子进行0、2、4、6、8Gy剂量辐照处理,研究辐照对其萌发特性及其实生苗开花性状的影响。结果表明:大花君子兰种子对60Co-γ射线辐照较为敏感,低剂量即可影响其萌发特性,60Co-γ射线对隔覆兰和佛光2个品种的半致死剂量为2～4Gy,对其余4个品种的半致死剂量为4～6Gy。6Gy内,剂量越高,变异率越高;各剂量辐照处理对延迟实生苗始花期,降低花葶高度,减小花序直径都有显著影响,但对影响小花数目无明显效果。60Co-γ射线对大花君子兰种子适宜的辐照剂量为4Gy,即能保证种子较高的萌发率,又具有较高的变异率,便于筛选新种质。

君子兰花粉生活力测定及贮藏方法筛选

以大花君子兰品种胜利为试材,利用单因子试验比较了固体培养基中蔗糖、硼、钙、镁、钾及琼脂质量浓度对花粉萌发的影响,在此基础上进行正交试验。结果表明,适宜的花粉培养基为蔗糖100 g/L+H3BO3150 mg/L+CaCl2100 mg/L+琼脂4 g/L,新鲜花粉萌发率最高达91.4%。用醋酸洋红染色法和I-KI染色法测定君子兰花粉生活力分别为88.1%和89.4%,比培养基法(78.7%)略高。不同贮藏方法对君子兰花粉生活力影响差异较大,最佳贮藏方法为-20℃冷冻干燥贮藏,贮藏120 d后花粉生活力为24.4%。

君子兰叶片电信号的初步研究

首次采用铂电极测定了君子兰叶片的微弱电信号,在增益设置为200倍,时间常数为5s,滤波设置为30Hz时,测得在起始阶段植物信号渐增后趋于平稳,之后此条件下不再有任何变化,且一天内植物信号波形在同一测点的峰峰值在几个到十几个mV间变化;当将增益设置增大到80000倍时,可以看到植物信号微弱部分的变化,可看出此信号为叠加有噪声的随机信号,经过初步统计峰峰值在10～150μV.

大花君子兰新品种扬君1号选育与栽培技术

大花君子兰新品种选育工作在我国进展较为缓慢,有效育种途径较为单一,效率较低。扬君1号是江苏里下河地区农业科学研究所利用60Co-γ射线辐射诱变技术选育的大花君子兰新品种,该品种株型紧凑,叶片齐整对称,叶肉厚实,脉纹清晰,叶片长宽比协调,花期早,花棕黄色,观赏性佳,适应性好,抗病性中等,具有很好的应用前景。本文介绍了该品种的选育过程、品种比较试验结果、形态特征、生物学特性以及配套栽培技术,为大花君子兰新品种选育提供了新的途径,并为提高其品种更新效率奠定了基础。

君子兰花器官离体培养

以君子兰品种‘油匠’的花瓣、花丝、胚珠等花器官为外植体进行离体培养,结果表明:采用0.1%升汞消毒10min,花器官外植体污染率较低,仅为9.9%;不同花器官外植体愈伤组织诱导与分化能力不同,花瓣的愈伤组织诱导率和分化率最高,分别达到15.6%和57.1%;花瓣外植体诱导愈伤组织和分化成苗的能力与花蕾大小、植物生长调节剂及蔗糖浓度等因素有关,最适培养基为MS+2,4-D2.0mg·L-1+BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖3.0%,适宜的花蕾长度为0.6～1.0cm。蔗糖浓度为3%时,花器官外植体愈伤组织诱导率与分化成苗率较高。

赤霉素对君子兰开花及可溶性糖和蛋白质含量的影响

[目的]研究不同月份、不同浓度的赤霉素(GA3)对君子兰的开花及其生理指标的影响,为君子兰花期调控提供理论依据。[方法]分别在8、9、10月的15日进行叶面喷施不同浓度GA3,以清水作对照,定期测定君子兰叶片可溶性蛋白质和糖等生理指标。[结果]8月15日和10月15日喷施50～100mg/LGA3对君子兰提早开花有促进效果,而9月15日喷施100～200mg/LGA3对君子兰开花时间有延迟作用。GA3处理可使君子兰叶片可溶性蛋白质和全氮含量降低、可溶性糖含量和碳氮比值与开花时间的关系无明显的规律。[结论]GA3对君子兰提早开花有促进作用,喷施时期8月或10月中旬,喷施50～100mg/L。

大花君子兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以大花君子兰为材料研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对君子兰ISSR扩增结果的影响,并对影响PCR反应体系的主要成分及退火温度进行筛选和优化,确立了适合君子兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系：在20μL的反应体系中,Mg^2＋为2.0 mmol/L,模板DNA用量为50 ng/μL,Taq酶0.4 U,dNTPs浓度为0.15 mmol/L,引物浓度为0.4 mmol/L。筛选出了13个适宜君子兰遗传分析的ISSR引物,确定最适宜退火温度为52-56℃。

君子兰转化酶基因片段(CMCW1)的克隆和序列分析

分析植物酸性转化酶基因的保守区序列,设计一对PCR引物,以君子兰基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出长约500 bp的DNA片段,克隆入pGEM-T Easy载体,测序结果表明获得君子兰酸性转化酶基因家族的一个成员CMCW1,该基因片段长518 bp,不含内含子,编码172个氨基酸。其序列已在GenBank中登记(登记号为AY151269)。在GenBank中进行同源性检索的结果表明,该成员编码的氨基酸与其它植物细胞壁酸性转化酶编码的氨基酸同源性较高。

君子兰花丝离体培养影响因素研究

以君子兰（Clivia miniata Regel.）品种油匠的花丝为外植体进行离体培养,结果表明：君子兰花丝离体培养能通过愈伤组织和直接再生不定芽两条途径成苗。适宜花丝愈伤组织诱导与分化的花蕾长度为0.6~1.0 cm;培养基中加入活性炭加速了外植体的褐化,对花丝诱导和分化不利;暗培养和接种前4℃低温预处理明显降低了外植体的诱导率和分化率,在花丝离体培养中不宜采用;花丝诱导和分化的最佳培养基为MS＋BA2.0mg·L-1＋NAA3.0mg·L-1＋IBA1.0mg·L-1,诱导率与分化率分别为16.3%和50.0%。

君子兰快速离体繁殖研究

试验表明,君子兰叶片组织无菌条件接种于添加1.2 mg/L BA+2.0 mg/L NAA+0.8 mg/L 2,4-D的基础培养基(细胞诱导分生培养基)中,培养28 d,叶片细胞逐渐增殖培养生成芽苗;将芽苗切割分离接种于0.9 mg/L BA和0.5 mg/L NAA的芽苗增殖培养基中,无菌培养12 d后,君子兰芽苗诱导生成幼苗;将君子兰幼苗转接入含激素0.1 mg/L NAA的生根培养基中,培养20 d后,幼苗诱导生根形成完整的君子兰小植株。

柞枝废菌棒有机肥及在君子兰栽培上的应用

以柞枝食用菌废料和鸡粪为试材,采用条垛式高温好氧堆肥方法,研究了柞枝废菌棒有机肥对盆栽君子兰的各项生长指标的影响。结果表明：所得堆肥产品的有机质达到50.7%,全氮、全磷和全钾含量分别为2.11%、4.90%和1.42%,完全符合国家有机肥料行业技术标准。在只添加16.67%～50.00%堆肥范围内,不添加其它辅料的情况下,堆肥在盆栽基质中比例越高,君子兰生长越好。其中各项指标最大增长率：株高（根以上冠高）为32.5%,叶片数为45.1%,最长叶长为5.3%,最宽叶宽为18.8%,根须数为145.1%,最长根长为29.2%,最粗根直径为41.3%。

赤霉素对君子兰花期调控的研究

应用赤霉素不同浓度和不同处理频率对君子兰品种"油匠"进行处理。结果表明:与对照相比各浓度赤霉素(GA3)处理对植株提高抽葶率、提早花期、促进叶生长都有明显作用。每天喷施1次200mg/L赤霉素后植株的抽葶率高于其他处理,50mg/L赤霉素可以明显促进君子兰的花葶生长。应用50mg/L和200mg/L赤霉素均可使君子兰提前21d开花,经过50mg/L赤霉素处理后,花朵和果实数量多于其他处理。

君子兰组织培养研究

[目的]筛选适宜君子兰叶片离体的条件。[方法]选取君子兰(Clivia miniata Regel)品种"油匠"的叶片为外植体进行离体培养,在MS培养基中附加不同浓度的2,4-D、BA、NAA和KT,对外植体采用不用时间的低温预处理,并对接种后的外植体分别进行不同时长的暗培养,研究不同培养条件对外植体愈伤组织诱导和分化的影响。[结果]叶片诱导分化的最佳培养基为MS+BA2.0 mg/L+NAA3.0 mg/L+KT1.0 mg/L+蔗糖3.0%,诱导与分化率分别为59.2%和55.2%;暗培养10d后外植体诱导与分化率较高,为13.8%和25.0%。[结论]培养基中加入活性炭对叶片诱导与分化不利;接种前低温预处理1 d,叶片诱导与分化率较高,分别为33.3%和25.0%。

君子兰电信号与含水率的关系

以盆栽君子兰为材料,采用生物机能采集系统和水分传感器,测定君子兰的电信号及其含水率,研究君子兰的生理电信号与含水率之间的变化规律。结果表明:当含水率较低时,君子兰的电信号平稳,处于沉寂状态;随着含水率增加,君子兰的电信号兴奋度增强,处于活跃状态;含水率为18.8%时,君子兰的电信号兴奋度最强,活跃状态最明显;含水率继续增加,君子兰的电信号兴奋度减弱,继而逐渐恢复平稳状态。本研究建立了植物电信号与含水率的可视性对话,以期为君子兰生长的智能化灌溉提供参考。

大花君子兰单细胞培养再生绿色植株

以大花君子兰（ｃｌｉｖｉａ ｍｉｎｉａｔａ） 瘤状结构的胚性愈伤组织为单细胞培养来源，在附加２ ｍｇ／ＬＫＴ、１ｍｇ／Ｌ２ ，４ —Ｄ 及３ ％ 蔗糖的ＭＳ基本培养基上培养，诱导出的愈伤组织经同一诱导培养基长期继代培养后形成幼苗，将较大的幼苗转入状苗生根培养基（ 附加０－５ ｍｇ／ＬＫＴ 和０－１ｍｇ／ＬＮＡＡ的１／２ ＭＳ培养基） 上继代培养形成再生绿色植株。绿苗再生频率随继代时间的延长而提高。

大花君子兰水培技术研究

以大花君子兰为试材,采用随机排列的试验设计方法,研究了去根、不同基质、基质的不同湿度、不同温度、不同光照、不同生长调节剂、磁场、不同营养液对大花君子兰的催根影响。结果表明：去根对大花君子兰生根效果较好,去根越多,生根率越高,但叶片越黄;以珍珠岩作为基质较为理想,生根率达90.7%;在90%~100%高湿度下,大花君子兰的生根率达93.3%;在15~25℃生根率达90.0%;光照强度在10~13klx范围内生根率较高;君子兰驯化最佳水杨酸浓度为50~100μmol/L,乙烯利的最佳驯化浓度为0.008%;采用磁化处理技术,能使种苗的根系发达,可以使一级侧根率大大提高;君子兰在1/4剂量的标准营养液配方（C）中根最长平均达15.3cm。

君子兰细菌性叶枯病病原鉴定及室内药剂筛选

2019年夏在吉林农业科技学院温室大棚中发现一种君子兰新病害——叶枯病,发病部位主要为中下部叶片,从叶片边缘开始变褐,然后逐渐枯萎扩大,发病较重。为有效防治君子兰叶枯病,平板划线分离纯化君子兰叶枯病病原菌。依据柯赫氏法则、形态学测定和16S rDNA序列比对鉴定,确定了致病菌的分类地位,并测试了10种药剂对该病菌的抑菌效果。结果表明:君子兰叶枯病病原菌为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),质量分数20%噻菌铜悬浮剂和30%乙蒜素乳油抑菌效果最好。综上所述,明确了君子兰细菌性叶枯病致病菌种类,筛选出2种药剂可有效抑制病害的发生。

大花君子兰营养器官的解剖学结构

对大花君子兰营养器官根和叶片的解剖学结构观察结果显示:其不定根为肉质,具有发达的复表皮,复表皮最内层细胞具有分生组织细胞,向外分裂形成新的细胞;根尖组织分化属封闭型,根冠与表皮同源,根内皮层细胞具凯氏带加厚,初生本质部多原型。叶为等面叶,叶片上、下表皮细胞外壁均被有厚的角质层,气孔器的保卫细胞为肾形,具有发达的储水组织;叶肉细胞同型,无栅栏细胞和海绵组织的分化;平行脉序,维管束具有维管束鞘。