耐热果胶裂解酶基因pel9A的克隆和表达

利用PCR技术从耐热梭状芽孢杆菌(Clostridium stercorarium)中扩增得到产耐热果胶裂解酶的结构基因pel9A,并将其克隆于表达载体pET28a中,最后将此重组质粒转化到受体菌E.coliBL-21中进行表达。诱导条件为:37℃诱导5 h,IPTG浓度为0.8 mmol/L。重组菌经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表达的蛋白质的相对分子质量为130 000,与预期相对分子质量相符。细胞经超声破碎后,测得果胶酶的比酶活为15 U/mg粗蛋白。