Role of Complement Regulatory Proteins (CD55, CD59, and CD35) on Red Blood Cells of <i>β</i>-Thalassaemia Patients

Background: β-thalassaemia (β-Thal) is an inherited chronic haemolytic anaemia resulting from absent or low level of synthesis of β-globin chains of haemoglobin A in erythropoietic cells. The complement system is an important part of innate immune response that may be implicated in red blood cell (RBC) lysis. Mammalian cells are provided with surface bound complement regulatory proteins (MCRPs) that regulate the activation of complement cascade, thus protecting them from uncontrolled complement-mediated lysis. Objective is to evaluate the role of complement regulatory proteins (CD55, CD59, and CD35) on red blood cells, and to explain the pathogenesis of anaemia in β-thalassemia major. Methods: This case-control study enrolled 74 β thalassemia major patients who were compared with 40 age and sex matched controls. We performed expression of CD55, CD59, and CD35 on RBCs using flow cytometry. Results: CD55 levels of β-thalassemia major patients (79.78% ± 18.54%) were significantly decreased compared to healthy controls (99.45% ± 0.59%) (P < 0.001). CD59 levels of β-thalassemia major patients (97.76% ± 1.72%) were significantly lower than in the controls (99.75% ± 0.36%) (P < 0.001), also CD35 levels were significantly lower in the β-thalassemia major patients (4.30% ± 4.66%) than in the control group (19.40% ± 10.90%) (P < 0.001). Conclusion: β-thalassemia major patients suffer from increased haemolysis and a consequent increase in their demand for blood transfusion. Complement-mediated haemolysis was shown in our study by decreased expression of CD55, CD59, and CD35 in β-thalassemia major patients. This allows complement deposition on RBCs and enhances or accelerates their lysis.

CD55、CD59、CD34对AA-PNH早期诊断研究应用

目的:探讨CD55、CD59、CD34抗原在再障阵发性血红蛋白尿综合征(AAPNH)的早期诊断中的价值,寻找AAPNH早期诊断敏感指标,进而达到早期发现、早期诊断、早期治疗的目的。方法:应用流式细胞仪测定AAPNH综合征患者的CD55、CD59、CD34抗原变化关系,并与PNH、AA等疾病组以及正常对照组CD55、CD59、CD34抗原相互变化关系,经过统计学处理,找出相关性。结果:结果表明AAPNH、PNHCD55、CD59、CD34抗原较AA及其他疾病组及正常对照组明显减低,并与溶血试验中溶血程度呈正相关,且早于其他溶血指标。结论:CD55、CD59、CD34抗原表达率可作为PNH、AAPNH综合征早期诊断最敏感指标,并与预后转归密切相关。

外周血粒细胞CD55,CD59和FLAER检测在贫血及PNH诊断中的意义

目的探讨CD55,CD59和嗜水气单胞菌毒素变异体(FLAER)检测在各类贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者诊断中的临床意义。方法选取2009年1月~2017年3月期间收集的30例健康对照,22例PNH,33例再生障碍性贫血(AA),37例缺铁性贫血(IDA),45例巨幼细胞性贫血(MA),30例溶血性贫血(HA)和31例骨髓增生异常综合征(MDS)患者,用多参数流式细胞仪同时检测外周血粒细胞CD55,CD59和FLAER阴性细胞比例,代表检出的PNH克隆数。结果 PNH,AA和MDS组FLAER检出率均高于CD55和CD59,但只有AA患者差异有统计学意义(X^2=7.759,5.518,P=0.005,0.019<0.05)。PNH和AA组CD55,CD59和FLAER阴性细胞比例均显著高于正常对照组及其他贫血组(t=2.163~17.890,P=0.000~0.038<0.05)。PNH组FLAER阴性细胞比例高于CD59,CD59高于CD55,差异均具有统计学意义(t=2.503~6.308,P=0.000~0.016<0.05)。结论 CD55,CD59和FLAER在PNH诊断及与其他贫血性疾病鉴别诊断中具有重要价值,尤其是存在微小PNH克隆的MDS和AA患者,FLAER优于CD59,CD59优于CD55。

模拟常压失事潜艇环境人血细胞表面CD55、CD59分布的变化

目的探讨模拟固壳未破损失事潜艇环境条件暴露对人体血液免疫功能的影响及其变化的规律。方法使用500m饱和潜水居住舱系统模拟失事潜艇固壳未破损舱室环境条件,控制舱内温度、PCO2、PO2,于进舱前、暴露第2、4、8d采晨空腹血,用流式细胞分析术测定红细胞、淋巴细胞、中性粒细胞表面CD55和CD59的分布变化。结果红细胞膜表面CD55的分布在8d有显著升高(P<0.01);淋巴细胞膜表面CD55的分布在暴露的初、中期显著下降(P<0.01),后期明显恢复,与温度、PO2呈正相关(P<0.01),与PCO2呈负相关(P<0.01),CD59分布的变化与CD55变化类似。结论氧分压和环境温度过低、二氧化碳分压过高都是诱发免疫活性细胞激活的有效因素。此环境暴露对血细胞自身保护作用有随时间累积的效应。

CD55、CD59在健康者红细胞及中性粒细胞上表达的研究

目的探讨CD55和CD59在健康者的红细胞及中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞上的表达。方法采用流式细胞技术检测健康体检者外周血红细胞及中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞膜上CD55和CD59表达的百分率及平均荧光强度。结果 CD55在中性粒细胞及单核细胞上的表达率(99.50±1.987,98.63±1.629)及平均荧光强度(11.14±2.927,13.37±4.127)均高于在淋巴细胞和红细胞上的表达(P<0.01);CD59在红细胞、中性粒细胞及单核细胞上均高表达(大于98.21±1.857)且差异无统计学意义(P>0.05),在淋巴细胞上的表达及平均荧光强度均低于其他组(P<0.01),CD59在红细胞和中性粒细胞上表达的荧光强度(8.65±1.655,8.595±2.091)高于其他两组(P<0.01)。结论采用流式细胞术检测CD55、CD59表达时应选取中性粒细胞及成熟红细胞作为靶细胞。

贫血患者外周血CD55、CD59检测及对阵发性睡眠性血红蛋白尿症的诊断意义

目的:检测贫血性疾病患者外周血CD55、CD59的表达并行相关实验检查,并探讨其对阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)诊断的临床意义。方法:选取2012年6月至2014年2月入院的129例贫血患者行流式细胞术检测CD55、CD59,同时选取健康体检者25例作为对照,对贫血性疾病患者以健康对照人群CD55、CD59检出结果进行综合对比与分析,并同时做FLAER实验、酸化血清溶血实验(Ham实验)、尿含铁血黄素试验(尿Rous实验)、网织红细胞计数。结果:与正常对照组和其他贫血组相比,再生障碍性贫血(AA)-PNH和PNH患者外周血红细胞与粒细胞CD55、CD59表达明显低下(P<0.05),表达均<95.0%,部分再生障碍性贫血与部分骨髓增生异常综合征患者外周血红细胞与粒细胞CD55、CD59表达也可低下,但表达均>48.0%,与健康组和其他贫血组(除AA-PNH和PNH组)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。纯红再障、营养性贫血、自身免疫性溶血性贫血、缺铁性贫血患者CD55、CD59表达均在正常范围。部分AA-PNH和PNH患者,加做FLAER实验,显示外周血粒细胞及单核细胞PNH克隆明显增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CD55、CD59检测与FLAER实验在诊断AA-PNH、PNH患者中有重要意义,是目前诊断PNH的最敏感,最可靠的方法,也可作为疗效判断及观察病情变化的手段。

用流式细胞术检测CD55及CD59表型对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿的意义

探讨用流式细胞术检测免疫表型对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmalnoctur-nalhemoglobinuria,PNH)的意义。方法:用荧光标记分化群(clusterofdifferentiation,CD)中的CD55、CD59的单克隆抗体,采用流式细胞术测定25名正常人、28例PNH患者外周中性粒细胞和红细胞膜抗原的表达。结果:PNH患者中性粒细胞CD55、CD59,红细胞CD59表达率较正常人明显降低,且与疾病的严重程度相关。结论:用流式细胞术检测CD55、CD59表型是目前诊断PNH的较直接而又特异、敏感的方法。

贫血患者外周血中T淋巴细胞亚群和CD55^+、CD59^+检测的意义

目的探讨T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值和CD55+、CD59+水平在各种贫血患者外周血中的表达及意义。方法利用流式细胞术,测定100例贫血患者,其中巨幼细胞贫血(MA)25例,缺铁性贫血(IDA)40例,再生障碍性贫血(AA)35例,30名健康对照组外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值)和CD55+、CD59+水平的变化,比较与健康对照组间的差异。结果与健康对照组相比,3类贫血患者的CD3+、CD4+和CD4+/CD8+均低于健康对照组[(69.2±3.62)%、(38.7±3.56)%、(1.69±0.15)%],其中AA患者的CD4+/CD8+比值为0.94±0.59,与健康对照组相比明显下降(P<0.05);CD8+均高于健康对照组(22.9±2.35)%,其中AA患者的CD8+为(34.5±2.44)%,明显高于健康对照组(P<0.05);MA患者CD55+和CD59+表达正常,大约40%的IDA和34%的AA患者CD55+和CD59+表达异常。结论 3类贫血患者免疫功能均有不同程度异常,IDA患者可能是由缺铁引起。AA患者可能是由T细胞功能亢进和CD55+、CD59+表达异常引起的。

外周血红细胞和中性粒细胞CD55/CD59表达在贫血诊断中的意义

CD55、CD59表达缺陷是诊断阵发性睡眠血红蛋白尿症（paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH）的主要特征,但文献报告健康人及常见的其他贫血性疾病也存在不同程度的表达下降[1],鉴于贫血的种类繁多,病因复杂,诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义。为此,对襄阳市中心医院204例各类贫血患者外周血红细胞和中性粒细胞CD55和CD59免疫表型进行了比较分析。

高脂血症患者补体调节蛋白CD55、CD59表达与脂肪细胞因子的关系研究

目的探讨高脂血症患者补体调节蛋白CD55、CD59的表达与脂肪细胞因子瘦素、脂联素、抵抗素水平的变化及其关系。方法高脂血症患者50例,年龄、性别、体重与其匹配的健康对照21例,用流式细胞术测定外周血白细胞CD55、CD59的表达,用酶联免疫法测定血浆瘦素、脂联素,血清抵抗素浓度,分析CD55、CD59和脂肪细胞因子在高脂血症中的变化及其关系。结果高脂血症患者CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度(MFI)较健康对照组下降(P<0.05),瘦素较健康对照组升高(P<0.05),脂联素较健康对照组下降(P<0.05);CD55阳性淋巴细胞MFI与腰围、腰臀比值呈负相关(均P<0.05),与脂联素呈正相关(P<0.05)。结论高脂血症患者补体调节蛋白CD55表达下调,可能与腹部脂肪分布、脂联素有关,脂联素可能影响补体调节蛋白CD55的表达。

CD55、CD59联合嗜水气单胞菌毒素变异体检测对PNH的诊断价值

目的检测各类贫血患者CD55、CD59和嗜水气单胞菌毒素变异体(FLAER)的表达情况,评价CD55、CD59联合FLAER检测对阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的诊断价值。方法选取贫血住院患者157例,其中缺铁性贫血(IDA)38例、巨幼细胞性贫血(MA)23例、骨髓增生异常综合征(MDS)27例、再生障碍性贫血(AA)25例、自身免疫溶血性贫血(AIHA)31例、PNH 13例。另选取体检健康者20名,作为正常对照组。检测所有研究对象红细胞和粒细胞CD55、CD59以及粒细胞和单核细胞FLAER的表达情况。结果PNH组红细胞和粒细胞CD55^-、CD59^-百分比与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。PNH组粒细胞和单核细胞FLAER-百分比均>50%,显著高于红细胞和粒细胞CD55^-、CD59^-百分比(P<0.05)。CD55、CD59与FLAER检测对PNH诊断的符合率为100%。有3例AA患者和2例MDS患者FLAER表达缺失,而CD55、CD59表达正常;有2例AIHA患者红细胞CD55、CD59表达部分缺失,粒细胞CD55、CD59表达正常,FLAER表达正常。结论CD55、CD59表达缺陷是PNH的主要特征,CD55、CD59联合FLAER检测在PNH诊断及鉴别诊断中有着重要的价值。

健康人群外周血各类血细胞CD55/CD59的表达

目的了解健康人群外周血细胞CD55/CD59表达情况。方法用流式细胞仪检测健康人红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞膜上CD55/CD59表达。结果80名健康人外周血不同类型的血细胞膜上CD55/CD59表达不同。正常红细胞CD55/CD59双阳性的红细胞中位数为85.100%,阵发性血红蛋白尿症(PNH)细胞<0.200%;正常中性粒细胞双阳性细胞中位数为99.900%,PNH细胞<0.100%;单核细胞双阳性细胞的中位数为93.000%,PNH细胞<2.900%。淋巴细胞双阳性细胞中位数为72.600%,PNH细胞<18.000%。正常淋巴细胞中所含的PNH细胞比例明显高于其他细胞(P<0.01),且主要为T淋巴细胞。结论健康人的外周血各种血细胞CD55/CD59表达不同,分析结果有助于对PNH等干细胞疾病的诊断和发病机制进行探讨。

补体调节蛋白CD55、CD59调控T淋巴细胞免疫研究进展

补体系统在多种可溶性和膜结合调节因子作用下,参与机体抗感染防御、获得性免疫应答的启动及维持等生物学效应。其中补体调节蛋白以特定方式与不同补体成分相互作用,使补体激活与抑制维持精细的平衡状态,从而既防止对自身组织造成损害,又能有效杀灭外来微生物,目前对膜结合调节蛋白CD55（decay-accelerating factor,DAF）、

原代培养的小鼠星形胶质细胞CD46、CD55、CD59的表达及炎症刺激因子对其的影响

目的通过体外培养小鼠大脑皮层星形胶质细胞,明确补体调节蛋白CD46、CD55、CD59在原代小鼠大脑皮层星形胶质细胞上的表达情况,及炎症因子对CD46、CD55、CD59表达的影响,为研究补体系统在AD中的作用打下基础。方法原代纯化培养小鼠星形胶质细胞,用RT PCR,免疫荧光的方法,分别在mRNA水平、蛋白质水平,检测炎症因子刺激前以及LPS、IFNγ单独或协同刺激后,CD46、CD55、CD59的表达情况。结果RT PCR检测到CD59mRNA的表达,CD46、CD55的表达不明确,未刺激组和刺激组无明显差别;免疫荧光结果示CD59阳性,CD46、CD55弱阳性。结论保护素CD59在原代小鼠星形胶质细胞上显著表达,可能可以保护星形胶质细胞免受补体的溶破效应的杀伤。

太极拳运动对中老年女性外周血白细胞和红细胞表面CD55/CD59表达的影响

目的：探讨太极拳运动对中老年女性CD55和CD59表达影响。方法：研究一：94名中老年女性志愿者（55~65岁）,随机分为安静对照组（47人）和太极拳组（47人）。太极拳组进行24周太极拳锻炼,每周3次,每次训练时间约为60 min;对照组保持原有生活规律。研究二：90名中老年女性志愿者,其中太极拳组30人、快走对照组30人、久坐组30人。太极拳组和快走对照组运动年限在3~5年,每周锻炼次数不少于3次,每次锻炼时间约60 min;久坐组组无运动习惯。对各组CD55、CD59在各血细胞表面的变化进行研究。结果：124周后太极拳锻炼后,MO CD55及RBC CD55下降具有显著性（P〈0.05）;LY CD59和MO CD59呈非常显著性升高（P〈0.01）。安静对照组RBC CD55呈显著性下降（P〈0.05）;LY CD59显著性上升（P〈0.05）。23~5年太极拳组LY、GR、MO、RBC CD55显著低于安静组（P〈0.05）;LY CD55显著低于快走组但RBC CD55显著高于快走组（P〈0.05）;太极拳组LY、RBC CD59显著高于安静组和快走组（P〈0.05）。3太极拳锻炼第0周、第24周,各血细胞表面CD55和CD59之间均无相关性,3~5年太极拳锻炼组LY CD55/CD59及RBC CD55/CD59出现显著相关（P〈0.05）;3~5年太极拳组与快走组LY CD55/CD59较安静对照组均出现显著相关（P〈0.05）;另外太极拳组RBC CD55/CD59比安静对照组和快走组显著相关（P〈0.05）。结论：1太极拳锻炼对血细胞表面CD55和CD59的影响不同,其中对红细胞的影响更为明显,可以为进一步研究运动与红细胞免疫提供理论支撑。2太极拳运动后外周血白细胞及红细胞表面CD55、CD59发生的变化与血细胞计数关系不大。3太极拳锻炼时间越长,CD55、CD59在淋巴细胞和红细胞上的协同作用越明显,可有效对抗年龄依赖性免疫机能下降。

CD55、CD59检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症标准方法建立

目的建立流式细胞术(FCM)检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuriaP,NH)的标准方法。方法应用FCM对49例PNH病人,18例自身免疫性溶血性贫血(AIHA),10例缺铁性贫血(IDA),正常对照40例;采用活细胞直接免疫荧光标记法检测红细胞和粒细胞膜表面的CD55和CD59的表达。结果49例PNH病人除2例红细胞CD55-、CD59-的百分率小于5%,其余病例红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均大于5%(5.9%￣79.1%)。18例AIHA病人红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。10例IDA病人有8例红细胞CD55-、CD59-的百分率均大于5%(5.0%￣9.1%),而粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。40例正常对照红细胞和粒细胞CD55-、CD59-的百分率均小于5%。49例PNH病人蛇毒因子试验5例阴性;糖水试验4例阴性、酸溶血试验5例阴性。而这其中仅2例病人蛇毒因子试验、糖水试验、溶血试验同时阴性。其余病人蛇毒因子试验、糖水试验、酸溶血试验均阳性。结论同时检测红细胞和粒细胞膜的CD55和CD59诊断PNH,该方法的灵敏度与特异性均高达100%。因此,针对国内其他单位在开展此项目时仅检测CD55或CD59,或者只检测红细胞或白细胞的CD55、CD59的情况,作者认为同时检测红细胞和粒细胞膜的CD55和CD59诊断PNH是值得在临床推广的标准方法。

CD55/CD59缺陷检测及其在阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断中的意义

目的:应用外周血红细胞CD55和CD59的检测并结合相关检验,建立有效的诊断和鉴别诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的实验体系。方法:运用流式细胞术检测10例PNH患者外周血红细胞和粒细胞的CD55和CD59,并分别对缺陷红细胞作激光散射分析(FS)及FS/CD55和FS/CD59双参数分析,结合溶血性贫血(溶贫)相关其他检验,作出PNH诊断。结果:5例PNH发作期患者酸溶血试验呈阳性,CD55和CD59缺陷红细胞在流式细胞术检测中具有特征性的改变;5例PNH缓解期酸溶血试验等无明显改变,患者外周血CD55和CD59缺陷红细胞的数量较少。运用流式细胞术分别作红细胞FS/CD55和FS/CD59双参数分析,发现CD59缺陷与红细胞FS具有相关性。正常红细胞与缺陷红细胞的FS分布存在明显差异。部分再生障碍性贫血患者外周血也存在PNH样细胞,但FS/CD59检测结果与PNH患者具有不同特征。结论:流式细胞术检测外周血红细胞CD55和CD59缺陷结合溶血性贫血的常规检验可对PNH作出较明确的诊断和鉴别诊断。

CD55,CD59,CD34在全血细胞减少症鉴别诊断中的地位

目的探讨CD55,CD59,CD34抗原表达对全血细胞减少症的诊断意义。方法应用流式细胞仪测定全血细胞减少症及对照组粒细胞上CD55,CD59,CD34抗原表达率,并同时做相关血液学试验。结果阵发性血红蛋白尿(PNH),再生障碍性贫血(AA),再障-阵发性血红蛋白尿综合征(AA-PNH)病人CD55,CD59,CD34抗原表达率与正常对照组,相互间有显著差异(P<0.01,P<0.05)。结论粒细胞上CD55,CD59,CD34抗原表达率可作为PNH,AA,AA-PNH综合征诊断指标,具有灵敏性强,特异性高等优点。

流式细胞术检测CD55、CD59对阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断价值的探讨

目的探讨患者外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmal nocturnalhemoglobinuria,PNH)的诊断价值。方法采用流式细胞术对CD55-PE及CD59-FITC标记的患者外周血中性粒细胞和红细胞进行检测。对2009年1月～2012年3月来我院就诊的13例PNH患者、13例再生障碍性贫血(aplasticanemia,AA)、21例骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者、12例缺铁性贫血(irondeficient anemia,IDA)患者与同期80例健康体检者进行回顾性分析。结果 PNH患者中性粒细胞及红细胞膜表面CD55、CD59较AA、MDS、IDA及健康体检者均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用流式细胞术检测贫血患者外周血红细胞及中性粒细胞膜上CD55和CD59缺陷,是临床鉴别诊断PNH与AA、IDA、MDS可靠而敏感的指标。